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文檔簡介

動物科學學院《獸醫(yī)臨床診療學》試驗指導書主性馮杰編寫適用專業(yè):動物醫(yī)學貴州大學二OO 七年八月

前言獸醫(yī)臨床診療學基礎內容包含獸醫(yī)臨床檢驗基礎方法、基礎知識、基礎理論和臨床操作技能;還介紹了試驗室常見檢驗項目、檢驗方法及其診療意義,和獸醫(yī)X線檢驗、B超檢驗和獸醫(yī)心電圖檢驗基礎知識等。經(jīng)過學習,讓學生熟練掌握臨床檢驗基礎方法,并利用于臨床通常檢驗和系統(tǒng)檢驗,最終達成初步臨診分析能力,對動物常見疾病能夠作出診療和處理。獸醫(yī)臨床診療學是一門實踐性很強課程。為了使學生不僅在理論上學好本門課基礎知識,而且能確實掌握相關基礎技能和操作技術,并能應用于臨診實際,以確保教學質量,必需在動物保定、投藥、通常檢驗、系統(tǒng)檢驗、血常規(guī)檢驗等方面加強實踐動手操作能力。試驗項目--動物靠近和保定,要求學生掌握動物通用保定方法,確保臨診過程中人畜安全。試驗項目--動物投藥、注射及穿刺,要求學生熟練掌握動物投藥、注射及穿刺技術。試驗項目--通常檢驗,要求學生熟練掌握通常檢驗內容及其臨床意義。試驗項目--循環(huán)系統(tǒng)檢驗、呼吸系統(tǒng)檢驗、消化系統(tǒng)檢驗,要求學生熟練掌握系統(tǒng)檢驗內容及其臨床意義。試驗項目--血液采集、抗凝及血常規(guī)檢驗,要求學生了解血常規(guī)檢驗內容及程序。試驗項目--現(xiàn)場病例診療分析,關鍵考查學生綜合利用知識能力和分析能力。其中血液采集、抗凝及血常規(guī)檢驗和現(xiàn)場病例診療分析為綜合性試驗項目。本指導書適適用于動物醫(yī)學本科專業(yè)學生。在試驗項目標編排上,做到循序漸進、由淺入深,關鍵突出培養(yǎng)學生操作動手能力和綜合利用知識能力。

目錄1.試驗一:動物靠近和保定???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????42.試驗二:動物投藥、注射及穿刺?????????????????????????????????????????????????????????????????????????63.試驗三:通常檢驗?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????94.試驗四:循環(huán)系統(tǒng)檢驗????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????115.試驗五:呼吸系統(tǒng)檢驗????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????136.試驗六:消化系統(tǒng)檢驗????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????157.試驗七:血液采集、抗凝及血常規(guī)檢驗?????????????????????????????????????????????????????????178.試驗八:現(xiàn)場病例診療分析?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????24附:試驗匯報基礎內容及要求?????????????????????????????????????????????????????????????????????????26貴州大學試驗匯報?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????27

