基因工程-【新題速遞】2023屆高三生物模擬試卷分類匯編（全國(guó)卷區(qū)）

專題18基因工程

12.(2023屆陜西省西安市蓮湖區(qū)高三上學(xué)期第一次調(diào)研模擬生物試題)丙型肝炎病毒

(HCV)是一種RNA病毒，可使人患肝炎。實(shí)驗(yàn)小組為了研究基因工程菌的口服接種免疫

預(yù)防效果，初步觀察了經(jīng)口服途徑接種以pMAL為質(zhì)粒構(gòu)建的含HCV基因重組質(zhì)粒的大腸

桿菌后小鼠體內(nèi)的免疫反應(yīng)，回答下列問題：

(1)實(shí)驗(yàn)室獲得HCV基因時(shí)要先獲得HCV的遺傳物質(zhì)，然后在酶的作用下合成DNA

分子，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要用同種限制酶切割質(zhì)粒分子和含目的基因的DNA片段，其目的

是。

(2)導(dǎo)入小鼠體細(xì)胞內(nèi)的HCV基因需要依次經(jīng)過兩個(gè)過程合成抗原蛋白，檢測(cè)小鼠

體內(nèi)是否產(chǎn)生相應(yīng)抗體的方法是。

(3)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，要用Ca2+處理大腸桿菌制備細(xì)胞，以使細(xì)胞處于

一種的生理狀態(tài)。

(4)為檢測(cè)基因工程菌的口服接種的免疫預(yù)防效果，該小組設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)組為口服適量的

，該實(shí)驗(yàn)還需要另外設(shè)計(jì)兩組對(duì)照組，分別為：對(duì)照組①為;對(duì)照組②為口服等

量的蒸儲(chǔ)水。

【答案】(1)①.逆轉(zhuǎn)錄②.使質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段產(chǎn)生相同的黏性末

端

(2)①.轉(zhuǎn)錄和翻譯②.抗原一抗體雜交法

(3)①.感受態(tài)②.能吸收周圍環(huán)境中DNA分子

(4)①.以pMAL為質(zhì)粒構(gòu)建的含HCV基因重組質(zhì)粒的大腸桿菌②.口服等量的

含pMAL質(zhì)粒的大腸桿菌

【解析】

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：

(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)了、

終止子和標(biāo)記基因等。

(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否

插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗

病鑒定、活性鑒定等。

【小問1詳解】

丙型肝炎病毒（HCV）是一種RNA病毒，其遺傳物質(zhì)是RNA,實(shí)驗(yàn)過程中選用的是與其

RNA對(duì)應(yīng)的相關(guān)DNA片段，因此，實(shí)驗(yàn)室獲得HCV基因時(shí)要先獲得HCV的遺傳物質(zhì)，

然后在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成DNA分子，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要用同種限制酶切割質(zhì)粒分

子和含目的基因的DNA片段，這樣可以使質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段產(chǎn)生相同的黏性

末端，進(jìn)而能夠?qū)崿F(xiàn)連接。

【小問2詳解】

基因能控制蛋白質(zhì)的生物合成，需要經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過程，因此，導(dǎo)入小鼠體細(xì)胞內(nèi)的

HCV基因需要依次經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過程合成抗原蛋白，檢測(cè)小鼠體內(nèi)是否產(chǎn)生相應(yīng)抗

體，即是否有相應(yīng)的抗體蛋白可用的檢測(cè)方法是抗原一抗體雜交法，若出現(xiàn)雜交帶，則說明

實(shí)驗(yàn)成功。

【小問3詳解】

將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，為了提高轉(zhuǎn)化率，要用Ca2+處理大腸桿菌使其成為感受態(tài)細(xì)

胞，感受態(tài)細(xì)胞容易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子，即感受態(tài)細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境

中DNA分子的生理狀態(tài)，保證目的基因的成功導(dǎo)入。

【小問4詳解】

為檢測(cè)基因工程菌的口服接種的免疫預(yù)防效果，該小組設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)組為口服適量的含有以

pMAL為質(zhì)粒構(gòu)建的含HCV基因重組質(zhì)粒的大腸桿菌，該實(shí)驗(yàn)還需要另外設(shè)計(jì)兩組對(duì)照組,

分別為：對(duì)照組①為口服等量的含pMAL質(zhì)粒的大腸桿菌；對(duì)照組②為口服等量的蒸儲(chǔ)水,

前者是為了排除含有正常質(zhì)粒的大腸桿菌的作用，后者是為了排除實(shí)驗(yàn)本身的作用，若實(shí)驗(yàn)

組小鼠相應(yīng)的抗體含量高，則說明該工程菌有較好的免疫效果。

【點(diǎn)睛】熟知基因工程的原理和操作流程是解答本題的關(guān)鍵，明確實(shí)驗(yàn)的目的是解答本題

的前提，掌握基因工程在實(shí)踐中的應(yīng)用是解答本題的另一關(guān)鍵。

3.（2023屆陜西省西安市臨潼區(qū)高三上學(xué)期第一次調(diào)研模擬生物試題）下列有關(guān)質(zhì)粒的敘

述，不正確的是（）

A.質(zhì)粒分子中含有A、U、G、C四種堿基

B.質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體

C.某些真核細(xì)胞中也有質(zhì)粒

D.質(zhì)粒中的每個(gè)五碳糖都與兩個(gè)磷酸基團(tuán)相連接

【答案】A

【解析】

【分析】質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的

雙鏈環(huán)狀DNA分子。常用作基因工程的運(yùn)載體。

【詳解】A、質(zhì)粒的本質(zhì)是DNA,不含U,A錯(cuò)誤；

B、基因工程常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒，B正確；

C、某些真核生物也有質(zhì)粒，如酵母菌，C正確；

D、質(zhì)粒是環(huán)狀DNA構(gòu)成的，DNA中每個(gè)五碳糖都與兩個(gè)磷酸基團(tuán)相連接，D正確。

故選Ao

12.（2023屆陜西省西安市臨潼區(qū)高三上學(xué)期第一次調(diào)研模擬生物試題）丙型肝炎病毒

（HCV）是一種RNA病毒，可使人患肝炎。實(shí)驗(yàn)小組為了研究基因工程菌的口服接種免疫

預(yù)防效果，初步觀察了經(jīng)口服途徑接種以pMAL為質(zhì)粒構(gòu)建的含HCV基因重組質(zhì)粒的大腸

桿菌后小鼠體內(nèi)的免疫反應(yīng)，回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)室獲得HCV基因時(shí)要先獲得HCV的遺傳物質(zhì)，然后在酶的作用下合成DNA

