藥物分析第二章鑒別

藥物分析第二章鑒別

它是藥檢工作的首藥檢工作中的首先項任務(wù)，只有在藥物鑒別無誤的情況下，才能進行藥物的雜質(zhì)檢查、含量測定。藥物鑒別試驗是用來證實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所表示的藥物，而不是對未知物進行定性分析，因為這些鑒別試驗雖有一定的專屬性，但不具備進行未知無確證的條件，故不能鑒別未知物。舉列:天麻鑒別要點:鶯哥嘴橫點紋(市場有人有土豆做假)

第一節(jié)藥物鑒別試驗的定義與目的第2頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

<中國藥典>2010版凡例中對藥物鑒別的定義為：鑒別項下規(guī)定的試驗方法，僅反映該藥品某些物理、化學(xué)或生物學(xué)等性質(zhì)的特征，不完全代表對該藥品化學(xué)結(jié)構(gòu)的確證。

化學(xué)藥物的結(jié)構(gòu)確證是確認所制備原料藥的結(jié)構(gòu)是否正確，適用于未知化合物的鑒別或目標對象的結(jié)構(gòu)確認。第3頁,共35頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)藥物鑒別的項目藥物的鑒別試驗包括：性狀和鑒別一、性狀（definition)聚集狀態(tài)、晶形

外觀色澤臭、味第4頁,共35頁，2024年2月25日，星期天:、

極易溶：1份溶質(zhì)在不到1份溶劑中溶解易溶：1份溶質(zhì)在1份~不到10份溶劑中溶解溶解:1份溶質(zhì)在10份~不到30份溶劑中溶解溶解度略溶:1份溶質(zhì)在30份~不到100份溶劑中溶解微溶:…..在100份~不到1000份溶劑中溶解極微溶解:在1000份~不到10000份溶劑中溶解幾乎不溶或不溶：…10000份溶劑中不完全溶

第5頁,共35頁，2024年2月25日，星期天物理常數(shù):相對密度、餾程、熔點、比旋度、吸收系數(shù)、折光率、黏度、酸值、碘值、皂化值、羥值

第一法：測定易碎的固體藥品熔點第二法：測定不易碎的固體藥品（脂肪酸、石蠟等）

第三法：測定凡士林或其他類似的物質(zhì)第6頁,共35頁，2024年2月25日，星期天熔點系指一種物質(zhì)按規(guī)定方法測定，由固體熔化成液體的溫度或融熔同時分解的溫度或在熔化時初熔至全熔經(jīng)歷的溫度范圍。測定熔點的藥品，應(yīng)是遇熱晶型不轉(zhuǎn)化，其初熔點和終熔點容易分辨；融熔同時分解是指某一藥品在一定溫度產(chǎn)生氣泡、上升、變色或渾濁等現(xiàn)象。第7頁,共35頁，2024年2月25日，星期天藥品的熔點與分子結(jié)構(gòu)有關(guān)，當構(gòu)成晶格的單位（對有機化合物來說一般是分子，無機化合物的是離子或原子組成）受熱，動能增加到足以克服各單位間相互作用力即格子力，晶格崩潰渙散，這時的溫度就是固體的熔點。每種純的固體有機化合物都有自己的獨特的晶型結(jié)構(gòu)和分子間力，因此要熔化固體，就需要一定的熱能，所以每種固體物質(zhì)都有獨特的熔點。第8頁,共35頁，2024年2月25日，星期天熔點在一定程度上反映了物質(zhì)固態(tài)時的格子力大小。凡這種力越大，其熔點越高。格子力大小受分子間作用力的本性、分子結(jié)構(gòu)與性狀以及晶格類型三種因素的支配，因此有些結(jié)晶性固體物質(zhì)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)相同，但晶型不同，熔點也就不同。第9頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

熔點是多數(shù)有機藥物的重要物理常數(shù)

一般未注明者均指“第一法”

