桃實(shí)蠅檢疫鑒定方法

中華人民共和國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)桃實(shí)蠅檢疫鑒定方法Identificationofpeachfruitfly,Bactrocera(Bactrocera)zonata(Saunders)2006-08-28發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局桃實(shí)蠅檢疫鑒定方法2縫后中黃色條medialpost-sutaralvitta位于中胸背板中線上的一條黃色帶。4儀器、用具和試劑4.1儀器與用具體視顯微鏡、干燥箱、冰箱、養(yǎng)蟲箱、小型干燥器、防蟲網(wǎng)罩、玻璃棉、養(yǎng)蟲杯、載玻片、蓋玻片、解剖刀、解剖針，灑精燈、溫濕度計(jì)、量筒(50mL.,200mL),燒杯數(shù)個(200mL,500mL)、白瓷盤(大號、小號)。10%氫氧化鈉(或10%氫氧化鉀)溶液、封片膠、苯酚、二甲苯、75%乙醇、丙三醉、水合三氯乙醛、阿拉伯樹膠粉，燕餾水。4.3試劑的配制4.3.110%氫氧化鈉(或10%氫氧化鉀)溶液的配制稱取氫氧化鈉(或氧氧化鉀)10g置于200mL.燒杯中，加入約80mL,的蒸餾水，攪拌溶解后再加蒸餾水定容至100mL。4.3.2封片膠的配制稱取阿拉伯樹膠粉30g于燒杯中，加入50ml.蒸餾水(最好是溫水以加速溶解)。溶解后，加入200mL.水合三氯乙醛及20ml.丙三醇，置于55℃~60℃的干燥箱內(nèi)。1d后，用玻璃棉過濾(在55℃~60℃干燥箱內(nèi)進(jìn)行)。4.3.3保存液的配制量取75%乙醇100mL,加人1mL.丙三醇。5實(shí)驗(yàn)室鑒定5.1樣品檢查檢查果實(shí)表面有無產(chǎn)卵刻點(diǎn)或產(chǎn)卵痕跡，或果實(shí)是否有腐軟的現(xiàn)象，必要時剖果檢查是否有蛆狀幼蟲。將懷疑帶蟲的果實(shí)進(jìn)行飼養(yǎng)鑒定。5.2飼養(yǎng)鑒定5.2.1卵或幼蟲飼養(yǎng)將帶有卵或幼蟲的寄主果實(shí)放在小號白瓷盤里，然后將小號白瓷盤放在裝有自來水的大號白瓷盤內(nèi)，再用防蟲網(wǎng)罩蓋住小號白瓷盤，罩的下方邊緣浸沒于大號白瓷盤內(nèi)的水中，置于溫度為22℃~28℃,相對濕度為50%～90%的環(huán)境中飼養(yǎng)5d～10d,以獲取老熟幼蟲。5.2.2圍蛹飼養(yǎng)取一盛有半干濕(含水量約5%)潔凈細(xì)砂的養(yǎng)蟲杯，將圍蛹埋入距細(xì)砂表面3em～5cm處《若是老熟幼蟲則可直接將其置于細(xì)砂表面，幼蟲將鉆入砂中化蛹),然后置于養(yǎng)蟲箱中，在溫度為22℃~28℃,相對濕度為50%～90%條件下飼養(yǎng)，直至成蟲羽化。5.2.3初羽化成蟲飼養(yǎng)成蟲羽化后，懸掛相應(yīng)寄主果實(shí)切片于養(yǎng)蟲箱內(nèi)供其取食，待成蟲斑紋的色澤和大小穩(wěn)定后(約需5d),收集成蟲并置于冰箱冷凍層0.5h～1h殺死。5.3標(biāo)本制備5.3.1成蟲標(biāo)本制備如果成蟲蟲體已干硬，在制備標(biāo)本前應(yīng)進(jìn)行軟化處理。取一小型干燥器，加入干凈組砂約2cm,加水至漫過細(xì)砂表面約1em,并滴加數(shù)滴苯酚以防標(biāo)本腐爛，上層散待軟化的成蟲標(biāo)本，密團(tuán)1d,制成針3插標(biāo)本。5.3.2成蟲外生殖器玻片標(biāo)本制備用解剖刀取成蟲標(biāo)本腹節(jié)，置于10%氧氧化納(或10%氫氧化鉀)溶液中，浸泡12h(或煮沸3min)后取出，用蒸餾水洗凈，在體視顯微鏡下，用解剖針挑取陽莖或產(chǎn)卵器，制成玻片標(biāo)本。