試驗一:動物靠近和保定試驗課時:2試驗類型:操作 試驗要求:必修一、試驗目標 經(jīng)過本試驗學習,使學生熟悉靠近動物標準,掌握通用動物保定方法,為以后臨診工作奠定基礎。二、試驗內容 動物靠近;動物保定。三、試驗原理、方法和手段 本試驗為操作性,方法及手段詳見試驗步驟。四、試驗組織運行要求 依據(jù)本試驗特點、要求和具體條件,采取以學生自主訓練為主開放模式組織教學。五、試驗條件 成年黃牛兩頭、保定繩、診療室等。六、試驗步驟(以黃牛為例)1.黃??拷?)靠近黃牛前,應向喂養(yǎng)員了解其性情,有沒有咬、踢、抵等惡癖,然后以溫和聲音打招呼,再從其側方慢慢靠近。(2)靠近后,用手撫摩黃牛頸側待其平靜后,再行檢驗。(3)檢驗時,應將一手放于黃牛合適部位(如肩部、髖結節(jié)),一旦黃牛猛烈騷動抵御時,即可作為支點向對側推進并快速離開。2.黃牛保定(1)鉗鼻保定法。用鼻鉗子鉗壓鼻中隔,或用拇指和中指捏住鼻中隔,向后上方提舉保持之。對穿有鼻環(huán)牛,牽拉鼻環(huán)繩即可。(2)捆角保定法。用一根繩拴在雙側牛角根部,并用此繩將牛頭固定于立柱或樹干上。(3)柱欄保定法??捎枚鶛?、四柱欄、五柱欄、六柱欄保定。(4)雙環(huán)套倒牛法。用12-15米長圓繩1條,一端拴在牛角根部,另端由頸背側引向后方,經(jīng)肩胛后方及髖結節(jié)前方時,分別繞背胸及腰腹部各作一環(huán)套,再引繩向后。兩環(huán)套之繩交叉點均在倒臥對則。隨即,由2人固定牛頭并向倒臥側按壓,3人向后牽拉倒繩,牛因繩套壓迫,胸腹肌緊縮,后肢屈曲而自行倒臥。(5)提肢倒牛法。用7-8米長圓繩一條,折成一長一短雙疊,在折疊部做豬蹄扣,套在倒臥側前肢掌部。先將短繩穿過胸下,從對側經(jīng)背部返回交1人固定。再將長繩引向后方,在髖結節(jié)之前繞腰腹部作一環(huán)套,并繼續(xù)引向后方,交1人固定。放倒時,拉緊前方短繩,提舉倒臥側前肢;再將后方繩環(huán)經(jīng)臀部移至脛部,收緊并向后方牽拉,使繩緊縛后肢,牛即先坐下以后臥倒。倒臥后保定應依據(jù)需要進行。短時間保定且牛體不大時,可令一助手坐在后肢后方地上,牢靠地抓住上側后肢并用力向后拉,腳抵于另一后肢跗關節(jié)上,用力向前蹬,另一助手緊抓前肢并牢靠地使其屈曲,同時用一膝抵住患畜頸部。需長時間保定時,可將兩前肢用繩捆在一起,向前伸直,固定;一樣,兩后肢捆好后,向后拉直固定;另1人固定頭部。七、思索題牛五柱欄保定怎樣操作?適合于哪些檢驗或手術?八、試驗匯報 要求學生作好試驗預習、試驗統(tǒng)計和試驗匯報。在正式試驗前先作試驗預習,并以書面形式交于試驗指導老師,檢驗可行后方能作正式試驗。試驗過程中對試驗相關內容及步驟作具體統(tǒng)計。試驗完成后填寫試驗匯報,交由指導老師批閱。九、其它說明 條件含有時可增加其它動物保定內容。試驗二:動物投藥、注射及穿刺試驗課時:2試驗類型:操作 試驗要求:必修一、試驗目標 經(jīng)過本試驗學習,使學生熟練掌握動物投藥法、注射法及穿刺技術,為以后臨診工作奠定基礎。二、試驗內容 投藥法;注射法;穿刺術。三、試驗原理、方法和手段 本試驗為操作性試驗,方法及手段詳見試驗步驟。四、試驗組織運行要求 依據(jù)本試驗特點、要求和具體條件,采取以學生自主訓練為主開放模式組織教學。五、試驗條件 診療室、黃牛兩頭、保定繩、穿刺針、注射器、輸液器、胃導管、長頸橡膠瓶、5%碘酊棉球、75%酒精棉球及生理鹽水等。六、試驗步驟(以黃牛為例)(一)長頸橡膠灌藥法:關鍵用于少許水劑藥品或將粉劑、研碎片劑、加適量水而制成溶液、混懸液、糊劑、中藥及其煎劑、片劑、丸劑、舔劑等,經(jīng)口灌給病畜。1牛站立保定,一手握角根,另手握鼻中隔,或裝著鼻鉗子,使頭稍高抬固定。2術者站在斜前方,左手食、中指從牛一側口角處伸入口腔,并輕壓舌頭,右手持盛滿藥液灌藥瓶,自另側口角伸入舌背部抬高瓶底,并輕輕振抖,如用橡膠瓶時可壓擠瓶體,促進藥液流出,在配合吞咽動作中繼續(xù)灌服,直至灌完。注意不要連續(xù)灌注,以免誤咽。(二)片劑、丸劑、舐劑投藥法:術者用一手從一側口角伸入拇指頂上顎打開口腔,另手持藥片、藥丸或用竹片刮取舔劑,自另側口角送入舌根部,同時抽出另手使其閉口,并用右手掌托其下頜骨,使頭稍高抬,待其自行咽下。(三)經(jīng)鼻胃導管投藥法:1動物保定,固定牛頭。2術者站于牛頭稍右前方,用左手無名指和小指伸入左側上鼻翼副鼻腔、中指、食指伸入鼻腔,和鼻腔外側拇指固定內側鼻翼。3右手持胃管將前端經(jīng)過左手拇指和食指之間沿鼻中隔漸漸插入胃管,并加以固定,預防病畜騷動時胃等滑出。