革蘭氏陰性需氧桿菌

革蘭氏陰性需氧桿菌第九章革蘭氏陰性需氧桿菌G－需氧桿菌屬于細(xì)菌門的第七部分。包括8個(gè)科16個(gè)關(guān)系未定的屬，在獸醫(yī)上具有重要意義的主要是：假單胞菌科：綠膿桿菌；伯氏菌屬：鼻疽桿菌、類鼻疽桿菌；布氏桿菌屬：布氏桿菌；波氏桿菌屬：支氣管敗血波氏桿菌、禽波氏菌等。第2頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天第一節(jié)假單胞菌屬假單胞菌屬(Pseudomonas)是一群有動(dòng)力、需氧的革蘭氏陰性菌，廣泛分布于土壤、水及空氣中。第3頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天綠膿桿菌銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，俗稱為綠膿桿菌，廣泛存在于自然界中，以及人畜體表和各腔道中，為條件致病菌。為常見(jiàn)的多種家畜和人的創(chuàng)傷感染、泌尿系統(tǒng)感染和牛乳房炎病原，還可致敗血癥。第4頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、生物學(xué)性狀大?。?.6-2.0um，G－，有菌毛，有鞭毛（1~3根）、粘液型菌株有多糖莢膜。第5頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、生物學(xué)性狀需氧、營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)良好。菌落：圓形、邊緣不整齊、扁平隆起、光滑濕潤(rùn)、?；ハ嗳诤闲纬删?。能產(chǎn)生藍(lán)綠色的綠膿素和綠色熒光的熒光素，均為水溶性色素。能分解葡萄糖，產(chǎn)生H2S，靛基質(zhì)陰性，液化明膠，氧化酶陽(yáng)性。第6頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、微生物學(xué)診斷病料涂片鏡檢意義不大，應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌分離及生化鑒定。

三、免疫及微生物學(xué)防治獸醫(yī)上人工免疫預(yù)防無(wú)實(shí)際意義。在人醫(yī)中，對(duì)燒傷患者采用多價(jià)綠膿桿菌免疫血清治療可降低敗血癥的發(fā)病率和死亡率。第7頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天第二節(jié)布氏桿菌屬布氏桿菌屬(Brucella)為一革蘭氏陰性短小桿菌。該菌為牛羊豬等動(dòng)物的病原菌，可引起母畜流產(chǎn)，公畜附丸睪炎。人類與病畜或帶菌動(dòng)物接觸，或食用染菌肉類，乳制品，可發(fā)生感染，稱布氏桿菌病(Brucellosis)。臨床表現(xiàn)為間歇發(fā)熱，稱波浪熱。第8頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與染色初次分離呈小球桿狀，大小為0.2~0.5×0.5~1um。多次傳代后，牛、豬布氏桿菌可變成桿狀，大小為0.5~0.7×0.6~1.5um，多單在，少呈鏈狀。本菌不形成芽胞，無(wú)鞭毛，不能運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陰性。第9頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)與染色本菌有抗酸染色性，對(duì)布氏桿菌有鑒別意義。第10頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)與染色左為E.coli；右為布魯氏桿菌第11頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)與染色布氏桿菌電鏡照片（偽著色）第12頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）培養(yǎng)特性專性需氧菌。初次分離時(shí)要在5％~10％CO2環(huán)境下始能生長(zhǎng)。最適生長(zhǎng)溫度為37℃，最適pH值為6.6-7.4。人工培養(yǎng)數(shù)代后，即適應(yīng)普通大氣。普通培養(yǎng)基生長(zhǎng)不好，生長(zhǎng)遲緩。加及血清或肝浸液等可促進(jìn)生長(zhǎng)。初代培養(yǎng)常需5~10天，甚至20~30天，方可見(jiàn)生長(zhǎng)；經(jīng)傳代后的菌種，約24~72小時(shí)即可生長(zhǎng)良好。第13頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）培養(yǎng)特性在肝湯瓊脂或胰蛋白胨瓊脂上生長(zhǎng)，呈圓形、光滑、稍隆起，均質(zhì)而中央常有細(xì)微顆粒；初無(wú)色透明，后漸渾濁而帶灰白甚至灰黃色；大小差異大，直徑約0.1mm至2~3mm。