5.3.3幼蟲玻片標(biāo)本制備用昆蟲針在幼蟲體壁上刺截?cái)?shù)個小孔，置于10%氫氧化鈉(或10%氫氧化鉀)溶液中浸泡12h(或煮沸3min)后取出，用解剖針將幼蟲體中的殘留物擠壓出并用蒸餾水洗凈；在體視顯微鏡下挑取口鉤、前氣門和后氣門等部位，制成玻片標(biāo)本。5.4鑒定特征(參見附錄C)5.4.1實(shí)蜣科Tephritidae翅Sc脈突然朝前彎曲成近90°,外彎段變羽，終于前緣脈的斷裂處，R,脈的背側(cè)有小鬃；cup室具一尖角延伸。5.4.2寡毛實(shí)蠅亞科Dacinae后頭槃列均細(xì)長且通常為黑色，無單眼聚。中胸背板具肩板聚，肩聚常缺如；無背中聚；上前側(cè)片為一條縫所分離。翅沿R,:脈青面遠(yuǎn)至rm橫脈處通常具小聚。具2個受精囊。5.4.3離腹嘉毛實(shí)蠅屬Bactrocera觸角第3節(jié)長至少為其寬的3倍；題eup室狹，其延伸部分甚長，翅上斑紋通常匯合成前緣帶和臀條。腹部各節(jié)背板分離。5.4.4離腹嘉毛實(shí)蠅亞屬Bactrocera背板具小盾前鬃和前翅上期，小盾端槃1對，雄成蟲背針突后葉短，第5腹板后緣深凹，第3節(jié)腹節(jié)背板具櫛毛。5.4.5桃實(shí)蠅Bactrocera(B.)zomata成蟲成蟲以橙褐色至紅褐色為主。體長和翅長均為5.2mm~6.1mm。頭部黑色，中頗板黃色，具一對卵圓形黑色顏面斑。中胸背板淡黃色至紅褐色，覆灰白粉被4條；縫后側(cè)黃色條寬，終于翅內(nèi)鬃之后，縫后中黃色條缺如，具前翅上鬃；小盾片黃色，基部偶有1紅褐色狹橫帶，小盾前鬃1對，小盾鬃1對。肩胛、背側(cè)板胛和足均為黃色。翅斑少，前緣區(qū)無深色條紋，重前緣室棕黃色，rsm室端部有一個小褐斑，延伸到r+:室端部；臀條幾乎缺如或僅限于基肘室端部呈灰滿色，r-m橫脈向外頃斜與M脈成銳角。腹部黃色至紅褐色，一般第3青板的前緣有上黑色狹槽帶，第3背板至第5青板的中央常具一黑色狹縱條，但有時間斷或不明顯。第5背板具1對褐色大腺斑。雌蟲產(chǎn)卵器短，其基節(jié)長約與第5背板長相等。產(chǎn)卵管長約1.0mm～1.2mm,末端尖說，具長、短亞端剛毛各2對。產(chǎn)卵器長約4.0mm。雄蟲第3背板具櫛毛，第5腹板后緣具深V形裂。5.4.6桃實(shí)蠅幼蟲幼蟲蛆形，共3齡。3齡期幼蟲體長10.0mm～11.0mm。口感器小，呈圓形；口脊10條～11條；齒裂深，清晰；口鉤中等骨化，各具一細(xì)長端齒。第1胸節(jié)的節(jié)前部有6行～9行小刺環(huán)；第2胸節(jié)的節(jié)前刺環(huán)不多；第3胸節(jié)的背面有少量微刺，其側(cè)、腹面有微刺帶若干。第1腹節(jié)至第8腹節(jié)腹面小刺列形成爬行突起，前有1列、后有1列～2列較大的刺列。前氣門指狀突13個～15個。后氣門裂長為寬的3.0倍～3.5倍，各具一中等骨化緣；氣門毛較氣門裂略長，常分枝；背、腹毛束有3毛～17毛，側(cè)束6毛～8毛。6結(jié)果判定以成蟲形態(tài)特征為依據(jù)，符合上述科，屬和種鑒定特征的個體可確定為桃實(shí)蠅。成蟲以外的蟲態(tài)的形態(tài)特征可作為鑒定時參考。7標(biāo)本保存7.1成蟲標(biāo)本及玻片標(biāo)本的保存將制好的成蟲標(biāo)本或相應(yīng)的玻片標(biāo)本，置于干燥箱中干燥數(shù)日，然后移入標(biāo)本柜中保存，保存過程中注重防蟲和防潮。7.2幼蟲標(biāo)本的保存將采集到的幼蟲或圍蛹用蒸餾水清洗后，投入60℃(±5℃)熱水中浸泡殺死，置于室溫下冷卻，