4當胃管抵達咽部后,隨病畜咽下動作將胃管插入食道。有時可能拒絕不咽,推送困難,此時不要勉強推送,應稍?;蜉p輕抽動胃管,誘發(fā)吞咽動作,順勢將胃管插入食道。5判定胃管正確插入食道后,再將胃管前端推送頸部到下處。連接漏斗,先投少許清水,證實無誤后,即可投藥。也可連接投藥唧筒,將藥液壓送入胃內。6投藥以后,再投以少許清水,沖凈胃等內殘留藥液,然后漸漸抽出胃管。用完胃管放在煤酚皂溶液中浸泡消毒、備用。7注意事項(1)插入或抽動胃管時要小心、緩慢,不宜粗暴。(2)當病畜呼吸極度困難,或有鼻炎、咽炎、喉炎、高溫時,禁用胃管給藥。(3)當證實胃管插入食道深部后,方可進行投藥。如投藥后引發(fā)咳嗽、氣喘,應立即停止。(4)藥品誤投入肺表現(xiàn)及其搶救方法(四)皮下注射法:將藥品注射于皮下組織內,經(jīng)毛細血管、淋巴管吸收,通常經(jīng)5-10分鐘展現(xiàn)效果。通常易溶解無強烈刺激性藥品及菌苗、疫苗等均可作皮下注射。1部位:牛在頸側或肩胛后方胸側。2方法:局部剪毛消毒后,用左手拇指和中指捏起皮膚,食指壓其頂點,使其形成三角凹窩。右手持注射器,快速將什頭刺入凹窩中心皮膚內,深2厘米左右。放開皮膚,抽動活塞不見回血時,注入藥液。藥液多時,應分點注射。注射完成拔出針頭,局部涂以碘酊。(五)肌肉注射法:肌肉內血管豐富,注射后藥液吸收較快,僅次于靜脈注射;又因感覺神經(jīng)比皮下少故引發(fā)疼痛較輕,臨床上應用較多。1部位:臀部和頸側。2方法:剪毛消毒后,將針頭先刺入肌肉內,再接連吸好藥液注射器,抽拔活塞確定無回血后,注入藥液。先接好針頭一次操作也可。注射時,不要將針頭全刺入肌肉內,以免折斷時不易取出。(六)靜脈注射法:將藥液直接注于靜脈管內,伴隨血流很快分布到全身,奏效快速,但排除較快,作用時間短。1部位:在頸靜脈溝上1/3和中1/3交界處進行頸靜脈注射。2方法:剪毛消毒后,以左手指壓在頸靜脈溝下1/3處,在上方靜脈怒張后,用16#垂直刺入上1/3和中1/3交界處靜脈,見到回血后,將針頭順血管走向推進1厘米,將藥液漸漸注入。注射完成,左手拿酒精棉球壓緊針孔,右手快速拔出針頭。為了預防針孔溢血,繼續(xù)緊壓局部片刻,最終涂以碘酊。(七)瘤胃穿刺法:可作為急性瘤胃膨脹時一個搶救方法,以免造成窒息或瘤胃破裂。有時為采取瘤胃內容物,或向瘤胃內注藥,也需實施本手術。1部位:在左肷窩部,由髖結節(jié)、腰椎橫突和最終肋骨三者之間所組成等距離點處。當瘤胃膨脹時,取其膨脹部頂點。2方法:剪毛消毒后,先切1厘米長皮膚切口,將套管針對準右側肘頭,快速刺入深約10-20厘米。用酒精棉球圍繞并固定套管,抽出內針,以紗布塊堵住管口進行間歇放氣。套管針堵塞時,可插入內針疏通或稍擺動套管。排氣后可向瘤胃內注入防腐止酵劑。完成插入內針,用力壓迫腹壁、慢慢拔針、切口涂碘酊,并用火棉膠覆蓋。緊急情況下,無套管針時,可就地取材,切開皮膚后用竹管、放血針頭等快速穿刺排氣,先救命后再采取抗感染方法。七、思索題1牛頸靜脈注射操作關鍵點是什么?2胃管投藥時,怎樣判定胃管進入食道?八、試驗匯報 要求學生作好試驗預習、試驗統(tǒng)計和試驗匯報。在正式試驗前先作試驗預習,并以書面形式交于試驗指導老師,檢驗可行后方能作正式試驗。試驗過程中對試驗相關內容及步驟作具體統(tǒng)計。試驗完成后填寫試驗匯報,交由指導老師批閱。試驗三:通常檢驗試驗課時:2試驗類型:操作試驗要求:必修一、試驗目標 經(jīng)過本試驗學習,使學生熟練掌握般檢驗內容和方法,為判定病情大致情況和深入檢驗奠定基礎。二、試驗內容 整體狀態(tài)觀察;皮膚和被毛檢驗;可視粘檢驗;淺在淋巴結檢驗;T、P、R檢驗。三、試驗原理、方法和手段 本試驗為操作性試驗,方法及手段詳見試驗步驟。四、試驗組織運行要求 依據(jù)本試驗特點、要求和具體條件,采取以學生自主訓練為主開放模式組織教學。五、試驗條件 診療室、黃牛兩頭、保定繩、體溫計、聽診器等。六、試驗步驟(以黃牛為例)(一)整體狀態(tài)觀察1精神狀態(tài):觀察病畜神態(tài)、依據(jù)其耳活動,眼表情及多種反應、舉動而判定。分為抑制狀態(tài)和興奮狀態(tài)。