艾滋病抗體檢測

艾滋病抗體檢測艾滋病抗體檢測第1頁2規(guī)范性引用文件《艾滋病和艾滋病病毒感染診療標準》（中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準，WS293-）GuidanceforHIVtestingintheWesternPacificRegion.WHODraft19July.Statement

fromtheSurveillanceandSurveyWorkingGroupandtheLaboratoryWorkingGrouptotheOfficeoftheGlobalAIDSCoordinator.26Nov..GuidelinesfortheuseoftheBEDassayforincidenceestimationandsurveillanceinresource-limitedcountries.Atlanta,5June.RevisedGuidelinesforHIVCounseling,Testing,andReferral.U.S.CDC.CurrentHIV-2diagnosticstrategyoverestimatesHIV-2prevalenceinChina.JournalofMedicalVirology,,81:790-797.艾滋病抗體檢測第2頁3HIV抗體檢測試驗室要求應符合《全國艾滋病檢測工作管理方法（）》中對試驗室人員、建筑設施和設備等條件要求。試驗室質量確保和試驗室安全防護按本規(guī)范相關章節(jié)要求執(zhí)行。艾滋病抗體檢測第3頁4.1HIV抗體檢測目標4.1.1HIV抗體檢測可用于診療、血液篩查、監(jiān)測等。4.1.2以診療為目標檢測是為了確定個體HIV感染情況，包含臨床檢測、自愿咨詢檢測、依據(jù)特殊需要進行體檢等。4.1.3以血液篩查為目標檢測是為了預防輸血傳輸HIV，包含獻血員篩查和原料血漿篩查。4.1.4以監(jiān)測為目標檢測是為了解不一樣人群HIV感染率及其改變趨勢，包含各類高危人群、重點人群和普通人群。艾滋病抗體檢測第4頁4.2HIV抗體檢測關鍵點4.2.1依據(jù)目標選擇檢測方法及檢測策略。4.2.2嚴格恪守試驗室SOP。4.2.3篩查試驗陽性，須作確證試驗。4.2.4篩查試驗陰性，不應做確證試驗。4.2.5篩查及確證試驗陽性均應做好咨詢工作。艾滋病抗體檢測第5頁檢測策略5.以診療為目標檢測策略

6.以監(jiān)測為目標檢測策略7.以血液篩查為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第6頁5.以診療為目標檢測策略5.1常規(guī)HIV抗體檢測方法和程序HIV抗體檢測分為篩查試驗（包含初篩和復檢）和確證試驗。5.1.1篩查試驗5.1.1.1篩查試劑必須是經國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊同意、在使用期內試劑，其中酶聯(lián)免疫試劑應批批檢合格。推薦使用臨床質量評定敏感性和特異性高試劑。5.1.1.2篩查樣品HIV抗體篩查可采取血清、血漿、濾紙干血斑、唾液和尿液樣品。艾滋病抗體檢測第7頁5.1.1.3篩查方法（1）酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）可使用血液、唾液、尿液樣品包含單純檢測HIV抗體第三代和可同時檢測血液中HIV-1p24抗原和HIV-1/2抗體第四代試劑有效試驗陰性和陽性對照必須符合試劑盒要求。5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第8頁（2）化學發(fā)光或免疫熒光試驗采取發(fā)光或熒光底物既可檢測抗體，也可聯(lián)合檢測抗原抗體用發(fā)光或熒光儀測定結果有效試驗陰性和陽性對照必須符合試劑盒要求。5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第9頁（3）快速檢測（RT）及其它檢測試驗這類試驗簡便快速，適合用于應急檢測、門診急診檢測。普通可在10～30分鐘內得出結果明膠顆粒凝集試驗（PA）免疫滲濾試驗，免疫層析試驗有效試驗質控帶必須顯色5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第10頁5.1.1.4篩查程序（1）初篩試驗依據(jù)檢測目標選取符合要求篩查試劑對樣品進行初篩檢測，對呈陰性反應樣品，可出具HIV抗體陰性（-）匯報；對呈陽性反應樣品，需要深入做復檢試驗5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第11頁（2）復檢試驗對初篩呈陽性反應樣品，應使用原有試劑和另外一個不一樣原理（或廠家）試劑，或另外兩種不一樣原理或不一樣廠家試劑進行復檢試驗。假如初篩檢測使用抗原抗體聯(lián)合試劑，則復檢必須包含一個抗原抗體聯(lián)合試劑。如兩種試劑復檢均呈陰性反應，則匯報HIV抗體陰性（-）；如均呈陽性反應，或一陰一陽，需送艾滋病確證試驗室進行確證試驗（圖1）。假如抗原抗體聯(lián)合試劑檢測呈陽性反應，而抗體試劑檢測為陰性反應，則應考慮進行HIV-1p24抗原或核酸檢測，必要時進行隨訪。艾滋病檢測篩查試驗室復檢判定為陽性反應樣品，確證試驗室能夠直接進行確證試驗。5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第12頁HIV抗體篩查檢測流程樣本陽性反應一陰一陽陰性反應初篩試驗均陽性反應復檢試驗均陰性反應送確證試驗室進行確認檢測匯報陰性篩查試劑原有試劑和另一個不一樣原理（或廠家）試劑或另外兩種不一樣原理（或廠家）試劑

