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文檔簡介
臨床血液學
1.胚胎造血期特點:中胚葉造血期:2~9周,卵黃囊壁上的血島是人類最初的造
血中心;肝臟造血期即胚胎發(fā)育的第6周到第7個月;骨髓造血期從胚胎3個月
開始,到8個月時骨髓成為造血中心。
2.造血干細胞在體內(nèi)可長期地重建造血,而早期造血祖細胞只能短期重建造血,
晚期造血祖細胞則完全喪失重新造血的能力。
3.在造血正調(diào)控因子中,屬于早期造血因子的是多系集落刺激因子。
4.T細胞可產(chǎn)生IL-2-IL-5因子,不能產(chǎn)生IL-1因子。
5.正常人無效造血可占總造血的1%。
6.區(qū)分造血干細胞和早期造血祖細胞的依據(jù)是細胞表面標志。
7.腫瘤壞死因子a對祖細胞具有抑制和激活兩種效應。
8.造血干細胞只進行不對稱有絲分裂。
9.轉化生長因子B參與造血的負向調(diào)控,阻止細胞進入S期,維持造血干、祖
細胞處于非增殖狀態(tài)。
10.從出生到4歲,全身骨髓的髓腔內(nèi)均為紅骨髓。5歲后,紅骨髓脂肪化由遠
心端向近心端發(fā)展。健康成人紅骨髓約占骨髓總量的50%o
11.青春期后逐漸萎縮的里吧器官是胸腺。
12.骨髓穿刺的常用部位是骼骨、胸骨、脛骨,成人最理想的骨髓穿刺部位是骼
骨后上棘。
13.骨髓增生標準中,有核細胞與成熟紅細胞的比值為1:20時,屬于增生活躍。
14.對增生極度減低的骨髓片,可計數(shù)100個有核細胞。
15.正常骨髓中,粒細胞系統(tǒng)中比例最高的是中性桿狀核粒細胞,大約20%。
16.正常骨髓分裂象中常見于早幼及中幼階段,約占有核細胞的1%,增殖過高
的骨髓分裂象約占有核細胞的5%o
17.正常骨髓分裂象中幼紅細胞約占有核細胞的20%,以中、晚幼紅細胞為主,
平均各約10%O
18.細胞核形態(tài)異常改變的是Pelger-Huet異常,其它為胞質(zhì)異常。漿細胞中有
Russel小體。
19.胞質(zhì)豐富的原始階段細胞是原始漿細胞。
20.核染色質(zhì)呈粗大網(wǎng)狀且排列緊密的是原始巨核細胞。
21.在正常骨髓象中,在1.5cmX3.0cm的片膜上,可見巨核細胞7~35個,數(shù)量
最少的是原始巨核細胞。
22.骨髓涂片中出現(xiàn)火焰細胞的是漿細胞系統(tǒng)。
23.粒細胞系統(tǒng)中,體積最大的階段是早幼粒細胞,體積大于原始粒細胞是血細
胞發(fā)育成熟演變規(guī)律中的特例。
24.顆粒常覆蓋在細胞核上的是嗜堿性粒細胞。
25.胞質(zhì)中出現(xiàn)紫紅色非特異性嗜天青顆粒的是早幼粒細胞;細小的、分散均勻
的灰塵樣紫紅色天青胺藍顆粒的是單核細胞。
26.原發(fā)性染色體異常也稱為標記染色體。
27.成熟中性粒細胞過氧化物酶活性增高:再生
障礙性貧血、感染、急淋和慢淋,其他降低。
28.可以被過碘酸氧化并形成雙醛基的物質(zhì)是含乙二醇的多糖類物質(zhì)。
29.區(qū)別過碘酸-雪夫反應陽性結果+和++的紅色顆粒數(shù)量是10個。
30,過碘酸-雪夫反應可輔助診斷紅血病或紅白血病,正常幼紅細胞和紅細胞均呈
陰性反應,而發(fā)病時可呈陽性反應。
31.過碘酸-雪夫反應陽性:缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血及骨髓增生異常
綜合癥;過碘酸-雪夫反應陰性:巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧
血和白血病等疾病。
32.血細胞內(nèi)的堿性磷酸酶水解基質(zhì)液中的a-磷酸蔡酚時,所需的PH值環(huán)境是
9.4~9.6。
33.急、慢性粒細胞白血病和急性單核細胞白血病時,堿性磷酸酶染色積分值減
低,但在類白血病時,NAP積分值明顯增高,中性桿狀核粒細胞堿性磷酸酶活性
增強,甚至中性晚幼粒細胞也呈陽性反應。
34.NAP試驗中除成熟粒細胞外,呈陽性反應的細胞是巨噬細胞。
35.NAP可用于鑒別真性紅細胞增多癥和繼發(fā)性紅細胞增多癥,前者積分值升高,
后者無明顯變化。
36.醋酸AS-D蔡酚酯酶染色中紅細胞系統(tǒng)的反應特點是:早期幼紅細胞可呈陽
性反應,隨細胞的成熟陽性反應程度逐漸減弱,此反應不被氟化鈉抑制。
37.酸性磷酸酶染色時,可被酒石酸抑制的是淋巴瘤細胞和慢性淋巴細胞白血病
的
38.巨核細胞可呈陰性反應的化學染色是堿性a丁酸蔡酚酯酶染色。
39.能鑒別T淋巴細胞和B淋巴細胞的化學染色是堿性a丁酸蔡酚酯酶染色和酸
性磷酸酶染色。
40.惡性組織細胞病有時需與急性單核細胞白血病相區(qū)分,可采用堿性a丁酸蔡
酚酯酶染色,前者陽性,但反應不被氟化鈉抑制;也可借助過氧化酶染色輔助鑒
別,前者陰性,后者弱陽性。
41.鐵染色時,骨髓小粒中的鐵術語細胞外鐵。
42.區(qū)分遺傳性和繼發(fā)性鐵粒幼性貧血的是發(fā)病年齡,前者多發(fā)于青少年,后者
多發(fā)于中老年;人體內(nèi)鐵主要經(jīng)膽汁、尿液排出。
43.正常情況下,人體內(nèi)鐵的主要存在形式是鐵蛋白;當體內(nèi)鐵負荷過重時,以
含鐵血黃素形式貯存。
44.鐵吸收率的正確范圍是10%~35%o
45.骨髓細胞核質(zhì)發(fā)育不平衡的是:①缺鐵性貧血(核老質(zhì)幼)②巨幼細胞性貧
血(核幼質(zhì)老)。
46.氟化高鐵血紅蛋白吸收峰在540nm處。
47.成年男性貧血標準是Hb<120g/L,Hct<41%
48.根據(jù)Hb濃度確定貧血:重度為30~60g/L,極重度為小于等于30g/L,常合并
貧血性心臟病。
49.缺鐵性貧血的細胞外鐵陰性,細胞內(nèi)鐵明顯減少,鐵粒幼細胞小于15%,轉
鐵蛋白飽和度<15%,紅細胞游離原口卜咻大于0.9Pmol/Lo
50.缺鐵性貧血缺鐵早期Hb、網(wǎng)織紅細胞數(shù)量、鐵吸收率、總鐵結
合力及鐵幼粒細胞均正常。
51.早期缺鐵性貧血時,有貧血,血清鐵減低,轉鐵蛋白飽和度降低,此時可見
正細胞正色素性貧血。
52.缺鐵性貧血時骨髓象顯示紅系明顯增生,以中幼紅細胞和晚幼紅細胞為主。
而鐵粒幼紅細胞骨髓象中中幼紅細胞為主。
53.中幼和晚幼紅細胞的胞質(zhì)中出現(xiàn)鐵顆粒成為鐵粒幼紅細胞,成熟紅細胞中出
現(xiàn)鐵顆粒稱為鐵粒紅細胞。
54.由于造血原料利用障礙導致的貧血是鐵粒幼細胞性貧血。
55.鐵粒幼細胞性貧血可以出現(xiàn)轉鐵蛋白飽和度增高。