分子，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要用同種限制酶切割質(zhì)粒分子和含目的基因的DNA片段，其目的

是。

（2）導(dǎo)入小鼠體細(xì)胞內(nèi)的HCV基因需要依次經(jīng)過兩個(gè)過程合成抗原蛋白，檢測(cè)小鼠

體內(nèi)是否產(chǎn)生相應(yīng)抗體的方法是。

（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，要用Ca2+處理大腸桿菌制備細(xì)胞，以使細(xì)胞處于

一種的生理狀態(tài)。

（4）為檢測(cè)基因工程菌的口服接種的免疫預(yù)防效果，該小組設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)組為口服適量的

，該實(shí)驗(yàn)還需要另外設(shè)計(jì)兩組對(duì)照組，分別為：對(duì)照組①為;對(duì)照組②為口服等

量的蒸儲(chǔ)水。

【答案】（1）①.逆轉(zhuǎn)錄②.使質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段產(chǎn)生相同的黏性末

端

（2）①.轉(zhuǎn)錄和翻譯②.抗原一抗體雜交法

（3）①.感受態(tài)②.能吸收周圍環(huán)境中DNA分子

(4)①.以pMAL為質(zhì)粒構(gòu)建的含HCV基因重組質(zhì)粒的大腸桿菌②.口服等量的

含pMAL質(zhì)粒的大腸桿菌

【解析】

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：

(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、

終止子和標(biāo)記基因等。

(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>

入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最

有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否

插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)-抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗

病鑒定、活性鑒定等。

【小問1詳解】

丙型肝炎病毒(HCV)是一種RNA病毒，其遺傳物質(zhì)是RNA,實(shí)驗(yàn)過程中選用的是與其

RNA對(duì)應(yīng)的相關(guān)DNA片段，因此，實(shí)驗(yàn)室獲得HCV基因時(shí)要先獲得HCV的遺傳物質(zhì)，

然后在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成DNA分子，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要用同種限制酶切割質(zhì)粒分

子和含目的基因的DNA片段，這樣可以使質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段產(chǎn)生相同的黏性

末端，進(jìn)而能夠?qū)崿F(xiàn)連接。

【小問2詳解】

基因能控制蛋白質(zhì)的生物合成，需要經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過程，因此，導(dǎo)入小鼠體細(xì)胞內(nèi)的

HCV基因需要依次經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過程合成抗原蛋白，檢測(cè)小鼠體內(nèi)是否產(chǎn)生相應(yīng)抗

體，即是否有相應(yīng)的抗體蛋白可用的檢測(cè)方法是抗原一抗體雜交法，若出現(xiàn)雜交帶，則說明

實(shí)驗(yàn)成功。

【小問3詳解】

將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，為了提高轉(zhuǎn)化率，要用Ca2+處理大腸桿菌使其成為感受態(tài)細(xì)

胞，感受態(tài)細(xì)胞容易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子，即感受態(tài)細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境

中DNA分子的生理狀態(tài)，保證目的基因的成功導(dǎo)入。

【小問4詳解】

為檢測(cè)基因工程菌的口服接種的免疫預(yù)防效果，該小組設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)組為口服適量的含有以

pMAL為質(zhì)粒構(gòu)建的含HCV基因重組質(zhì)粒的大腸桿菌，該實(shí)驗(yàn)還需要另外設(shè)計(jì)兩組對(duì)照組,

分別為：對(duì)照組①為口服等量的含pMAL質(zhì)粒的大腸桿菌：對(duì)照組②為口服等量的蒸儲(chǔ)水,

前者是為了排除含有正常質(zhì)粒的大腸桿菌的作用，后者是為了排除實(shí)驗(yàn)本身的作用，若實(shí)驗(yàn)

組小鼠相應(yīng)的抗體含量高，則說明該工程菌有較好的免疫效果。

【點(diǎn)睛】熟知基因工程的原理和操作流程是解答本題的關(guān)鍵，明確實(shí)驗(yàn)的目的是解答本題

的前提，掌握基因工程在實(shí)踐中的應(yīng)用是解答本題的另一關(guān)鍵。

12.（023屆陜西省西安市未央?yún)^(qū)2高三上學(xué)期第一次調(diào)研模擬生物試題）疫苗接種是當(dāng)前

新冠肺炎疫情防控工作的一項(xiàng)重要舉措。重組腺病毒疫苗研發(fā)策略是:將新冠病毒的S蛋白

基因整合到腺病毒DNA中，形成表達(dá)S蛋白的重組腺病毒，注射到健康人體內(nèi)，腺病毒可

侵染人體細(xì)胞，達(dá)到預(yù)防新冠病毒感染的效果?；卮鹣铝袉栴}。

左臂

熬鸚

??無：質(zhì)粒1和質(zhì)粒2的左臂

和右臂之間的片段互換

（1）由于腺病毒DNA分子較大，需采取圖所示方法獲得重組腺病毒DNA。即：將質(zhì)粒1

和質(zhì)粒2共同導(dǎo)入受體細(xì)胞中，最終重組在線性DNA分子上，據(jù)圖推測(cè)，X所示的原件應(yīng)

該為。

（2）將上述重組線性DNA分子（不編碼病毒復(fù)制必需EI蛋白）導(dǎo)入到能表達(dá)人體細(xì)胞沒

有的E1蛋白的細(xì)胞系，最終包裝成完整的腺病毒。這種方式生產(chǎn)的疫苗由于重組腺病毒

,從而提高了疫苗的安全性。

（3）重組腺病毒疫苗（填"含有”或"不含有”）有活性的病毒。注射進(jìn)入人體后可經(jīng)過

（填“轉(zhuǎn)錄”“翻譯”或“轉(zhuǎn)錄及翻譯”）產(chǎn)生相應(yīng)蛋白發(fā)揮抗原作用。人體接種該疫苗

后，免疫系統(tǒng)會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體及記憶細(xì)胞，后者在新型冠狀病毒進(jìn)入人體時(shí)，可迅速

