化礦金專業(yè)化學(xué)檢測(cè)方法驗(yàn)證程序-檢驗(yàn)檢疫標(biāo)準(zhǔn)管理信息系統(tǒng)

化學(xué)檢測(cè)方法驗(yàn)證程序（試行）

第一章總則

1.1目的

分析方法驗(yàn)證是確證該方法適用于某一分析目標(biāo)的過程，為規(guī)范

分析方法的驗(yàn)證流程，提高本專業(yè)檢測(cè)類方法的科學(xué)性、嚴(yán)謹(jǐn)性和適

用性，特制定本程序。

1.2范圍

本程序適用于化學(xué)檢測(cè)類標(biāo)準(zhǔn)建立過程中方法的驗(yàn)證，無論該標(biāo)

準(zhǔn)是新制定標(biāo)準(zhǔn)、由現(xiàn)有分析方法轉(zhuǎn)化的標(biāo)準(zhǔn)或由原標(biāo)準(zhǔn)更新后的標(biāo)

準(zhǔn)。此外，實(shí)驗(yàn)室采用非標(biāo)準(zhǔn)方法及自主研究開發(fā)新方法時(shí)，也可參

照本程序用以判斷這些方法的適用性。

若所制定的標(biāo)準(zhǔn)或方法為等同采用國(guó)際先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)，則可采取僅進(jìn)

行第二、三章中本實(shí)驗(yàn)室及獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證的快速驗(yàn)證程序；若所制

定的標(biāo)準(zhǔn)或方法為修改采用國(guó)際先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)其關(guān)鍵性技術(shù)進(jìn)行修

改，則需進(jìn)行完整的驗(yàn)證流程。無論在何種情況下，都鼓勵(lì)方法開發(fā)

方進(jìn)行完整的驗(yàn)證流程。

1.3組織機(jī)構(gòu)

化礦金專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（以下簡(jiǎn)稱“委員會(huì)”）負(fù)責(zé)本專業(yè)

化學(xué)檢測(cè)方法驗(yàn)證的組織、審核等管理工作。委員會(huì)通過秘書處承擔(dān)

具體職責(zé)，包括審核驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)，建立并定期更新維護(hù)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

室數(shù)據(jù)庫(kù)，指定并組織驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室開展驗(yàn)證，組織專家進(jìn)行驗(yàn)證材料

的審核及驗(yàn)證數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)等。

1.4術(shù)語與定義

1.4.1本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證(In-housevalidation)

方法開發(fā)方通過本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)方法特性指標(biāo)的測(cè)試，初步判斷方

法的適用性。

1.4.2獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證(Independentlaboratoryvalidation)

獨(dú)立于方法開發(fā)方的實(shí)驗(yàn)室，通過重復(fù)測(cè)試方法的性能指標(biāo)，以

審核方法特性指標(biāo)是否能夠滿足預(yù)期的分析目標(biāo)。

1.4.3協(xié)同實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證(Collaborativestudyvalidation)

協(xié)同實(shí)驗(yàn)室通過協(xié)同實(shí)驗(yàn)以獲得測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確

度與精密度卜

1.5驗(yàn)證流程

開展驗(yàn)證工作的具體步驟如下，驗(yàn)證流程圖參見附錄A。

1.5.1本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證

(1)方法開發(fā)方完成方法草案、選擇合適的驗(yàn)證參數(shù)(即方法的性

能指標(biāo)\并設(shè)計(jì)驗(yàn)證方案。驗(yàn)證方案應(yīng)包括獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證方案和

協(xié)同實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證方案。

(2)方法開發(fā)方根據(jù)所選驗(yàn)證參數(shù)完成本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證，并向秘書

處提交驗(yàn)證材料。驗(yàn)證材料應(yīng)包括方法草案、驗(yàn)證方案、本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)

驗(yàn)證報(bào)告、獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證樣品和協(xié)同實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證樣品。

(3)秘書處組織專家審核本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證材料的完整性與符合性。

1.5.2獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證

(4)本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證材料審核通過后，秘書處組織1-2家獨(dú)立于開

發(fā)方的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室，通過重復(fù)測(cè)試驗(yàn)證參數(shù)(即方法的性能指標(biāo))進(jìn)

行獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證。

(5)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室完成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證后，提交結(jié)果至秘書處。

(6)秘書處組織專家審核獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證結(jié)果，決定是否進(jìn)行協(xié)同

實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，并將結(jié)果反饋給方法開發(fā)方。

1.5.3協(xié)同實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

(7)秘書處篩選、組織適當(dāng)?shù)尿?yàn)證實(shí)驗(yàn)室參加協(xié)同實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，并回

收驗(yàn)證結(jié)果；

(8)將驗(yàn)證結(jié)果提交給指定的統(tǒng)計(jì)專家進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析處理；

(9)將統(tǒng)計(jì)結(jié)果反饋給方法開發(fā)方。

1.6驗(yàn)證結(jié)果的應(yīng)用

驗(yàn)證報(bào)告將作為標(biāo)準(zhǔn)審定時(shí)的重要參考資料。秘書處組織專家形

成專家組，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證的結(jié)果，對(duì)方法能否實(shí)現(xiàn)預(yù)期目標(biāo)進(jìn)行評(píng)

估，并形成鑒定結(jié)論。若方法不能滿足預(yù)期目標(biāo)的要求，應(yīng)將此意見

通知開發(fā)方，由其對(duì)方法進(jìn)行必要的修改。

第二章分析方法的本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證程序

2.1驗(yàn)證方案

2.1.1方法文本

驗(yàn)證所考察的分析方法應(yīng)是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的方法，這個(gè)方法應(yīng)是穩(wěn)

健的，即試驗(yàn)過程中的微小變動(dòng)不會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生不可預(yù)估的大

變化。穩(wěn)健性試驗(yàn)參見附錄B。

此外，所建立分析方法的文件應(yīng)該是明確和完整的。所有涉及該

程序環(huán)境的重要操作，包括試劑和器具、設(shè)備的初始檢查、測(cè)試樣品

的準(zhǔn)備等都應(yīng)包括在分析方法中。分析方法中還應(yīng)規(guī)定校正程序和校

正頻率。

2.1.2方法的預(yù)期用途

方法開發(fā)方應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況描述方法的預(yù)期用途。預(yù)期用途的描

述應(yīng)當(dāng)包括制定方法的目的，分析物的形態(tài)、存在形式及其分布的介

質(zhì)、濃度，現(xiàn)有法規(guī)及動(dòng)態(tài)等相關(guān)信息；必要時(shí)，還應(yīng)包括其應(yīng)用的

時(shí)域、地域、行業(yè)等信息。

2.1.3驗(yàn)證參數(shù)

方法開放方應(yīng)根據(jù)所開發(fā)方法的預(yù)期用途（2.1.2）選擇合適的

驗(yàn)證參數(shù)，并形成實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證方案。典型的驗(yàn)證參數(shù)包括方法的選

擇性、檢出限、定量限、線性、范圍、靈敏度、穩(wěn)健性、正確度、精

密度。方法的預(yù)期用途決定了對(duì)方法性能的具體要求，驗(yàn)證參數(shù)的選

擇應(yīng)根據(jù)方法的預(yù)期用途加以確定。對(duì)于不同類型的化學(xué)檢測(cè)方法，

典型參數(shù)的選擇見表1。

表1:典型驗(yàn)證參數(shù)的選擇

適用性/

正確度/選擇性/線性/靈敏

檢測(cè)限定量限精密度穩(wěn)健性/

回收率專屬性度/范圍

穩(wěn)定性

定性S+---++-

方法C+---++-

走里S++-++++

方法C+++++++

備注：二篩選方法(Screeningmethods)；"C"=確證方法(Confirmatorymethods)

