小反芻獸疫的流行病學(xué)及常見(jiàn)診斷方法

小反芻獸疫是由副黏病毒科麻疹病毒屬的小反芻獸疫病毒引起，以發(fā)熱、眼鼻黏膜卡他性炎癥、壞死性口炎、腹瀉和支氣管肺炎為主要特征，包括野生動(dòng)物在內(nèi)的小反芻動(dòng)物的一種急性、烈性、致死性、高度接觸性傳染病。與小反芻獸疫同為麻疹病毒屬的成員還包括牛瘟病毒、人麻疹病毒、犬瘟熱病毒、海豹瘟病毒和海豚瘟病毒。其中小反芻獸疫與牛瘟具有相近的病理變化和臨床癥狀，兩者還具有血清學(xué)相關(guān)性。小反芻獸疫是嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)安全的重大動(dòng)物疫病，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為法定報(bào)告的動(dòng)物疫病；目前防控主要依靠滅活苗或弱毒苗，但在實(shí)際應(yīng)用中存在著免疫持續(xù)期短、熱穩(wěn)定性差、病毒毒力有返強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)等眾多缺陷；目前主要分布在非洲、阿拉伯、中東以及大陸在內(nèi)的亞洲部分地區(qū)。一、流行病學(xué)1.1小反芻獸疫的地理分布小反芻獸疫在1942年第一次在非洲的象牙海岸被報(bào)道，隨后的調(diào)查發(fā)現(xiàn)小反芻獸疫廣泛流行于撒哈拉沙漠與赤道之間的大多數(shù)非洲國(guó)家。后來(lái)，小反芻獸疫的分布逐漸擴(kuò)大到中東、伊朗、南亞次大陸、土耳其以及亞洲中部的部分國(guó)家。在亞洲，小反芻獸疫于1987年首次在印度南部地區(qū)出現(xiàn)，于1993年至1995年傳入阿拉伯半島、中東及南亞次大陸部分地區(qū)并成為了當(dāng)?shù)氐牡胤叫粤餍胁?。隨著小反芻獸疫全球范圍內(nèi)的凈化，人們對(duì)小反芻獸疫的認(rèn)識(shí)不斷加深，對(duì)其警性有所提高，相應(yīng)的診斷技術(shù)也在不斷地改進(jìn)，但更為頻繁的動(dòng)物貿(mào)易、牲畜的季節(jié)性的遷移以及部分地區(qū)的游牧風(fēng)俗為小反芻獸疫的傳播創(chuàng)造了許多條件，使之在全球范圍內(nèi)的分布不斷擴(kuò)大。近年來(lái)，小反芻獸疫跨國(guó)疫情多發(fā)，于2000年首次在亞洲的塔吉克斯坦、尼泊爾、中國(guó)西藏暴發(fā)。在非洲，小反芻獸疫已遍及赤道以南的剛果（2006）、肯尼亞（2006）、烏干達(dá)（2007），撒哈拉北部的摩洛哥（2008）。根據(jù)小反芻獸疫F蛋白、H蛋白和N蛋白基因的序列比對(duì)，將世界不同地域的小反芻獸疫流行毒株劃分為4個(gè)基因群。其中，20世紀(jì)70年代在非洲西部及近年在非洲中部分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅰ系；在西非的象牙海岸、幾內(nèi)亞、布基納法索分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅱ系；在東部非洲的蘇丹、也門(mén)、阿曼分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅲ系；在阿拉伯半島、中東、亞州南部地區(qū)及非洲的摩洛哥分離的毒株屬于小反芻獸疫Ⅳ系。1.2易感動(dòng)物山羊和綿羊是小反芻獸疫的易感動(dòng)物，山羊較綿羊感染性高且臨床癥狀較嚴(yán)重，但也有報(bào)道稱綿羊和山羊同樣易感，甚至在小反芻獸疫暴發(fā)流行時(shí)，某些山羊不被感染或僅出現(xiàn)較輕的感染癥狀，而綿羊卻表現(xiàn)出較高的發(fā)病率和死亡率。據(jù)報(bào)道，在實(shí)驗(yàn)室給同一種山羊接種不同毒株，表現(xiàn)出了毒株間的毒力差異，相應(yīng)的不同種的山羊?qū)ν欢局戤a(chǎn)生不同的反應(yīng)。對(duì)牛和豬人工接種或接觸感染，皆不發(fā)病，但產(chǎn)生抗體，也不散毒。目前，由于對(duì)小反芻獸疫易感的野生動(dòng)物種類信息不全面，報(bào)道過(guò)感染小反芻獸疫的野生動(dòng)物主要有印度水牛、單峰駱駝、小鹿瞪羚、湯氏瞪羚、努比亞北山羊、大羚羊、美洲白尾鹿、中國(guó)巖羊。1.3傳播方式傳播方式主要是接觸傳播，可通過(guò)與病羊直接接觸發(fā)生傳播，病羊的鼻液、糞尿等分泌物和排泄物可含有大量的病毒，與被病毒污染的飼料、飲水、衣物、工具、圈舍和牧場(chǎng)等接觸也可發(fā)生間接傳播，在養(yǎng)殖密度較高的羊群偶爾會(huì)發(fā)生近距離的氣溶膠傳播。但與口蹄疫病毒傳播有區(qū)別，小反芻獸疫不能在空氣中長(zhǎng)時(shí)間存活，不能通過(guò)氣溶膠長(zhǎng)距離的傳播；因此在防控上做好養(yǎng)殖場(chǎng)及牧場(chǎng)的飼養(yǎng)欄舍、活動(dòng)場(chǎng)地、飲水設(shè)施以及交通工具的消毒及管理，可有效防控小反芻獸疫的感染。