2營養(yǎng):依據(jù)肌肉豐滿度、皮下脂肪蓄積量及被毛情況而定。分為營養(yǎng)良好和營養(yǎng)不良。3發(fā)育:依據(jù)骨骼發(fā)育程度及軀體大小而定。如體長、體高、體重、胸圍、管圍等。4軀體結構:注意頭、頸、軀干、四肢及關節(jié)形態(tài)和百分比。5姿勢(二)被毛和皮膚檢驗1鼻鏡:健康牛鼻鏡有少許水珠,觸之有涼感。病理情況常為干燥、增溫和龜裂等。示熱性病和前胃疾病。診療過程由干轉濕,為病情好轉征兆。2被毛:清潔、光澤及脫落情況。3皮膚顏色:關鍵檢驗白色皮膚動物。4皮膚溫度:正常時牛鼻鏡冰涼、角根有溫感。分為全身性皮溫升高、不足皮溫升高、全身性皮溫降低、不足皮溫降低(該部水腫或外周神經(jīng)麻痹)。5皮膚濕度:經(jīng)過視診和觸診。6皮膚彈性:牛有最終肋骨后部。7皮下組織:浮腫、氣腫、血腫、膿腫、淋巴外滲、疝、腫瘤。(三)可視粘膜檢驗(以眼結合膜為例)檢驗有沒有腫脹、外傷、分泌物及顏色。檢驗鞏膜可扭轉牛頭,檢驗結膜則大拇指撥開下眼瞼。水牛較深,黃牛較淺。(四)淺在淋巴結檢驗頜下、肩前淋、膝襞及乳房上淋巴結等。(五)體溫檢驗:直腸溫。黃牛體溫范圍:37.5~39.50C。(六)呼吸數(shù)檢驗:黃牛10~25次/次。(七)脈搏數(shù)檢驗:檢驗尾動脈,距尾根10厘米腹面。黃牛40~80次/分。七、思索題病理情況下眼結膜檢驗有哪些顏色改變?八、試驗匯報 要求學生作好試驗預習、試驗統(tǒng)計和試驗匯報。在正式試驗前先作試驗預習,并以書面形式交于試驗指導老師,檢驗可行后方能作正式試驗。試驗過程中對試驗相關內容及步驟作具體統(tǒng)計。試驗完成后填寫試驗匯報,交由指導老師批閱。試驗四:循環(huán)系統(tǒng)檢驗試驗課時:2試驗類型:操作、驗證 試驗要求:必修一、試驗目標 經(jīng)過本試驗學習,使學生熟練掌握心血管系統(tǒng)檢驗內容及方法,為心血管系統(tǒng)疾病及全身疾病檢驗奠定基礎。二、試驗內容 心搏動視診和觸診;心臟叩診;心臟聽診;血管檢驗。三、試驗原理、方法和手段 本試驗為操作性和驗證性試驗,方法及手段詳見試驗步驟。四、試驗組織運行要求 依據(jù)本試驗特點、要求和具體條件,采取以學生自主訓練為主開放模式組織教學。五、試驗條件 診療室、黃牛兩頭、保定繩、聽診器等。六、試驗步驟(以黃牛為例)(一)心搏動視診和觸診1黃牛站立保定,左前肢前跨,充足露心區(qū)。2檢驗者于黃牛左側,觀察左側肘后心區(qū)被毛及胸壁振動情況。3觸診時用右手搭于髻甲部,左手貼于左肘后方心區(qū)。(二)心臟叩診1黃牛站立保定,左前肢前跨,充足露心區(qū)。2肩胛骨垂直向下至心區(qū)進行叩診,標識清濁音過渡點;往后上45度叩診,一樣標識清濁音區(qū)過渡點,兩點弧線連接,即為心濁音區(qū)后上界。(三)心臟聽診1黃牛站立保定,左前肢前跨,充足露心區(qū)。2左第四、第三肋間,右第四肋骨。黃牛心音較馬清楚,水牛心音模糊,犬心音清亮。3聽心率、強度、分裂、雜音及心率不齊等。(四)動脈血管檢驗。牛為尾動脈。(五)靜脈血管檢驗(以牛頸靜脈為例)。頸靜脈波動超出下三分之一時,多為病態(tài)。有陽性、陰性和偽性之分。七、思索題心臟異常聽診音有哪些?頸靜脈波動有哪多個?八、試驗匯報 要求學生作好試驗預習、試驗統(tǒng)計和試驗匯報。在正式試驗前先作試驗預習,并以書面形式交于試驗指導老師,檢驗可行后方能作正式試驗。試驗過程中對試驗相關內容及步驟作具體統(tǒng)計。試驗完成后填寫試驗匯報,交由指導老師批閱。試驗五:呼吸系統(tǒng)檢驗試驗課時:2試驗類型:操作、驗證試驗要求:必修一、試驗目標 經(jīng)過本試驗學習,使學生熟練掌握呼吸系統(tǒng)檢驗內容及方法,為呼吸系統(tǒng)疾病及全身疾病檢驗奠定基礎。二、試驗內容 呼吸次數(shù)、呼吸式、上呼吸道、鼻液、咳嗽及胸廓檢驗等。三、試驗原理、方法和手段 本試驗為操作性和驗證性試驗,方法及手段詳見試驗步驟。四、試驗組織運行要求 依據(jù)本試驗特點、要求和具體條件,采取以學生自主訓練為主開放模式組織教學。五、試驗條件 診療室、黃牛兩頭、保定繩、叩診槌及叩診板、聽診器等。