“+”=必選參數(shù);

2.2本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證(in-housevalidation)

方法開發(fā)方應(yīng)按照驗(yàn)證方案（2.1）首先完成本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的驗(yàn)證，

初步判斷方法的適用性，各參數(shù)的具體驗(yàn)證程序參見附錄C。在本實(shí)

驗(yàn)室內(nèi)的驗(yàn)證過程中，若某一參數(shù)的結(jié)果表明分析方法不能滿足檢測(cè)

目標(biāo)的特定要求，應(yīng)對(duì)該方法進(jìn)行必要的修改并重新進(jìn)行驗(yàn)證，直至

能夠證明其滿足檢測(cè)要求。

2.3本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證材料的審核

在方法開發(fā)方完成本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證后，提交至委員會(huì)秘書處的驗(yàn)

證材料中應(yīng)包括：a）方法草案、b）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證方案、c）本實(shí)驗(yàn)

室內(nèi)驗(yàn)證報(bào)告、d）實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證方案（包括作業(yè)指導(dǎo)書卜秘書處組

織專家對(duì)方法開發(fā)方提交的材料進(jìn)行完整性與符合性評(píng)估。若提交的

材料不完整，應(yīng)要求其補(bǔ)足材料；若材料已完整，驗(yàn)證方案合理，且

現(xiàn)有的驗(yàn)證結(jié)果能夠滿足預(yù)期目標(biāo)的要求，則進(jìn)行分析方法的獨(dú)立實(shí)

驗(yàn)室驗(yàn)證程序。

第三章分析方法的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證程序

3.1獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證（Independentlaboratoryvalidation）

秘書處組織1-2家驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室按照方法開發(fā)方設(shè)計(jì)的驗(yàn)證方案進(jìn)

行獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室通過重復(fù)測(cè)試實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證參數(shù)（方

法的性能指標(biāo)），以審核方法性能指標(biāo)是否能夠滿足預(yù)期的分析目標(biāo)。

3.2獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證數(shù)據(jù)的審核

秘書處組織專家審核驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證結(jié)果，若結(jié)果

無法滿足方法預(yù)期的分析目標(biāo)，則應(yīng)將結(jié)果反饋給方法開發(fā)方，并要

求其對(duì)方法進(jìn)行必要的審查并重新進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證流程；若結(jié)果

能滿足方法預(yù)期的分析目標(biāo)，則完成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證流程。

第四章化學(xué)分析方法的實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證

4.1一般要求

4.1.1驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室的選擇

a）驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室數(shù),p:參加協(xié)同實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室個(gè)數(shù)一般取8?15,

要求獲得至少8個(gè)有效數(shù)據(jù)報(bào)告。只有在極個(gè)別的情況下，如參加驗(yàn)

證試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室確實(shí)不足，或者測(cè)試非常昂貴，或者樣品本身確實(shí)難

以得到等原因，經(jīng)專業(yè)技術(shù)委員會(huì)專家商定裁決后，可以采用較少實(shí)

驗(yàn)室（不少于5個(gè)有效數(shù)據(jù)報(bào)告）進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。

b）驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室選擇要具代表性和公信力，參加的實(shí)驗(yàn)室不宜僅

由那些在對(duì)測(cè)量方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化過程中已獲得專門經(jīng)驗(yàn)的特別“標(biāo)

準(zhǔn)”的實(shí)驗(yàn)室組成。秘書處采用從驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)庫(kù)中隨機(jī)抽取的方

式選出協(xié)同實(shí)驗(yàn)參與者，根據(jù)驗(yàn)證計(jì)劃開展協(xié)同實(shí)驗(yàn)。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室的

要求見附錄D。

4.1.2物料的準(zhǔn)備

a）方法開發(fā)人應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證用樣品的準(zhǔn)備，對(duì)樣品進(jìn)行勻質(zhì)化，

并對(duì)其均勻性和穩(wěn)定性進(jìn)行測(cè)試，均勻性與穩(wěn)定性驗(yàn)證參見附錄E。

測(cè)試完成后，將測(cè)試結(jié)果、驗(yàn)證樣品統(tǒng)一提交到秘書處。

b）物料水平,q:作為一般規(guī)則，使用5種不同的物料通常就能

夠滿足要求。此外，實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證中物料的類型和數(shù)目還取決于獲取、

加工及分發(fā)樣品過程的難度和費(fèi)用，取決于進(jìn)行測(cè)試所需要的時(shí)間和

費(fèi)用等。一個(gè)實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證試驗(yàn)應(yīng)最少選擇3種物料代表不同的測(cè)試

水平。物料的選擇既應(yīng)確保其能代表測(cè)量方法在正常使用中的那些物

料，又應(yīng)滿足方法的預(yù)期用途。如為評(píng)估材料與技術(shù)法規(guī)的符合性而

開發(fā)的化學(xué)檢測(cè)方法，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證時(shí)，物料中至少應(yīng)包含一

種目標(biāo)分析物濃度（含量）接近于法規(guī)限量的樣品。

c）物料數(shù)量：在決定試驗(yàn)所需的物料數(shù)量時(shí)，應(yīng)考慮到在獲得

某些測(cè)試結(jié)果時(shí)會(huì)出現(xiàn)偶然的操作過失，從而需用到額外的物料。需

準(zhǔn)備的物料數(shù)量應(yīng)當(dāng)足以滿足測(cè)試之用，并且允許適當(dāng)?shù)娜哂?。但是?/p>

也不能提供過多的物料樣品，以防止有實(shí)驗(yàn)室出于某種原因，過多地

進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并且從中“挑選”報(bào)告某些檢測(cè)結(jié)果，從而人為地提高了該

實(shí)驗(yàn)室的精密度。一般以所需試驗(yàn)的物料量的2-5倍為宜。

d）正確度驗(yàn)證過程中所用物料的接受參照值應(yīng)可作為約定真

值。標(biāo)準(zhǔn)物料可以是:1）有證的標(biāo)準(zhǔn)物料；2）按已知特性試驗(yàn)?zāi)康?/p>

生產(chǎn)的物料；3）其特性根據(jù)另一測(cè)量方法測(cè)量，已知偏倚可以忽略

不計(jì)的物料。評(píng)估一個(gè)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法的偏倚，在目前的科學(xué)水平下，

大多采用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品（CRM）來進(jìn)行。只有在實(shí)在無法獲得有證

標(biāo)準(zhǔn)樣品或控制樣品的情況下，才能采用在一個(gè)空白樣品基質(zhì)中添加

已知濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的辦法。

4.2實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證的實(shí)施

4.2.1秘書處與選擇的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行聯(lián)系，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)后，根據(jù)

實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證方案將驗(yàn)證樣品和作業(yè)指導(dǎo)書分發(fā)給各參與實(shí)驗(yàn)室。由

各實(shí)驗(yàn)室在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成協(xié)同實(shí)驗(yàn)。

