動物解剖生理-顯微鏡的使用及組織切片觀察

顯微鏡的使用衣藻細菌的運動顯微鏡是常用的探究器具，常用的主要是光學顯微鏡。實驗目的認識顯微鏡的基本構(gòu)造和作用掌握顯微鏡的使用方法和保養(yǎng)方法能使用顯微鏡觀察到清晰的圖像英國物理學家羅伯特·虎克研制出光學顯微鏡并發(fā)現(xiàn)了細胞。放大倍數(shù)放大倍數(shù)目鏡：目鏡無螺紋；

目鏡越短，放大倍數(shù)越大。物鏡：物鏡有螺紋；物鏡越長，放大倍數(shù)越大。物鏡目鏡10×5×放大倍數(shù)10×16×40×50×100×200×400×160×640×放大倍數(shù)＝目鏡放大倍數(shù)×物鏡放大倍數(shù)顯微鏡物像放大倍數(shù)計算物鏡1、目鏡內(nèi)看到的物像是倒像2、放大倍數(shù)：3、將物像調(diào)整到中心：4、只能觀察被光穿透的物體（透明）物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積同向（像）法規(guī)律：1、顯微鏡放大倍數(shù)越大，視野中的細胞越少，視野越暗。2、目鏡相同時，物鏡放大倍數(shù)越大，物鏡越接近玻片標本100倍200倍300倍注意：低倍鏡換成高倍鏡后，細胞變大、數(shù)量減少、顏色變淺。50倍下顯微鏡細胞圖400倍下顯微鏡細胞圖放大倍數(shù)越小,細胞越小、數(shù)量越多；放大倍數(shù)越大,細胞越大、數(shù)量越少。LOGO鏡座鏡柱壓片夾鏡臂細準焦螺旋粗準焦螺旋目鏡鏡筒轉(zhuǎn)換器物鏡通光孔遮光器反光鏡載物臺支撐部分調(diào)節(jié)部分光線通過部分1、取鏡和安放右手握住鏡臂，左手托住鏡座放在實驗臺距邊緣3-4cm左右處，略偏左2、調(diào)節(jié)光源接通電源，調(diào)節(jié)光線；轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對準通光孔，通過目鏡可以看到白亮的圓形視野。3、低倍鏡觀察物鏡調(diào)至低倍鏡將玻片標本置鏡臺上用標本夾夾住載物臺上升至最高的位置轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋至清晰的影像4.高倍鏡觀察標本移到視野中心更換高倍的物鏡調(diào)節(jié)光線轉(zhuǎn)動細調(diào)螺旋至清晰調(diào)節(jié)光線5.油鏡觀察下降載物臺，在載玻片上滴一滴香柏（甘）油，將油鏡移至正中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒在油中，剛好貼近載玻片；用細準焦螺旋微微向上調(diào)（切忌用粗準焦螺旋）即可。1.清潔顯微鏡把油鏡轉(zhuǎn)離光軸，擦鏡紙擦1～2次，去油，用二甲苯（水）滴濕的擦鏡紙擦2次，再用擦鏡紙擦1～2次。順鏡頭直徑方向擦擦干凈鏡體三、普通光學顯微鏡的維護2.還原顯微鏡調(diào)節(jié)光源到最小再關掉電源開關調(diào)節(jié)載物臺下降到最低，取下玻片物鏡轉(zhuǎn)成“八”字形，聚光鏡降下罩上防塵罩放回原處3.維護顯微鏡顯微鏡要輕拿輕放存于干燥無塵處表面有水的載片嚴禁放到鏡上鏡頭用專用工具經(jīng)專門程序清洗四、組織切片的畫法疏松結(jié)締組織切片HE染色40×

組織切片畫圖：1組織切片名稱

2染色方法

3圖的放大倍數(shù)