56.鐵粒幼細胞性貧血時環(huán)形鐵粒幼紅細胞水平常占幼紅細胞15%以上。
57.葉酸缺乏癥血象中粒細胞出現(xiàn)巨型桿狀核和核分頁過多,5葉者大于5%或6
葉者大于1%。
58.葉酸經(jīng)葉酸還原酶作用變?yōu)樗臍淙~酸,它具有轉運“一碳團”如甲基、甲酰
基等作用。
59.血液透析可導致葉酸丟失過多。
60.急性再障貧血的骨髓增生程度多為增生減低,三系血細胞減少。
61.再障時,骨髓病理組織檢驗顯示造血組織與脂肪組織容積比降低,小于0.34。
62.再生障礙危象表現(xiàn)為慢性溶血者突發(fā)全血細胞和網(wǎng)織紅細胞減少。
63.B珠蛋白生成障礙性貧血又稱B地中海貧血,臨床分為輕型(雜合子型)、
微型、中間型、重型等。
64.珠蛋白生成障礙性貧血時常見靶形紅細胞增多。
65.獲得性物理因素所致溶血性貧血有微血管性溶血性貧血、心源性溶血性貧血、
行軍性血紅旦白尿癥。
66.溶血性貧血外周血涂片中常見有核和嗜多色性紅細胞。
67.溶血性貧血急性發(fā)作期,外周血網(wǎng)織紅細胞計數(shù)一般是2%~4%。
68.紅細胞壽命(51CrTl/2)在溶血存在時應<25天。
69.紅細胞葡萄糖6-磷酸脫氫酶缺陷癥分五型:蠶豆病、藥物致溶血性貧血、感
染誘發(fā)溶血、新生兒高膽紅素血癥、遺傳性非球形紅細胞溶血性貧血。
70.遺傳性口形紅細胞增多癥分為水腫細胞型、干細胞型,其依據(jù)是紅細胞內(nèi)
Na、K離子濃度。
71.細胞鐮變試驗(HbS?。┧迷噭┦瞧貋喠蛩幔∟a2s205)。
72.PHN的篩選/排除試驗是Rous試驗,確診試驗是Ham試驗(酸化血清溶血試
驗)。
73.篩選/排除試驗選用PK熒光斑點試驗,可能的溶血性貧血是啥咤-5'-核甘酸
缺乏癥;用熱變性試驗的是血紅蛋白??;Heinz小體生成試驗用于丙酮酸激酶缺
乏癥或血紅蛋白癥;Ret試驗用于微血管病性溶血性貧血;Coombs試驗用于急
發(fā)性溶血性輸血反應。
74.冷凝集素綜合癥的抗體型別為IgM。
75.與M0型急性髓細胞性白血病在形態(tài)上類似的是ALL-L2,都為形態(tài)較小,也
可較大,胞質(zhì)少,無顆粒和Auer等。
76.Phi。小體染色可輔助鑒別M2a與ALL。
77.M3有短而粗的Auer小體,數(shù)條或數(shù)十條呈束狀交叉排列。
78.AML-M3最容易并發(fā)DIC。
79.M4EO嗜酸性粒細胞增多。
80.M5a骨髓原單核細胞280%;M5b原始單核細胞<80%,原始和幼稚單核細
胞>30%。
81.M6血涂片及骨髓中幼紅細胞常見的形態(tài)學變異是巨幼樣改變。
82.M7未成熟型主要增多的巨核細胞是原始巨核細胞。
83.特有的遺傳學標記:M2:t(8,21)(q22,q22);M3:t(15,17)(q21,
ql2)及PML-RAPa融合蛋白;M4E0:Inv(16)(pl3,q22);慢粒:t(9,22)
(q34,qll)及Ph染色體。;B細胞慢性淋巴細胞白血?。簍(11,14)(ql3,
q32);T細胞慢性淋巴細胞白血病:inv(14)(qll,q32);多毛細胞白血?。篸el
(14)(q22,q23)o
84.CML常出現(xiàn)的融合基因是BCR-ABL;AML-M3常出現(xiàn)的融合基因是PML-RAPa;
AML-M2b常出現(xiàn)的融合基因是AML-MTG8。
85.AML-M3敏感免疫學標志:CD33;AML-M5敏感免疫學標志:CD14;AML-M7
敏感免疫學標志:CD41o
86.AML-M1POX染色原始細胞陽性率正確的是>3%。
87.AML-M2原始粒細胞PAS染色結果應為陰性反應。
88.粒-單核細胞共有的標記是CDllb、CD31~CD36>CD64和CD68。
89.M6型白血病的紅血病期以原始紅細胞和早幼紅細胞為主;紅白血病期血象以
中幼紅細胞和晚幼紅細胞為主。
90.紅白血病期骨髓增生極度活躍或明顯活躍,紅系和粒系(或單核系)細胞呈
惡性增生。
91.巨核細胞白血病時血片中可見小巨核細胞,形態(tài)類似于淋巴細胞。
92.慢性粒細胞白血病起源于克隆性增殖性疾患的造血干細胞,其白細胞總數(shù)顯
著增高。
93.慢性粒細胞一一慢性期:原始細胞W10%;加速期原始細胞210%;急變期
外周血原始粒+早幼粒230%,骨髓中原始粒+早幼粒250%o
94.絕大多數(shù)的慢性淋巴細胞白血病是B細胞型(95%)。
95.慢性淋巴細胞白血病細胞化學染色特點:PAS染色陽性。
96.B細胞特異性抗原有CD19、CD20、CD2B、CD5、HLA-DR、Smlg等,而T細胞
慢性淋巴細胞性白血病主要表面標記是CD2、CD3、CD4、CD6、CD8,而CD5陰
性。
97.CD7為出現(xiàn)早、且貫穿表達整個T細胞分化發(fā)育過程中;CD19是鑒別全B細
胞敏感又特異的指標;CD10是診斷common-ALL必須標記;CyCD22檢測早期B
細胞來源的急性白血病特異而有敏感;CD14是單核細胞所特有的。
98.漿細胞白血病時,外周血白細胞分類中的漿細胞應該大于20%,這是與多發(fā)
性骨髓瘤鑒別的主要區(qū)別。
99.關于MDS的FAB分類中,被WHO刪除的類型是RAEB-T。
100.MDS時髓系細胞表面抗原及淋巴細胞亞群分布異常,CD3、CD4細胞減少,
CD4/CD8比值減低或倒置。
101.MDS骨髓活檢顯示,聚集成簇并位于骨髓中央的細胞是原始粒細胞和早幼
粒細胞。
102.有助于早期診斷MDS的巨核細胞類型是小巨核細胞。
103.骨髓異
常增生綜合癥其骨髓中鐵粒幼紅細胞常增多。
104.霍奇金病的骨髓組織活檢可將R-S細胞陽性率提高至9%~22%o
105.非霍奇金淋巴瘤的主要診斷依據(jù)是病理學檢查。
106.漿細胞病包括多發(fā)骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等,不包括漿細胞白血病。
原發(fā)性巨球蛋白血癥大量增多的單克隆巨球蛋白是
107.lgMo
108.漿細胞白血病骨髓象:漿細胞成熟程度和形態(tài)極不一致,形態(tài)較小,核仁
明顯,核染色質(zhì)致密。
109.48%~60的患者骨髓穿刺呈“干抽”樣見于多毛細胞白血病。
110.證實多毛細胞白血病最可靠和有效的手段是掃描電鏡超微結構檢查。
111.骨髓增生性疾病包括真性紅細胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥和骨髓纖維