六、試驗步驟(以黃牛為例)(一)呼吸次數(shù)測定:在通常檢驗已講。(二)呼吸式觀察:健康者通常呈胸腹式呼吸,深度、間隔時間均勻。病情況為胸式呼吸和腹式呼吸。(三)鼻液檢驗:為呼吸道及肺臟病理性產(chǎn)物(健康水牛除外)。檢驗其是否為單側或雙側、數(shù)量、性質及混雜物。(四)咳嗽檢驗:聽取咳嗽聲音、性質及咳嗽反應。人工誘咳法:站立,一手置于其髻甲部,另手握住擠壓喉頭及第一、二氣管環(huán)。也可用捂鼻法。正常可引發(fā)一至二聲咳嗽,如呈頻繁咳嗽,常為喉、氣管敏感反應。(五)胸部視診、觸診和叩診1視診:觀察胸廓外形,對稱性及局部改變。2觸診:經(jīng)過觸摸,判定胸壁敏感性、有沒有浮腫、氣腫,和肋骨有沒有變形或骨折。3叩診:用槌板叩診法。由前往后,由上而下,每隔3-4厘米叩診。叩診區(qū)后下界為髖結節(jié)水平線和第11肋骨交點及肩關節(jié)水平線和第8肋骨交點圓弧連線,最終第4肋。前界為肩胛骨后角向下所著垂線。上界為肩胛骨后角引向髂結節(jié)連線和第11肋線段。(六)胸部聽診。用聽診器,在上述肺區(qū)每隔3-4厘米聽診。聽不清楚,可作運動或捂鼻放開后聽診。牛較強,可聽到“夫夫”音。有時可聽到羅音、胸膜摩擦音(吸氣末和呼氣初,示纖維素性胸膜炎。)。七、思索題胸部異常呼吸音有哪些?鼻液和咳嗽檢驗包含哪些內容?八、試驗匯報 要求學生作好試驗預習、試驗統(tǒng)計和試驗匯報。在正式試驗前先作試驗預習,并以書面形式交于試驗指導老師,檢驗可行后方能作正式試驗。試驗過程中對試驗相關內容及步驟作具體統(tǒng)計。試驗完成后填寫試驗匯報,交由指導老師批閱。試驗六:消化系統(tǒng)檢驗試驗課時:2試驗類型:操作、驗證試驗要求:必修一、試驗目標 經(jīng)過本試驗學習,使學生熟練掌握消化系統(tǒng)檢驗內容及方法,為消化系統(tǒng)疾病及全身疾病檢驗奠定基礎。二、試驗內容 飲食欲、口腔、咽、食管、腹部、直腸、排糞動物、糞便檢驗等。三、試驗原理、方法和手段 本試驗為操作性和驗證性試驗,方法及手段詳見試驗步驟。四、試驗組織運行要求 依據(jù)本試驗特點、要求和具體條件,采取以學生自主訓練為主開放模式組織教學。五、試驗條件 診療室、黃牛兩頭、保定繩、叩診槌及叩診板、聽診器等。六、試驗步驟(以黃牛為例)(一)采食情況檢驗1采食和飲水。牛用舌卷食草飼料。2反芻和噯氣。時間、次數(shù)。采食后一小時至半小時反芻,每次反芻連續(xù)20-60分鐘,每個食團再咀嚼40-60次,每晝夜4-8次。每小時噯氣15-30次。3嘔吐。牛少嘔吐,嘔吐則不安、呻吟,腹肌猛烈收縮。(二)口腔檢驗。檢驗者握捏牛鼻及中隔,強行上提,另手從口角伸入拉出舌頭。濕度、溫度、顏色、舌苔、完整性及牙齒情況。(三)咽檢驗。關鍵經(jīng)過視診和觸診。結核、腮腺炎和放射線菌。(四)食管檢驗。關鍵經(jīng)過視診和觸診。(五)腹部視診、觸診和叩診1大小、形狀;敏感性及擔心度。2瘤胃檢驗。上部叩診呈臌音,觸診呈面團樣硬度,聽診隨每次蠕動波可出現(xiàn)逐步增強后又逐步減弱沙沙音、吹風樣或遠雷音,第分鐘2-3次。3瓣胃檢驗。右側第7-9肋間肩關節(jié)水平線水平線上下3厘米范圍。4真胃及腸管。真胃在右側第9-11肋間、沿肋弓下。真胃如腸音,似流水聲或含嗽音。腸音短而稀少。(六)肝臟。右側肋弓下深部觸診。(七)排糞動作及糞便檢驗(八)直腸檢驗七、思索題直腸檢驗適應癥是什么?排糞動作及糞便感觀檢驗包含哪些內容?八、試驗匯報 要求學生作好試驗預習、試驗統(tǒng)計和試驗匯報。在正式試驗前先作試驗預習,并以書面形式交于試驗指導老師,檢驗可行后方能作正式試驗。試驗過程中對試驗相關內容及步驟作具體統(tǒng)計。試驗完成后填寫試驗匯報,交由指導老師批閱。試驗七:血液采集、抗凝及血常規(guī)檢驗試驗課時:2試驗類型:綜合試驗要求:必修一、試驗目標 經(jīng)過本試驗學習,使學生了解血常規(guī)檢驗內容及方法,為全身疾病檢驗奠定基礎。二、試驗內容 血液采集、抗凝、血常規(guī)檢驗檢驗。三、試驗原理、方法和手段 本試驗為綜合性試驗,原理、方法及手段詳見試驗步驟。四、試驗組織運行要求 依據(jù)本試驗特點、要求和具體條件,采取以學生自主訓練為主開放模式組織教學。