血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義

第第頁血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義

氨基酸和生物資源

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AminoAcidsBioticResources1998,20(2):24～26

血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義

劉惠敏姜秋芬戴尚飛李興發(fā)

(河北醫(yī)科高校基礎(chǔ)所石家莊050017)

Ξ

摘要建立了用毛細(xì)管氣相色譜法分析血漿中游離脂肪酸(FFA)的方法。測定了20例正常人和16例糖尿病人血漿中游離脂肪酸的含量。測定結(jié)果說明,糖尿病人的C16∶1等三種脂肪酸與正常人相比有明顯差異。就脂肪酸類與疾病的關(guān)系作了爭論。

關(guān)鍵詞血漿游離脂肪酸氣相色譜法

脂類物質(zhì)是細(xì)胞膜的主要組成,具有多

種重要的生物學(xué)功能。通過檢測血漿中脂肪酸水平,肪酸的關(guān)系。,,的濃度,。所以我們建立了用毛細(xì)管氣相色譜法測定血漿中游離脂肪酸的方法,并就其在臨床上的意義加以爭論。

1材料和方法1.1測試對象

正常人組:20名(男10,女10),年齡18～43歲,平均年齡28.96歲。系本校1995級體檢正常的同學(xué),部分來自血站體檢合格的獻(xiàn)血者。

病人組:16名(男8,女8),年齡44歲～70歲,平均年齡60.7歲。均系型糖尿病人,病史5～15年。1.2主要儀器和試劑

日立663-50氣相色譜儀,裝有氫焰離子化檢測器(FID)有毛細(xì)管裝置。

C16∶0等十種脂肪酸標(biāo)品為Alltech公司

Ξ收稿日期:1997-08-15;

、、甲醇均。.:OV-101玻璃毛細(xì)管柱,0.25mm18m,液膜厚度為0.25Λm(日立公司產(chǎn)品)。檢測器:FID。柱溫起始溫度170℃,保持3min,以3℃min速率升溫至220℃,保持5min。檢測器溫度250℃,進(jìn)樣器溫度230℃。載氣為氫氣,70mlmin。分流式進(jìn)樣,分流比為100∶1。1.4提取與酯化

提取:取2ml空腹血漿,加6ml甲醇,12ml氯仿,充分振搖,2500r

min離心10min,吸去上層水相,濾去蛋白,用0.5ml氯仿洗濾紙一次,濾液在60℃下N2吹趕至0.5ml。

酯化:提取液中加入2ml無水甲醇和1ml三氟化硼一乙醚液,加入內(nèi)標(biāo)C17∶0,緩緩加溫至沸,煮沸30min。放置室溫,加入2ml二次蒸餾水,用二氯甲烷萃取3次,在40℃下N2吹趕至100Λl,進(jìn)樣1Λl。2結(jié)果

2.120例正常人和16例糖尿病(DM)患

者,血漿中FFA的測定結(jié)果見表1,經(jīng)統(tǒng)計(jì)t

血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義

劉惠敏等血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義

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檢驗(yàn),顯著差異的有C16∶1、C18∶1、C18∶0。各種脂肪酸的重復(fù)性測定變異系數(shù)在9%以內(nèi),見表2。不飽和脂肪酸以C18∶2為代表,飽和脂肪酸以C20∶0為代表,回收率分別為82.75%和96.70%。

2.2糖尿病患者狀況比較繁復(fù),病人往往有

各式各樣的合并癥,血漿中游離脂肪酸的濃度也就不同。不飽和脂肪酸C16∶1和C18∶1均低于正常人(P0.05),而飽和脂肪酸C18∶0高于正常人(P0.01)。3臨床意義3.1關(guān)于必需脂肪酸