4所畫內(nèi)容的標注使用方法總結(jié)：步驟：（一）、取鏡和安放（二）、對光（三）、觀察（四）、清潔收鏡注意事項轉(zhuǎn)動粗、細調(diào)節(jié)器時，不要用力過猛，以防止機件損傷，調(diào)節(jié)失靈。在高倍鏡下調(diào)節(jié)焦距時，切勿使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓壞標本，損壞物鏡。絕對高倍鏡使用完畢，必須先上升鏡筒，移開鏡頭后再取出玻片標本，以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。禁止隨意取出目鏡或拆下顯微鏡的其他部件，以免灰塵掉入鏡筒、部件失落或損壞。 1.在鏡筒下降，物鏡接近標本的過程中，為什么要用眼睛看著物鏡？ 2.在觀察的過程中，發(fā)現(xiàn)視野中有黑點，如何判斷黑點的位置？防止物鏡壓壞標本，損傷物鏡依次調(diào)換目鏡、物鏡，如果視野中的黑點還在，則黑點在玻片上1.大家觀察到的物像是怎樣的呢？上下顛倒，左右相反2.如果物像偏左，你應將標本向哪個方向移動，才能使物像居中？往左3.寫在玻片上的“上”字，在顯微鏡下看到的是什么字？4.用鑷子將一只死螞蟻，或?qū)⒁桓^發(fā)放在載玻片的正中央可否觀察到它們的內(nèi)部結(jié)構(gòu)？不能，光學顯微鏡只能觀察能被光穿透的物體上組織組織是由來源相同、形態(tài)結(jié)構(gòu)相似、機能相關的細胞群和細胞間質(zhì)構(gòu)成的。組織上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織一、上皮組織依據(jù)上皮組織的形態(tài)和功能的不同，上皮組織可以分為以下三種：被覆上皮腺上皮特殊上皮上皮組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點：①細胞多，間質(zhì)少，細胞排列緊密，成層分布；②上皮組織的細胞具有極性：有游離面和基底面；③上皮組織中無血管分布，其營養(yǎng)依靠滲透作用從結(jié)締組織獲得；④上皮組織內(nèi)神經(jīng)末梢豐富，因而感覺靈敏。

上皮組織的功能：具有保護、吸收、分泌和排泄等功能。上皮組織的分布：體表、有腔器官的內(nèi)表面和某些器官的外表面，構(gòu)成器官的邊界，故又稱邊界組織。被覆上皮單層柱狀上皮單層立方上皮單層扁平上皮復層扁平上皮變移上皮假復層纖毛柱狀上皮①結(jié)構(gòu)：由一層扁平細胞構(gòu)成。從正面看，細胞呈多邊形，邊緣為鋸齒狀，相鄰細胞互相嵌合，核橢圓形，位于細胞中央，胞質(zhì)少，細胞器不發(fā)達。從側(cè)面看，細胞呈梭形，胞核橢圓形，含核部分稍厚。單層扁平上皮（鋪片，硝酸銀染色）單層扁平上皮模式圖單層扁平上皮（鋪片，銀染）1：細胞質(zhì)，2：細胞核單層扁平上皮正面及側(cè)面觀（血管內(nèi)皮模式圖）2②分布：心臟、血管、淋巴管的內(nèi)表面，又稱內(nèi)皮；胸膜、腹膜、心包膜以及許多內(nèi)臟器官的外表面，又稱間皮；以及肺泡壁、腎小囊壁層等處。③功能：減少摩擦。內(nèi)皮薄而光滑，有利于心血管和淋巴管內(nèi)液體流動和物質(zhì)交換，間皮表面光滑濕潤，堅韌耐磨，有保護作用。單層扁平上皮（內(nèi)皮）箭頭示大血管內(nèi)皮細胞核）單層扁平上皮（間皮，箭頭示細胞核）①結(jié)構(gòu)：由一層立方形細胞構(gòu)成。從表面看，細胞呈多邊形。從側(cè)面看，細胞為正方形，胞核圓形，位于中央。②分布：腎小管、外分泌腺的小導管、甲狀腺濾泡等。

③功能：具有分泌和吸收等功能。單層立方上皮模式圖單層立方上皮（腎小管，HE）※示近曲小管，★示遠曲小管）

單層立方上皮（甲狀腺，HE）①結(jié)構(gòu)：由一層柱狀細胞構(gòu)成。從表面看，細胞呈多邊形。從側(cè)面看，細胞為長方形，胞核橢圓形，靠近細胞基部。②分布：單胃動物的胃、反芻動物的皺胃、腸管和子宮粘膜等處③功能：具有吸收、分泌和保護作用。單層柱狀上皮（腸上皮，立體結(jié)構(gòu)及切片）單層柱狀上皮（小腸絨毛）單層柱狀上皮（小腸絨毛，HE）箭頭示單層柱狀上皮①結(jié)構(gòu)：由柱狀細胞、梭形細胞和錐體形細胞等幾種形狀、大小不同的細胞組成。從表面看，柱狀細胞游離面具有纖毛。從側(cè)面看，側(cè)面看很像復層上皮。由于幾種細胞高矮不等,只有柱狀細胞和杯狀細胞的頂端伸到上皮游離面,細胞核的位置也深淺不一。②分布：呼吸管道的腔面。③功能：具有分泌和保護作用。假復層柱狀纖毛上皮（氣管粘膜）↓示纖毛，△示基膜，▼示杯狀細胞①結(jié)構(gòu)：光學顯微鏡下，細胞的形態(tài)和層數(shù)隨器官的功能狀態(tài)不同而異。膀胱處于收縮狀態(tài)時，上皮細胞層數(shù)較多，表層細胞大，呈立方形，稱為蓋細胞，中層細胞為多邊形，基層細胞為矮柱狀；膀胱擴張時，上皮細胞層數(shù)變少，細胞變扁。