五、試驗條件1試驗動物:牛、豬、犬不限。2試驗藥品:5%碘酊、75%酒精、抗凝劑及相關藥劑。3試驗器械:繃帶、采血針、藥棉、計數(shù)器、血細胞自動分析儀等。六、試驗步驟(一)血液采集。裝在小試管或帶橡皮塞抗生素小瓶中。若分離血清,則無須加抗凝劑。(二)血液抗凝1EDTA二鈉。奪取血游離鈣豐螯合物而起抗凝作用。配成10%溶液,第2滴可對5毫升血液起抗作用。對血細胞形態(tài)影響小,可預防血小板聚集,在室溫下數(shù)小時內,對血紅蛋白、血小板讀數(shù)計數(shù)及血片染色均無不良影響。2草酸鉀。奪取血游離鈣形成不溶解草酸鈣而起抗凝作用。配成10%溶液,取0.1毫升于試管中烘干,可抗凝5毫升血液。優(yōu)點是抗凝作用強,缺點是能使紅細胞體積縮小6%,故不宜于PCV測定。3雙草酸鹽合劑。草酸鉀0.8克,草酸銨1.2克,加蒸餾水至100毫升,取此液0.5毫升于試管烘干,可抗凝5毫升血液。草酸銨可使紅細胞腫脹,抵消草酸鉀缺點。4檸檬酸鈉:和血游離鈣結合成松散檸檬酸鈣。配成3.8%溶液,取此液0.5毫升可抗凝5毫升血液.用于血沉及輸血時抗凝劑,不宜于血液化學檢驗。5肝素。抗凝血作用。配成1%溶液,取此液0.1毫升可抗凝5毫升血液。不宜作纖維蛋白原測定。(三)血沉測定。紅細胞沉降速度或稱血沉,是指將抗凝血裝入特制玻璃管中,在一定時間內,觀察下降毫米數(shù)。1原理:紅細胞表面、白蛋白帶負電荷,球蛋白、纖維蛋白帶正電荷。電荷多少對血沉起著關鍵起決定作用。2方法:有魏氏法、涅氏法、溫氏法、潘氏法、傾斜法和微量等。獸醫(yī)臨床常見魏氏法、涅氏法。匯報宜標明是哪種方法。(1)魏氏法。魏氏管200刻度,全長30厘米,帶刻度處20厘米。①3.8%檸檬酸溶液1毫升和4毫升血液混合。②吸上述抗凝血至血沉管,到0刻度為準。③室溫靜置在15、30、45和60分四個時段觀察紅細胞沉降毫米數(shù)。(2)涅氏法。①涅氏管加10%EDTA4滴,再加血至0刻度處,混合。②室溫靜置,于15、30、45和60分四個時段觀察紅細胞沉降數(shù)值。3意義。(1)血沉加緊。貧血、發(fā)燒病、感染性疾病、化膿、組織損傷、白蛋白丟失、風濕。(2)血沉減慢。脫水。(四)紅細胞壓積(packedcellvolume)測定。1溫氏管,長110mm,分為10個大刻度,100個小刻度;長15cm充液長針頭;水平電動離心機。2用充液長針取10%EDTA抗凝血于溫氏管10刻度,以3000rpm離心30分鐘。3讀取紅細胞柱高度。通常值在30%-40%之間。(五)血紅蛋白(hemoglobin)測定1沙利氏比色法。(1)原理。血液和鹽酸作用后,變?yōu)楹稚哞F血紅蛋白,和標準色柱相比,求出每百毫升血中蛋白克數(shù)。(2)器材和試劑。沙利氏血蛋白計,0.1mol/L或1%鹽酸。(3)方法。在沙氏比色管加0.1mol/L或1%鹽酸至刻度10或20處。用沙氏吸管吸血至20刻度處,加到鹽酸液,反復沖洗混勻,靜置10分鐘,緩緩加入蒸餾水,直至和標準色柱相同為止。液體凹面讀數(shù),即為血紅蛋白克數(shù)。通常100毫升血液含9-12克血紅蛋白。2光電比色法。3試紙法。(六)紅細胞計數(shù)1原理。血液按倍比稀釋,計數(shù)一定容積內紅細胞數(shù)并換算成每微升或立方毫米內數(shù)目。計數(shù)板也可用于白細胞和血小板計數(shù)。兩個計數(shù)室,每個計數(shù)室9個大方格,大方格邊長1mm。四角大方格又分為16個中方格,用白細胞計數(shù)。中央大方格用于紅細胞計數(shù),由25個中方格組成,每個中方格又由16個小方格組成。計對角線5個中方格即80個方格內紅細胞即可(或東西南北中五個中方格)。2器材及試劑。計數(shù)板、血蓋片、沙利氏吸血管或紅細胞稀釋管、生理鹽水或赫姆氏液。3方法。(1)試管稀釋法。5ml吸管吸收紅細胞稀釋液3.98ml于試管。沙氏吸血管吸收全血樣品至20刻度處,和上述稀釋液混勻,再用毛細吸管吸收放于計數(shù)板計數(shù)。(2)紅細胞吸管稀釋法。紅細胞吸管吸全血至刻度0.5處,再吸稀釋液至刻度101處,食、拇指堵住上下端,混勻后先棄數(shù)滴,靜置幾分鐘后計數(shù)。