人體內(nèi)脂肪和類脂所含有的脂肪酸,都是具有偶數(shù)碳原子的脂肪酸,都在12子以上。(C16∶1)、油酸(C18∶1)(C18∶2)、亞麻油酸(C18∶3)和花生四烯酸(C20∶4),其中含量最多的是油酸。在多不飽和脂肪酸中有幾種是體內(nèi)不能自行合成的,稱為必需脂肪酸(EFA)。它包括亞油酸、亞麻油酸和花生四烯酸(AA)。既然人體不能合成,就必需從食物中供應(yīng)。富含必需脂肪酸的食物主要是植物性食物,如:玉米油、豆油、棉籽油、葵花子油等含有多量亞油酸。假如EFA供應(yīng)不足或過多地被氧化時,會導(dǎo)致EFA缺乏癥,比如可涌現(xiàn)皮炎,脂肪肝及有關(guān)脂類代謝障礙。一般認(rèn)為脂肪肝的病因之一是:需要脂肪酸缺乏而使磷脂合成減削所致。EFA缺乏癥,只能靠補(bǔ)充需要脂肪酸來治療。

但是,假如含多不飽和脂肪酸的植物油食入量過多,會引起脂質(zhì)過氧化增高。脂質(zhì)過氧化是衰弱、糖尿病及肝硬化等很多疾病的病理過程。而含飽和脂肪酸及膽固醇較多的動物油可降低脂質(zhì)過氧化,卻又會引起高血脂癥,是動脈粥樣硬化冠心病的一個危急因

[1]

素[2]。所以人們應(yīng)保持良好的飲食習(xí)慣。3.2必需脂肪酸與癌

多不飽和脂肪酸中主要是EFA具有抑制腫瘤的作用。如EFA在組織培育中能阻礙三種腹水癌的生長。對6C3HED淋巴肉瘤也有抑制作用,其中以亞油酸和亞麻酸的作用較強(qiáng)。用含有EFA的飼料喂養(yǎng)已接種試驗(yàn)?zāi)[瘤的大鼠,能抑制腫瘤的生長和延長大鼠的生存期。因腫瘤死亡的大鼠,組織的提取物中亞麻酸的含量就顯著減削或消逝。

與多不飽和脂肪酸有關(guān)的抗癌新劑型

(139),“油酸多相脂質(zhì)體”

測定,,其主要,從“139”治療一個,萎縮、變性或變形,據(jù)初步統(tǒng)計(jì)臨床有效率達(dá)66.7%(P0.05)。對晚期肺腺癌的治療后,*線透視腫塊消逝,痰檢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)陰。AA也與癌癥有親密關(guān)系,大鼠患白血病時,血漿和紅細(xì)胞中AA的含量也明顯地降低。癌癥患者血漿中的AA的含量比正常人降低50%以上[3]。

表1正常人與糖尿病人血漿中的游離脂肪酸含量

S)(*

.1ThecontentsofFFAintheplasmaofTabel

healthyhumanandpatientssuffeiingfromdiabetesmelitus

脂肪酸

C16∶1C16∶0C18∶3C18∶2C18∶1C18∶0C20∶4C20∶3C20∶0

ΛmolL

正常人組(n=20)

76.123.81455.1146.3641.5162.5389.286.770.420.3421.840.1221.444.972.933.229.37.5

病人組(n=16)

47.525.031437.2232.4764.3285.8352.7143.453.727.733567.292.53240.099.9105.697.347.039.5

33P0.053P0.01

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氨基酸和生物資源

表2血漿中游離脂肪酸測定的重復(fù)性

Table.2ReproducibilityofFFAdeterminationinplasmaΛmolL

脂肪酸

C16∶1C16∶0C18∶3C18∶2C18∶1C18∶0C20∶4C20∶3C20∶0

A64.151390.83523.60357.5172.01551.27218.1280.8025.25

B66.031349.32518.86342.2864.01552.50201.3099.6425.12

C69.141281.31502.84353.4865.85570.04225.6589.4626.33

D57.981373.19565.26342.8277.50558.06208.8387.3122.53

均數(shù)