化等,不包括骨髓增生異常綜合癥。
112.真性紅細胞增多癥診斷時血紅蛋白濃度應達到男性>180g/L,女性>170g/L。
113.骨髓纖維化外周血圖片中常見的異形紅細胞是淚滴狀紅細胞。
114.多發(fā)性骨髓瘤血象中,紅細胞常見“緡線狀”排列。
115.真性紅細胞增多癥的骨髓象特點:偶有“干抽”現(xiàn)象,有核細胞增生活躍,
巨核細胞增多,各系各階段比值及形態(tài)大致正常,骨髓鐵減少或消失。
116.惡性組織細胞病最為突出和首發(fā)的癥狀為發(fā)熱。
117.粒細胞缺乏癥的骨髓象表現(xiàn)為:成熟階段中性粒細胞明顯減低和缺乏,但
可見原始和早幼粒細胞,表明粒細胞系成熟障礙。
118.類白血病患者的骨髓象顯示為增生活躍。
119.傳染性單核細胞增多癥血液中存在嗜異性抗體,屬于IgM,2~3周滴度達到
最高。骨髓象有核細胞增生程度屬于增生活躍。
120.血小板a顆粒中含有vWF;致密顆粒中含有ADP;溶酶體顆粒中含有膠原
酶。
121.血小板a顆粒特有的蛋白是血小板球蛋白(B-TG)和血小板第四因子
(PF4)o
122.屬于血小板活化標志物的指標是5-羥色胺。
123.纖溶酶原活性增高表明纖溶系統(tǒng)活性減低,見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病。
124.a2纖溶酶主要功能是與纖溶酶結合形成等分子復合物,從而滅活纖溶酶,
減少引起纖溶亢進,表現(xiàn)為出血傾向,呈導致DIC。
125.D-二聚體可鑒別原發(fā)性纖溶癥和繼發(fā)性纖溶癥,它是后者的特有代謝物。
126.D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白的特異性降解產(chǎn)物,只有在血栓形成后才會在血漿
中增高。D-二聚體增高多見于深靜脈血栓形成、肺栓塞、DIC等繼發(fā)纖溶亢進,
是診斷血栓形成的重要分子標志物。
127.血漿D-二聚體增高的病理條件是纖維蛋白形成和繼發(fā)性纖溶亢進。
128.PAI-1的主要作用是t-PA和u-PA結合形成不穩(wěn)定的復合物,使其失去活性。
129.血友病患者篩選試驗中發(fā)生延長的凝血時間是APTTo
130.PT為外源凝血途徑的篩選試
驗;APTT是內(nèi)源凝血途徑的篩選試驗;TT檢測的是低(無)纖維蛋白原血癥或
外周血中肝素及肝素樣抗凝物質(zhì);BT反映的是毛細血管和血小板的相互作用;
診斷FVLeiden突變采用的試驗是活化蛋白C抵抗(APCR)試驗。
131.接觸凝血因子通過接觸反應啟動內(nèi)源凝血途徑。
132.在體內(nèi),最不穩(wěn)定的凝血因子是FV。
133.血管壁單層內(nèi)皮細胞中含有各種細胞器,其中特有的細胞器是棒管狀小體。
134.低分子量肝素抗凝機制特點:對FXa的抑制活性相對增強,而對口la的
抑制活性相對減弱。
135.FXa活性用于監(jiān)測低相對分子量肝素,活性維持在0.5~4.0個抗因子Xa/ml。
136.外源凝血途徑特點:組織因子(TF)進入血液,活化FVD;內(nèi)源凝血途徑:
所需凝血因子全部源自血液,主要涉及FXD、FXI、FIX、FVIIo
137.依賴維生素K的凝血因子:口I、FVD、FIX、FX;接觸凝血因子:FXfl,F
XI;對凝血酶敏感的凝血因子:Fl、FV、FWI、FXIIIo
138.抗凝血酶可與FXa、FXIIa、FXIa、FlXa結合而這些酶失去活性。
139.蛋白C系統(tǒng)包括蛋白C、蛋白S、血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)及活化蛋白C抑制
物。
140.血漿總蛋白S包括游離蛋白S以及C4Bp-PSo
141.纖溶酶原抑制劑(PAI)可t-PA以1:1比例結合,使其失活;a2-AP與PL
以1:1結合抑制PL活性。
142.采用凝血酶作用于待測血漿中的纖維蛋白原的方法是Clauss法(凝固法)。
143.凝血酶時間觀察的是加入“標準化”凝血酶溶液后形成纖維蛋白絲所需時
間。
144.一期止血缺陷篩查試驗包括出血時間和束臂試驗;二期止血缺陷篩查試驗
包括凝血酶原時間和活化部分凝血活酶時間;血管壁檢查包括血管性血友病因子
和血漿6-酮-前列腺素Fla;抗凝物質(zhì)測定包括抗凝血酶、蛋白C、蛋白S等。
145.抗凝血酶缺乏可導致靜脈血栓;繼發(fā)性纖溶亢進發(fā)生于血栓形成之后;繼
發(fā)性低凝狀態(tài)多發(fā)生于DIC后期;血管性血友病的發(fā)病原因是由VWF缺陷所致。
146.狼瘡樣抗凝物質(zhì)增多會導致血栓形成。
147.如血漿中存在狼瘡抗凝物質(zhì),則應延長的血漿凝固時間是APTT。
148.抗凝治療中,如懷疑肝素抵抗,可測定抗凝血酶。
149.原發(fā)性纖溶亢進癥是指纖溶酶活性增強,降解纖維蛋白原。
150.纖維蛋白原減低見于肝硬化,因其由肝細胞合成。
151.采用發(fā)色底物法測定血漿纖維酶原活性時,需向受檢血漿中加入鏈激酶和
發(fā)色底物,生成對硝基苯胺(PNA)。
152.血清纖維蛋白降解產(chǎn)物膠乳凝集法中,血清FDP和乳膠顆粒上的抗體結合
所需濃度為25Pg/ml。
153.DIC診斷中最為敏感的指標是血清FDP測定。
154.抗凝治療中,監(jiān)測普通肝素的首選試驗指標是APTT。
155.PT是檢測口服抗凝藥的首選指標,應用口服抗凝藥時使PT維持在正常對照
值的1.5~2.0倍,或國際標準化比值(INR)在2.0~3.0為宜。
156.血漿魚精蛋白副凝固試驗陰性見于DIC晚期。
157.臨床上有出血而APTT和PT正常時,應首先懷疑遺傳性因子VIII缺乏癥。
158.在使用大劑量肝素時,既可獲得最佳抗凝療效又無嚴重的出血風險的APTT
測定值范圍應是較正常對照值延長1.5~2.5倍。
159.血友病A、B均為性連鎖隱性遺傳病;而血管性血友病除UN亞型和III為常
染色體隱形遺傳病外,其余均為常染色體顯性遺傳。
160.血友病患者篩選試驗中發(fā)生延長的凝血時間是APTTo
161.抗栓酶治療的監(jiān)測指標是纖維蛋白原和血小板。
162.紅色血栓又稱靜脈血栓;白色血栓(灰色血栓)又稱動脈血栓。
臨床血液學和血液學檢驗知識點
(一)粒細胞系統(tǒng)
1.原始粒細胞(myeloblast):10~18um,胞體圓或類圓形,核占細胞的2/3以
上,居中或略偏位,核染色質(zhì)呈細顆粒狀排列均勻,核仁2~5個、較小、清楚;
