果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察

果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第1頁一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)學(xué)習(xí)剖離果蠅幼蟲唾腺和壓制唾腺染色體標(biāo)本方法；觀察唾腺細(xì)胞巨染色體。果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第2頁二、試驗(yàn)材料果蠅三齡幼蟲果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第3頁三、試驗(yàn)原理果蠅唾腺染色體是一個(gè)經(jīng)典多線染色體。它是果蠅唾腺細(xì)胞核內(nèi)有絲分裂所致，即核內(nèi)染色體中染色線連續(xù)復(fù)制而染色體并不分裂，結(jié)果使每條染色體中染色線多達(dá)500～1000條，其長度和體積分別比其它細(xì)胞染色體長100～200倍、大1000～倍，所以也稱巨型染色體。因?yàn)槊織l染色體染色線在不一樣區(qū)段螺旋化程度不一，因而出現(xiàn)一系列寬窄不一樣、染色深淺不一或明暗相間橫紋。不一樣染色體橫紋數(shù)量、形狀和排列次序是恒定。利用這些特征不但能夠判定不一樣染色體，還能夠結(jié)合遺傳試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行基因定位。另外，因?yàn)槠潴w細(xì)胞同源染色體配對(duì)，故易于進(jìn)行染色體缺失、重復(fù)、倒位和易位細(xì)胞學(xué)觀察和研究。果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第4頁四、試驗(yàn)用具藥品

1．儀器用具：顯微鏡、雙目解剖鏡、培養(yǎng)瓶、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、吸水紙、酒精燈、火柴等。2．藥品試劑：無水酒精、冰醋酸、1%醋酸洋紅、改良品紅、生理鹽水（0.7%NaCl）、1N鹽酸、蒸餾水。3．培養(yǎng)基：玉米瓊脂培養(yǎng)基。果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第5頁五、試驗(yàn)步驟

果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第6頁幼蟲培養(yǎng)：

置于16—18℃下喂養(yǎng)，當(dāng)幼蟲爬上瓶壁準(zhǔn)備化蛹前，即為三齡幼蟲，此時(shí)蟲體肥大，便于解剖，是制備唾腺染色體最理想時(shí)期。果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第7頁2.腺體剖取

果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第8頁3.解離

把載玻片上幼蟲其它個(gè)別除去，用吸水紙小心吸去生理鹽水（注意吸水紙應(yīng)離唾腺遠(yuǎn)些，以免吸附唾腺），加1滴1NHCl，浸2—3分鐘，使組織疏松，方便壓片時(shí)細(xì)胞分散，染色體散開。

果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第9頁4.染色

用吸水紙吸去鹽酸，加1滴蒸餾水輕輕沖洗后吸干，加2滴醋酸洋紅或改良品紅染液，染色5—20分鐘（此過程應(yīng)保持腺體一直處于染液浸泡中）。果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第10頁5.壓片

換上新鮮染液或45%醋酸，蓋上蓋玻片壓片，然后用吸水紙包被玻片，吸干多出染色液，并用手指輕壓蓋玻片，再用鉛筆橡皮頭或解剖針柄垂直輕敲，或深入用拇指在蓋玻片上適當(dāng)用力壓片

果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第11頁6.觀察

將制片置低倍鏡下找到分散好標(biāo)本，移至視野中心，然后轉(zhuǎn)到高倍鏡下觀察。對(duì)染色體分散、個(gè)體性清楚片子，應(yīng)仔細(xì)觀察染色體橫紋數(shù)量、形狀和排列次序，方便對(duì)照模式照片識(shí)別出不一樣染色體臂。

果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第12頁果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第13頁果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察第14頁六、作業(yè)及思索題

1.繪制你在顯微鏡下所看到果蠅唾腺巨染色體圖，標(biāo)明實(shí)際標(biāo)本在觀察中所能分辨經(jīng)典部位。2.每人制1張染色體分散、橫紋清楚暫時(shí)片。3.什么是染色中心（chromocenter）?4.依據(jù)你所學(xué)知識(shí)