2.5 導(dǎo)入宿主細(xì)胞

主講老師：邢煜騫導(dǎo)入宿主細(xì)胞如何將克隆載體導(dǎo)入到宿主細(xì)胞呢宿主細(xì)胞能夠供載體進(jìn)入并支持其復(fù)制和蛋白質(zhì)表達(dá)的細(xì)胞宿主細(xì)胞可分為以下兩類：原核生物——大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、鏈霉菌等真核生物——酵母菌、絲狀真菌、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等理想宿主細(xì)胞應(yīng)滿足的條件容易獲得較高濃度的細(xì)胞能利用廉價(jià)易得的原料不致病、不產(chǎn)生肉毒素發(fā)熱量低、需氧低，適當(dāng)?shù)陌l(fā)酵溫度容易進(jìn)行代謝調(diào)控容易進(jìn)行DNA重組技術(shù)操作產(chǎn)物的產(chǎn)量、產(chǎn)率高，產(chǎn)物容易提取。原核生物特點(diǎn)大部分原核生物細(xì)胞沒有纖維素組成的堅(jiān)硬細(xì)胞壁，便于外源DNA的進(jìn)入沒有核膜，染色體DNA沒有固定結(jié)合的蛋白質(zhì)，這為外源DNA與裸露的染色體DNA重組減少了麻煩基因組小，遺傳背景簡(jiǎn)單，并且不含線粒體和質(zhì)體基因組，便于對(duì)引入的外源基因進(jìn)行遺傳分析原核生物多數(shù)為單細(xì)胞生物，容易獲得一致性的實(shí)驗(yàn)材料，并且培養(yǎng)簡(jiǎn)單,繁殖迅速，實(shí)驗(yàn)周期短，重復(fù)實(shí)驗(yàn)快真核生物種類酵母：基因結(jié)構(gòu)相對(duì)比較簡(jiǎn)單，便于基因工程操作；培養(yǎng)簡(jiǎn)單，適于大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)，成本低廉；基因表達(dá)產(chǎn)物能分泌到培養(yǎng)基中,便于產(chǎn)物的提取加工;不含特異性的病毒，不產(chǎn)生毒素，是安全的受體細(xì)胞。植物細(xì)胞：具全能性。有水稻、棉花、玉米、馬鈴薯、煙草和擬南芥等。動(dòng)物細(xì)胞：多采用生殖細(xì)胞、受精卵細(xì)胞或胚細(xì)胞以及干細(xì)胞。有豬、羊、牛、魚、鼠、猴等。導(dǎo)入宿主細(xì)胞的方法轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)導(dǎo)外源DNA轉(zhuǎn)化方法化合物誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化法熱休克法電穿孔轉(zhuǎn)化法微彈轟擊(基因槍)轉(zhuǎn)化法激光微束穿孔轉(zhuǎn)化法超聲波處理轉(zhuǎn)化法

脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法

體內(nèi)注射轉(zhuǎn)化法花粉管通道轉(zhuǎn)化法

精子介導(dǎo)法低能離子束介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法小結(jié)轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)染主要是基于