胞漿量少,染天藍色,有透明感,無顆粒。
2.早幼粒細胞(promyelocyte):12~20um,較原粒細胞大,核染色質(zhì)較原粒細
胞粗糙,染色質(zhì)顆粒開始有聚集,核仁可見或消失;胞漿染淡藍色、藍色或深藍
色,含大小不等、形態(tài)不一的紫紅色顆粒(即非特異性顆粒)。
3.中幼粒細胞(myelocyte)
①中性中幼粒(neutrophilicmyelocyte):10~18um,胞核橢圓形或一側
開始扁平,可有凹陷,其凹陷處約占細胞的2/3~1/2,核染色質(zhì)聚集呈索塊狀,
核仁隱約可見或消失;胞漿量多,染淡紅或少數(shù)區(qū)域略偏藍,含大小一致的紅色
顆粒、即特異性顆粒(致少有一個區(qū)域)。
②嗜酸性中幼粒(eosinophilic):15~20um:核與中性中幼粒相似;胞漿內(nèi)
充滿粗大而均勻、排列緊密的橘紅色特異性嗜酸性顆粒。
③嗜堿性中幼粒(basphilic):10~15um,核圓形或橢圓形、但常常輪廓不
清,核染色質(zhì)較模糊;胞漿內(nèi)及核上含有排列零亂、大小不等數(shù)量不多的紫黑色
嗜堿性顆粒。
4、晚幼粒細胞(metamyelocyte)
①中性晚幼粒(neutropilicmetamyelocyte):10~16um,核明顯凹陷呈腎形,
馬蹄形,半月形,但其核凹陷程度不超過假設直徑的一半,核染色質(zhì)粗糙,排列
更緊密,無核仁;胞漿量多,淺紅色,充滿中性特異性顆粒。
②嗜酸性晚幼粒(eosinophilicmetamyelocyte):10~16um,核形及結構
與中性晚幼粒相似;胞漿內(nèi)充滿橘紅色的、大小一致的嗜酸性特異性顆粒。
③嗜堿性晚幼粒(basophilicmetamyelocyte):10~14um,核固縮呈腎形,
輪廓模糊;胞漿內(nèi)及核上分布有少量嗜堿性非特異顆粒。
5.桿狀核粒細胞(stabgranulocyte)
①中性桿狀核粒細胞(neutrophilicstabgranulocyte):10~15um,核凹
陷程度超過假設直徑的一半,核徑最窄處大于最寬處1/3以上,呈帶狀彎曲,核
染色質(zhì)粗糙呈塊狀;胞漿充滿中性顆粒。
②嗜酸性桿狀核粒細胞(eosinophilicstabgranulocyte):11~16um,
核與中性桿狀相似;漿內(nèi)充滿嗜酸性顆粒。
③嗜堿性桿狀核粒細胞(basophilicstabgranulocyte):10~12um,核
呈模糊桿狀;胞漿內(nèi)及核上分布有少量嗜堿性顆粒。
6.分葉核粒細胞(segmentedgranulocyte)
①中性分葉核粒細胞(neutrophilicsegmentedgranulocyte):10~14u
m,核呈分葉狀,葉與葉之間有細絲相連或全斷開,常分2~5葉,核染色質(zhì)已濃
集呈粗的小塊狀,染深紫紅色;胞漿豐富,內(nèi)含淡紅色均勻細小顆粒。
②嗜酸性分葉核粒細胞((eosinophHicsegmentedgranulocyte):11~16
um,核多分2葉,核染色質(zhì)結構與中性分葉核相似;胞漿內(nèi)充滿粗大均勻一致
的橘紅色嗜酸性顆粒。
③嗜堿性分葉核粒細胞(basophilicsegmentedgranulocyte):10~12u
m,核可分3~4葉或分葉不明顯;胞漿分布有少量大小不等的紫黑色嗜堿性顆粒。
(二)紅細胞系統(tǒng)
①原始紅細胞(pronormoblast):15~20um,呈圓形或橢圓形,邊緣常呈鈍
角狀或瘤狀突起,核呈圓形,居中或偏位,約占細胞體的4/5左右,核染色質(zhì)呈
顆粒狀較原粒細胞粗而密集,核仁廠3個不等,且大小不一,形狀不規(guī)則,呈淺
藍色或暗藍色;胞漿量少,染深藍色、不透明,有油畫藍感,無顆粒。
②早幼紅細胞(eariynormoblast):10~18um,核圓形或橢圓形,約占細胞
的2/3以上,核染色質(zhì)顆粒有濃集現(xiàn)象,較原紅細胞粗糙,核仁模糊或消失;胞
漿量增多,染不透明藍色或深藍色,邊緣可見瘤狀突起。
③中幼紅細胞(polychromaticnormoblast):8~15um,核圓形,約占細
胞的1/2,核染色質(zhì)凝聚呈條索狀或塊狀,中間有明顯空隙,如壓碎餅干樣或打
碎墨硯感,無核仁;胞漿量相對較多,漿內(nèi)由于已合成不等量的血紅蛋白,可染
呈不同程度的嗜多色性。
④晚幼紅細胞(orthochromaticnormoblast):7~10um,核圓形居中或
偏位,占細胞的1/2以下,核染色質(zhì)致密聚集成結構不清的紫黑色團塊狀,無核
仁;胞漿量較多,因已合成大量血紅蛋白,常染淺灰紅色或淺紅色。
⑤網(wǎng)織紅細胞(reticulocyte):7.2~7.5um,為晚幼紅細胞剛脫核而成,是尚
未完全成熟的紅細胞,瑞氏染色為多嗜性紅細胞,用煌焦油藍活體染色后在細胞
內(nèi)可見藍色細顆?;虺示€狀或網(wǎng)狀結構。
⑥紅細胞(erythrocyte):正常紅細胞平均為7.2um,呈雙面微凹之圓盤狀,
中央較薄,染色淺,邊緣較厚,染色深,呈粉紅色,無核。
(三)單核細胞系統(tǒng)
①原始單核細胞(monoblast):15~20“m,胞體圓形或橢圓形,核較大圓
形或類圓形,核染色質(zhì)纖細,呈疏松網(wǎng)狀結構,核仁1~3個;胞漿量較其它原始
細胞豐富,灰藍色,不透明,邊緣不規(guī)則或有偽足狀突起。
②幼稚單核細胞(promonocyte):15~25um,核圓形或不規(guī)則形,易見扭
曲、凹陷、切跡等改變,核染色質(zhì)較原始單核細胞粗糙疏松,核仁可有可無;胞
漿淺灰藍色,不透明,可見細小顆粒。
③單核細胞(monocyte):12~20um,核形態(tài)常不規(guī)則,有腎形,馬蹄形,
“S”形,分葉狀,筆架形等,核染色質(zhì)疏松呈絲網(wǎng)狀或條紋狀結構,無核仁;
胞漿量較多,染不透明的灰藍色,可見細小紅色顆粒。
(四)淋巴細胞系統(tǒng)
1.原始淋巴細胞(lymphoblast):10~18um,胞體圓形或橢圓形,核呈圓形或
橢圓形,核染色質(zhì)呈細顆粒狀,核仁1~2個;胞漿量少,呈淡藍色,透明,無顆
粒。
2.幼稚淋巴細胞(prolymphocyte):10~16um,核圓形或橢圓形,核染色質(zhì)仍
較細致,核仁可有可無;胞漿量較少,淡藍色,偶見有少許紅色顆粒。
3.淋巴細胞(lymphocyte)
①大淋巴細胞:12~15um,核圓形稍偏于一側,核染色質(zhì)排列緊密均勻,