,引發(fā)強(qiáng)烈特異性免疫反應(yīng)。

（4）為了檢測(cè)疫苗的效果，科學(xué)家用不同方式給雪貂接種重組腺病毒疫苗后，感染新冠病

毒。一段時(shí)間后檢測(cè)新冠病毒含量，結(jié)果如下，說明重組腺病毒疫苗,且效果

最好的免疫方式是______________________

?滴鼻和口服

新■肌肉注射

冠▲▲對(duì)照

病

毒

相

對(duì)2"m

含

量nfll門贈(zèng)gon

4610

新冠病毒免疫后時(shí)間慶）

【答案】（1）Kan抗性基因

（2）（不編碼E1蛋白從而）不能在人體細(xì)胞中復(fù)制

（3）①.含有②.轉(zhuǎn)錄及翻譯③.增殖與分化

（4）①.能有效抑制新冠病毒的復(fù)制②.滴鼻和口服

【解析】

【分析】1、根據(jù)重組腺病毒疫苗研發(fā)圖可知，獲得重組線性DNA分子是通過質(zhì)粒1與質(zhì)

粒2的左臂和右臂之間的片段互換實(shí)現(xiàn)的，故可知質(zhì)粒2的左臂與右臂之間含S基因的片段

代替了質(zhì)粒1左臂與右臂之間的Amp抗性基因，故對(duì)應(yīng)重組線性DNA分子中的X為Kan

抗性基因。

2、分析柱狀圖可知，通過給雪貂滴鼻和口服、肌肉注射兩種方式接種重組腺病毒疫苗的結(jié)

果，與對(duì)照組比較，均能夠使雪貂產(chǎn)生對(duì)新冠病毒的免疫能力；題圖中顯示，滴鼻和口服組

的新冠病毒相對(duì)含量始終最低，說明該免疫方式效果最好。

【小問1詳解】

根據(jù)以上分析可知，圖示方法獲得重組腺病毒DNA將質(zhì)粒1和質(zhì)粒2共同導(dǎo)入受體細(xì)胞中,

通過質(zhì)粒1與質(zhì)粒2的左臂和右臂之間的片段互換實(shí)現(xiàn)的，故可知質(zhì)粒2的左臂與右臂之間

含S基因的片段代替了質(zhì)粒1左臂與右臂之間的Amp抗性基因，故對(duì)?應(yīng)重組線性DNA分子

中的X為Kan抗性基因。

【小問2詳解】

根據(jù)題意可知，重組線性DNA分子中不含病毒復(fù)制必需的E1蛋白基因，人體細(xì)胞中也不

含有E1蛋白，而作為載體的293細(xì)胞系中能夠表達(dá)E1蛋白，故將這樣獲得的重組腺病毒

疫苗，能夠在載體中進(jìn)行復(fù)制，誘導(dǎo)刺激人體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，但無法在人體的宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)

制，提高了疫苗的安全性。

【小問3詳解】

根據(jù)“腺病毒可侵染人體細(xì)胞”可知，該疫苗含有活性病毒。重組腺病毒疫苗含有病毒的S蛋

白基因，因此注射進(jìn)入人體后可經(jīng)過轉(zhuǎn)錄及翻譯過程產(chǎn)生S蛋白發(fā)揮抗原作用。記憶細(xì)胞再

次遇到相同抗原時(shí)，會(huì)迅速增殖與分化，引發(fā)強(qiáng)烈特異性免疫反應(yīng)。

【小問4詳解】

分析題圖可知，通過滴鼻和口服、肌肉注射兩種方式接種重組腺病毒疫苗的雪貂對(duì)比對(duì)照組,

均能夠使雪貂產(chǎn)生對(duì)新冠病毒的免疫能力;且題圖中顯示滴鼻和口服組的新冠病毒相對(duì)含量

始終最低，說明該免疫方式效果最好。

【點(diǎn)睛】本題以新冠病毒疫苗的制備為背景考查基因工程和免疫的知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生識(shí)記基

因表達(dá)載體的構(gòu)建和組成，能夠正確識(shí)圖判斷獲得重組腺病毒的圖示中的信息，結(jié)合所學(xué)的

知識(shí)點(diǎn)解決問題；把握病毒的結(jié)構(gòu)組成和特點(diǎn)以及疫苗的作用，能夠分析柱狀圖獲取有效信

息，進(jìn)而用準(zhǔn)確的語言表述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，考查了學(xué)生分析和語言的表述能力。

12.（2023屆陜西省西安市雁塔區(qū)高三上學(xué)期第一次調(diào)研模擬生物試題）反義RNA可以抑

制特定基因的表達(dá)，反義RNA技術(shù)可用于分析或鑒定植物基因的功能。實(shí)驗(yàn)小組將番茄的

pTOM5基因通過特殊的農(nóng)桿菌反向?qū)敕鸭?xì)胞中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)番茄果實(shí)呈黃色，原因是類

胡蘿卜素的合成受阻。反義RNA技術(shù)的原理如圖所示，回答下列問題：

煙草病毒基因

---

廠》重組病毒載

轉(zhuǎn)錄一

體TRV2

剪切-JQ]

導(dǎo)人]小分子RNAmRNA切割酶

忑茄細(xì)胞mRNA降解與靶基因mRN蟀5

特殊農(nóng)桿菌

（1）基因工程中通常采用技術(shù)體外擴(kuò)增pTOM5基因。將pTOM5基因和煙草病

毒載體構(gòu)建重組載體時(shí)需要的酶是,將重組病毒載體TRV2導(dǎo)入農(nóng)桿菌前要用

Ca2+處理農(nóng)桿菌，其目的是。

(2)在基因工程中，轉(zhuǎn)化是指。普通農(nóng)桿菌能將自身Ti質(zhì)粒的T-DNA片段插入

宿主細(xì)胞的染色體的DNA上。據(jù)圖可知，特殊農(nóng)桿菌與普通農(nóng)桿菌的區(qū)別在于。

(3)據(jù)圖可知，反義RNA技術(shù)可抑制pTOM5基因表達(dá)的過程，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

可知，pT0M5基因控制合成的產(chǎn)物可能是。

【答案】(1)①.PCR②.限制酶和DNA連接酶③.使農(nóng)桿菌處于易于接受外

源DNA分子的感受態(tài)

(2)①.目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程②.