但新的研究表明，電鏡下觀察時變移上皮中的每一個細胞均與基膜相連，因此，將其歸為單層。②分布：主要分布于排尿管道，如輸尿管、膀胱等。③功能：具有保護作用。變移上皮（膀胱）左圖為切片，右圖為立體模式圖變移上皮（膀胱空虛）①結(jié)構(gòu)：由多層細胞構(gòu)成?；讓蛹毎柿⒎叫位虬鶢?；中間層細胞為多邊形；近淺層細胞呈扁平形。淺層細胞很快死亡脫落，由基底層細胞不斷分裂增殖加以補充。②分布：皮膚（角化程度高），消化管的兩端（口腔、咽、食管、反芻動物的前胃、肛門），陰道等。③功能：具有很強的保護作用。非角化復層扁平上皮左圖為切片，右圖為立體模式圖復層扁平上皮（角化程度較低）復層扁平上皮（角化程度較高，箭頭示表層角化的細胞）①結(jié)構(gòu)：由多層細胞構(gòu)成基底層細胞呈矮柱，中間為多角形細胞，表面為一層柱狀細胞。②分布：眼瞼結(jié)膜,男性尿道。③功能：具有保護作用。腺上皮腺上皮是由具有分泌功能的腺上皮細胞所構(gòu)成的。腺細胞多呈立方形，核較大，位于細胞中央。以腺上皮為主要成分的器官稱腺。根據(jù)其分泌物的排除方式，可以將腺體分為內(nèi)分泌腺和外分泌腺。外分泌腺特殊上皮感覺上皮：游離端有纖毛，另一端與感覺神經(jīng)相連，分布于舌、鼻、眼、耳等，有味覺、嗅覺、視覺、聽覺等功能。

生殖上皮：曲細精管上皮、卵巢外表面的等生殖上皮。二、結(jié)締組織疏松結(jié)締組織致密結(jié)締組織網(wǎng)狀組織脂肪組織軟骨組織骨組織血液淋巴固有結(jié)締組織①結(jié)構(gòu)：細胞種類較多,纖維較少,排列稀疏,基質(zhì)成分較多。②分布：廣泛分布于器官,組織和細胞之間,結(jié)構(gòu)疏松,形似蜂窩,所以又稱蜂窩組織。③功能：有連接支持,營養(yǎng),防御,保護和修復等功能。疏松結(jié)締組織細胞成分基質(zhì)纖維成纖維細胞組織細胞肥大細胞漿細胞脂肪細胞未分化的間充質(zhì)細胞網(wǎng)狀纖維彈性纖維膠原纖維牛皮下疏松結(jié)締組織（一）細胞（二）纖維類型顏色別稱韌性彈性分布膠原纖維白色白纖維好差肌腱彈性纖維黃色黃纖維差好項韌帶網(wǎng)狀纖維黑色（銀染）嗜銀纖維有一定的韌性差免疫器官（淋巴結(jié)、脾、骨髓）、肝（三）基質(zhì)基質(zhì)是一種無色透明,均質(zhì)狀的膠態(tài)物質(zhì),沒有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu),充滿于纖維和細胞之間。松結(jié)締組織中含大量基質(zhì)，且含有蛋白多糖，粘性強，含透明質(zhì)酸基質(zhì)有阻止細菌進人和異物擴散的作用。但豬溶血性鏈球菌以及癌細胞可分泌透明質(zhì)酸酶，溶解透明質(zhì)酸，使細菌與癌細胞在疏松結(jié)締組織中蔓延。致密結(jié)締組織的組成與疏松結(jié)締組織基本相同兩者的主要區(qū)別是,致密結(jié)締組織中的纖維成分特別多,而且排列緊密,細胞和基質(zhì)成分很少。除彈性組織外,絕大多數(shù)的致密結(jié)締組織中以粗大的膠原纖維束為主要成分,其中含少量纖維細胞,小血管和淋巴管。分布于真皮、骨膜、軟骨膜、肌腱和韌帶等處（一）規(guī)則致密組織如肌腱、腱膜（二）不規(guī)則致密組織如真皮、硬腦膜（三）

彈性組織以彈性纖維為主如項韌帶由聚集成團的脂肪細胞和少量的疏松結(jié)締組織及網(wǎng)狀纖維構(gòu)成。被結(jié)締組織分成許多小葉。功能：貯存能量、支持保護、維持體溫。分布：皮下、腸系膜、腹膜、網(wǎng)膜、腎、心臟等器官周圍。由網(wǎng)狀細胞、網(wǎng)狀纖維和基質(zhì)構(gòu)成。網(wǎng)狀細胞為星形多突起細胞,突起彼此連接成網(wǎng)。胞質(zhì)弱嗜堿性。核較大,橢圓形,染色淺,核仁清楚。網(wǎng)狀纖維細而分支,沿著網(wǎng)狀細胞的胞體和突起分布。網(wǎng)狀纖維分支互相連接成的網(wǎng)孔內(nèi)充滿基質(zhì)

