高中生物新人教版選擇性必修3微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)（48張）課件

生物第1章發(fā)酵工程第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)01教材自主導(dǎo)讀02核心知識突破03隨堂達(dá)標(biāo)檢測課程標(biāo)準(zhǔn)1.闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提。2．闡明無菌技術(shù)是在操作過程中，保持無菌物品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技術(shù)。3．概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進(jìn)行微生物分離和純化的常用方法。素養(yǎng)要求1.科學(xué)思維：根據(jù)微生物的代謝類型分析培養(yǎng)基的組成成分。2．科學(xué)思維：通過學(xué)習(xí)消毒和滅菌的方法，認(rèn)識二者的異同，認(rèn)同滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提，保持無菌物品與無菌區(qū)域不被其他微生物污染。3．科學(xué)探究：設(shè)計制備一般培養(yǎng)基的實驗步驟，嘗試倒平板的操作方法及進(jìn)行酵母菌的純化方法。一、培養(yǎng)基的配制[提醒]瓊脂在培養(yǎng)基中僅作為凝固劑，不能為微生物提供能量和營養(yǎng)。二、無菌技術(shù)[提醒]

(1)做好消毒和滅菌工作后，應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。(2)為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接下來的許多操作都應(yīng)在超凈工作臺上并在酒精燈火焰附近進(jìn)行。三、微生物的純培養(yǎng)1．純培養(yǎng)(1)純培養(yǎng)物：由__________繁殖所獲得的____________。(2)純培養(yǎng)：獲得__________的過程。單一個體微生物群體純培養(yǎng)物2．酵母菌純培養(yǎng)的操作過程(1)液體培養(yǎng)基含有水，而固體培養(yǎng)基不含水。(

)(2)純化酵母菌可選用馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基。(

)(3)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌。(

)(4)平板冷凝后應(yīng)將平板倒置，可以避免水分過度蒸發(fā)，也可防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。(

)(5)轉(zhuǎn)換劃線角度后需要灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線。(

)×√×√√知識點(diǎn)一培養(yǎng)基的配制1．配制原則2．培養(yǎng)基的成分及功能營養(yǎng)要素來源功能碳源無機(jī)碳源CO2、NaHCO3等含碳無機(jī)物①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；②有機(jī)碳既是碳源又是能源有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油等營養(yǎng)要素來源功能氮源無機(jī)氮源N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等將無機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物生長因子維生素、氨基酸、堿基①酶和核酸的組成成分；②參與代謝過程中的酶促反應(yīng)營養(yǎng)要素來源功能水外界攝入①良好的溶劑；②維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定無機(jī)鹽無機(jī)物為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素3.培養(yǎng)基的種類[溫馨提示]

(1)擴(kuò)大培養(yǎng)獲得大量菌種時常用液體培養(yǎng)基。(2)微生物在瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，可以形成肉眼可見的菌落。1．(2021·山西大同高二期中)下列有關(guān)微生物培養(yǎng)基種類及配制原則的敘述，正確的是(

)A．任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽及生長因子B．液體培養(yǎng)基可用于觀察菌落，固體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)C．微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受pH、O2、滲透壓等的影響D．培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)到中性或弱堿性√解析：培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，有的微生物還需要生長因子；一般固體培養(yǎng)基可用于觀察菌落，液體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)；微生物在培養(yǎng)過程中除受營養(yǎng)因素影響外，還受pH、O2、滲透壓等的影響；培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性。2．(2021·山東青島高二檢測)下表是某微生物培養(yǎng)基成分表，請據(jù)此回答下列問題：編號成分含量①粉狀硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100mL(1)上表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型是____________________________。(2)若除去成分②，加入葡萄糖，該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)______________。(3)表中營養(yǎng)成分共有________類。(4)不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進(jìn)行的是____________________。(5)若上表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分是________________。解析：(1)由表可知，該培養(yǎng)基中沒有碳源，說明培養(yǎng)的微生物是從空氣中獲取碳源的，因此培養(yǎng)的微生物是自養(yǎng)微生物。(2)該培養(yǎng)基若加入葡萄糖，培養(yǎng)基中就有了碳源，但除去成分②，培養(yǎng)基中就沒有了氮源，該培養(yǎng)基就只能用于培養(yǎng)固氮微生物。(3)表中的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機(jī)鹽、無機(jī)氮源三類，缺乏碳源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)。(4)微生物生長需要適宜的pH，所以培養(yǎng)基分裝前需要調(diào)節(jié)pH。(5)該培養(yǎng)基中無凝固劑，為液體培養(yǎng)基。菌種的鑒定通常利用固體培養(yǎng)基以獲得單細(xì)胞菌落，因此需要加入凝固劑，如瓊脂，將液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)變成固體培養(yǎng)基。答案：(1)自養(yǎng)微生物(2)固氮微生物(3)三(4)調(diào)節(jié)pH

(5)瓊脂(或凝固劑)

發(fā)展素養(yǎng)

長句特訓(xùn)