無須將目的基因整合到T-DNA上，而直接將外源基因的重組病毒載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，同時(shí)

不會(huì)轉(zhuǎn)入Ti質(zhì)粒

(3)①.翻譯②.控制類胡蘿卜素合成的酶

【解析】

【分析】分析圖示可知，重組病毒載體TRV2在番茄細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄形成的小分子RNA可與靶

基因mRNA結(jié)合，而后被mRNA切割酶識(shí)別并被切割后降解，使靶基因mRNA不能翻譯

形成蛋白質(zhì)。

【小問1詳解】

體外擴(kuò)增目的基因常用PCR技術(shù)，因此基因工程中通常采用PCR技術(shù)體外擴(kuò)增pTOM5基

因。構(gòu)建重組載體時(shí)需要用限制酶和DNA連接酶。將重組病毒載體TRV2導(dǎo)入農(nóng)桿菌前要

用Ca2+處理農(nóng)桿菌，其目的是使農(nóng)桿菌處于易于接受外源DNA分子的感受態(tài)。

【小問2詳解】

在基因工程中，轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過

程。據(jù)圖可知，特殊農(nóng)桿菌無須將目的基因整合到T-DNA上，而直接將外源基因的重組病

毒載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，同時(shí)不會(huì)轉(zhuǎn)入Ti質(zhì)粒。而普通農(nóng)桿菌需要將目的基因與質(zhì)粒連接，

并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化使質(zhì)粒進(jìn)入植物細(xì)胞。

【小問3詳解】

根據(jù)分析可知，反義RNA技術(shù)使靶基因mRNA被降解，因此該技術(shù)抑制了pT0M5基因表

達(dá)的翻譯過程。根據(jù)題意“將番茄的pTOM5基因通過特殊的農(nóng)桿菌反向?qū)敕鸭?xì)胞中，

結(jié)果發(fā)現(xiàn)番茄果實(shí)呈黃色，原因是類胡蘿卜素的合成受阻“，可知PT0M5基因控制合成的

產(chǎn)物可能是控制類胡蘿卜素合成的酶，該酶能催化類胡蘿卜素的合成。

【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生從圖中獲取反義RNA作用原理的信

息。

30.（2023屆陜西省咸陽市武功縣高三第一次質(zhì)量檢測(cè)生物試題）下圖為“乙肝基因工程疫

苗''生產(chǎn)過程圖解，質(zhì)粒上箭頭所指部位為相應(yīng)的限制酶的切割位點(diǎn)。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼

產(chǎn)生的酶可以分解培養(yǎng)基中的X-gal,產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。

請(qǐng)回答下列問題：

③

導(dǎo)入大腸桿菌—乙肝病毒外殼

回答下列問題。

（1）過程①選用限制酶的最佳方案是。

A.EcoRV和EcoRI

B.BamHI和EcoRI

C.EcoRV和BamHI

D.只有BamHI

（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是

（3）過程②需要先將大腸桿菌用處理，目的是使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中

的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為。

（4）為了篩選含目的基因表達(dá)載體的大腸桿菌，可在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中額外加

入和，培養(yǎng)一段時(shí)間后挑選出（填“藍(lán)色”或“白色”）的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)，

從而獲得大量目的菌。

（5）目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，常用技術(shù)檢測(cè)目的基因是否翻譯出乙肝病毒外殼。

【答案】（1）B（2）RNA聚合醐識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

（3）?.Ca2+②.感受態(tài)細(xì)胞

（4）①.青霉素X-gal③.白色

（5）抗原一抗體雜交

【解析】

【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用

PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)

載體包括目的基因、啟動(dòng)了、終止了?和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受

體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【小問1詳解】

據(jù)圖可知，酶切目的基因，可以選擇BamHI和EcoRI、BamHI和EcoRV、EcoR1和氏oR

V這些兩種能組合，酶切質(zhì)粒載體，可以選擇BamH［和EcoRI,不能含有EcoRV,否則

會(huì)破壞青霉素抗性基因，影響篩選，因此該過程中獲取目的基因最好使用的限制性內(nèi)切核酸

酶是BamHI和EcoRI?故選B。

【小問2詳解】

構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間，其中啟動(dòng)子的作用是RNA

聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNAo

【小問3詳解】

將目的基因?qū)氪竽c桿菌（微生物細(xì)胞）需要鈣離子進(jìn)行處理，目的是使其處于感受態(tài)，能

吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。

【小問4詳解】

轉(zhuǎn)基因成功的大腸桿菌內(nèi)含有青霉素抗性基因且lacZ基因被破壞，因此需要在培養(yǎng)基中加

入青霉素和X-gal；無lacZ基因，則菌落呈白色，有青霉素抗性基因，則在含青霉素的培養(yǎng)

基中能存活，因此若出現(xiàn)白色菌落，則說明基因表達(dá)載體成功轉(zhuǎn)入大腸桿菌。

【小問5詳解】

抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，且基因表達(dá)的產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)，故目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞

后，常用抗原一抗體雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否翻譯出乙肝病毒外殼。

35.（陜西師范大學(xué)附中、渭北中學(xué)等2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期期初檢測(cè)生物聯(lián)考試題）

草莓芳香濃郁，營(yíng)養(yǎng)豐富。請(qǐng)回答下列與草莓栽培有關(guān)的問題。

（1）野生草壽是二倍體，通過特殊技術(shù)培育成的多倍體草慈更受大眾歡迎，這利用了多倍

體植株的（答出兩點(diǎn)）等特點(diǎn)。多倍體草莓的大量快速繁殖需要采集外植體細(xì)胞經(jīng)過

—與一過程，獲得試管苗。該技術(shù)證明了已分化的植物細(xì)胞仍具有?

（2）草莓植株感染病毒后會(huì)出現(xiàn)結(jié)實(shí)率下降，品質(zhì)變差等問題。若要恢復(fù)其品質(zhì)，可選取

植物的—進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗。此外，也可將抗病毒基因?qū)爰?xì)胞中培育出轉(zhuǎn)

基因抗病毒草再植株。為了檢測(cè)抗病毒基因是否導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因植物的組織細(xì)胞，需提取該細(xì)胞

中的（填“蛋白質(zhì)”“總RNA”或，總DNA”）與基因探針進(jìn)行分子雜交：欲從個(gè)體生物

學(xué)水平來鑒定抗病毒基因是否賦予該植物抗病特性的操作是一。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，由于細(xì)胞處于分裂狀態(tài)，可以對(duì)其進(jìn)行射線誘變處理，促使

其細(xì)胞內(nèi)發(fā)生_________再進(jìn)一步培養(yǎng)篩選獲得草莓新品種。

（4）若想利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培養(yǎng)出馬鈴薯-草莓雜種植物以提高土地的利用率,

（填“能”或“不能”）把兩個(gè)物種細(xì)胞直接融合，理由是。

【答案】（1）①.果實(shí)比較大、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量增加②.脫分化③.再分化④.