深紫紅色;胞漿量相對較多,染透明淡藍色,可有少量大小不等的紅色嗜天青顆
粒。
②小淋巴細胞:6~9um,核相對較小,呈圓形,核染色質(zhì)緊密呈大塊狀,
結構不清楚,染深紫紅色;胞漿極少,似裸核樣,如可見則呈淡藍色,一般無顆
粒。
(五)漿細胞系統(tǒng)
1.原始漿細胞(plasmablast):14~18um,胞體圓形或橢圓形,核圓形,占細
胞的2/3以上,居中或偏位,核染色質(zhì)呈粗顆粒網(wǎng)狀,染紫紅色,核仁2~5個;
胞漿量多,染深藍色,不透明,無顆粒。
2.幼稚漿細胞(proplasmacyte):12~16um,胞體多呈橢圓形,核圓形或橢圓
形,占細胞的1/2,居中或偏位,核染色質(zhì)較原漿細胞粗糙緊密,開始聚集,染
深紫紅色,核仁模糊或消失;胞漿量多,深藍色或紫藍色或呈藍色火焰狀,不透
明,有時可有空泡及少數(shù)嗜天青顆粒。
3.漿細胞(plasmacyte):8-15um,核明顯縮小,圓形,占細胞的1/3以下,
偏于一側,核染色質(zhì)濃集成塊狀,常排列呈車輪狀,無核仁;胞漿量豐富,染藍
色或紫藍色,不透明,有時有泡沫感,漿內(nèi)可含有小空泡及/或少量嗜天青顆粒,
偶見胞漿中有較大的紅色或淡藍色透明的球狀物,稱Russell小體,是球蛋白聚
集而成。
(六)巨核細胞系統(tǒng)
1.原始巨核細胞(megakaryoblast):15~30um,胞體圓形或不規(guī)則形,核大,
呈圓形或不規(guī)則形,核染色質(zhì)較其他原始細胞粗,呈粗網(wǎng)狀或細條索狀結構,染
深紫紅色,核仁2~3個,淡藍色,不清晰,不規(guī)則;胞漿量較少,不均勻,不規(guī)
則,染深藍色,無顆粒。
2.幼稚巨核細胞(promegkaryocyte):30~50um,外形不規(guī)則,核亦不規(guī)則,
有重疊,可扭轉呈腎形或分葉狀,核染色質(zhì)呈粗顆?;虼志W(wǎng)狀或局部濃集呈小塊
狀,排列緊密,核仁可有可無;胞漿量增多,常有偽足狀突出,染藍色或淺藍色,
在近核處出現(xiàn)或多或少的很細小紅色嗜天青顆粒。
3.巨核細胞(megakarycyte)
①顆粒型巨核細胞:40~70um,可達lOOum,外形不規(guī)則,核較大,形態(tài)
不規(guī)則,多呈分葉狀,核染色質(zhì)較粗糙,排列緊密呈團塊狀,紫紅色,無核仁;
胞漿量豐富,染粉紅色,夾雜有藍色,內(nèi)含大量細小紅色顆粒,常聚集呈簇,但
無血小板形成。
②產(chǎn)板型巨核細胞:40~70Pm,可達lOOum,形態(tài)大致與顆粒型巨核細胞
相似,唯有不同的一點是胞漿內(nèi)充滿細小的紅色顆粒及數(shù)量不等的血小板。
③裸核型巨核細胞:是產(chǎn)板型巨核細胞的胞漿解體后,釋放出大量血小板,
僅剩一個細胞核,稱之為裸核。
4.血小板(platelet):胞體很小,2~4um,呈圓形、橢圓形,逗點狀,不規(guī)則
形,中心部位有細小紫紅色顆粒,無細胞核,涂片上血小板常三五成群堆集出現(xiàn)。
(七)其他細胞
1.組織嗜細胞(tissuebasophiliccell):又稱肥大細胞(mastcell),12~20
um,呈圓形,橢圓形,梭形,三角形等,核小,呈圓形或橢圓形,居中或偏位,
核染色質(zhì)模糊,結構不清;胞漿充滿圓形、大小一致的深紫色嗜堿性顆粒。
2.內(nèi)皮細胞(endothelialcell):8~22um,形態(tài)極不規(guī)則,多呈梭形,核呈圓
形或橢圓形,核染色質(zhì)呈網(wǎng)狀,多無核仁;胞漿量少,染淡藍色,邊緣常模糊不
清,常沿核長軸的兩側或一端呈尾狀伸出,可有細小紫紅色顆粒。
3.纖維細胞(fibrocyte):胞體較大,不規(guī)則,多為長尾形,核圓形或橢圓形(1~
數(shù)個),核染色質(zhì)呈或細或粗的網(wǎng)狀結構,核仁1~2個,不清晰,成熟者無核仁;
胞漿豐富,多在細胞兩端,染淡藍色,邊界模糊,內(nèi)含纖維網(wǎng)狀物及少許嗜天青
顆粒。
4.成骨細胞(osteoblast):胞體較大,20~40um,長橢圓形或不規(guī)則形,單個
或多個成群分布,核圓形或橢圓形,常偏于細胞一側,核染色質(zhì)排列呈粗網(wǎng)狀,
染深紫紅色,核仁可有1~3個;胞漿豐富,染深藍色或灰藍色,邊緣常呈模糊云
霧狀。
5.破骨細胞(osteoclast):胞體巨大,60~100um,形態(tài)不規(guī)則,頗象巨核細胞,
核小、數(shù)量較多,3~100個不等,圓形或橢圓形,大小大致相等,邊緣清晰,彼
此獨立,無核絲相連,隨意排列,核染色質(zhì)呈粗網(wǎng)狀,幾乎每個核都有一個藍色
核仁;胞漿豐富,染淡藍色或淺紅色,含大小不等的紫紅細小顆粒。
6.脂肪細胞(fattycell):30~50um,胞體圓形或橢圓形,核較小,形狀不規(guī)
則,常被擠壓在一邊,核染色質(zhì)呈細致密網(wǎng)狀,無核仁;胞漿內(nèi)充滿大量空泡。
7.組織細胞(histiocyte):胞體較大,20~50um,形態(tài)多樣,一般呈圓形或橢
圓形及不規(guī)則形,核可有圓形,橢圓形,腎形,核染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀結構,核仁
2~4個不等;胞漿多少不一,染色也常不一致,有深藍,淡藍,灰藍色等,邊緣
多不規(guī)則或不清楚,無顆?;蚝猩倭炕蚣毣虼只虼旨毑灰坏氖忍烨囝w粒,可有
空泡或含異物等。
8.吞噬細胞(phagocyte):不是一種獨立的細胞,而是胞漿內(nèi)含有吞噬物質(zhì)的
一組細胞的總稱。具有吞噬功能的細胞有單核細胞、組織細胞、血管內(nèi)皮細胞,
纖維細胞等。吞噬細胞的形態(tài)極不一致,由吞噬物的類型及吞噬物的多少而定。
其胞核圓形、橢圓形或不規(guī)則形,常一個核,有時為雙核,核常被擠壓至一側,
核染色質(zhì)較疏松,核仁可有可無。胞漿多少不一,淡藍色或淡紅色,常有空泡,
并有數(shù)量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、顆粒、有核細胞、紅細胞、血小
板、碳核、細菌等。有時吞噬細胞成堆存在。
第二節(jié)異常血細胞形態(tài)學(4學時)
了解:初步認識各種異常血細胞形態(tài),并畫出每一臺顯微鏡下的細胞圖像。
血細胞形態(tài)在病理情況下,可在胞體、胞核、胞漿等方面發(fā)生異常改變。