4.2.2每個(gè)實(shí)驗(yàn)室在每個(gè)測(cè)試水平需要進(jìn)行的測(cè)試次數(shù)，n:一般情

況下每個(gè)實(shí)驗(yàn)室在每個(gè)測(cè)試水平進(jìn)行測(cè)試的次數(shù)為3次。若認(rèn)為存在

可疑測(cè)試結(jié)果的危險(xiǎn)性較小時(shí)，一般可取n=2。

4.2.3精密度的實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證

化學(xué)檢測(cè)方法的精密度確認(rèn)應(yīng)根據(jù)GB/T6379.2-2004《測(cè)量方

法與結(jié)果的準(zhǔn)確度（正確度與精密度）第2部分:確定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量方法重

復(fù)性與再現(xiàn)性的基本方法》或本程序附錄F進(jìn)行。必要時(shí)，可通過

GB/T6379.5-2006《測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度（正確度與精密度）第

5部分：確定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量方法精密度的可替代方法》進(jìn)行確認(rèn)。

4.2.4正確度的實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證

正確度指由大量測(cè)試結(jié)果得到的平均值與參照值間的一致程度，

正確度的度量通常用術(shù)語偏倚表示。正確度的驗(yàn)證應(yīng)根據(jù)GB/T

6379.4-2006《測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度（正確度與精密度）第4

部分：確定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量方法正確度的基本方法》或本程序附錄G進(jìn)行。

4.3驗(yàn)證數(shù)據(jù)的提交與統(tǒng)計(jì)分析

4.3.1參加實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)作業(yè)指導(dǎo)書的要求在規(guī)定

期限內(nèi)將測(cè)試數(shù)據(jù)按照規(guī)定格式（參見附錄H）提交到秘書處。

4.3.2秘書處將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)發(fā)給指定的統(tǒng)計(jì)專家，由其根據(jù)附錄F、G進(jìn)

行精密度（和正確度）的統(tǒng)計(jì)分析。完成統(tǒng)計(jì)分析后，將統(tǒng)計(jì)分析的

結(jié)果提交到秘書處。

4.3.3秘書處對(duì)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果進(jìn)行必要的審查并反饋給方法開發(fā)方。

附錄A

（資料性附錄）

化學(xué)分析方法驗(yàn)證流程圖

方法開發(fā)方

設(shè)計(jì)驗(yàn)證方案

方法開發(fā)方

NO

Yes秘書處

組織實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)

證，并組織統(tǒng)計(jì)專

家統(tǒng)計(jì)驗(yàn)證結(jié)果。

圖A.1化學(xué)分析方法驗(yàn)證流程圖

附錄B

（資料性附錄）

化學(xué)分析方法的穩(wěn)健性（耐變性）試驗(yàn)

B.1通則

B.1.1一個(gè)好的分析方法應(yīng)該不受環(huán)境等因素的變化而變化，即對(duì)于

溫度、濕度、氣壓等環(huán)境因素的變化，以及對(duì)于加入試劑量、反應(yīng)時(shí)

間等其他因素呈現(xiàn)不靈敏性。穩(wěn)健性（耐變性）試驗(yàn)是考察環(huán)境或其

他條件變量對(duì)分析方法影響的一項(xiàng)檢驗(yàn)程序，進(jìn)行穩(wěn)健性試驗(yàn)的目的

在于鑒別這些必須仔細(xì)控制的實(shí)驗(yàn)條件，并在試驗(yàn)方法文本中予以明

確的書面說明。例如，實(shí)驗(yàn)室溫度或試驗(yàn)中使用的某一加熱裝置的溫

度，這些條件在某些情況下具有不可忽略的影響，而在另一些情況下

則影響很小，進(jìn)行穩(wěn)健性試驗(yàn)可引入溫度自由變量以建立溫度控制允

許范圍。

B.1.2本附錄中介紹的是數(shù)理統(tǒng)計(jì)學(xué)家尤登設(shè)計(jì)的耐變性試驗(yàn)

（Youden'sRuggednessTest）,無需繁瑣的方差分析，只需一般的

數(shù)學(xué)計(jì)算即能對(duì)因素的影響作出判斷，同時(shí)它還具有試驗(yàn)次數(shù)少的優(yōu)

點(diǎn)。

B.2方法的穩(wěn)健性試驗(yàn)

B.2.1方法的穩(wěn)健性是通過慎重地對(duì)方法引入某些小的改變并檢查

其影響結(jié)果來測(cè)試的。方法穩(wěn)健性試驗(yàn)的第一步，確定需要評(píng)價(jià)的7

個(gè)變量。這些變量可以是：試樣量、干燥溫度、干燥時(shí)間、試劑濃度、

攪拌速度、濾紙類別等等。每個(gè)變量取兩個(gè)不同的水平，如試劑濃度

選取推薦濃度的±10%,加熱時(shí)間選取推薦時(shí)間的±10%,或者取兩

種不同類型的濾紙等。兩個(gè)水平應(yīng)具有方法常規(guī)使用的類型和大小的

代表性。如表B.1所示，列出環(huán)境等方面的七個(gè)因素A.........G,每

個(gè)因素2個(gè)水平，即A、a、B、b、C、c、D、d、E、e、F、f、G、

g,例如，A表示1.2g試樣，a表示0.8g試樣。然后按照表中8種

組合方式可得8個(gè)測(cè)定值s,t,u,v,w,x,y,z,即做8次測(cè)定

可求出7個(gè)因素的影響程度。如若只需5個(gè)因素，則刪去表B.1中F

行和G行。

表B.1穩(wěn)健性試驗(yàn)方法

七因素值實(shí)驗(yàn)次數(shù)

(二種水平)12345678

A或aAAAAaaaa

B或bBBbbBBbb

C或cCcCcCcCc

D或dDDddddDD

E或eEeEeeEeE

F或fFffFFffF

G或gGggGgGGg

測(cè)定值StuVwXyz

B.2.2將8個(gè)測(cè)定值按因素字母的大寫和小寫分成兩組，計(jì)算各個(gè)因

素的影響。如第一個(gè)因素從A到a變化的影響可由1/4(s+t+u+v)

和1/4(w+x+y+z)之間的差值給出。應(yīng)當(dāng)指出的是所有其他因素在上

述兩組的每一組中兩個(gè)水平都出現(xiàn)了兩次，這樣由B到G所帶來的

影響都被由b到g的影響相抵消了。以此類推，按照下列步驟可求得

環(huán)境因素變化而引起影響的大小：

a)選擇s至z中的4個(gè)測(cè)定值為一組平均值減去剩余4個(gè)測(cè)定

值的另一組平均值，如：

1/4(s+t+u+v)-1/4(w+x+y+z)=A-a=d1

1/4(s+t+w+x)-1/4(u+v+y+z)=B-b=d2

1/4(s+u+w+y)-1/4(t+v+x+z)=C-c=d3

1/4(s+t+y+z)-1/4(u+v+w+x)=D-d=d4

1/4(s+u+x+z)-1/4(t+v+w+y)=E-e=d5

1/4(s+v+w+z)-1/4(t+u+x+y)=F-f=d6

1/4(s+v+x+y)-1/4(t+u+w+z)=G-g=d7

b)通過將差值di與該分析方法在相同條件下重復(fù)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)