艾滋病抗體檢測第13頁（4）篩查試驗結果匯報HIV抗體篩查試驗用附表1進行匯報，陰性反應匯報為“HIV抗體陰性（-）”；陽性反應匯報為“HIV抗體待復檢”。（5）篩查試驗呈陽性反應樣品轉送如需送上級試驗室進行復檢或確證檢測，需要詳細填寫“HIV抗體復檢檢測單”和“高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本準運證書5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第14頁5.1.2確證試驗5.1.2.1確證試劑必須是經國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊同意、在使用期內試劑。5.1.2.2確證樣品可采取血清、血漿、濾紙干血斑樣品。5.1.2.3確證方法包含免疫印跡試驗（WB）、條帶免疫試驗、放射免疫沉淀試驗（RIPA）及免疫熒光試驗（IFA）等。5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第15頁5.1.2.4確證流程使用HIV-1/2混合型試劑進行檢測假如呈陽性反應，則匯報HIV-1抗體陽性（＋）假如呈陰性反應，則匯報HIV抗體陰性（－）假如不是陰性反應，但又不滿足陽性判斷標準，則匯報HIV抗體不確定（±）5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第16頁對HIV抗體不確定（±）結果處理4周后隨訪檢測如帶型沒有進展或呈陰性反應，則匯報陰性如出現(xiàn)陽性反應，則匯報陽性如帶型有進展，但不滿足陽性標準，應繼續(xù)隨訪到8周8周后隨訪檢測如帶型沒有進展或呈陰性反應則匯報陰性隨訪期間可依據(jù)需要，檢測病毒核酸或p24抗原作為輔助診療假如出現(xiàn)HIV-2型特異性指示條帶，依據(jù)實際情況需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2抗體確證試驗或HIV-2核酸檢測態(tài)疑難樣品送國家艾滋病參比試驗室深入分析5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第17頁5.1.2.6HIV抗體確證試驗結果匯報HIV抗體確證試驗結果用附表3匯報符合HIV-1抗體陽性判斷標準，匯報“HIV-1抗體陽性（＋）”，符合HIV-2抗體陽性判斷標準，匯報“HIV-2抗體陽性（＋）”。符合HIV抗體陰性判斷標準，匯報“HIV抗體陰性（－）”。如懷疑“窗口期”感染，提議深入做HIV核酸檢測，盡早明確診療。符合HIV抗體不確定判斷標準，匯報“HIV抗體不確定（±）”，在備注中應注明“4周后復檢”。5.1.2.7發(fā)出確證匯報同時要做好檢測后咨詢5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第18頁5.1.2.8HIV抗體確證匯報由檢測者，復核人員和簽發(fā)人員簽字后，按原送檢程序反饋一式三份（確證試驗室一份、送檢單位一份、患者一份）。如確證對象戶口不屬于本轄區(qū)，確證匯報應同時抄送感染者戶口所在地省艾滋病確證中心試驗室。其它系統(tǒng)確證地方人員，也應及時向當?shù)匦l(wèi)生行政部門和省艾滋病確證中心試驗室匯報。5.1.2.9省艾滋病確證中心試驗室難以確證樣品，送國家艾滋病參比試驗室確證。同一受檢對象樣品在不一樣試驗室得到不一致確實證結果時，由國家艾滋病參比試驗室給予仲裁。5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第19頁5.2其它HIV抗體檢測方法和程序5.2.1VCT替換檢測策略除上述常規(guī)檢測程序以外，對HIV高流行地域高危人群VCT檢測，可采取替換策略。5.2.1.1使用要求使用替換策略，應在確證中心試驗室和確證試驗室或以上試驗室指定篩查試驗室進行，用臨床試劑質量評定敏感性和特異性高篩查試劑檢測。使用該策略判斷結果，陽性匯報須由確證中心試驗室和確證試驗室或以上試驗室認可篩查試驗室出具。5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第20頁5.2.2HIV感染產婦所生兒童HIV抗體檢測策略及流程5.2.2.1適用范圍HIV感染產婦所生嬰幼兒已滿18個月嬰幼兒，其母親HIV感染狀態(tài)不詳，兒童出現(xiàn)HIV相關臨床表現(xiàn)，臨床懷疑HIV感染兒童。5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第21頁5.2.3HIV-1新近感染檢測HIV常規(guī)抗體檢測方法能夠判定感染和未感染狀態(tài)，新近感染檢測方法則用于識別近期感染與既往感染5.以診療為目標檢測策略艾滋病抗體檢測第22頁檢測策略5.以診療為目標檢測策略6.以監(jiān)測為目標檢測策略