（一定的）全能性（或形成完整植株所需的全部基因）

（2）①.分生區(qū)（如莖尖）②.總DNA③.進(jìn)行抗病毒草莓的接種試驗(yàn)（用

病毒來感染該草莓，觀察其抗病性）（3）突變

（4）①.不能②.植物細(xì)胞外面有一層細(xì)胞壁，阻礙細(xì)胞間的雜交（融合）

【解析】

【分析】植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再

分化生成根、芽，最終形成植物體。

【小問1詳解】

野生草莓往往是二倍體，而人工栽培的草莓往往是通過特殊技術(shù)育成的多倍體，這利用了多

倍體植株的果實(shí)比較大、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量增加特點(diǎn)；多倍體草莓的繁殖往往是無性繁殖，即通

過使外植體細(xì)胞經(jīng)歷脫分化與再分化過程成為試管苗；該技術(shù)證明了已分化的植物細(xì)胞仍具

有（一定的）全能性。

【小問2詳解】

草莓植株感染病毒后會(huì)出現(xiàn)結(jié)果減少，品質(zhì)變劣，若要恢復(fù)其品質(zhì)，可選取植物的分生區(qū)（如

莖尖）進(jìn)行植物組織培養(yǎng)（分生區(qū)的細(xì)胞不含病毒或病毒極少），獲得脫毒苗；為了檢測(cè)抗

病毒基因是否存在于該轉(zhuǎn)基因植物的所有不同組織細(xì)胞中，則需分別提取該轉(zhuǎn)基因植物的所

有不同組織細(xì)胞中的總DNA與基因探針雜交：若出現(xiàn)雜交帶，則證明導(dǎo)入成功；欲從個(gè)體

生物學(xué)水平來鑒定抗病毒基因是否賦予該植物抗病特性的操作是:進(jìn)行抗病毒草莓的接種試

驗(yàn)。

【小問3詳解】

在植物組織培養(yǎng)過程中，由于愈傷組織細(xì)胞一直處于分生(分裂)狀態(tài)，可以對(duì)植物的愈傷

組織進(jìn)行誘變處理，促使其發(fā)生突變，再進(jìn)一步培養(yǎng)篩選獲得草莓新品種。

【小問4詳解】

若想利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培養(yǎng)出馬鈴薯一草莓雜種植物以提高土地的利用率，不能把兩

物種細(xì)胞直接融合，原因是植物細(xì)胞外面有一層細(xì)胞壁，阻礙細(xì)胞間的雜交(融合)。

26.(陜西渭南市華州區(qū)咸林中學(xué)2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期開學(xué)摸底考試生物試題)玉米

是一種重要的食品、飼料以及工業(yè)原料，在我國(guó)糧食生產(chǎn)安全中占有重要地位。高溫脅迫會(huì)

造成玉米果穗畸形生長(zhǎng)，甚至出現(xiàn)空稈無穗，導(dǎo)致產(chǎn)量降低。研究人員獲得了一個(gè)耐熱相關(guān)

基因ZmCIPKHT并轉(zhuǎn)入玉米，培育出ZmCIPKHT過量表達(dá)的耐熱玉米。回答下列問題：

(1)擴(kuò)增獲得ZmCIPKHT含有酶切位點(diǎn)的編碼區(qū)，將質(zhì)粒與ZmCIPKHT基因用BamHI和

Bell進(jìn)行雙酶切：

①采用PCR技術(shù)體外擴(kuò)增ZmCIPKHT基因時(shí)，需先根據(jù)已知一段ZmCIPKHT基因的堿基

序列設(shè)計(jì)。該技術(shù)中需要的酶是。

②采用雙酶切的優(yōu)點(diǎn)是。

③ZmCIPKHT基因過量表達(dá)的調(diào)控與其上游的序列有關(guān)。

(2)重組質(zhì)粒經(jīng)鑒定后，轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌之前，需先用處理農(nóng)桿菌，使其處

于感受態(tài)；農(nóng)桿菌可將ZmCIPKHT基因轉(zhuǎn)入到玉米細(xì)胞中的原因是o

(3)研究人員檢測(cè)了野生型玉米(WT)和轉(zhuǎn)ZmCIPKHT基因的玉米株系(OE-4,OE-6)

中ZmCIPKHT的相對(duì)表達(dá)量，并對(duì)OE-4進(jìn)行42℃高溫脅迫處理，在0,0.5、3和6h分別

取樣檢測(cè)ZmCIPKHT基因的表達(dá)量，結(jié)果如圖所示。從分子水平上檢測(cè)OE-6中是否合成

ZmCIPKHT蛋白，常用的方法是。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ZmCIPKHT對(duì)高溫脅迫

具有響應(yīng)，理由是。

40z5

35

孟30z0

M去

25M

淵L5

涉

陡20

7阱

K157L0

書K

10.V

5。5

00

WTO4O6

E-E-

【答案】（1）①.兩種引物②.熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（或Taq酶）③.防止質(zhì)

粒、目的基因自連現(xiàn)象，防止目的基因和質(zhì)粒的反向連接④.啟動(dòng)子

（2）①.Ca2+②.ZmCIPKHT基因插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA序列中，隨

T-DNA轉(zhuǎn)移到玉米細(xì)胞，并且整合到玉米細(xì)胞的染色體DNA上，

（3）①.抗原-抗體雜交②.轉(zhuǎn)ZmCIPKHT基因的植株0E-4經(jīng)高溫處理3h內(nèi)，

ZmCIPKHT基因的相對(duì)表達(dá)水平明顯升高。

【解析】

【分析】PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種脫氧核甘酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶

（Taq酶）；PCR的操作過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不

需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中

溫延伸：合成子鏈。

【小問1詳解】

①采用PCR技術(shù)體外擴(kuò)增ZmCIPKHT基因時(shí)，需先根據(jù)已知一段ZmCIPKHT基因的堿基

序列設(shè)計(jì)引物，由于DNA復(fù)制過程中兩個(gè)單鏈均作為模板進(jìn)行DNA復(fù)制過程，因此需要

設(shè)計(jì)兩種引物，從而可以完成體外DNA復(fù)制的過程。PCR過程中通過調(diào)節(jié)溫度的變化實(shí)現(xiàn)

