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文檔簡(jiǎn)介
ICS07.080
A21
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
GB/TXXXXX—201X
生物產(chǎn)品降解植物纖維素功效
評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范
Technicalspecificationofevaluationfordegradationofplant
celluloseinbiologicproducts
(征求意見(jiàn)稿)
201X-XX-XX發(fā)布201X-XX-XX實(shí)施
發(fā)布
中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局
中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)1化管理委員會(huì)
GB/T××××—201×
I
GB/T××××—201×
生物產(chǎn)品降解植物纖維素功效評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生物產(chǎn)品降解植物纖維素效果評(píng)價(jià)試驗(yàn)原理、儀器設(shè)備及器具、試劑與材料、試驗(yàn)步驟、
結(jié)果分析。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于微生物和酶生物產(chǎn)品降解植物纖維效果評(píng)價(jià)。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB1886.232食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑羧甲基纖維素鈉
GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
3術(shù)語(yǔ)和定義
3.1
生物產(chǎn)品biologicalproducts
利用生物技術(shù)獲得的產(chǎn)品。
3.2
植物纖維素cellulose
由D-葡萄糖以β-1,4糖苷鍵組成的大分子多糖,不溶于水及一般有機(jī)溶劑,是植物細(xì)胞壁的主要成分。
4原理
在一定條件下,纖維素底物(羧甲基纖維素鈉)能夠被微生物或酶制劑降解,底物粘度隨之降低,通
過(guò)粘度計(jì)測(cè)得粘度的數(shù)值,以粘度的降低換算出纖維素底物降解率。
5儀器與設(shè)備
5.1pH計(jì):精度±0.01pH。
5.2恒溫水浴鍋:溫度制范圍在30℃~100℃,精度為0.1℃。
5.3電子天平:精度為0.001g和0.01g。
6試劑與材料
本標(biāo)準(zhǔn)使用的試劑均為分析純,水均為符合GB/T6882中規(guī)定的二級(jí)水。
1
GB/T××××—201×
6.1羧甲基纖維素鈉(CMCNa)溶液
準(zhǔn)確稱取5g羧甲基纖維素鈉,溶解于8090℃的熱水中,完全溶解后,冷卻至室溫定容至100mL。
6.2基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)基溶液
按照GB/T15818要求進(jìn)行配制。
7試驗(yàn)步驟
7.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)
不同類型生物產(chǎn)品降解植物纖維素效果試驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)符合表1要求。
表1生物產(chǎn)品降解植物纖維素效果試驗(yàn)設(shè)計(jì)
產(chǎn)品種類
項(xiàng)目
微生物產(chǎn)品酶產(chǎn)品
1.供試樣品
處理設(shè)計(jì)2.失活樣品
3.空白對(duì)照
重復(fù)次數(shù)不少于3次
反應(yīng)條件按正交試驗(yàn)結(jié)果確定
7.2待測(cè)微生物試驗(yàn)實(shí)施
7.2.1供試樣品處理
固體產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行研磨處理,制成粉末狀供試樣品。
7.2.2失活樣品處理
取供試的固體或液體微生物樣品進(jìn)行121oC,30min殺菌處理。
7.2.3最佳反應(yīng)體系確定
250ml三角瓶中加入100ml基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)基溶液,121℃,20min滅菌,冷卻。設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn),按照供
試樣品的影響因素宜選取反應(yīng)溫度、反應(yīng)轉(zhuǎn)速、底物濃度、反應(yīng)時(shí)間等,確定最佳反應(yīng)體系條件。
7.2.4降解處理試驗(yàn)
取250mL三角瓶9個(gè),空白樣3個(gè),供試樣品瓶3個(gè),失活樣品瓶3個(gè)。分別向9個(gè)瓶中加入100mL基礎(chǔ)
營(yíng)養(yǎng)基溶液,進(jìn)行滅菌處理后備用。按照最佳反應(yīng)體系條件進(jìn)行降解試驗(yàn)。
7.3待測(cè)酶試驗(yàn)實(shí)施
7.3.1供試樣品處理
固體產(chǎn)品應(yīng)用緩沖溶液溶解。
7.3.2失活樣品處理
2
GB/T××××—201×
用緩沖溶液溶解后的固體樣品或液體酶樣品在100oC環(huán)境下進(jìn)行15min去酶活處理。
7.3.3最佳反應(yīng)體系確定
250ml三角瓶中加入100ml緩沖溶液,設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn),影響因素宜選取酶量、底物濃度、pH值、反
應(yīng)時(shí)間等,確定最佳反應(yīng)體系條件。
7.3.4降解處理試驗(yàn)
取250mL三角瓶9個(gè),空白樣品瓶3個(gè),供試樣品瓶3個(gè),失活樣品瓶3個(gè)。分別向9個(gè)瓶中加入
100mL緩沖溶液。按照最佳反應(yīng)體系進(jìn)行降解試驗(yàn)。
7.4濃度測(cè)定
按GB1886.232要求進(jìn)行。
8結(jié)果分析
8.1結(jié)果計(jì)算
微生物產(chǎn)品降解率按照式(1)計(jì)算:
'
'…………..(1)
0?1?0?2?3?3?0?
式中:?=0×100%
D——底物的降解率(%);
0——為反應(yīng)開(kāi)始時(shí)的起始溶液粘度(mPa·s);
1——為供試樣品反應(yīng)后的溶液粘度(mPa·s);
2——為失活樣品反應(yīng)后的溶液粘度(mPa·s);
3——為微生物樣品瓶反應(yīng)后的溶液粘度(mPa·s);
3′——為微生物樣品瓶反應(yīng)前的溶液粘度(mPa·s);
′——為空白樣品反應(yīng)后的溶液粘度(mPa·s)。
酶產(chǎn)品降解率按照式(2)計(jì)算:
'…………..(2)
0?1?0?2?0?
式中:?=0×100%
D——底物的降解率(%);
3
GB/T××××—201×
0——為反應(yīng)開(kāi)始時(shí)的起始溶液粘度(mPa·s);
1——為供試樣品反應(yīng)后的溶液粘度(mPa·s);
2——為失活樣品反應(yīng)后的溶液粘度(mPa·s);
′——為空白樣品反應(yīng)后的溶液粘度(mPa·s)。
以平行樣的平均值為最終的降解率值,計(jì)算結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后兩位。
8.2結(jié)果判定
以降解率的大小評(píng)價(jià)被測(cè)試生物產(chǎn)品的降解功效:降解率大于等于80%,小于100%時(shí),降解效果為
好;降解率大于等于60%,小于80%時(shí),降解效果為良好;降解率大于等于40%,小于60%時(shí),降解效果
為較好;降解率大于等于20%,小于40%時(shí),降解效果為一般;降解率小于20%時(shí),降解
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