7.以血液篩查為目標檢測策略

艾滋病抗體檢測第23頁各級艾滋病檢測試驗室所在機構每個月應填寫《HIV抗體檢測數(shù)及陽性人數(shù)統(tǒng)計報表》（附表6），并于每個月10日前完成網絡直報。未開展網絡直報單位，由縣級疾病預防控制機構搜集信息后統(tǒng)一上報。8.艾滋病檢測試驗室檢測信息上報艾滋病抗體檢測第24頁9.質量控制

抗體檢測統(tǒng)計學室內質量控制試劑盒內部對照為試劑盒內提供陽性和陰性對照血清,用于判斷每次試驗有效性，但不能作為室內質控品使用每一次檢測臨床樣品時，必須有試劑盒內部對照，而且只能在同批號試劑盒中使用。內部對照結果無效，必須重新試驗艾滋病抗體檢測第25頁室內質控品(外部對照，外部質控品)非試劑盒組份外部質控品，包含強陽性、弱陽性和陰性質控血清，能夠監(jiān)控檢測重復性日常檢測中能夠只設置一個弱陽性質控，以該試劑盒臨界值（Cut-off）2～3倍為宜(S/Co值=2～3）外部質控品作用是，判斷該批臨床樣品檢測有效性，所以，每次試驗必須包含室內質控品，其結果無效，必須重新試驗室內質控品能夠是商品或試驗室自行制備質量控制

艾滋病抗體檢測第26頁室內質控品使用和質量要求每一次試驗必須使用室內質控品，方便監(jiān)控試驗重復性同時能夠了解各批試劑盒批間或孔間差異室內質控品管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測系統(tǒng)預期變異（cv＜20%）質控品應穩(wěn)定、無菌，且不含有影響試劑反應防腐劑普通采取在不一樣批次檢測取得最少20個數(shù)據(jù)后進行統(tǒng)計繪圖質量控制

艾滋病抗體檢測第27頁=1.74±1s=1.49-1.99±2s=1.24-2.24±3s=0.99-2.49質控圖艾滋病抗體檢測第28頁外部對照S/CO值超出±2s，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應予注意，是否能夠繼續(xù)檢測需要深入觀察質控圖判定和分析-①告警艾滋病抗體檢測第29頁質控圖判定和分析-②失控外部對照S/CO值超出±3s，系統(tǒng)處于失控狀態(tài)，此次試驗結果不能被接收，需查找原因，重新檢測艾滋病抗體檢測第30頁質控圖判定和分析-③位移，④趨勢連續(xù)幾個（3-5次）質控對照值都落在均值一側稱之為位移，提醒試驗條件發(fā)生了較大改變，如使用新批號試劑盒、使用新質控品、試驗員更換、孵育溫度改變、儀器故障等當連續(xù)幾個（5-7個）質控對照值幾乎按一個方向分布時稱之為趨勢，通常由參數(shù)遲緩改變引發(fā)，如試劑失效和移液器逐步不準確等艾滋病抗體檢測第31頁艾滋病抗體檢測第32頁9.1.3.4質控圖分析及失控處理試驗室應建立質控圖分析及失控情況處理程序。當質控已經有計劃并恰當?shù)貓?zhí)行時，要求可靠均值和標準差用于計算質控限，將假失控概率降到最低。當出現(xiàn)失控時，對原有外部質控品重復測定或更換新外部質控品進行測定不是最有效方法，必須找出問題發(fā)生原因，找出解除問題方法，并消除原因，預防未來出現(xiàn)一樣問題。艾滋病抗體檢測第33頁出現(xiàn)一次2s范圍改變時，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應予注意，是否能夠繼續(xù)檢測需要深入觀察。出現(xiàn)以下情況時，應暫停檢測查找原因： （1）出現(xiàn)一次超出3s范圍改變； （2）連續(xù)兩次出現(xiàn)同一方向超出2s范圍改變； （3）連續(xù)四次出現(xiàn)同一方向超出1s范圍改變； （4）連續(xù)10次結果都在1s范圍內，但落在均值線同一側。9.1.3.4質控圖分析及失控處理艾滋病抗體檢測第34頁繪制和分析質控圖關鍵點（1）分析數(shù)據(jù)時，超出2s或3