64.331348.66527.64349.0469.85557.99213.4689.3324.80

%CV7.313.375.042.198.791.254.988.71.49

脂肪酸是重要的生物資源,不僅在營養(yǎng)衛(wèi)生方面有重要的作用,關(guān)系,的水平,息。

2,,..色譜,1995,(6):415

3陳建智,顧學(xué)裘.多不飽和脂肪酸與癌.腫瘤,1983,(6):

268

4Eder.K,etal.Gaschromatographicanalysisoffatty

acidmethylesters:avoidingdiscriminationbypro2grammedtemperaturevaporizinginjecionJournalofchromatography.1991,(588):265

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氨基酸和生物資源

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AminoAcidsBioticResources1998,20(2):24～26

血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義

劉惠敏姜秋芬戴尚飛李興發(fā)

(河北醫(yī)科高校基礎(chǔ)所石家莊050017)

Ξ

摘要建立了用毛細(xì)管氣相色譜法分析血漿中游離脂肪酸(FFA)的方法。測定了20例正常人和16例糖尿病人血漿中游離脂肪酸的含量。測定結(jié)果說明,糖尿病人的C16∶1等三種脂肪酸與正常人相比有明顯差異。就脂肪酸類與疾病的關(guān)系作了爭論。

關(guān)鍵詞血漿游離脂肪酸氣相色譜法

脂類物質(zhì)是細(xì)胞膜的主要組成,具有多

種重要的生物學(xué)功能。通過檢測血漿中脂肪酸水平,肪酸的關(guān)系。,,的濃度,。所以我們建立了用毛細(xì)管氣相色譜法測定血漿中游離脂肪酸的方法,并就其在臨床上的意義加以爭論。

1材料和方法1.1測試對象

正常人組:20名(男10,女10),年齡18～43歲,平均年齡28.96歲。系本校1995級體檢正常的同學(xué),部分來自血站體檢合格的獻(xiàn)血者。

病人組:16名(男8,女8),年齡44歲～70歲,平均年齡60.7歲。均系型糖尿病人,病史5～15年。1.2主要儀器和試劑

日立663-50氣相色譜儀,裝有氫焰離子化檢測器(FID)有毛細(xì)管裝置。

C16∶0等十種脂肪酸標(biāo)品為Alltech公司

Ξ收稿日期:1997-08-15;

、、甲醇均。.:OV-101玻璃毛細(xì)管柱,0.25mm18m,液膜厚度為0.25Λm(日立公司產(chǎn)品)。檢測器:FID。柱溫起始溫度170℃,保持3min,以3℃min速率升溫至220℃,保持5min。檢測器溫度250℃,進(jìn)樣器溫度230℃。載氣為氫氣,70mlmin。分流式進(jìn)樣,分流比為100∶1。1.4提取與酯化

提取:取2ml空腹血漿,加6ml甲醇,12ml氯仿,充分振搖,2500r

min離心10min,吸去上層水相,濾去蛋白,用0.5ml氯仿洗濾紙一次,濾液在60℃下N2吹趕至0.5ml。

酯化:提取液中加入2ml無水甲醇和1ml三氟化硼一乙醚液,加入內(nèi)標(biāo)C17∶0,緩緩加溫至沸,煮沸30min。放置室溫,加入2ml二次蒸餾水,用二氯甲烷萃取3次,在40℃下N2吹趕至100Λl,進(jìn)樣1Λl。2結(jié)果

2.120例正常人和16例糖尿病(DM)患

者,血漿中FFA的測定結(jié)果見表1,經(jīng)統(tǒng)計(jì)t

血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義

劉惠敏等血漿中游離脂肪酸的測定及其臨床意義

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檢驗(yàn),顯著差異的有C16∶1、C18∶1、C18∶0。各種脂肪酸的重復(fù)性測定變異系數(shù)在9%以內(nèi),見表2。不飽和脂肪酸以C18∶2為代表,飽和脂肪酸以C20∶0為代表,回收率分別為82.75%和96.70%。