偏差相比較，可判斷因素的影響是否顯著。如果差值大于2倍標(biāo)準(zhǔn)偏

差，則該因素的影響是顯著的，對(duì)影響顯著的因素，在最后描述分析

方法時(shí)，應(yīng)當(dāng)特別注意這些變量，并指出它們必須非常小心地控制，

在協(xié)作實(shí)驗(yàn)室的方案中應(yīng)作出嚴(yán)格的規(guī)定。

c)用下式計(jì)算環(huán)境等因素引起的標(biāo)準(zhǔn)偏差：

S是該方法對(duì)環(huán)境等因素的耐變性的綜合表達(dá)，求得的s越小越

好，說明環(huán)境因素的變化對(duì)方法的影響越小。

附錄c

（資料性附錄）

化學(xué)分析方法獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證指南

C.1選擇性（Selectivity）

C.1.1驗(yàn)證要求

選擇性系指在雜質(zhì)、輔料等其他成分可能存在的情況下，采用的

分析方法能夠正確鑒定、檢出被分析物質(zhì)的特性。為一種分析物或一

組分析物選定一種分析方法時(shí)，這種方法應(yīng)對(duì)目標(biāo)分析物具有良好的

選擇性響應(yīng)。成分鑒別類、雜質(zhì)檢測(cè)類、主成分含量測(cè)定類等方法建

立過程中均應(yīng)考察其選擇性。應(yīng)當(dāng)用各種樣品來研究方法的選擇性,

所用的樣品種類從單純的目標(biāo)分析物到具有復(fù)雜基體的混合物。在每

種情況下，都應(yīng)當(dāng)確定被研究的分析物的分離情況，并充分說明可疑

干擾的影響。如采用的方法選擇性不能滿足要求，應(yīng)采用多個(gè)方法予

以補(bǔ)充，方法選擇性的任何限制都應(yīng)在方法中有文件化的規(guī)定。

C.1.2驗(yàn)證方法

C.1.2.1成分鑒別類方法的選擇性

鑒別法應(yīng)能區(qū)分可能存在的結(jié)構(gòu)相近的化合物。區(qū)分過程可通過

測(cè)試含有分析物的樣品獲得陽性結(jié)果、測(cè)試不含分析物的樣品獲得陰

性結(jié)果來確證（如與一已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相比對(duì)方此外，鑒別試驗(yàn)用于

測(cè)試與被分析物結(jié)構(gòu)相似或相近物質(zhì)不應(yīng)獲得陽性結(jié)果。選擇潛在干

擾物應(yīng)基于考慮到可能存在的干擾物質(zhì)的合理科學(xué)判斷。

C.1.2.2含■測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定方法的選擇性

作為純度、雜質(zhì)含量檢查，所采用的分析方法應(yīng)確?？蓹z出被分

析物中雜質(zhì)的含量，如有關(guān)物質(zhì)、重金屬等，因此要求分析方法有一

定的選擇性。在雜質(zhì)可獲得的情況下，可向供試樣品中加入一定量的

雜質(zhì)，證明雜質(zhì)與共存物質(zhì)能得到分離和檢出，并具有適當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確度

與精密度。在雜質(zhì)不能獲得的情況下，選擇性可通過與另一種已經(jīng)驗(yàn)

證的但分離或檢測(cè)原理不同、或具較強(qiáng)選擇性的方法進(jìn)行結(jié)果比較來

確定。

例如，對(duì)于色譜分析，應(yīng)給出代表性色譜圖用以說明方法的選擇

性，且應(yīng)在圖中標(biāo)識(shí)出單個(gè)組分。應(yīng)在一合適的濃度水平下考察色譜

的典型分離，可用稀釋至相近濃度的兩個(gè)化合物的分離度來證明方法

選擇性。必要時(shí)進(jìn)行色譜峰純度檢查，證明含量測(cè)定成分的色譜峰中

不包含其他成分。若含量測(cè)定方法選擇性不能滿足要求，則需用其他

輔助分析方法證明選擇性。其他分離方法也應(yīng)做相似的考慮。

C.2檢出限(LimitofDetection)

C.2.1驗(yàn)證要求

檢出限指試樣中的被分析物能夠被檢測(cè)到的最低量，但不一定要

準(zhǔn)確定量。該驗(yàn)證指標(biāo)的意義在于考察方法是否具備靈敏的檢測(cè)能

力。如對(duì)雜質(zhì)限量試驗(yàn)，需證明方法具有足夠低的檢出限，以保證檢

出需控制的雜質(zhì)。方法檢出限的確定方法可有以下幾種，根據(jù)不同的

檢測(cè)方法選擇合適的確定方法。然而無論用何種方法，均應(yīng)用一定數(shù)

量的濃度為近于或等于檢出限試樣進(jìn)行分析，以可靠地確證檢出限。

建議在給出檢出限時(shí)說明引用的是哪一種方法。

C.2.2驗(yàn)證方法

C.2.2.1直觀法(BasedonVisualEvaluation)

直觀評(píng)價(jià)可以用于非儀器分析方法，也可用于儀器分析方法。檢

出限的測(cè)定是通過對(duì)一系列已知濃度被測(cè)物的試樣進(jìn)行分析，并以能

準(zhǔn)確、可靠檢測(cè)被測(cè)物的最小量或最低濃度來建立。

C.2.2.2信噪比法(BasedonSignal-to-Noise)

用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度試樣測(cè)出的信

號(hào)與空白樣品噪聲信號(hào)進(jìn)行比較，計(jì)算可檢出的最低濃度或量。一般

以信噪比為3:1或2:1時(shí)相應(yīng)的濃度或注入儀器的量作為可接受的

檢出限估計(jì)值。本程序推薦使用3倍信噪比法獲得方法的檢出限。

C.2.2.3基于響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差和斜率的檢出限確定方法(Basedon

theStandardDeviationoftheResponseandtheSlope)

檢出限(LOD)可表示為：

LOD=^^

m

其中，。為響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差；

m為校正曲線的斜率。

m可通過分析物的校準(zhǔn)曲線估計(jì)得到。。的估計(jì)值可通過多種方

法得到，例如:

a)基于空白的標(biāo)準(zhǔn)偏差：分析一些空白樣品(N6個(gè))并計(jì)算空

白樣品響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

b）基于校準(zhǔn)曲線：回歸曲線的剩余標(biāo)準(zhǔn)差或回歸曲線y軸截距

的標(biāo)準(zhǔn)偏差可作為標(biāo)準(zhǔn)偏差。的估計(jì)值。

C.2.2.4其他方法

a）美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局規(guī)定樣品檢出限為三倍空白標(biāo)準(zhǔn)偏差，即3o

空（或3s空卜

b）對(duì)某些分光光度法，以扣除空白值后的與0.01吸光度相對(duì)應(yīng)

的濃度值為檢出限。

c）氣相色譜分析的最小檢測(cè)量系指檢測(cè)器恰能產(chǎn)生與噪聲相區(qū)

別的響應(yīng)信號(hào)時(shí)所需進(jìn)入色譜柱的被測(cè)物質(zhì)的最小量，一般為恰能辨

別的響應(yīng)信號(hào)。最小檢測(cè)濃度系指最小檢測(cè)量單位體積所對(duì)應(yīng)的濃

度。

d）某些離子選擇電極法規(guī)定：當(dāng)校準(zhǔn)曲線的直線部分外延的延

長(zhǎng)線與通過空白電位且平行于濃度軸的直線相交時(shí)，其交點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的

濃度值即為該離子選擇電極法的檢出限。

C.3定■限（LimitofQuantitation）

C.3.1驗(yàn)證要求

定量限指試樣中的被分析物能夠被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)

果應(yīng)具有一定的準(zhǔn)確度和精密度。定量限體現(xiàn)了分析方法是否具備靈

敏的定量檢測(cè)能力。雜質(zhì)定量試驗(yàn)，需考察方法的定量限，以保證含

量很少的雜質(zhì)能夠被準(zhǔn)確測(cè)出。方法檢出限的確定方法有許多種，根

據(jù)不同的檢測(cè)方法選擇合適的確定方法。然而無論用何種方法，均應(yīng)