與高考接軌(科學(xué)思維)下表是某培養(yǎng)基的配方，分析并回答下列問題：材料牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水用量5g10g5g20g1000mL(1)根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，理由是___________________________________________________________________________________________________________________________。答案：固體該培養(yǎng)基的配方中含有凝固劑瓊脂(2)該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類型是________________，理由是___________________________________________________________________________________________________________________________。答案：異養(yǎng)微生物該微生物的碳源和氮源是有機(jī)物幾種微生物的營養(yǎng)和能量來源知識點(diǎn)二無菌技術(shù)幾種常用滅菌和消毒方法的比較[溫馨提示]

進(jìn)行無菌操作時應(yīng)注意(1)考慮效果：滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒的方法，而不能采用滅菌的方法。1．(2021·湖南株洲高二期末)下列關(guān)于滅菌和消毒的理解，不正確的是(

)A．滅菌是指殺滅物體內(nèi)外一切微生物，包括芽孢和孢子B．實驗者的雙手用酒精消毒C．接種環(huán)用灼燒滅菌法滅菌D．常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌和紫外線照射等√解析：滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正確；實驗者的雙手用酒精消毒，B正確；金屬接種工具常用灼燒滅菌法滅菌，C正確；微生物的培養(yǎng)過程中常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌等，紫外線照射屬于消毒方法，D錯誤。2．(2021·湖北襄陽四校聯(lián)考)微生物培養(yǎng)過程中，要重視無菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實驗中的許多方面也要進(jìn)行無菌操作，防止雜菌污染，請分析下列操作，正確的是(

)A．煮沸消毒法中100℃煮沸5～6min可以殺死全部微生物的細(xì)胞和芽孢、孢子B．將接種環(huán)直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼熱，可以迅速徹底地滅菌C．加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌D．家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌√解析：煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢，而滅菌能殺滅環(huán)境中一切微生物，包括孢子和芽孢，A錯誤；指示劑和染料可能混有微生物，因此加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料也需要滅菌，C錯誤；家庭制作葡萄酒時，要將容器進(jìn)行滅菌或消毒，但是葡萄不能滅菌，因為發(fā)酵用的酵母菌來自葡萄果皮表面，D錯誤。

發(fā)展素養(yǎng)

長句特訓(xùn)

與高考接軌1．(科學(xué)探究)無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，其目的還有_________________________________________________________________________________________________________。答案：能有效避免污染環(huán)境以及操作者自身被微生物感染2．(社會責(zé)任)“無菌操作”與人們的生活休戚相關(guān)，無時無處不在。在日常生活、生產(chǎn)實踐、自身健康防護(hù)中，分別進(jìn)行“無菌操作”的例子有_________________________________________________________________________________________________________________________。答案：在日常生活、生產(chǎn)實踐、自身健康防護(hù)中“無菌操作”的例子分別有(1)被褥、鞋襪要常曬；肉制品儲存時用鹽腌制等；(2)家畜閹割后，要在其傷口處涂抹一些酒精或白酒；初冬楊樹樹干涂刷生石灰水等；(3)打針時，注射部位要用酒精棉球擦拭；在皮膚傷口處涂抹一些碘酒知識點(diǎn)三酵母菌的純培養(yǎng)1．倒平板操作[溫馨提示]

(1)培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃左右時才能倒平板，原因是瓊脂在44℃以下凝固。(2)將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開。(3)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避免雜菌污染。(4)平板凝固后要倒置，防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。(5)若倒平板時，培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間的部位，這個平板應(yīng)丟棄。2．平板劃線法操作的注意事項(1)第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線操作結(jié)束后仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的如下表所示。項目第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束后灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線的菌種來自上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免菌種污染環(huán)境和感染操作者(2)灼燒接種環(huán)并待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。(3)劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。(4)劃線時用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。[溫馨提示]

(1)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。(2)將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2天，若無菌落生長，說明培養(yǎng)基的配制成功；否則制備失敗，需重新配制。1．下列有關(guān)平板劃線法的操作，錯誤的是(

)A．在操作的每一步以及每次劃線前都要灼燒接種環(huán)B．待接種環(huán)冷卻后再伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行D．劃線時要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連√解析：在操作的每一步以及每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，A正確；待接種環(huán)冷卻后，才可以伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液，否則會燒傷或燒死微生物，B正確；蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行，防止空氣中雜菌的污染，C正確；劃線時要避免最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連，D錯誤。2．下圖是利用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟。下列有關(guān)敘述正確的是(

)A．步驟①中，倒好平板后應(yīng)立即將其倒置，防止水蒸氣落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)物B．步驟②接種環(huán)和試管口應(yīng)先在火焰上灼燒，接種環(huán)冷卻后再放入試管中蘸取菌液

C．步驟③沿多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后可根據(jù)出現(xiàn)的單個菌落計數(shù)

D．步驟④是將培養(yǎng)皿放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，一段時間后所得到的都是X細(xì)菌的菌落√

發(fā)展素養(yǎng)

長句特訓(xùn)

與高考接軌1．(科學(xué)探究)采用平板劃線法接種菌種時，可防止雜菌污染的操作有_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案：①接種前將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒。②用接種環(huán)蘸取菌液前后，要將試管口通過火焰。③劃線時將