食品中過敏原成分檢測方法 第2部分：實時熒光PCR法檢測花生成分_第1頁
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食品中過敏原成分檢測方法第2部分：實時熒光PCR法檢測花生成分2稱取約200g樣品，用潔凈研缽或合適的粉碎裝置將樣品粉碎至粉(24:1),強烈振蕩，12000r/min離心15min;吸取上層水相至新的1.5ml.離心管中，加入等體積異丙醇，振蕩均勻，12000r/min離心10min:棄上清液，加入70%乙醇小心清洗沉淀DNA,12000r/min劑提取對照(以水代替樣品)。 (1)比值在1.7~2.0之間較好，符合PCR檢測要求。 (2)3.5.3.2反應(yīng)參數(shù)”預(yù)變性95℃10min,1個循環(huán)；95℃15s,60℃1min,同時收集FAM熒光，進行45個循環(huán)。4.1基線的設(shè)置實時熒光PCR反應(yīng)結(jié)束后進行結(jié)果分析時，應(yīng)設(shè)置基線范圍?；€范圍選擇一般在6個～15個

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