用一定數(shù)量濃度為近于或等于定量限的試樣進(jìn)行分析，以可靠地確定

定量限。建議在給出定量限時(shí)說明引用的是哪一種方法。

C.3.2驗(yàn)證方法

C32.1直觀法(BasedonVisualEvaluation)

直觀法可以用于非儀器分析方法，也可用于儀器分析方法。定量

限一般通過對(duì)一系列含有已知濃度被測(cè)物的試樣進(jìn)行分析，在準(zhǔn)確度

和精密度都符合要求的情況下，來確定被測(cè)物能被定量的最小量。

C.322信噪比法(BasedonSignal-to-Noise)

用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度試樣測(cè)出的信

號(hào)與空白樣品噪聲信號(hào)進(jìn)行比較，計(jì)算出能可靠定量的最低濃度或

量。一般信噪比為10：1o

C32.3基于響應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)偏差和斜率的定量限確定方法(Basedonthe

StandardDeviationoftheResponseandtheSlope)

定量限(LOQ)可表示為：

LOQ=-

m

其中，。為響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差；

m為校正曲線的斜率。

m可通過分析物的校準(zhǔn)曲線估計(jì)得到。。的估計(jì)值可通過多種方

法得至！I,例如：

a)基于空白的標(biāo)準(zhǔn)偏差：分析一些空白樣品(N6個(gè))并計(jì)算空

白樣品響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

b）基于校準(zhǔn)曲線：回歸曲線的剩余標(biāo)準(zhǔn)差或回歸曲線y軸截距

的標(biāo)準(zhǔn)偏差可作為標(biāo)準(zhǔn)偏差。的估計(jì)值。

C.3.2.4其他方法

a）美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局定義10倍空白標(biāo)準(zhǔn)偏差為定量檢出限。

b）英國(guó)定義定量檢出限為：有95%把握認(rèn)為可測(cè)定的最小濃度。

C.4校正與線性（Calibrationandlinearity）

C.4.1驗(yàn)證要求

線性是定量測(cè)定的基礎(chǔ)，涉及定量測(cè)定的項(xiàng)目，如雜質(zhì)定量和含

量測(cè)定均需要驗(yàn)證線性。驗(yàn)證線性基本要求如下：

1）可用一儲(chǔ)備液經(jīng)精密稀釋、或分別精密稱樣制備一系列被測(cè)

物質(zhì)濃度系列進(jìn)行測(cè)定。由于增加校準(zhǔn)曲線的實(shí)驗(yàn)樣本數(shù)可使校準(zhǔn)曲

線的置信區(qū)間變窄，當(dāng)樣本數(shù)增加到n=6時(shí)，再增加樣本數(shù)得益不

大，因此保持校準(zhǔn)曲線實(shí)驗(yàn)點(diǎn)不少于6是適當(dāng)?shù)模?/p>

2）線性考察范圍應(yīng)包括可能遇到的目標(biāo)物濃度的0-150%或

50%-150%,校正點(diǎn)應(yīng)在考察范圍內(nèi)均勻分布。

3）校正標(biāo)樣應(yīng)以隨機(jī)順序至少運(yùn)行2次，最好運(yùn)行3次或更多。

本程序推薦使用3次。

4）以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函數(shù)做圖，觀察是否呈

線性，用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，

再進(jìn)行線性回歸計(jì)算，并說明依據(jù)。

C.4.2基質(zhì)效應(yīng)與測(cè)■方式

當(dāng)一個(gè)分析方法確立后，應(yīng)用該方法時(shí)，對(duì)于不同的測(cè)定對(duì)象要

考慮基體的影響?；w對(duì)欲測(cè)組分的影響稱為基質(zhì)效應(yīng)，基質(zhì)效應(yīng)對(duì)

于選擇合適的測(cè)量方式有很大的影響。常用的校準(zhǔn)曲線測(cè)量法只有在

沒有基質(zhì)效應(yīng)或基質(zhì)效應(yīng)不影響測(cè)定結(jié)果時(shí)才能使用。如果基質(zhì)效應(yīng)

影響測(cè)定結(jié)果，但對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不是太大時(shí)，可用標(biāo)準(zhǔn)加入測(cè)量法

來消除存在的基質(zhì)效應(yīng)的影響。但基質(zhì)效應(yīng)很明顯時(shí)，只能用預(yù)先分

離基體的測(cè)量法(即校準(zhǔn)曲線測(cè)量法與標(biāo)準(zhǔn)加入測(cè)量法的結(jié)合b

通過下述步驟判斷是否需要預(yù)先分離基體后才能進(jìn)行測(cè)量：

先繪制出標(biāo)準(zhǔn)溶液的校準(zhǔn)曲線，然后測(cè)定實(shí)際試樣，吸收值為A,

從校準(zhǔn)曲線上查得濃度為Xo再向?qū)嶋H試樣中加入標(biāo)準(zhǔn)量S,再進(jìn)行

測(cè)試，吸收值為B,從校準(zhǔn)曲線上查得濃度為yo用下式計(jì)算實(shí)際試

樣中的含量c:

(S}

C=------?X

當(dāng)不存在基質(zhì)效應(yīng)時(shí)，1＞一切應(yīng)為1,于是c=x,此時(shí)可用校準(zhǔn)

(S)(S]

曲線測(cè)量法。當(dāng)存在基質(zhì)效應(yīng)時(shí)不等于1，當(dāng)匕-"在0.5?

「5之間時(shí)，可用標(biāo)準(zhǔn)加入測(cè)量法。當(dāng)基質(zhì)效應(yīng)非常明顯時(shí)，㈠一刃超

出0.5?1.5范圍時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)加入測(cè)量法也不能用，必須預(yù)先分離基體

后才能進(jìn)行測(cè)定。

C.5范圍(Range)

范圍指能夠達(dá)到一定的準(zhǔn)確度、精密度和線性，測(cè)試方法適用的

試樣中被分析物高低限濃度或量的區(qū)間。通常取特定方法的定量限為

方法適用范圍的定量檢出限，取工作曲線彎曲處作為方法適用范圍的

定量檢測(cè)上限。

圖C.1方法適用范圍不意圖

C.6正確度(Trueness)

正確度是指測(cè)試值與約定真值之間的接近程度。正確度可用“偏

倚”定量地表示，偏倚越小說明正確度越高。偏倚通常通過比較方法

響應(yīng)值與被賦予已知值的參考物質(zhì)測(cè)得。

C.6.1正確度驗(yàn)證的參考值

1)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(Certifiedreferencematerials,CRMs)

CRMs可溯源至具有已知不確定度的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，因此若不考慮基

質(zhì)的不匹配性，CRMs可用于同時(shí)測(cè)得所有類型偏倚(方法偏倚，實(shí)

驗(yàn)室間偏倚，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)偏倚)o經(jīng)認(rèn)證的標(biāo)準(zhǔn)值不確定度應(yīng)足夠小以

測(cè)得偏倚。若不確定度不夠小，仍然推薦使用CRMs，但需進(jìn)行額外

的確認(rèn)。

2）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

若無法獲得有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，或作為有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的補(bǔ)充，可使用

按已知特性試驗(yàn)?zāi)康纳a(chǎn)的物料作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。例如：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)生產(chǎn)

商制得的已知特性物料，但其標(biāo)準(zhǔn)值不帶有不確定度；物料制造商制

得的已知特性物料；某一實(shí)驗(yàn)室制得的用作標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的物料。上述物

料的可追溯性不明確，但使用這些物料測(cè)得偏倚遠(yuǎn)勝于無偏倚評(píng)估。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用方法相同，只是由于無法獲得不確定

度，顯著性檢驗(yàn)全部依賴于結(jié)果的可見精度。

3）根據(jù)另一標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)量偏倚

當(dāng)核查已經(jīng)過驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)方法的可替代方法或修改方法時(shí)，在方

法的驗(yàn)證過程中，采用另一標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)量偏倚通常很有用。使用兩個(gè)

方法分析一系列典型測(cè)試樣品，最好能覆蓋到整個(gè)有用的濃度范圍。

通過合適的統(tǒng)計(jì)方法比較測(cè)試結(jié)果可測(cè)得這兩個(gè)方法之間的偏倚。

4）使用添加/回收率

在缺少標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的情況下，或在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究過程中，通常通過

添加和回收率考察偏倚。在驗(yàn)證過程中采用完整的方法分析一個(gè)典型

樣品的原始狀態(tài)試樣及添加已知量分析物試樣。兩個(gè)分析結(jié)果之間的

差異用添加分析物量的百分比表示，稱為替代回收率（surrogate

recovery\嚴(yán)格來說，回收率研究?jī)H依據(jù)對(duì)添加狀態(tài)分析物的影響

因素來評(píng)估偏倚。這些影響因素并不適用于實(shí)際試樣中處于原始狀態(tài)

下的分析物，對(duì)原始狀態(tài)下的分析物存在額外的影響因素。因此添加

/回收研究表明，好的回收率并不能保證方法的正確度，而差的回收

率肯定表明方法正確度差。因此評(píng)估一個(gè)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法的偏倚，在目

前的科學(xué)水平下，大多采用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品（CRM）來進(jìn)行。只有在

實(shí)在無法獲得有證標(biāo)準(zhǔn)樣品或控制樣品的情況下，才能采用在一個(gè)空

白樣品基質(zhì)中添加已知濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的辦法。

回收率的驗(yàn)證程序示例如下：

——選擇三組共18份空白基質(zhì)，每組中添加1、1.5和2倍定量

限分析物或0.5、1和1.5倍限量分析物。

——分析樣品并計(jì)算每個(gè)樣品中分析物的濃度。

——按照公式：％回收率=100、測(cè)得含量/添加水平，計(jì)算平均回

收率，并由每水平6個(gè)測(cè)試結(jié)果計(jì)算變異系數(shù)CVo

可接受的回收率范圍與分析目標(biāo)及分析物在樣品中的濃度有關(guān)。

通?？山邮艿幕厥章室笠姳鞢.1o

表C.1可接受的回收率范圍

分析物在樣品中濃度回收率范圍

100%98-101%

10%95-102%

1%92-105%

0.1%90-108%

0.01%85-110%

ioug/g(ppm)80-115%

1閡/g75-120%

10|ig/kg(ppb)70-125%

上述回收率范圍可參考不同方法或法規(guī)的要求進(jìn)行調(diào)整。通常，

回收率低于60%-70%說明應(yīng)對(duì)方法重新加以考察以改進(jìn)回收率，回

收率高于110%說明需要對(duì)試樣進(jìn)行更好的分離。若方法中采用某一

溶劑對(duì)基質(zhì)中的活性成分進(jìn)行提取，則需要通過對(duì)殘留物進(jìn)行再次提

取并測(cè)定殘留物中活性成分的含量來確定方法的提取效率。

C.7重復(fù)性精密度(RepeatabilityPrecision,RSDr)

重復(fù)性指在一定的操作條件下，由同一操作人員，在同一實(shí)驗(yàn)室

內(nèi)，使用同一儀器，并在短期內(nèi)，對(duì)相同試樣所作多個(gè)單次測(cè)試結(jié)果

間的接近程度。通常用同時(shí)測(cè)量的雙平行值或多個(gè)平行值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)

偏差RSDr表示。

——制備一組帶基質(zhì)樣品，添加分析物濃度至1、1.5和2倍定

量限，或0.5、1和1.5倍限量；

——每一水平分析應(yīng)至少包括6個(gè)平行樣；

----分析樣品；

——計(jì)算每個(gè)樣品中測(cè)得的分析物濃度；

一一計(jì)算添加樣品的濃度平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

(%、

——重復(fù)上述步驟至少兩次。

一一計(jì)算添加樣品的分析物濃度的總平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

RSDr。

重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差隨濃度改變，若C表示質(zhì)量分?jǐn)?shù)，可接受的重

復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差值近似于表C.2中的值或通過下式計(jì)算:

-015

RSDr=C

表C.2不同濃度條件下重復(fù)性精密度

分析物在樣品中濃度重復(fù)性精密度（RSDr）

100%1%

10%1.5%

1%2%

0.1%3%

0.01%4%

10pg/g(ppm)6%

1閡/g8%

10|ig/kg(ppb)15%

若用HORRATr表示測(cè)得RSDr與算得RSDr的比值，這一比值

的可接受值為0.5到2之間：

HORRATr=RSDr(found,%)/RSDr(calculated,%)

附錄D

驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室通用要求

D.1范圍

D.1.1本文件規(guī)定了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室的通用技術(shù)要求。

D.1.2本文件適用于參與方法獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證和/或協(xié)同試驗(yàn)驗(yàn)證的

實(shí)驗(yàn)室。

D.2通用要求

D.2.1人員

D.2.1.1驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備操作待驗(yàn)證方法所需專門設(shè)備、從事與待

驗(yàn)證方法相關(guān)檢測(cè)工作、出具檢測(cè)報(bào)告的技術(shù)人員。

D.2.1.2對(duì)參與驗(yàn)證人員，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能根據(jù)其相應(yīng)的教育、培訓(xùn)、

經(jīng)驗(yàn)和/或可證明的技能進(jìn)行資格確認(rèn)。

D.2.2設(shè)備

D.2.2.1驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備對(duì)待驗(yàn)證方法能正確進(jìn)行驗(yàn)證所要求的

所有制樣、測(cè)量和檢測(cè)設(shè)備。

D.2.2.2用于驗(yàn)證過程中制樣、測(cè)量和檢測(cè)的設(shè)備及其軟件應(yīng)達(dá)到待

驗(yàn)證方法要求的準(zhǔn)確度，并在驗(yàn)證前進(jìn)行核查和/或校準(zhǔn)，以證實(shí)其

能夠滿足實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范要求和待驗(yàn)證方法的要求。

D.2.3設(shè)施和環(huán)境條件

D.2.3.1驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保其環(huán)境條件（如生物消毒、灰塵、電磁干

擾、輻射、濕度、供電、溫度、聲級(jí)、振級(jí)等）滿足待驗(yàn)證方法的要

求，即不會(huì)使驗(yàn)證結(jié)果無效或?qū)Υ?yàn)證方法所要求的測(cè)量質(zhì)量產(chǎn)生不

良影響。

D.2.3.2當(dāng)待驗(yàn)證方法有要求，或?qū)Y(jié)果的質(zhì)量有影響時(shí)，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

室應(yīng)能監(jiān)測(cè)、控制和記錄環(huán)境條件。

D.2.4方法的確認(rèn)

D.2.4.1驗(yàn)證活動(dòng)開展前，參與驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確認(rèn)能夠根據(jù)方法開發(fā)

方提供的方法的預(yù)期用途或作業(yè)指導(dǎo)書正確運(yùn)用待驗(yàn)證方法。

D.2.4.2當(dāng)認(rèn)為待驗(yàn)證方法不適合時(shí)，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通知方法開發(fā)

方O

D.2.5檢測(cè)能力

D.2.5.1驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有質(zhì)量控制程序以保證驗(yàn)證數(shù)據(jù)的有效性。

D.2.5.2驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室參與待驗(yàn)證方法相關(guān)領(lǐng)域近兩年內(nèi)實(shí)驗(yàn)室間比

對(duì)或能力驗(yàn)證計(jì)劃應(yīng)無不滿意結(jié)果。

D.3驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室申請(qǐng)及參與驗(yàn)證程序

D.3.1填寫驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室信息表（表D.1）,加入驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)庫(kù)。

D.3.2按照秘書處公布的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)計(jì)劃，納入驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)庫(kù)的實(shí)

驗(yàn)室可根據(jù)待驗(yàn)證方法的要求，自愿提交參與某項(xiàng)驗(yàn)證試驗(yàn)的申請(qǐng)表

（表D.2'

D.3.3秘書處按照某項(xiàng)驗(yàn)證試驗(yàn)提交申請(qǐng)表的情況，組織專家對(duì)提出

申請(qǐng)的實(shí)驗(yàn)室的人員、設(shè)備、設(shè)施與環(huán)境條件、技術(shù)能力等進(jìn)行資格

審核與推薦。

D.3.4經(jīng)專家審核推薦的實(shí)驗(yàn)室作為某項(xiàng)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室的參與者開展

驗(yàn)證。

D.4驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)

D.4.1驗(yàn)證完成后，由統(tǒng)計(jì)專家完成數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析工作。

D.4.2秘書處組織專家根據(jù)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室提交的驗(yàn)證報(bào)告及統(tǒng)計(jì)分析

結(jié)果，對(duì)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行評(píng)價(jià)。

D.4.3涉及偽造、抄襲試驗(yàn)數(shù)據(jù)行為的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室，將予以記錄并取

消其驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室資格。

表D.1驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室信息表

實(shí)驗(yàn)室名稱人員情況主要儀器設(shè)備近兩年參加能認(rèn)可范圍（商

力驗(yàn)證情況品大類）

XXX檢驗(yàn)檢高工X名液相色譜儀參加能力驗(yàn)證化工品、農(nóng)藥、

疫局XXX實(shí)工程師X名氣相色譜儀X次，滿意X食品接觸材

驗(yàn)室博士X名氣質(zhì)聯(lián)用儀次，可疑值X料、橡膠、塑

碩士X名氣質(zhì)質(zhì)次，不滿意X料、涂料

本科X名液質(zhì)質(zhì)次

ICP-MS

表D.2參與驗(yàn)證試驗(yàn)申請(qǐng)表

驗(yàn)證試驗(yàn)名稱XXXXX的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)室名稱XXX檢驗(yàn)檢疫局XXX實(shí)驗(yàn)室

與申請(qǐng)領(lǐng)域相

關(guān)的認(rèn)可能力

范圍

申請(qǐng)能力相關(guān)包括設(shè)備名稱、狀態(tài)、校準(zhǔn)情況

的儀器設(shè)備情

況

在申請(qǐng)領(lǐng)域內(nèi)包括與申請(qǐng)領(lǐng)域相關(guān)的工作資歷描述及培訓(xùn)情況、操作申請(qǐng)能力

擬參與協(xié)同試相關(guān)儀器設(shè)備的資質(zhì)、參與與申請(qǐng)能力相關(guān)的科研情況（包括制

驗(yàn)人員情況標(biāo)、課題與論文情況）

在申請(qǐng)相關(guān)領(lǐng)參加能力驗(yàn)證X次，結(jié)果如何。

域內(nèi)參加國(guó)際

或國(guó)內(nèi)相關(guān)協(xié)

同試驗(yàn)或能力

驗(yàn)證情況

設(shè)施與環(huán)境條實(shí)驗(yàn)室所具有的設(shè)施與環(huán)境條件是否可以滿足驗(yàn)證試驗(yàn)的要求，

件會(huì)否對(duì)結(jié)果產(chǎn)生不良影響，如有影響是否能加以控制或記錄。

方法確認(rèn)是否對(duì)計(jì)劃驗(yàn)證的方法文本（包括作業(yè)指導(dǎo)書）確認(rèn)無疑意。

實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人

審核意見

年月日

申請(qǐng)領(lǐng)域?qū)＜?/p>

推薦意見

年月日

附錄E

(資料性附錄)

驗(yàn)證樣品均勻性與穩(wěn)定性評(píng)價(jià)指南

E.1均勻性檢驗(yàn)的要求和方法

(1)對(duì)驗(yàn)證計(jì)劃所制備的每一個(gè)樣品加以編號(hào)。

(2)從樣品總體中隨機(jī)抽取10個(gè)或10個(gè)以上的樣品用于均勻性檢

驗(yàn)。對(duì)抽取的每個(gè)樣品，在重復(fù)條件下至少測(cè)試2次，重復(fù)測(cè)試的樣

品應(yīng)分別單獨(dú)取樣，且樣品的所有重復(fù)測(cè)試應(yīng)按隨機(jī)次序進(jìn)行。

(3)采用單因子方差分析法對(duì)檢驗(yàn)中的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，若樣品

之間無顯著性差異，則表明樣品是均勻的。

(4)如果。是某個(gè)驗(yàn)證計(jì)劃中能力評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)偏差的目標(biāo)值，Ss為樣

品之間不均勻性的標(biāo)準(zhǔn)偏差。若Ss<0.3。，則使用的樣品可認(rèn)為在本

能力驗(yàn)證計(jì)劃中是均勻的。

E.1.1單因子方差分析

(1)為檢驗(yàn)樣品的均勻性，抽取i個(gè)樣品(i=1、2、3……m),每個(gè)

樣品在重復(fù)條件下測(cè)試j次(j=1、2、3……n\

__〃

x=/^-/n

(2)每個(gè)樣品的測(cè)試平均值：‘六"’

=，"一

x=>X./m

(3)全部樣品測(cè)試的總平均值：占

N=>%

(4)測(cè)試總次數(shù)：金

tn_=SS

L

SS1=2々(羽-x)2MSX=-

(5)樣品間平方和：公均方：工

川”1一SS

,風(fēng)=2￡〃0-尤,)22

MS2

(6)樣品內(nèi)平方和：I尸?均方：T

(7)自由度：＜="_1f2=N-m

FK

(8)統(tǒng)計(jì)量:g

(9)若F＜自由度為(f1,,f2)及給定顯著性水平a(通常a=0.05)

的臨界值Fa(f1…f2),則表明樣品內(nèi)和樣品間無顯著性差異，樣品

是均勻的。

E.1.2單因子方差分析例：以食用油中BHA的均勻性檢驗(yàn)為例

隨機(jī)抽取i=10個(gè)樣品，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)試j=2次，測(cè)定總次數(shù)

N=20次，測(cè)定結(jié)果見表1。

表1食用油中BHA測(cè)試結(jié)果(mg/kg)

測(cè)試次數(shù)(j)