(一)粒細胞系統(tǒng)形態(tài)異常
1.白血病時粒細胞改變
①胞體:大小不等、畸形。
②胞漿:Auer小體,顆粒粗大、增多。
Auer小體:是在細胞漿內(nèi)出現(xiàn)結構均勻一致的紅色細棒狀小體。產(chǎn)生原因是嗜
天青顆粒融合而成。常見于急性非淋巴細胞性白血病細胞漿內(nèi)。
③胞核:畸形、切跡、折疊、凹陷、扭曲、分葉等。如急淋時核易破碎,核分裂
象增多。
④核漿比:增大、發(fā)育不平衡(M2b)。
⑤核仁:大、數(shù)量增多、亦可不清楚。
2.巨大粒細胞:可見于中、晚、桿、分階段。常見巨晚幼、巨桿狀。
①形態(tài)特征:與同期相比,胞體大、核大、核染色質(zhì)較同階段細胞細致。
②形成原因:核酸代謝障礙。
③常見疾?。壕抻棕殹6、MDS、M2b、抗葉酸類藥物治療后。
3.中性粒細胞分葉過多:分5葉以上,常見于巨幼貧、嚴重感染恢復期。
4.粒細胞中毒變性改變
①中毒顆粒:胞漿顆粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫紅色。見于嚴重感
染、大面積燒傷等。
②空泡:漿或核內(nèi)空泡。見于嚴重感染。
③杜勒小體(Dohle):藍斑,在細胞漿內(nèi)直徑約l~2um的藍色區(qū)域。見于嚴重
感染,肝硬化等。
④核變性:核固縮、核腫脹、核碎裂、核溶解。見于嚴重感染。
(-)紅細胞系形態(tài)異常
1.巨幼紅細胞
①形態(tài)特征:與同期細胞相比,胞體大、核大、核染色質(zhì)細致、排列疏松“幼核
老漿”。
②產(chǎn)生原因:核酸代謝障礙。
③常見疾?。壕抻棕殹6、MDS、抗葉酸治療后等。
2.低色素性紅細胞
①形態(tài)特征:與同期細胞相比,漿量少、嗜堿性、著色偏藍,核染色質(zhì)無明顯異
常改變“幼漿老核”。成熟紅細胞中心淡染區(qū)明顯擴大。
②產(chǎn)生原因:Hb合成障礙(不能說缺鐵)。
③常見疾?。篒DA、Hb病、慢性感染性貧血等。
3.紅細胞大小不等、形態(tài)不整:見于各種增生性貧血。
4.球形紅細胞:V6.4um,中心淡染區(qū)明顯縮小或消失。見于遺傳性球形紅細
胞增多癥。
5.橢圓形紅細胞:橫徑/長徑<0.78。見于遺傳性橢圓形紅細胞增多癥。
6.靶形紅細胞:見于低色素性貧血、地貧等。
7.嗜多色性紅細胞:成熟紅細胞染灰藍色或淺灰色。多表示骨髓造血功能活躍,
多見于溶貧、失血性貧血等。
8.嗜堿性點彩紅細胞:瑞氏染色后在紅細胞漿中有藍黑色細小顆粒存在。表示
骨髓再生加速。鉛中毒時多見。
9.裂紅細胞:即紅細胞碎片??梢娪谖⒀懿⌒匀茇?、DIC及損傷性。
10.紅細胞中出現(xiàn)異常結構
①豪-周小體(Howoll-Jolly,s):屬核殘余物??梢娪诰抻棕?、溶貧、脾切除后、
鉛中毒等。
②卡波環(huán)(Cabot,sring):可見于鉛中毒、巨幼貧等。
(三)淋巴細胞形態(tài)異常
1.異型淋巴細胞:分漿細胞型、單核細胞、幼稚型??梢娪诔鲅獰?、傳單及其
它病毒感染。
2.原、幼淋巴細胞:淋巴細胞白血病、淋巴瘤等。
(四)單核-巨噬細胞系統(tǒng)形態(tài)異常
1.惡組:多形性、多核異組。
2.急單、類單核細胞白血病反應等。
3.戈謝細胞(Gaucher):戈謝病。
4.尼曼-皮克細胞(Niemann-pick):尼曼-皮克病。
(五)巨核細胞系統(tǒng)形態(tài)異常
1.幼巨產(chǎn)板:ITP。
2.小巨核:大小與成熟淋巴細胞相似,形態(tài)不規(guī)則,有偽足突起,核染色質(zhì)濃
集,無明核仁??梢娪诎籽?、MDS等。
3.巨大血小板:見于巨大血小板綜合癥。
第二章檢驗的基本方法
第一節(jié)制片方法(1學時)
掌握:制片及染色的基本方法。
了解:染液及緩沖液的配制方法。
一、骨髓制片
1.第一次骨髓穿刺患者,骨髓涂片8張以上或?qū)⑺楣撬枰喝客客?,?/p>
時涂外周血
片4張。
2.復查病人,骨髓涂片4張,同時涂外周血片2張。
二、脫落細胞制片
1.一般包塊穿刺,涂片1?2張。
2.胸腹水及尿液標本,取50ml以上離心(3000r/分)10分鐘,取沉淀物
涂片2張。
3.腦脊液標本,將全部送檢物離心(3000r/分)沉淀,取沉淀物涂片1張。
4.痰液標本,取可疑部分涂片3?5張。
第二節(jié)血細胞及脫落細胞瑞氏-姬姆薩染色(1學時)
一、試劑
1.瑞氏染色液:稱1克瑞氏染粉,加入1瓶甲醇(分析純,約500ml)中混
勻,室溫放
置3個月后應用或每天混勻1次,放置室溫連續(xù)7天后應用o
2.姬姆薩染色液:稱0.5克姬姆薩(吉氏)染粉,加入33ml丙三醇(甘油,分
析純)中混勻,放56℃水浴箱中3小時以上,中間混勻3?
5次,取出冷確至室溫,再加入33ml甲醇(分析純)中,
混勻即可應用。
3.磷酸鹽緩沖液(PH=6.4?6.8):磷酸二氫鉀(無水,分析純)5克
磷酸氫二鈉(含12.出0,分析純)5克
蒸播水10000ml
溶解混勻備用
4.姬姆薩染色液一磷酸鹽緩沖液混合比例:姬姆薩染色液約2?3ml,加磷酸鹽
緩沖液約30?40ml混勻即可應用。每天上下午各新鮮配制1
次。
二、染色方法
1.血或骨髓涂片在瑞氏染色液中固定5?8秒鐘。
2.放入姬姆薩染色液一磷酸鹽緩沖液混合液中染色15?20分鐘,慢性粒細胞
白血病患者
涂片染色30分鐘,取出涼干或用濾紙吸干即作鏡下觀察。
第三、四節(jié)血象及骨髓象檢驗分析步驟(2學時)
掌握:血象檢驗結果及骨髓象檢驗結果的正常值,正常骨髓象的正常形態(tài)特征。
熟悉:常見血液病的臨床表現(xiàn)及血象、骨髓象的形態(tài)學改變特征。
了解:其他系細胞的正常形態(tài)及異常形態(tài)。
(一)血象檢驗
1.在做骨髓穿刺的同時須做血象檢驗
⑴BRC、RC、WBC、PLT計數(shù)。
⑵涂片染色觀察。
①紅細胞形態(tài)有無異常。
②白細胞形態(tài)有無異常。
③血小板形態(tài)及數(shù)量有無異常。
④有無寄生蟲及其他異常細胞。
2、作用
⑴提供思路
①一系減少:HbI、WBC及PLT正常一單純貧血。
WBCI、Hb及PLT正常一粒細胞減少或缺乏。
PLTIHb及WBC正常一ITP。
②二系減少:Hb及PLTlWBC正常一ITP、急白、MDS、巨幼貧。
③三系減少:Hb、PLT及WBC均I-AA、急白、巨幼貧。
⑵提供診斷依據(jù)
①骨髓象相似,血象有區(qū)別
如:球形RBCtiGFf骨髓紅系t、血象有核紅t、球形RBCt。