(3)先低倍鏡,后高倍鏡,數(shù)左不數(shù)右,數(shù)上不數(shù)下。五個中方格,一個中方格含16個小方格,累計80個小方格。(4)呈圓形、淡黃色、發(fā)亮。(5)每立方毫米紅細胞數(shù)公式:5X.200.10=10000X(七)白細胞計數(shù)1原理。一定量血液用冰醋酸稀釋后,可將紅細胞破壞,然后在計數(shù)室內計數(shù)一定容積白細胞數(shù),再推算出每毫升血液內白細胞數(shù)。2器材和試劑。血細胞計數(shù)板,沙利氏吸血管,0.5或1ml刻度吸管,小試管,顯微鏡,白細胞稀釋液等。3方法(1)試管稀釋法:1ml吸管吸收白細胞稀釋液0.38ml于試管。沙氏吸血管吸收全血樣品至20刻度處,和上述稀釋液混勻,再用毛細吸管吸收放于計數(shù)板計數(shù)。(2)白細胞吸管稀釋法:白細胞吸管吸全血至刻度0.5處,再吸稀釋液至刻度11處,食、拇指堵住上下端,混勻后先棄數(shù)滴,靜置幾分鐘后計數(shù)。(3)用低倍鏡計數(shù)四角大方格白細胞,用公式計算每立方毫米白細胞數(shù)。公為10.20.X\4=50X(10為體積倍數(shù),20為稀釋倍數(shù),X\4為每角白細胞數(shù))。4意義。(1)增多。大多細菌感染,組織急性炎癥,注射血清疫苗,大出血,急性溶血。(2)降低。病毒性感染,如豬瘟、流感、馬傳貧;再障、嚴重感染、高度衰竭、內毒素性休克、應用氯霉素。(八)白細胞分類計數(shù)1血片制作。(1)潔凈脫脂兩玻片,一載一推。(2)耳尖血一滴于玻片一端。(3)推片于血滴前,向后輕拖血滴擴散,再向前30度推成均勻血膜,自然干燥。2血片染色。(1)染液配制。瑞染粉0.1克,甲醇60毫升。(2)緩液配制。1%磷酸二氫鈉30.01%磷酸氫二鈉20.0蒸餾水加至1000.0(3)染色過程①③④蠟筆血膜兩端劃線,放于支持架上。②加染液1-2分鐘,再加緩沖液,3-5分鐘后,水或蒸餾水沖洗。③自然干燥后鏡檢。3鏡檢計數(shù)。(1)先低倍后油鏡。按一定方向曲折移動分類計數(shù),總數(shù)不低于100個。(2)嗜堿性白細胞特點。圓形或橢圓形,胞漿中呈深紫色較小顆粒。(3)嗜酸性白細胞特點。圓形或橢圓形,胞漿中有較大呈鮮紅色顆粒。(4)嗜中性白細胞特點。圓形或橢圓形,胞漿中有圓形或橢圓形,呈淡玫瑰色小顆粒。依據(jù)細胞核形態(tài)分為髓細胞、幼稚型、桿狀型和分葉型核細胞。(5)淋巴細胞特點。圓形,核呈深藍紫色、圓形、致密、常偏位。胞漿呈天藍色。(6)大單核細胞,大,呈不正、多邊、多角形,胞漿呈煙灰色、較暗,核呈紫褐色、近似橢圓或不正形。4臨床意義。白細胞數(shù)在生理或病理情況下均可發(fā)生改變,因為外周血中細胞組成關鍵是中性粒細胞和淋巴細胞,尤其是中性粒細胞數(shù)量最多,約占白細胞50%。故在大多情況下,白細胞增多或降低,關鍵受中性粒細胞影響。所以,白細胞增多或降低通常和中性粒細胞增多或降低有著親密關系和相同意義。各類白細胞改變臨床意義分述以下。(1)中性粒細胞。多種粒細胞均起源于骨髓多能干細胞.粒細胞含有較強運動能力、吞噬活性和復雜殺菌系統(tǒng),憑借其滲透性、變形性、趨化性及吞噬功效等生理特征而捕捉、殺滅組織中、體腔內或血液中病原體,對機體相關鍵保護作用。當病原微生物侵入機體引發(fā)局部炎癥時,中性粒細胞經(jīng)過變形運動,從血管內皮細胞間游出,趨向炎癥區(qū),將入侵病原體或壞死細胞吞噬,并經(jīng)過細胞內溶酶體釋放蛋白水解酶將其消化,預防病原微生物在體內擴散。中性粒細胞增多。見于急性感染或炎癥,如化膿性胸膜炎、化膿性腹膜炎、創(chuàng)傷性心包炎、肺膿腫、胃腸炎、肺炎、子宮炎、乳房炎等,一些傳染病如炭疸、豬丹毒等,一些慢性傳染病如鼻疽、結核,和大手術后、外傷、酸中毒前期、燙傷等。核左移伴有白細胞總數(shù)增高,稱為再生性左移,表示機體反應性強,骨髓造血功效旺盛,能釋放大量粒細胞至外周血,常見于感染,尤其是化膿菌引發(fā)急性感染,也可見于急性中毒、急性溶血、急性失血等。僅核左移對病性嚴重程度和機體反應能力估量含有一定價值。