氫鍵的斷裂、形成和子鏈的延伸過程，因此該過程需要的酶是耐高溫的DNA聚合酶，即Taq

聚。

②將質(zhì)粒與ZmCIPKHT基因進(jìn)行雙酶切的優(yōu)點(diǎn)表現(xiàn)在能保證目的基因合質(zhì)粒的正向連接，

避免質(zhì)粒和目的基因自連現(xiàn)象的發(fā)生。

③基因表達(dá)的過程需要首先通過轉(zhuǎn)錄過程，轉(zhuǎn)錄過程的啟動(dòng)需要RNA聚合酶與相關(guān)基因的

啟動(dòng)子進(jìn)行結(jié)合，據(jù)此可推測(cè)，ZmCIPKHT基因過量表達(dá)的調(diào)控與其上游的啟動(dòng)子的脫氧

核甘酸序列的改變有關(guān)。

【小問2詳解】

質(zhì)粒經(jīng)鑒定后，轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌之前，需先用Ca2+處理農(nóng)桿菌，使其處于感受態(tài)，即此時(shí)易吸

收外源DNA的狀態(tài):農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒中有T-DNA,插入其中ZmCIPKHT基因可隨著T-DNA

轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞的染色體DNA上，隨著染色體DNA的復(fù)制而復(fù)制。

【小問3詳解】

若要從分子水平上檢測(cè)0E-6中是否合成ZmCIPKHT蛋白，需要采用抗原-抗體雜交技術(shù)檢

測(cè)是否表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明隨著高溫脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，ZmCIPKHT基因的

表達(dá)水平上升，即轉(zhuǎn)ZmCIPKHT基因的植株0E-4經(jīng)高溫處理3h內(nèi)，ZmCIPKHT基因的相

對(duì)表達(dá)水平明顯升高。

9.（黑龍江省大慶鐵人中學(xué)2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期開學(xué)考試生物試題）在DNA的粗提

與鑒定實(shí)驗(yàn)中，試劑的種類、濃度和使用方法均有嚴(yán)格的規(guī)定。下列相關(guān)操作正確的是（）

A.用蒸儲(chǔ)水裂解豬的成熟紅細(xì)胞可獲得大量DNA

B.在裂解液中加入NaCl溶液并調(diào)至2moi/L,可以析出DNA

C.冷酒精加入到DNA溶液中，可降低DNA在其中的溶解度

D.高溫會(huì)使二苯胺分解，鑒定DNA時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制在室溫條件下進(jìn)行

【答案】C

【解析】

【分析】DNA的粗提取的原理是DNA在0.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低，而蛋白質(zhì)

此時(shí)的溶解度高的特點(diǎn)，可以使DNA與蛋白質(zhì)分離，形成沉淀析出，通過過濾，得到粗提

取的濾出物DNA。再利用DNA不溶于酒精，但細(xì)胞中的其他物質(zhì)可溶于酒精的特點(diǎn)，進(jìn)

一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。鑒定的原理是DNA遇:苯胺（沸水浴）成藍(lán)色的特性。

【詳解】A、豬是哺乳動(dòng)物，其血細(xì)胞中主要是紅細(xì)胞，成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核，不能提取

DNA,一般用雞血提取，A錯(cuò)誤；

B、DNA在0.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低，在裂解液中加入NaCl溶液并調(diào)至

014moi/L,可以析出DNA,B錯(cuò)誤；

C、利用DNA不溶于酒精，但細(xì)胞中的其他物質(zhì)可溶于酒精的特點(diǎn)，可將冷卻過的酒精加

入到DNA溶液中以降低DNA在其中的溶解度，C正確；

D、DNA遇二苯胺成藍(lán)色，需進(jìn)行沸水浴加熱，D錯(cuò)誤。

故選C。

10.（黑龍江省大慶鐵人中學(xué)2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期開學(xué)考試生物試題）我國(guó)科學(xué)家將

外源生長(zhǎng)激素基因?qū)膈庺~受精卵，培育出轉(zhuǎn)基因鯉魚，與對(duì)照組相比，生長(zhǎng)速度加快?？?/p>

學(xué)家介紹，外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，必須整合到受體細(xì)胞的DNA上才能發(fā)揮作用。下列

有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）

A.導(dǎo)入的是DNA分子的一段脫氧核昔酸序列

B.將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法

C.未整合到受體細(xì)胞DNA上的生長(zhǎng)激素基因也不會(huì)被DNA酶水解

D.外源基因能整合到其它生物的DNA上是因?yàn)樗鼈兊慕Y(jié)構(gòu)與組成相類似

【答案】C

【解析】

【分析】目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。題中外

源生長(zhǎng)激素基因就是目的基因。

【詳解】A、基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，DNA分子是由兩條脫氧核甘酸鏈形成雙螺旋

結(jié)構(gòu)，A正確；

B、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)，B正確；

C、未整合到受體細(xì)胞DNA上的生長(zhǎng)激素基因，會(huì)被DNA能催化水解，C錯(cuò)誤：

D、外源基因和其它生物的DNA有共同的DNA結(jié)構(gòu)：①DNA分子由兩條反向平行的脫氧

核苜酸長(zhǎng)鏈盤旋而成。②DNA分子外側(cè)是脫氧核糖和磷酸交替連接而成的基本骨架。③DNA

分子兩條鏈的內(nèi)側(cè)的堿基按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則配對(duì)，并以氫鍵互相連接，D正確。

故選Co

11.（黑龍江省大慶鐵人中學(xué)2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期開學(xué)考試生物試題）下圖1表示某

DNA片段及限制酶酶切位點(diǎn)，用限制酶XhoI和SalI分別處理該DNA片段后，酶切產(chǎn)物

電泳分離的結(jié)果如圖2所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

①②

圖1圖2

A.不同的限制酶切割DNA后形成的黏性末端可能相同

B.限制酶XhoI與限制酶SalI識(shí)別的核昔酸序列不同

C.泳道①②分別是限制酶XhoI和限制酶Sal1處理得到的產(chǎn)物

D.用限制酶XhoI和限制酶SalI同時(shí)處理該DNA片段，可得到6種電泳產(chǎn)物

【答案】C

【解析】

【分析】根據(jù)圖1可知，該DNA中含有2個(gè)XhoI酶切位點(diǎn)和3個(gè)SalI酶切位點(diǎn)。結(jié)合

圖2中，①有4種片段，②有3種片段可知，前者是Sal1前切產(chǎn)物，后者是XhoI酶切產(chǎn)