測定時根據(jù)供試品熔融同時分解與否，調(diào)節(jié)傳溫液的升溫為2.5---3.0℃／min或1.0—1.5℃／min。要求報告:初熔----供試品在毛細管內(nèi)開始局部液化出現(xiàn)明顯液滴時的溫度。

全熔----供試品全部液化時的溫度

第10頁,共35頁，2024年2月25日，星期天注意：（1）化合物分子中引入能形成氫鍵的官能團后，其熔點升高；（2）同系物中，熔點隨分子量的增大而升高；（3）分子結(jié)構(gòu)越對稱，越有利于排成整齊形式，造成更大的格子力，則熔點越高。第11頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

比旋度：指在一定波長下，偏振光透過1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度?？捎糜阼b別藥物、檢查藥物的純度和含量測定。[n]TD=100α/dL摩爾吸收系數(shù)ε=A/CL吸收系數(shù)百分吸收系數(shù)（Ch.P收載的方法）E1%1cm=A/CL

第12頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

是指依據(jù)一類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或理化特性，通過化學(xué)反應(yīng)鑒別藥物的真?zhèn)?。注?只能證實是某一類藥,而不能證實是哪一種藥?ChP附錄中有：丙二酰脲類、托烷生物堿類、

芳香第一胺類、有機氟類等、二、一般鑒別試驗（generalidentificationtest）第13頁,共35頁，2024年2月25日，星期天1.有機氟化物有機氟氧瓶燃燒無機氟離子pH4.3

茜素氟藍硝酸亞鈰藍紫色絡(luò)合物第14頁,共35頁，2024年2月25日，星期天2.有機酸鹽(1)水楊酸水楊酸+FeCl3中性條件弱酸性條件紅色配位化合物紫色配位化合物第15頁,共35頁，2024年2月25日，星期天(2)酒石酸鹽供試品溶液（中性）+氨制硝酸銀水浴中

銀鏡第16頁,共35頁，2024年2月25日，星期天3.芳香第一胺類供試品+

稀鹽酸亞硝酸鈉堿性-萘酚試液紅色到猩紅色第17頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

4.托烷生物堿類

此類生物堿中具有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有Vitali反應(yīng),顯紫色。

5.無機金屬鹽（Na,K,Ca)

焰色反應(yīng)：Na顯鮮黃色；K顯紫色；Ca顯磚紅色銨鹽：供試品+NaOH

氨臭使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍使硝酸亞汞試液濕潤的濾紙顯黑色第18頁,共35頁，2024年2月25日，星期天6.無機酸根

氯化物：Cl-+Ag+AgCl乳白色

硫酸鹽：SO42-+Ba2+

BaSO4

白色第19頁,共35頁，2024年2月25日，星期天三、專屬鑒別試驗(specificidentificationtest)證實某一種藥物的依據(jù)，是根據(jù)每一種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異或理化性質(zhì)的不同，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)巍５?0頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

綜上所述，一般鑒別試驗是以某些類別藥物的共同化學(xué)結(jié)構(gòu)為依據(jù)，根據(jù)其相同的物理化學(xué)性質(zhì)進行藥物真為的鑒別，以區(qū)別不同類別的藥物。專屬鑒別試驗是在一般鑒別試驗的基礎(chǔ)上，利用各種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)差異，來鑒別藥物，以區(qū)別同類藥物或具有相同化學(xué)結(jié)構(gòu)部分的各個藥物單體，達到最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康?。?1頁,共35頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)鑒別方法一、化學(xué)鑒別法

三氯化鐵呈色反應(yīng)(Ar-OH,Ar-OCOCH3)

異羥戊酸鐵反應(yīng)(Ar-COOH;-COOR)

1.顯色反應(yīng)鑒別法茚三酮呈色反應(yīng)(脂肪氨基，α－氨基酸）重氮化-偶合呈色反應(yīng)(Ar-NH2;-NHCOR)氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)與金屬離子的沉淀反應(yīng)第22頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