1.4潛伏期小反芻獸疫一年四季均可發(fā)生，但多雨季節(jié)和干燥寒冷季節(jié)多發(fā)。潛伏期為4-5天，最長(zhǎng)可達(dá)21天，《陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典》規(guī)定為21天。如同其它動(dòng)物傳染病，首次入侵時(shí)，所有易感性羊群會(huì)大爆發(fā)本病，一旦病原存在后，變?yōu)樯l(fā)，隨季節(jié)性羊羔的出生而病例增加。二、診斷方法根據(jù)小反芻獸疫的流行病學(xué)特點(diǎn)、臨床癥狀和剖檢病變等，可作出初步診斷。但應(yīng)注意與巴氏桿菌病、傳染性羊胸膜肺炎、羊傳染性膿皰、藍(lán)舌病和口蹄疫等作鑒別診斷。目前本病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要有以下幾種。2.1樣品采集以拭棒刮取睫膜炎分泌物及鼻、口腔及直腸等拭子，以及剖檢采取淋巴結(jié)、扁桃腺、脾、肺、大腸等組織塊，以干冰或冰袋冷藏送至實(shí)驗(yàn)室。供病理切片的組織則以10%中性福爾馬林液保存及輸送。另采取抗凝血?jiǎng)┲苽涞娜?，供病毒分離、血液學(xué)及血清學(xué)使用。2.2常規(guī)診斷PPRV的常規(guī)診斷技術(shù)主要有瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（AGID）、病毒分離鑒定和膠體金試紙條等。AGID的敏感性相對(duì)較低，因此基本不用于標(biāo)準(zhǔn)診斷。血凝試驗(yàn)（HA）和血凝抑制試驗(yàn)（HI）可用于日常監(jiān)測(cè)，此兩種技術(shù)易操作、花費(fèi)少、敏感性也相對(duì)較高。病毒分離培養(yǎng)通常采用非洲綠猴腎細(xì)胞（Vero細(xì)胞）進(jìn)行。Sreenivasa等于2006年，研究發(fā)現(xiàn)改造過(guò)的狨猴B淋巴細(xì)胞衍生細(xì)胞系MarmosetB95a細(xì)胞更利于PPRV的繁殖和分離。應(yīng)用此方法鑒定比較準(zhǔn)確，但相對(duì)費(fèi)時(shí)費(fèi)力，不適用于PPRV的快速檢測(cè)。在膠體金試紙條方面，研究者成功地建立了一種特異、快速檢測(cè)PPRV抗原膠體金免疫層析試紙條。此方法與病毒分離方法相比，縮短了PPRV抗原檢測(cè)時(shí)間、降低了檢測(cè)成本和檢測(cè)環(huán)境要求，是PPRV檢測(cè)方法的完善，也是PPR快速診斷方法之一。2.3病原學(xué)診斷病原診斷主要包括特異性的cDNA探針雜交、RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP）、RT-PCR-ELISA和抗原捕獲ELISA等。分子生物學(xué)技術(shù)雖然耗時(shí)短、靈敏度高、特異性強(qiáng)，但由于樣品易污染、RNA易降解等可造成不準(zhǔn)確結(jié)果，而且檢測(cè)設(shè)備要求高、專業(yè)性要求強(qiáng)、檢測(cè)成本高，難以適用于大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查和檢驗(yàn)檢疫。2.4血清學(xué)診斷PPRV抗體血清學(xué)診斷方法包括間接熒光抗體試驗(yàn)（IFAT）、對(duì)流免疫電泳試驗(yàn)（CIEP）、病毒中和試驗(yàn)（VNT）和ELISA等。其中，IFAT和VNT雖然是鑒別診斷PPRV和RPV的可靠方法，但由于此兩種方法操作復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)、設(shè)備要求高，不適于大量樣品的檢測(cè)；而VNT是國(guó)際貿(mào)易中要求進(jìn)行的一項(xiàng)檢測(cè)試驗(yàn)，該法靈敏度高、特異性強(qiáng)，但十分耗時(shí)。ELISA方法相比上述幾種方法更加方便、快捷，適用于大量樣品的檢測(cè)診斷。三、小結(jié)小反芻獸疫已經(jīng)嚴(yán)重影響了我國(guó)羊養(yǎng)殖業(yè)，制約著羊養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展，近期中國(guó)多地暴發(fā)小反芻獸疫疫情為我們敲起了警鐘。本文通過(guò)從該病的病原、流行病學(xué)、診斷方法等幾個(gè)方面進(jìn)行闡述，為小反芻獸疫的認(rèn)識(shí)和防控提供指導(dǎo)。目前，小反芻獸疫目前尚無(wú)有效的治療方法，當(dāng)小反芻獸疫爆發(fā)前，快速確診，緊急建立免疫帶，才能有效控制該病在我國(guó)的傳播。當(dāng)前的小反芻獸疫防控措施不夠