物。

【詳解】A、不同的限制酶識(shí)別的序列不同，但可能會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端，A正確；

B、結(jié)合圖1和圖2可知，限制醐XhoI與限制醐Sal［識(shí)別的核音酸序列不同，B正確；

C、由上分析可知，泳道①②分別是限制酶SalI和限制酶XhoI處理得到的產(chǎn)物，C錯(cuò)誤;

D、用限制酶XhoI和限制酶SalI同時(shí)處理該DNA片段，該片段共有5個(gè)酶切位點(diǎn)，可得

到6種電泳產(chǎn)物，D正確。

故選C。

13.（黑龍江省大慶鐵人中學(xué)2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期開學(xué)考試生物試題）下列關(guān)于蛋白

質(zhì)工程的敘述，正確的是（）

A.蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系

B.蛋白質(zhì)工程的操作對(duì)象是蛋白質(zhì)或控制蛋白質(zhì)合成的基因

C.蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是通過改變氨基酸的結(jié)構(gòu)改變蛋白質(zhì)的功能

D.限制蛋白質(zhì)工程發(fā)展的關(guān)鍵因素是基因工程技術(shù)還不成熟

【答案】A

【解析】

【分析】蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修

飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和

生活的需要。

【詳解】A、結(jié)構(gòu)決定功能，故蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能

的關(guān)系，A正確；

B、蛋白質(zhì)工程能通過基因修飾或基因合成，定向?qū)ΜF(xiàn)有蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，使之

更加符合人類需要，故蛋白質(zhì)工程的操作對(duì)象為控制蛋白質(zhì)合成的基因，B錯(cuò)誤；

C、蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是通過改變基因的結(jié)構(gòu)達(dá)到改變蛋白質(zhì)功能的目的，C錯(cuò)誤；

D、當(dāng)前限制蛋白質(zhì)工程發(fā)展的關(guān)鍵因素是對(duì)蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)了解不夠，D錯(cuò)誤。

故選A?

14.（黑龍江省大慶鐵人中學(xué)2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期開學(xué)考試生物試題）菊花是一種雙

子葉植物，易感桃蠣。桃魴不但直接影響植物生長(zhǎng)，還是多種植物病毒的傳播媒介。雪花蓮

凝集素基因GNA的表達(dá)產(chǎn)物能有效抑制桃蛆生長(zhǎng)，某科研團(tuán)隊(duì)運(yùn)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得了轉(zhuǎn)

GNA基因菊花。下列有關(guān)敘述不正確的是（）

A.受體細(xì)胞可以選擇菊花葉片細(xì)胞或桃蜘細(xì)胞

B.需經(jīng)過植物組織培養(yǎng)過程獲得轉(zhuǎn)基因菊花

C.將目的基因GNA插入至ljTi質(zhì)粒的T-DNA上構(gòu)建表達(dá)載體

D.應(yīng)用抗蟲接種實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)桃蛇的抗性及抗性的程度

【答案】A

【解析】

【分析】菊花是一種雙子葉植物，桃場(chǎng)是害蟲?？茖W(xué)家用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得了轉(zhuǎn)GNA基因

菊花，可知雪花蓮凝集素基因GNA是目的基因，受體細(xì)胞為菊花細(xì)胞。

【詳解】A、要獲得轉(zhuǎn)基因菊花，可以選擇菊花葉片細(xì)胞作為受體細(xì)胞，但不能選擇桃蠅細(xì)

胞作為受體細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B、導(dǎo)入的目的基因的受體細(xì)胞為菊花細(xì)胞，要將其培養(yǎng)成個(gè)體，需要經(jīng)過植物組織培養(yǎng)，

B正確；

C、Ti質(zhì)粒的T-DNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中，并同整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)

這一特點(diǎn)，構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)該將目的基因GNA插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，C正確；

D、已知雪花蓮凝集素基因GNA的表達(dá)產(chǎn)物能有效抑制桃蠣生長(zhǎng)，故應(yīng)用抗蟲接種實(shí)驗(yàn)，

檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)桃蠣的抗性及抗性的程度，D正確。

故選Ao

35.（黑龍江省大慶鐵人中學(xué)2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期開學(xué)考試生物試題）請(qǐng)根據(jù)有關(guān)生

物工程方面的知識(shí)回答下列問題：

（1）基因工程的核心是，從分子水平上看，基因工程得以實(shí)現(xiàn)的遺傳學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)是：

，o（寫出兩點(diǎn)）。

（2）我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法是,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是利

用其菌體中質(zhì)粒的T-DNA片段可的特點(diǎn);將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞最有效的方法是

（3）動(dòng)物細(xì)胞工程中技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。動(dòng)物細(xì)胞工程的一項(xiàng)重要

應(yīng)用是制備單克隆抗體，該過程形成的雜交瘤細(xì)胞中發(fā)生的遺傳信息流動(dòng)有DNA-DNA、

（4）胚胎工程中，胚胎移植選擇受體的條件是的個(gè)體，受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基

本不發(fā)生，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。為了獲得產(chǎn)奶量高的奶牛，需取囊

胚期細(xì)胞做性別鑒定。若對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割，要注意,否則影響分割后胚胎的

恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

【答案】（1）①.基因表達(dá)載體的構(gòu)建②.不同生物DNA分子的基本結(jié)構(gòu)相似

③.所有生物共用一套密碼子

（2）①.花粉管通道法②.轉(zhuǎn)移并整合到染色體DNA上③.Ca?+處理法

（3）①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)②.DNATRNAT蛋白質(zhì)

（4）①.同種的具有健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力②.免疫排斥③.滋養(yǎng)層

④.將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割

【解析】

【分析】1、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的

基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物

細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

2、對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢

復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

小問1詳解】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟?；蚬こ痰靡詫?shí)現(xiàn)的遺傳學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)是：不同

生物DNA分子的基本結(jié)構(gòu)相似；所有生物共用一套密碼子。

【小問2詳解】

我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法是花粉管通道法，將目的基因?qū)胫参锛?xì)

胞最常見的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，原理是利用農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段可轉(zhuǎn)移并

整合到宿主細(xì)胞染色體DNA上。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞最有效的方法是Ca2+處理法。

【小問3詳解】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。在制備單克隆抗體過程中，形成的雜交瘤細(xì)胞能