2.沉淀生成鑒別法與硫氰化鉻銨的沉淀反應(yīng)其它沉淀反應(yīng)(如生物堿沉淀劑）

第23頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

藥物本身在可見光下發(fā)射熒光藥物溶液加硫酸后在可見光下發(fā)射熒光

3.熒光反應(yīng)鑒別法藥物與溴反應(yīng)后，在可見光下發(fā)出熒光藥物與間苯二酚溴反應(yīng)后，發(fā)射出熒光藥物其它反應(yīng)后，發(fā)射出熒光

制備衍生物：藥物＋試劑具有熒光的衍生物第24頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

胺類、酰脲類、酰胺類藥物經(jīng)強堿處理生成氨氣(NH3；NH(C2H5)2)含硫藥物經(jīng)強酸處理后，加熱，生成硫4.氣體生成反應(yīng)鑒別法化氫氣體(H2S+Pb2+PbS+2H+)含碘有機藥物，加熱。生成紫色碘蒸汽含醋酸酯和乙酰胺類藥物酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯第25頁,共35頁，2024年2月25日，星期天5、制備衍生物測定熔點法

藥物＋試劑新化合物有一定mp;藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。操作繁瑣費時間，應(yīng)用較少。第26頁,共35頁，2024年2月25日，星期天二、光譜鑒別法

測定最大吸收波長，或同時測定最小吸收波長規(guī)定濃度的供試液在最大吸收波長測定吸收度1.紫外光譜鑒別法規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法規(guī)定吸收波長和吸收度比值法經(jīng)化學(xué)處理后,測定其反應(yīng)產(chǎn)物吸收光譜特性例P77

第27頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

壓片法2.紅外光譜鑒別法糊法膜法溶液法在用IR光譜進行鑒別試驗時，ChP2010采用標準圖譜對照法第28頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

TLC法（Rf樣＝Rf對）

三、色譜鑒別法

PC法

HPLC法（tR樣＝tR對）

GC法第29頁,共35頁，2024年2月25日，星期天

在ChP2010中，對TLC鑒別法在斑點的顏色、位置、與斑點大小方面做出了明確要求：1、供試品與同濃度對照品顏色（或熒光）與位置（Rf）應(yīng)一致，斑點大小應(yīng)大致相同；2、供試品與對照品等體積混合，應(yīng)顯示單一，斑點緊密；或供試品溶液的主斑點與上述混合液的主斑點的顏色與位置一致，大小相似；3、選用與供試品化學(xué)結(jié)構(gòu)相似藥物對照品或雜質(zhì)對照品，兩者的比移值應(yīng)不同；4、上述兩種溶液等體積混合，應(yīng)顯示兩個清晰分離的斑點。第30頁,共35頁，2024年2月25日，星期天注意事項：1、由于受薄層板質(zhì)量、邊緣效應(yīng)等因素的影響，實際操作中有時會遇到同一物質(zhì)在同一薄層板上的Rf值不一的情況，操作中可增加將供試品溶液與對照品溶液等量混合，點樣后出現(xiàn)單一斑點作為鑒別依據(jù)。2、單獨使用TLC鑒別時，需要進行色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗內(nèi)容，對斑點的比移值和分離效能進行考察。必要時進行靈敏度考察。3、TLC法除色譜行為外，還可將斑點顏色作為鑒別依據(jù)，由以上兩個因素把握供試品與對照品的同一性，簡單易行，是一個鑒別的好方法。第31頁,共35頁，2024年2月25日，星期天四、原子吸收法（AAS法）五、核磁共振法（NMR法）六、質(zhì)譜法（MS法）七、X射線粉末衍射法第32頁,共35頁，2024年2月25日，星期天八、指紋圖譜與特征圖譜鑒別法P91

通過對所得到的能夠體現(xiàn)中藥整體特性的圖譜識別，提供一種能夠比較全面的控制中藥質(zhì)量的方法，從化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)的角度