2.2糖尿病患者狀況比較繁復(fù),病人往往有

各式各樣的合并癥,血漿中游離脂肪酸的濃度也就不同。不飽和脂肪酸C16∶1和C18∶1均低于正常人(P0.05),而飽和脂肪酸C18∶0高于正常人(P0.01)。3臨床意義3.1關(guān)于必需脂肪酸

人體內(nèi)脂肪和類脂所含有的脂肪酸,都是具有偶數(shù)碳原子的脂肪酸,都在12子以上。(C16∶1)、油酸(C18∶1)(C18∶2)、亞麻油酸(C18∶3)和花生四烯酸(C20∶4),其中含量最多的是油酸。在多不飽和脂肪酸中有幾種是體內(nèi)不能自行合成的,稱為必需脂肪酸(EFA)。它包括亞油酸、亞麻油酸和花生四烯酸(AA)。既然人體不能合成,就必需從食物中供應(yīng)。富含必需脂肪酸的食物主要是植物性食物,如:玉米油、豆油、棉籽油、葵花子油等含有多量亞油酸。假如EFA供應(yīng)不足或過多地被氧化時,會導(dǎo)致EFA缺乏癥,比如可涌現(xiàn)皮炎,脂肪肝及有關(guān)脂類代謝障礙。一般認(rèn)為脂肪肝的病因之一是:需要脂肪酸缺乏而使磷脂合成減削所致。EFA缺乏癥,只能靠補(bǔ)充需要脂肪酸來治療。

但是,假如含多不飽和脂肪酸的植物油食入量過多,會引起脂質(zhì)過氧化增高。脂質(zhì)過氧化是衰弱、糖尿病及肝硬化等很多疾病的病理過程。而含飽和脂肪酸及膽固醇較多的動物油可降低脂質(zhì)過氧化,卻又會引起高血脂癥,是動脈粥樣硬化冠心病的一個危急因

[1]

素[2]。所以人們應(yīng)保持良好的飲食習(xí)慣。3.2必需脂肪酸與癌

多不飽和脂肪酸中主要是EFA具有抑制腫瘤的作用。如EFA在組織培育中能阻礙三種腹水癌的生長。對6C3HED淋巴肉瘤也有抑制作用,其中以亞油酸和亞麻酸的作用較強(qiáng)。用含有EFA的飼料喂養(yǎng)已接種試驗(yàn)?zāi)[瘤的大鼠,能抑制腫瘤的生長和延長大鼠的生存期。因腫瘤死亡的大鼠,組織的提取物中亞麻酸的含量就顯著減削或消逝。

與多不飽和脂肪酸有關(guān)的抗癌新劑型

(139),“油酸多相脂質(zhì)體”

測定,,其主要,從“139”治療一個,萎縮、變性或變形,據(jù)初步統(tǒng)計(jì)臨床有效率達(dá)66.7%(P0.05)。對晚期肺腺癌的治療后,*線透視腫塊消逝,痰檢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)陰。AA也與癌癥有親密關(guān)系,大鼠患白血病時,血漿和紅細(xì)胞中AA的含量也明顯地降低。癌癥患者血漿中的AA的含量比正常人降低50%以上[3]。

表1正常人與糖尿病人血漿中的游離脂肪酸含量

S)(*

.1ThecontentsofFFAintheplasmaofTabel

healthyhumanandpatientssuffeiingfromdiabetesmelitus

脂肪酸

C16∶1C16∶0C18∶3C18∶2C18∶1C18∶0C20∶4C20∶3C20∶0

ΛmolL

正常人組(n=20)

76.123.81455.1146.3641.5162.5389.286.770.420.3421.840.1221.444.972.933.229.37.5

病人組(n=16)

47.525.031437.22