樣品號(hào)(

i)平均值三

12

1251.4252.1251.75

2243.9235.1239.50

3242.9255.0248.95

4252.9255.3254.10

5242.2254.3248.25

6249.1255.3252.20

7247.0252.5249.75

8251.3256.4253.85

9267.2249.2258.20

10254.4248.8251.60

總平均值嚏250.82

單因子方差分析結(jié)果見表2

表2單因子方差分析結(jié)果

方差來自由度⑺、f2)平方和均方(MS1,MS2)F

源(SS1,SS2)

樣品間1f1=m-1=9SS1=434.34MS1=SS1/f1=48.260F=MS1/MS2

樣品內(nèi)2f2=N-m=10SS2=413.28MS2=SS2/f2=41.328F=1.17

查表得F臨界值F0.05(9,10)=3.02o計(jì)算的F值=1.17<F

臨界值，表明在0.05顯著性水平時(shí)，樣品中的BHA是均勻的。

E.1.3Ss《0.3。準(zhǔn)貝ij

若計(jì)算的F值〉F臨界值F檢驗(yàn)結(jié)果表明樣品間存在顯著性差

異，但若滿足SsWO.3。準(zhǔn)則(式中。是能力驗(yàn)證計(jì)劃中能力評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

偏差的目標(biāo)值，可通過Horwitz經(jīng)驗(yàn)公式RS%(%)=2L給定，C為

被測(cè)組分的濃度)，則可認(rèn)為使用的樣品在本能力驗(yàn)證計(jì)劃中是均勻

的。

(10)樣品之間的不均勻性標(biāo)準(zhǔn)偏差S、=MS「MS?。

式中MS1為樣品間均方(見公式5),MS2為樣品內(nèi)均方(見

公式6),n為每個(gè)樣品的重復(fù)測(cè)試次數(shù)。若Ss<0.3o，則使用的樣品

可認(rèn)為在本能力驗(yàn)證計(jì)劃中是均勻的。

E.1.4SsVO.3。準(zhǔn)則應(yīng)用示例

以大豆粉中銅含量的均勻性檢驗(yàn)為例從能力驗(yàn)證計(jì)劃制備的樣

品中隨機(jī)抽取12個(gè)樣品，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)試2次，測(cè)試結(jié)果見表3。

表3大豆粉中的銅含量測(cè)試結(jié)果（mg/g）

測(cè)試次數(shù)（j）

樣品號(hào)（）

i平均值工

12

14.454.454.45

24.454.354.40

34.454.454.45

44.454.554.50

54.354.354.35

64.354.454.40

74.354.254.30

84.454.554.50

94.254.254.25

104.354.454.40

總平均值；4.40

統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果見表4。

表4單因子方差分析結(jié)果

方差來自由度（f1、f2）平方和均方(MS1,MS2)F

源(SS1,SS2)

樣品間1f1=m-1=9SS1=0.12MS1=SS1/f1=0.0133F=MS1/MS2

樣品內(nèi)2f2=N-m=10SS2=0.03MS2=SS2/f2=0.003F=4.44

查表得F臨界值F0.05(9,10)=3.02o計(jì)算的F值=4.44>F

臨界值，表明樣品間存在顯著性差異。

樣品之間的不均勻性標(biāo)準(zhǔn)偏差s，=J(MS「MS2)/〃=00719(n=2)

o=RSO?(%)=2s“=i￡

Ss/o=0.0719/1.6=0.045<0.3，說明雖然樣品間存在顯著性差異，

但就此次水平測(cè)試而言樣品可認(rèn)為是均勻的。

E.2穩(wěn)定性檢驗(yàn)的要求和方法

(1)對(duì)于某些性質(zhì)較不穩(wěn)定的檢測(cè)樣品，運(yùn)輸和時(shí)間對(duì)檢測(cè)的特性

量可能會(huì)產(chǎn)生影響，因此在樣品發(fā)送給實(shí)驗(yàn)室之前，需要進(jìn)行有關(guān)條

件的穩(wěn)定性檢驗(yàn)。

(2)當(dāng)檢測(cè)樣品有多個(gè)待測(cè)特性量時(shí)，應(yīng)選擇容易發(fā)生變化和有代

表性的特性量進(jìn)行穩(wěn)定性檢驗(yàn)。

(3)穩(wěn)定性檢驗(yàn)的樣品應(yīng)從包裝單元中隨機(jī)抽取，抽取的樣品數(shù)具

有足夠的代表性。在能力驗(yàn)證計(jì)劃中，測(cè)量的樣品需在參加實(shí)驗(yàn)室質(zhì)

檢傳遞，作為被測(cè)特性量的監(jiān)控，在計(jì)劃運(yùn)作的始末或期間應(yīng)做穩(wěn)定

性檢驗(yàn)。

(4)穩(wěn)定性檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)方法有t檢驗(yàn)法、卜一)仔。臺(tái)0■準(zhǔn)則法等。t檢

驗(yàn)法通常用于比較一個(gè)平均值與標(biāo)準(zhǔn)值/參考值之間或二個(gè)平均值之

間是否存在顯著性差異。檢驗(yàn)者可根據(jù)樣品的性質(zhì)和工作要求選用某

一方法。

E.2.1t檢驗(yàn)法：一系列測(cè)量的平均值與標(biāo)準(zhǔn)值/參考值的比較

按下式計(jì)算t值：

s

式中：；一n次測(cè)量的平均值；

g——標(biāo)準(zhǔn)值/參考值；

n——測(cè)試次數(shù)；

S——n次測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，n>6o

E.2.2t檢驗(yàn)法：二個(gè)平均值之間的一致性

按下式計(jì)算t值：

_艮-.

卜~~+(%-1)5；.多+〃2

'nt+n2-2ntxn2

式中：3—第一次檢驗(yàn)測(cè)量數(shù)據(jù)的平均值；

五——第二次檢驗(yàn)測(cè)量數(shù)據(jù)的平均值；

S1——第一次檢驗(yàn)測(cè)量數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差；

S2——第二次檢驗(yàn)測(cè)量數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差；

m——第一次檢驗(yàn)測(cè)量的測(cè)量次數(shù)；

n2——第二次檢驗(yàn)測(cè)量的測(cè)量次數(shù)；

注：為了保證平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差的準(zhǔn)確度，n1和n1均26。

若t<顯著性水平a(a=0.05)自由度(n1+n2-2)的臨界值ta

(n1+n2-2),則二個(gè)平均值之間無顯著性差異。

E.2.3?-亍|<0.3<7準(zhǔn)則

若卜一)仔成立，則認(rèn)為備檢樣品是穩(wěn)定的。

式中：量——均勻性檢驗(yàn)的總平均值；

——穩(wěn)定性檢驗(yàn)時(shí)對(duì)隨機(jī)抽出樣品的測(cè)量平均值；

O——該能力驗(yàn)證計(jì)劃的能力評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)偏差目標(biāo)值；

注：抽樣數(shù)23。對(duì)每個(gè)抽取的樣品重復(fù)測(cè)試2次，每次分別單

獨(dú)取樣。測(cè)量方法與均勻性檢驗(yàn)用的測(cè)量方法相同。

附錄F

（資料性附錄）

開展實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證確定方法精密度

F.1通則

F.1.1標(biāo)準(zhǔn)測(cè)■方法：為使測(cè)量按同樣的方法進(jìn)行，測(cè)量方法應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)

化。所有測(cè)量都應(yīng)根據(jù)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行。這意味著必須要有一個(gè)

書面的文件，規(guī)定有關(guān)如何進(jìn)行測(cè)量的所