分布于淋巴結(jié)、胸腺、脾和骨髓等處。

網(wǎng)狀組織（棕黑色，硝酸銀染色）形態(tài)特點：由軟骨細胞、纖維（膠原纖維或彈性纖維）及基質(zhì)組成。分類及分布：透明軟骨：（膠原原纖維）喉、氣管、肋軟骨、關節(jié)面等處彈性軟骨：（彈性纖維）耳廓、會厭等處纖維軟骨：（膠原纖維束）椎間盤、恥骨聯(lián)合等處軟骨組織透明軟骨彈性軟骨纖維軟骨基質(zhì)：軟骨粘蛋白，嗜堿性軟骨基質(zhì)中無血管,營養(yǎng)靠軟骨膜中的毛細血管滲出的組織液供給軟骨細胞：軟骨周邊—幼稚，扁圓形，單個分布軟骨深部—成熟，圓形或橢圓形，稱同源細胞群。同源細胞群中每個軟骨細胞分別圍以軟骨囊功能：合成纖維和基質(zhì)（一）透明軟骨（二）彈性軟骨分布：耳廓、會厭軟骨結(jié)構(gòu)：彈性纖維，相互交織（三）纖維軟骨分布：椎間盤、關節(jié)盤和恥骨聯(lián)合結(jié)構(gòu)：膠原纖維束，平行或交叉排列軟骨細胞小，排列成行骨組織細胞骨基質(zhì)有機成分

大量的膠原纖維少量無定形物質(zhì)無機成分

羥磷灰石骨原細胞成骨細胞骨細胞破骨細胞骨組織的功能：（1）支持，保護機體（2）集中了體內(nèi)99%的鈣，是維持血鈣平衡的器官，適宜的血液鈣濃度才能保證心臟正常工作（3）造血功能，骨髓中有大量骨髓干細胞，可誘導分化成各種血細胞進入血液。血液血漿有形成分紅細胞白細胞血小板三、肌組織骨骼肌平滑肌心肌不同肌組織的比較1、分布在頭、頸、軀干和四肢2、骨骼肌收縮快而有力3、屬于隨意肌骨骼肌纖維的光鏡結(jié)構(gòu)1.細胞長圓柱形2.細胞核扁橢圓形，數(shù)目多，位于細胞周邊3.肌漿內(nèi)含有許多與細胞長軸平行排列的肌原纖維周期性橫紋(肌原纖維)明帶（I帶）：中央有Z線暗帶（A帶）：中間有H帶和M線1、分布于血管壁和許多內(nèi)臟器官2、收縮持久而緩慢3、屬于不隨意肌平滑肌纖維的光鏡結(jié)構(gòu)1、纖維呈梭形，無橫紋2、細胞核只有一個，呈長橢圓，位于中央3、肌纖維粗細相嵌，成束、成層排列1、分布于心臟及其鄰近心臟的大血管根部2、收縮具有自動節(jié)律性，緩慢而持久，不易疲勞3、屬于不隨意肌心肌纖維的光鏡結(jié)構(gòu)

1.短圓柱狀，有分支并連接成網(wǎng)

2.心肌纖維連接處染色較深的帶狀結(jié)構(gòu)，稱閏盤,呈階梯狀3.胞核一個，位于中央4.有橫紋，但不如骨骼肌明顯四、神經(jīng)組織神經(jīng)細胞（神經(jīng)元）突觸神經(jīng)膠質(zhì)細胞神經(jīng)纖維神經(jīng)元胞體

突起樹突軸突

①尼氏體

②神經(jīng)原纖維1.胞體為神經(jīng)元的營養(yǎng)和代謝中心形狀：圓形，錐形、梭形和星形構(gòu)成：細胞膜，細胞質(zhì)、細胞核細胞核：位于胞體中央，大而圓，著色淺，核仁大尼氏體：嗜染質(zhì)，能合成酶及分泌性蛋白質(zhì)3.神經(jīng)元分類根據(jù)神經(jīng)元突起的數(shù)量分：多極神經(jīng)元：一個軸突和多個樹突雙極神經(jīng)元：軸突和樹突各一個假單極神經(jīng)元：從胞體發(fā)出一個突起，但在不出現(xiàn)分支，一支進入中樞神經(jīng)統(tǒng)，另一支分布到周圍的其他器官多極神經(jīng)元雙極神經(jīng)元假