IDA------------?骨髓紅系t、血象無有核紅、RBC中心淡染區(qū)擴大。
②血象相似,骨髓象不同
如:AA------------血象三系I、骨髓巨核細胞I及無白血病細胞。
非白血病性白血病血象三系I、骨髓有白血病細胞。
MA--------------血象三系I,骨髓粒系、紅系、巨核系均有巨幼變。
③血象有明顯變化、骨髓無變化
如:傳單>血象淋巴細胞t、異淋f(>10%)、骨髓無變化。
傳淋----------血象淋巴細胞f、異淋I、骨髓無變化。
④骨髓有變化、血象無明顯變化
如:戈謝病------骨髓有戈謝細胞、血象無明顯變化。
尼曼-皮克病--------?骨髓有尼曼-皮克細胞、血象無明顯變化。
(-)骨髓象檢查
凡疑有血液系統(tǒng)或并發(fā)血液系統(tǒng)疾病均應作骨髓穿刺檢查
1、適應癥
①檢查血常規(guī)有問題:血象增高、減少。
⑵臨床體征有不明原因貧血、出血、發(fā)熱、骨痛、肝脾淋巴結腫大。
2、禁忌癥
①由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病。
②晚期妊娠作骨穿檢查要慎重。
③小兒及不合作患者不宜作胸骨穿刺術。
3、標本采集:一般由臨床醫(yī)生作。
⑴采集部位:胸骨、脊突、骸骨、脛骨粗隆(2歲以下小兒)。
⑵采集質(zhì)量保證
①無菌、嚴防感染。
②死亡病例應在30分鐘內(nèi)完成。
③量不能多,一般不超過0.2ml,否則導致血稀(混血),影響判定診斷。
④對某些疾病采取多部位穿刺可提高診斷率。如轉移癌、骨髓瘤等在病變或骨痛
部位穿刺其陽性率
較高;如AA多部位穿刺有利確診。
⑶涂片質(zhì)量保證
①推片時角度太大、太快都使涂片厚,反之則薄。
②先涂血片、后涂骨髓片。
③骨髓抽太多,制片人應將剩骨髓液的玻片斜立,用棉花在斜面的底部吸去部分
血液,再行涂片,底片不能丟。
④作好標識:姓名、血片(B)、骨髓(M)。
⑤涂片中前3張涂片,對估計PLT量較好。
⑷判定骨髓取材滿意的幾項指標
①抽吸骨髓時病人有特殊的痛感。
②骨髓液及涂片均可見骨髓小粒(骨髓渣)和脂肪滴。
③顯微鏡觀察涂片可發(fā)現(xiàn)骨髓特有細胞。
④含有大量幼粒幼紅細胞,粒細胞桿狀核與分葉核的比值大于血片中的比值。
⑸干抽的概念:是指非技術錯誤或穿刺位置不當而抽不出骨髓液或只得到少量血
液。其常見疾病有:
①原發(fā)性或繼發(fā)性骨髓纖維化。
②骨髓增生極度活躍,細胞過于濃集。如:白血病、真紅。
③骨髓增生減低:AAo
④腫瘤骨髓浸潤:惡淋、MM、轉移癌等。
4、檢驗的方法及步驟
(1)低倍鏡觀察
①取材、涂片、染色情況:采用“良好”、“尚可”、“欠佳”等標準進行評價。
②判定骨髓有核細胞增生程度:有核細胞與成熟紅細胞之比,分五級:
增生極度活躍:平均約1:1
增生明顯活躍:平均約1:10
增生活躍:平均約1:20
增生減低:平均約1:50
增生極度減低:平均約1:200
③觀察涂片尾部及邊緣有無大的或成群(團)的異常細胞,同時計數(shù)全片巨核細
胞。
(2)油鏡觀察
①選擇部位:在涂片體、尾交界處,選擇細胞分布比較均勻處。
②有核細胞分類計數(shù):可根據(jù)增生程度確定分類總數(shù)
增生減低及極度減低:分100或200個細胞。
增生活躍:分200或500個細胞。
增生明顯活躍及極度活躍:分500個細胞。
③觀察細胞形態(tài)
粒系:中毒顆粒、空泡、有無巨幼變粒細胞、Aure小體等。
紅系:幼紅細胞及成熟紅細胞有無異常變化。
巨核系:小巨核、幼巨產(chǎn)板、巨大血小板、估計血小板量。
④注意有無寄生蟲。
⑤判定低倍鏡下觀察到的異常細胞性質(zhì)。
(3)計算結果
①根據(jù)分類結果計算出各系統(tǒng)及各階段細胞的百分率。
②計算粒紅比值:粒細胞系總和/紅細胞系總和。
(4)填寫報告
①根據(jù)骨髓象分類結果,按報告單要求逐項進行填寫。
②做好骨髓象所見的形態(tài)特征描述。
(5)骨髓報告分析及意見
①取材、涂片、染色情況:良好、尚可、欠佳。
②骨髓增生程度,粒:紅=?:?。
③粒系:
④紅系:
⑤淋巴系或單核系:
⑥全片巨核細胞數(shù),根據(jù)血小板分布估計其量是多、正常、少。
⑦有無寄生蟲。
⑧血片分類及所見進行描述。
⑨寫出診斷意見:根據(jù)血象、骨髓象和細胞化學染色所見,結合臨床資料,提出
具體診斷意見或供參考的意見。診斷意見分為以下幾種:
肯定性診斷:骨髓有特異性變化,臨床表現(xiàn)又典型者,如各種白血病、MA、MM、
轉移癌、戈謝病、尼曼-皮克病等。
支持性診斷:血象、骨髓象有形態(tài)改變,可解釋臨床表現(xiàn),如IDA、AA、溶貧等。
可疑性診斷:骨髓象有部分變化或出現(xiàn)少量異常細胞,臨床表現(xiàn)又不典型,可能
為某種疾病的早期或前期或不典型病例者,如難治性貧血等,要結合臨床、作相
應的檢查,并動態(tài)觀察
其變化。
排除性診斷:如臨床上懷疑ITP的患者,其骨髓中血小板易見(不少),巨核細
胞無成熟障礙,即可排除ITP的可能性。
形態(tài)學描寫:骨髓有些改變,但提不出上述性質(zhì)診斷意見,可簡述其形態(tài)學變化
的主要特點,并建議作動態(tài)觀察,盡可能提出進一步檢查的建議。
⑩填寫報告日期并簽名。
5、骨髓象檢查的注意事項
①由于細胞形態(tài)變化多種多樣,故觀察細胞時不能根據(jù)某一、二個特點就輕易作
出肯定性診斷或否定性診斷,要全面觀察細胞的形態(tài)變化,結合臨床綜合分析
作出判斷。
②同一病人的骨髓涂片,可因制作涂片不佳(太厚、太?。?、染色不好、選擇分
類或觀察的部位不當均易導致判斷錯誤。
③觀察細胞形態(tài)要認識到血細胞的發(fā)育是一個連續(xù)不斷的過程,對各系細胞劃分
為若干階段是人為劃分的,在實際觀察中常會遇到一些細胞既有上一階段的某
些特征,又有下一階段的某些特點,由于血細胞是向成熟方向發(fā)育,故一般遇
此情況歸入下一階段。
④對于個別介于兩系統(tǒng)之間的細胞難以判斷時,可采用大數(shù)歸類法(即將此類難
以判斷的細胞歸入細胞多的細胞系)。如在紅系較多的骨髓片中,將介于漿細
胞與幼紅細胞之間的細胞歸入紅系細胞;介于原粒細胞與原淋巴細胞之間的細
胞,一般情況原粒細胞較原淋巴細胞易見,故應歸入原粒;如為急性淋巴細胞
白血病的病人,應歸入原淋巴細胞。切忌在急性白血病骨髓象中分出多種原始
細胞(如原粒、原單、原淋都有)的現(xiàn)象。
⑤急性白血病時,各系統(tǒng)原始細胞在理論上雖各有特征,但有時及為相似,很難