在液體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48小時(shí)呈輕度渾濁，一周后混濁明顯，有沉淀。第14頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）生化反應(yīng)本菌屬分解糖的能力不同:不產(chǎn)生吲哚；不液化明膠；尿素分解陰性；M－R試驗(yàn)陰性；V－P試驗(yàn)陰性；石蕊牛乳陰性；過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性。第15頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（四）抵抗力本菌抵抗力較強(qiáng):在土壤、皮毛、肉和乳制品及水中可生存數(shù)周至數(shù)月。但在濕熱60℃10min死亡；直射陽(yáng)光下10-20min死亡；對(duì)消毒劑抵抗力不強(qiáng):3％的來(lái)蘇兒中數(shù)分鐘內(nèi)死亡。第16頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（五）抗原構(gòu)造與分型布氏桿菌屬含有兩種抗原物質(zhì)。一種是M抗原（羊布氏菌菌體抗原）另一種是A抗原（牛布氏菌菌體的抗原）兩種抗原在三種菌中含量不同:羊布氏菌M:A是20:1牛布氏桿菌M:A＝1:20豬布氏桿菌M:A＝1:2。第17頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、致病性與免疫性（一）致病物質(zhì)：內(nèi)毒素主主要致病物質(zhì)。馬爾他布氏桿菌毒力最強(qiáng)，其次為豬布氏桿菌、流產(chǎn)布氏桿菌毒力較弱。透明質(zhì)酸酶、莢膜等也具有較強(qiáng)的侵襲力。第18頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）所致疾病本屬細(xì)菌可感染的動(dòng)物種類極多，目前已知有六十多種；其中有各種家畜、野生哺乳動(dòng)物、嚙齒動(dòng)物、鳥(niǎo)類、爬蟲(chóng)類、兩棲類和魚(yú)類。布氏桿菌所致病，母畜主要癥狀為流產(chǎn)，公畜主要發(fā)生附睪炎第19頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）免疫性一般認(rèn)為布氏桿菌感染后形成的免疫是有菌免疫，即初次感染后病菌存在體內(nèi)，對(duì)再次感染有較強(qiáng)的免疫力。近年來(lái)學(xué)者認(rèn)為，隨著病程的延續(xù)，機(jī)體免疫力增強(qiáng)，病菌可被不斷消滅，而最終變成無(wú)菌免疫。布氏菌感染后，以細(xì)胞免疫為主，產(chǎn)生的IgG、IgM起調(diào)理作用。第20頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天疫苗1、羊型5號(hào)（M5）弱毒活菌苗：由哈獸藥研究所生產(chǎn)，采用馬爾他布氏桿菌H28強(qiáng)毒經(jīng)雞體長(zhǎng)期傳代減毒篩選出弱毒制成的疫苗。使用方法是皮下注射或氣霧免疫，對(duì)羊免疫期為1年半、對(duì)牛和鹿免疫期為1年。第21頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天2、豬型2號(hào)（S2）弱毒活菌苗由農(nóng)業(yè)部獸藥監(jiān)察所研制，采用豬布氏桿菌的變種制備而成的疫苗。使用方法：口服（飲水），對(duì)豬亦可皮下注射，羊可肌肉注射。免疫期：綿羊半年到1年，山羊和豬均為一年。第22頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、微生物學(xué)檢查（一）細(xì)菌學(xué)檢查：首先采集標(biāo)本：流產(chǎn)胎兒胃內(nèi)容物、羊水及胎盤的壞死部分或母畜陰道分泌物、乳汁、尿液等。其次：直接涂片，抗酸染色鏡檢；第23頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）細(xì)菌學(xué)檢查再：分離培養(yǎng)：以優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基，加入抗生素，兩套培養(yǎng)基分別置普通環(huán)境和5－10％CO2環(huán)境中培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)在30天以上。如有可疑菌落，作玻板凝集試驗(yàn)，以確定。第24頁(yè),共26頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）細(xì)菌學(xué)檢查分離培養(yǎng)物可進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)：細(xì)菌懸液以腹腔可皮下注射接種豚鼠。一方面