如白細胞總數(shù)和中性粒細胞百分數(shù)略增高,并核左移,表示感染程度較輕、機體抵御力強;但核左移而白細胞總數(shù)不增高,甚至降低者,稱為退行性左移。在再生障礙性貧血等病理狀態(tài)下,表示骨髓造血功效減低,粒細胞成熟受阻,嚴重感染如敗血癥時可出現(xiàn)這一現(xiàn)象,表示機體反應性低下,骨髓釋放粒細胞功效受抑制。核右移關鍵見于重度貧血和應用抗代謝藥品診療后及感染恢復期,但在疾病進展期出現(xiàn)中性粒細胞核右移改變,則提醒預后不良。中性粒細胞降低。白細胞總數(shù)降低時其關鍵是中性粒細胞降低,引發(fā)中性粒細胞降低病因很多,關鍵見于病毒感染性疾病、再生障礙性貧血、缺鐵性貧血、骨髓轉移癌、放射線、放射性核素,化學藥品等均可引發(fā)。(2)嗜酸性粒細胞。嗜酸性粒細胞亦含有吞噬作用和變形運動,因細胞內顆粒不含有溶菌酶、吞噬細胞素,而含較多過氧化物酶和堿性蛋白,故殺菌力遠不如中性粒細胞。它能吞噬抗原抗體復合物。對組胺、抗原抗體復合物、肥大細胞釋放嗜酸粒細胞趨化因子等多個物質有趨化性,并分泌組胺酶滅活組胺,減輕一些過敏反應。當寄生蟲病或一些過敏癥時,組織中肥大細胞增多,血中組胺濃度升高,刺激骨髓釋放或生成嗜酸性粒細胞能力加強,造成血液中嗜酸性粒細胞增多;若用腎上腺皮質激素進行診療、過敏反應消失時,嗜酸性粒細胞也降低。嗜酸性粒細胞增多。關鍵見于變態(tài)反應性疾?。ㄈ邕^敏反應)、寄生蟲?。ㄈ绺纹x、球蟲、旋毛蟲病等)、皮膚?。ㄈ鐫裾?、疥癬等)和注射血清以后和一些惡性腫瘤等。嗜酸性粒細胞降低。見于毒血癥、尿毒癥、嚴重創(chuàng)傷、中毒、饑餓及過勞等。大手術后,嗜酸性粒細胞常常消失,幾天后又常常急劇增多,臨床癥狀也見好轉。在長久應用腎上腺皮質激素后也可出現(xiàn)嗜酸性粒細胞降低。(3)嗜堿性粒細胞是一個少見粒細胞,其生理功效中突出特點是參與超敏反應。嗜堿性粒細胞增多和降低,此種情況比較少見,在外周血中原來不易見到,故其降低無臨床意義。(4)淋巴細胞源于骨髓適血干細胞,其數(shù)量較多,約占白細胞總數(shù)四分之一。淋巴細胞不是一個終未細胞,而是一個不活躍處于靜止期細胞。它含有和抗原起特異反應能力,是關鍵免疫活性細胞。淋巴細胞因發(fā)育和成熟路徑不一樣,可分為胸腺依靠淋巴細胞和骨髓依靠細胞兩種類型,即T淋巴細胞和B淋巴細胞,它們之間又有效應細胞和記憶細胞之分。淋巴細胞增多。見于一些感染性疾病,關鍵是病毒感染如豬瘟、流行性感冒,也可見于一些細菌感染如結核桿菌、布氏桿菌和血孢子蟲病等。淋巴細胞降低。當嗜中性白細胞絕對值增多,伴隨降低常常是淋巴細胞,說明機體和病原處于猛烈斗爭階段,以后淋巴細胞由少逐步增多,常為預后良好象征。(5)單核細胞。誘導免疫反應。經(jīng)過吞飲或吞噬可溶性抗原和顆粒性抗原,在溶體酶作用下將抗原分解,然后經(jīng)過遞質、將抗原提供給淋巴細胞,以激活淋巴細胞在特異性免疫中起關鍵作用。吞噬和殺滅一些病原體。吞噬紅細胞和消除損傷組織及死亡細胞。關鍵處理衰老或異常紅細胞和清理炎癥反應場所。抗腫瘤活性。試驗證實激活巨噬細胞在體外對腫瘤細胞生長有抑制作用,也有殺滅腫瘤細胞能力。對白細胞生成調整。單核細胞和吞噬細胞可產(chǎn)生集落刺激因子,在單核細胞和中性粒細胞生成中可能起反饋性調整作用。單核細胞增多,見于一些原蟲性疾病如焦蟲病、錐蟲病,一些慢性細菌性疾病如結核、布氏桿菌病和一些病毒性疾病如馬傳染性貧血等。單核細胞降低,關鍵見于急性傳染病早期和多種疫病垂危期。七、思索題紅細胞常規(guī)檢驗包含哪些內容?八、試驗匯報 要求學生作好試驗預習、試驗統(tǒng)計和試驗匯報。在正式試驗前先作試驗預習,并以書面形式交于試驗指導老師,檢驗可行后方能作正式試驗。試驗過程中對試驗相關內容及步驟作具體統(tǒng)計。試驗完成后填寫試驗匯報,交由指導老師批閱。試驗八:現(xiàn)場病例診療分析試驗課時:4試驗類型:綜合試驗要求:必修一、試驗目標 經(jīng)過本單位動物醫(yī)院應診病例(牛、羊、馬、豬、犬等不限)診療,使學生對臨床病例有一定初步診療、分析和診療能力。二、試驗內容 現(xiàn)場病例診療、分析。三、試驗原理、

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