鑒別,這時應注意觀察伴隨出現(xiàn)的幼稚細胞、成熟細胞,并與其比較,同時要
結合細胞化學染色、血象細胞形態(tài)等綜合考慮,推測原始細胞的歸屬。
⑥有時可見到難以識別的細胞,可參考涂片上其他細胞后作出判斷,如仍不能確
定可歸入“分類不明細胞”,但不宜太多,若有一定數(shù)量,則應通過細胞化學
染色、集體閱片或會診等方法弄清類別。
⑦骨髓涂中巨核細胞減少或血小板減,而外周血象中血小板數(shù)正常時,則往往是
由穿刺凝固或涂片凝固所致。
⑧作骨髓細胞學檢查時,應同時作血象細胞學檢查,這有助于疾病的診斷及化療
后療效判斷。
(三)判定骨髓計數(shù)值的高低
根據(jù)骨髓各系統(tǒng)各階段細胞的計數(shù)值與其相應的X±SD的離散程度進行判
斷。
計數(shù)值:在X±1SD以內(nèi)視為正常
在X—1SD以下視為減低
在X+1SD~2SD之間視為增高
在X+2SD以上視為明顯增高
從第五節(jié)起以下的實驗課均讓學生自己動手做,教師輔導。
第五節(jié)大致正常骨髓象(4學時)
掌握:血象檢驗結果及骨髓象檢驗結果的正常值,骨髓各系統(tǒng)各階段細胞的正常
形態(tài)特征,正常骨髓象報告的書寫方法。
熟悉:其他系細胞的正常形態(tài)。
一般符合列情況者,可視為大致正常骨髓象。
1.骨髓有核細胞增生活躍。
2.粒紅比值:2~4:lo
3.各系統(tǒng)各階段細胞比值在正常范圍,形態(tài)無明顯異常。
①粒系:約占40~60%,其中原粒V2%,早幼粒V5%,中性中幼粒8%~12%,中
性晚幼粒10%~15%,中性桿狀核15%~20%,中性分葉核12%~20%,且桿狀〉
分葉,嗜酸<5%,嗜堿VI%。
②紅系:約占20%~25%,原紅VI%,早幼紅<5%,以中、晚幼紅細胞為主、各
約占10%,形態(tài)無異常。
③淋巴細胞系:約占15~25%,均為成熟淋巴細胞,原幼淋巴細胞小兒偶見。
④單核及漿細胞系:各<4%。無原幼單及原幼漿細胞。
⑤巨核系:通常在1.5義3cm的涂片膜上,可見7~35個巨核細胞。其中原巨0或
罕見,幼巨0~5%,顆粒巨10~27%,產(chǎn)板巨44%~60%,裸核0~30%。血小板
易見,呈堆存在。
⑥其它細胞:可見少量非造血細胞,如組織細胞、內(nèi)皮細胞、肥大細胞、破骨細
胞、成骨細胞、脂肪細胞等。
⑦核分裂象少。
⑧無異常細胞及寄生蟲。
⑨各系細胞形態(tài)正常。
第六節(jié)臨床血液生化和血細胞化學
一、細胞化學染色(4學時)
掌握:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法、結果判定、正常值及臨床意義。
熟悉:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法的試劑配制。
了解:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法的。
(一)堿性磷酸酶染色(NAP)
------鈣鉆法
1.原理細胞內(nèi)的堿性磷酸酶在PH9.2~9.8時,將底物B-甘油磷酸鈉水解,產(chǎn)
生磷酸根,后者與其質(zhì)液中的鈣離子作用形成磷酸鈣,再與硝酸鉆起反應,形成
磷酸鉆,最后與硫化錢作用形成硫化鉆黑色沉淀定位于胞漿中。
2.試劑
(1)備用試劑:①95%乙醇②2%CaCl2③2%硝酸鉆④1%硫化鏤⑤B-甘油磷
酸鈉⑥Tris-HCI緩沖液(PH9.5):Tris6g溶于400ml水中,加0.1MHCI80ml,調(diào)
PH9.5,加水至500ml
孵育液(每次必須新鮮配制):緩沖液
(2)Tris20ml,2%CaCI2
20ml,B一甘油磷酸鈉200mg。
3.方法
(1)新鮮血片用95%乙醇固定lOmin,取出,自然干燥。
(2)將孵育液放入45℃水浴箱中先預溫5min后,再放入涂片孵育30min,取出
涂片(不沖洗)立即放入2%硝酸鉆中5min,取出用自來水充分沖洗干凈。
(3)放入1%硫化鏤溶液(每次必須新鮮配制)中2min,用自來水沖洗干凈,
用核固紅復染30min。
4.結果
陽性:中性粒細胞胞漿內(nèi)有棕黑色沉淀。
陰性:中性粒細胞胞漿內(nèi)無棕黑色沉淀。
5.正常參考值
成人:積分80分左右。
兒童:因年齡而異。
6.臨床意義
(1)細菌:積分球菌tt>GN桿菌,病毒減低或無變化。但NAP積分正常/1,
不能除外細菌感染。
(2)慢粒II,類白t?tto
(3)ALLf,ANLLl。
(4)AAtt,PNH正常/l。
(5)惡組II,反應性組織細胞增多t-tto
(6)增性紅細胞增多癥t,繼發(fā)性紅細胞增多正常。
(7)激素治療后NAPt?
(8)妊娠期NAPto
7.質(zhì)量保證
(1)孵育液、1%硫化錠每次實驗必須新鮮配制。
(2)Tris-HCI緩沖液的PH應控制在9.2~9.8之間。
(3)溫度應嚴格控制在45℃左右(上下不超過1℃)。
(4)涂片在孵育液中準確溫育30分鐘。
(5)涂片從孵育液中取出時不能沖洗,應直接放入硝酸鉆,否則實驗失敗。
(6)涂片從硝酸鉆中取出時應用自來水沖洗3分鐘,否則涂片太臟,結果不好
觀察。
(7)每次染色必須作對照。
(二)鐵染色
1.原理骨髓小粒中的含鐵血黃素稱細胞外鐵,其中的三價鐵與分子中的蛋白
質(zhì)結合不牢固,經(jīng)稀鹽酸處理后而游離,并能在酸性亞鐵氧化鉀溶液中產(chǎn)生普魯
士藍反應。細胞內(nèi)鐵也可用此法顯示。根據(jù)反應的強弱了解骨髓中鐵的含量。
2.試劑
(1)酸性亞鐵氧化鉀溶液
200g/L亞鐵氧化鉀溶液5份
濃鹽酸1份
取200g/L亞鐵甄化鉀溶液置于試管中,緩緩滴加濃鹽酸,邊滴邊搖勻,至
出現(xiàn)白色沉淀,再滴加200g/L亞鐵氟化鉀溶液,亦邊滴邊搖勻,至白色沉
淀消失為止,備用。
(2)2g/L核固紅一硫酸鋁溶液
取硫酸鋁2g溶于100ml蒸儲水中,再加入核固紅0.2g,置37℃水浴中1小
時,并隨時振搖,使溶解,過濾后使用。
3.方法
(1)選髓粒豐富的骨髓片,用甲醇固定10分鐘。
(2)髓片上滴滿酸性亞鐵氧化鉀溶液,染色30分鐘。
(3)用蒸儲水沖洗后,用核固紅復染20分鐘。
4.結果判斷
幼紅細胞內(nèi)出現(xiàn)藍綠色顆粒為陽性。
5.正常參考值
正常:細胞內(nèi)鐵>20%,細胞外鐵+~++。
IDA:細胞內(nèi)鐵<15%,細胞外鐵陰性。
6.
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