進(jìn)行DNA復(fù)制和基因表達(dá)，故細(xì)胞中發(fā)生的遺傳信息流動(dòng)有DNA—DNA、DNA—RNA一

蛋白質(zhì)。

【小問4詳解】

胚胎工程中，胚胎移植選擇的受體是同種（或生理狀態(tài)相同）的具有健康體質(zhì)和正常繁殖能

力的雌性個(gè)體。由于受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥，這為胚胎在受體內(nèi)的

存活提供了可能。一般取囊胚期滋養(yǎng)層細(xì)胞做性別鑒定。若對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割，要注意將

內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

25.（黑龍江省哈爾濱市2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè)生物試題）PCR技術(shù)是一

項(xiàng)令人類值得自傲的技術(shù)，它在分子生物學(xué)，臨床醫(yī)學(xué)、考古學(xué)等眾多領(lǐng)域取得了巨大成就,

在當(dāng)今社會(huì)乃至未來社會(huì)都會(huì)有它的立足之地；充分運(yùn)用它，人類會(huì)在文明發(fā)展的進(jìn)程中發(fā)

出更耀眼的光芒。據(jù)此回答下列問題。

（1）PCR的過程是目的基因DNA受熱變性后解為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)____結(jié)合；然后

以單鏈DNA為模板，在作用下進(jìn)行延伸，即將4種脫氧核甘酸加到,如此重復(fù)

循環(huán)多次。

（2）PCR技術(shù)的結(jié)果是呈指數(shù)形式擴(kuò)增，其原因是o

（3）由于PCR技術(shù)具有高特異性、高靈敏度，在基因工程中PCR技術(shù)可用于等。

（4）又由于PCR技術(shù)具有操作快速、簡(jiǎn)便、對(duì)樣本要求低等特點(diǎn)，加之它能與多種分子生

物學(xué)技術(shù)配合使用，臨床醫(yī)學(xué)上PCR技術(shù)已成為在、發(fā)病機(jī)理的研究等方面最有效、

最可靠的方法之一、

【答案】（1）①.互補(bǔ)序列②.Taq酶③.與模板互補(bǔ)的DNA新鏈上

（2）PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制（3）病毒基因檢測(cè)（4）遺傳病診斷

【解析】

【分析】PCR技術(shù)的過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈

DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【小問1詳解】

PCR的過程是目的基因DNA受熱變性后解為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合；然后以

單鏈DNA為模板，在Taq醐作用下進(jìn)行延伸，即將4種脫氧核甘酸加到與模板互補(bǔ)的DNA

新鏈上，如此重復(fù)循環(huán)多次。

【小問2詳解】

由于PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制，所以PCR技術(shù)的結(jié)果是呈指數(shù)形式擴(kuò)增。

【小問3詳解】

由于PCR技術(shù)具有高特異性、高靈敏度，在基因工程中PCR技術(shù)可用于病毒基因檢測(cè)等。

【小問4詳解】

又由于PCR技術(shù)具有操作快速、簡(jiǎn)便、對(duì)樣本要求低等特點(diǎn)，加之它能與多種分子生物學(xué)

技術(shù)配合使用，可以檢出大部分已知的基因突變、基因缺失、染色體錯(cuò)位等，臨床醫(yī)學(xué)上

PCR技術(shù)已成為在遺傳病診斷、發(fā)病機(jī)理的研究等方面最有效、最可靠的方法之一。

40.（黑龍江省哈爾濱市六中2022-2023學(xué)年高三8月月考生物試題）科學(xué)家運(yùn)用基因工程

技術(shù)，將人凝血因子基因?qū)肷窖虻腄NA中，培育出羊乳腺生物反應(yīng)器，使羊乳汁中含有

人凝血因子。以下有關(guān)敘述，正確的是

A.可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵

B.在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他細(xì)胞

C.人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA

D.科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因重組在一起，從而使人凝血因子基因只在乳腺

細(xì)胞中特異表達(dá)

【答案】A

【解析】

【分析】

【詳解】A、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，因此可用顯微注射技術(shù)

將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵，A正確；

B、在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子存在于所有細(xì)胞中，但只在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C、人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，RNA聚合酶以DNA分子一條鏈為模板合成mRNA,C錯(cuò)

誤：

D、科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，從而使人凝

血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)，D錯(cuò)誤。

故選Ao

20.（黑龍江省綏化市望奎縣一中2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期第一次月考生物試題）作為基

因的運(yùn)輸工具——載體，必須具備的條件之一及理由是（）。

A.能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復(fù)制，以便提供大量的目的基因

B.具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便目的基因的表達(dá)

C.具有某些標(biāo)記基因，以便目的基因能夠與其結(jié)合

D.它的參與能夠使標(biāo)記基因在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存

【答案】A

【解析】

【分析】標(biāo)記基因是一種已知功能或已知序列的基因，能夠起著特異性標(biāo)記的作用。在基因

工程意義上來說，它是重組DNA載體的重要標(biāo)記，通常用來檢驗(yàn)轉(zhuǎn)化成功與否；在基因定

位意義上來說，它是對(duì)目的基因進(jìn)行標(biāo)志的工具，通常用來檢測(cè)目的基因在細(xì)胞中的定位。

【詳解】A、作為運(yùn)載體必須具備的條件是之一是在宿主細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，或整合到染

色體DNA匕隨染色體DNA進(jìn)行同步復(fù)制，即能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定保存并大量復(fù)制，以

便提供大量的目的基因，A正確；

B、具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，是為了使外源DNA片段（目的基因）插入其中，B錯(cuò)誤;

C、標(biāo)記基因是為了便于重組DNA的鑒定和選擇，C錯(cuò)誤；

D、它的參與能夠使目的基因在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，D錯(cuò)誤。

故選Ao

26.（黑龍江省綏化市望奎縣一中2022-2023學(xué)年高三上學(xué)期第一次月考生物試題）下列有

關(guān)基因工程的敘述正確的是（）。

A.限制酶只存在于原核生物中，只能識(shí)別DNA分子的特定核甘酸序列

B.只有同種限制酶切割的末端才能連接，不同限制酶切割的末端不能連接

C.基因工程中，只能利用天然質(zhì)粒，質(zhì)粒上的標(biāo)記基因用于重組DNA的篩選

D.質(zhì)粒是獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外的環(huán)狀雙鏈DNA

【答案】D

【解析】

【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈D