消毒與滅菌（動(dòng)物微生物課件）

化學(xué)因素對(duì)微生物的影響高效消毒劑可殺滅一切微生物，包括芽孢(碘酊、福爾馬林等)。中效消毒劑可殺滅細(xì)菌繁殖體，不能殺滅芽孢(乙醇、碘伏等)。低效消毒劑可殺滅細(xì)菌繁殖體，不能殺滅結(jié)核桿菌、親水性病毒或芽孢(苯扎溴銨、氯己定等)。類(lèi)別作用機(jī)制常用種類(lèi)酚類(lèi)蛋白變性，細(xì)胞膜損傷石炭酸醇類(lèi)蛋白變性乙醇氧化劑氧化、蛋白沉淀高錳酸鉀、過(guò)氧乙酸、碘酒重金屬鹽氧化、蛋白酶變性紅汞、硫柳汞表面活性劑蛋白變性，細(xì)胞膜損傷新潔而滅染料干擾氧化、抑制繁殖龍膽紫酸堿類(lèi)破壞膜、壁，蛋白凝固醋酸、生石灰烷化劑蛋白質(zhì)、核酸烷基化環(huán)氧乙烷將物品洗凈、擦干后，浸沒(méi)在消毒液中進(jìn)行消毒滅菌的方法。浸泡法利用噴霧器將消毒劑變成微粒氣霧彌散在空氣中，對(duì)空氣和物品表面進(jìn)行消毒滅菌的方法。噴霧法將消毒劑加熱或加人氧化劑，使其產(chǎn)生氣體來(lái)進(jìn)行消毒滅菌的方法。熏蒸法用消毒劑直接擦拭機(jī)體或物品表面，如皮膚、桌椅等，達(dá)到消毒滅菌的方法。擦拭法B干擾微生物酶系統(tǒng)和影響其代謝C改變細(xì)菌細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的通透性A使菌體蛋白變性或凝固消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間微生物的種類(lèi)與數(shù)量環(huán)境中有機(jī)物的存在生物因素對(duì)微生物的影響1共生2寄生3拮抗一種生物從另一生物獲取其所需的營(yíng)養(yǎng)，賴以為生，并往往對(duì)后者呈現(xiàn)傷害作用的現(xiàn)象，稱為寄生。如病原微生物與其寄生的動(dòng)物之間兩種或多種生物生活在一起時(shí)，彼此并不相互損害而是互為有利的現(xiàn)象，稱為共生。反芻動(dòng)物瘤胃微生物與動(dòng)物機(jī)體的共生現(xiàn)象最為典型。豆科植物與固氮菌之間也存在共生關(guān)系。當(dāng)兩種微生物生活在一起時(shí)，一種微生物能產(chǎn)生另一種微生物毒害作用的物質(zhì)，從而抑制或殺滅另一種微生物的現(xiàn)象，稱為拮抗。

拮抗的作用方式

拮抗的作用方式干擾素細(xì)菌素抗生素噬菌體植物殺菌素微生物在自然界的分布土壤的環(huán)境適合微生物的生長(zhǎng)微生物的種類(lèi)：細(xì)菌、放線菌、真菌、螺旋體、噬菌體等。其中主要是細(xì)菌，占土壤微生物總數(shù)的70%～90%。

微生物在土壤中的分布特點(diǎn)：

表層微生物數(shù)量較少。在離地面10～20cm深的土層中微生物的數(shù)量最多。愈往深處則微生物愈少，在數(shù)米深的土層處幾乎可達(dá)無(wú)菌。土壤中的病原微生物來(lái)源病原微生物可隨著動(dòng)、植物尸體及人、畜排泄物、分泌物、污水、垃圾等廢棄物一起進(jìn)入土壤的。常見(jiàn)的病原微生物少數(shù)抵抗力強(qiáng)的芽孢菌（如炭疽桿菌、破傷風(fēng)梭菌、腐敗梭菌、魏氏梭菌等的芽孢），一些抵抗力較強(qiáng)的非芽孢病原菌常以土壤為媒介進(jìn)行疫病的傳播。來(lái)源隨土壤、動(dòng)物的排泄物、動(dòng)植物殘?bào)w、垃圾、污水和雨水等匯集到水中。種類(lèi)腐生性細(xì)菌、真菌、螺旋體、噬菌體等。分布地面水比地下水含菌量多，雨水和雪水含菌數(shù)量少。水中常見(jiàn)的病原微生物炭疽桿菌、豬丹毒桿菌、沙門(mén)氏菌、大腸桿菌、鼻疽桿菌、布氏桿菌、巴氏桿菌、鉤端螺旋體、口蹄疫病毒和豬瘟病毒等。被病原微生物污染的水體，是傳染病發(fā)生和流行的重要傳播媒介。水質(zhì)細(xì)菌學(xué)檢查三項(xiàng)指標(biāo)指標(biāo)名稱意義國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)菌總數(shù)檢定1ml自來(lái)水中所含各種活細(xì)菌數(shù)<100個(gè)大腸桿菌價(jià)能檢出1個(gè)大腸桿菌的最小自來(lái)水量>300ml大腸桿菌指數(shù)在1000ml自來(lái)水中檢出的大腸桿菌數(shù)<3個(gè)種類(lèi)主要是真菌和細(xì)菌。來(lái)源人、動(dòng)植物及土壤中的微生物通過(guò)水滴、塵埃、飛沫或噴嚏等微粒一并散布進(jìn)入，以氣溶膠的形式存在。霉菌的孢子，則能被氣流直接吹入空氣中。分布一般在畜舍、醫(yī)院、宿舍、城市街道等地空氣中含微生物量較高，而在大洋、高山或極地上空的空氣中，微生物的含量就很少。

檢測(cè)空氣中微生物常用的方法主要有濾過(guò)法和沉降法兩種。濾過(guò)法的原理是使一定體積的空氣通過(guò)一定體積的某種無(wú)菌吸附劑（通常為無(wú)菌水），然后用平板培養(yǎng)吸附劑中的微生物，以平板上出現(xiàn)的菌落數(shù)推算空氣中的微生物數(shù)。沉降法的原理是將盛有培養(yǎng)基的平板置空氣中暴露一定時(shí)間后，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)用出現(xiàn)的菌落數(shù)來(lái)推算空氣中的微生物數(shù)。正常菌群

概念

正常菌群對(duì)機(jī)體的有益作用正常動(dòng)物體的微生物的分布體表

消化道

呼吸道

泌尿生殖道菌群失調(diào)與菌群失調(diào)癥菌群失調(diào)的概念菌群失調(diào)癥：概念

原因

避免措施無(wú)菌動(dòng)物和無(wú)特定病原體動(dòng)物

正常菌群概念在正常動(dòng)物的體表或與外界相通的腔道經(jīng)常有一些微生物存在，它們對(duì)宿主不但無(wú)害，而且是有益的和必需的，這些微生物稱為正常微生物群或正常菌群。2.正常菌群對(duì)機(jī)體的有益作用：營(yíng)養(yǎng)作用

免疫作用

生物頡頏

體表的微生物種類(lèi)以球菌最多，包括葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌等。當(dāng)皮膚出現(xiàn)創(chuàng)傷時(shí)，其中某些菌是引起化膿感染的主要原因。如金黃色葡萄球菌

消化道中的微生物口腔

較多，有葡萄球菌、鏈球菌、乳酸桿菌、棒狀桿菌等。食道

很少。胃單胃動(dòng)物：有乳酸桿菌、幽門(mén)螺桿菌和胃八疊球菌等少量細(xì)菌。反芻動(dòng)物瘤胃：有大量細(xì)菌，其中分解纖維素的細(xì)菌有產(chǎn)琥珀酸纖維菌、黃色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌、小生纖維梭菌和小瘤胃桿菌；合成蛋白質(zhì)的細(xì)菌有淀粉球菌、淀粉八疊球菌和淀粉螺旋菌等；瘤胃厭氧真菌具有降解纖維和半纖維的能力，有的還具有降解淀粉、蛋白質(zhì)能力。小腸：很少，腸道后段逐漸增多，主要有大腸桿菌、腸球菌等。呼吸道中的微生物常見(jiàn)的有葡萄球菌、鏈球菌、巴氏桿菌和肺炎球菌等。以鼻腔內(nèi)細(xì)菌為最多，其中主要是葡萄球菌，它們一般隨空氣進(jìn)入。上呼吸道黏膜，主要是扁桃體黏膜上常棲居著一些微生物，有葡萄球菌、肺炎球菌、巴氏桿菌等。這些微生物在動(dòng)物抵抗力減弱時(shí)，就可大量繁殖，引起原發(fā)、并發(fā)或繼發(fā)感染。支氣管末梢和肺泡內(nèi)一般無(wú)細(xì)菌，只有在宿主患病時(shí)才有微生物存在。泌尿生殖道的微生物在正常情況下，泌尿系統(tǒng)中的腎臟、輸尿管、睪丸、卵巢、子宮以及輸精管、輸卵管等是無(wú)菌的，只是在泌尿生殖道口有細(xì)菌。陰道中微生物主要為乳桿菌，其次是葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌、抗酸桿菌等；尿道中一般可檢測(cè)到葡萄球菌、棒狀桿菌等，偶有腸球菌和霉形體。尿道口常棲居一些革蘭氏陰性或陽(yáng)性球菌，以及若干不知名的桿菌。如發(fā)生上行性感染，細(xì)菌如大腸桿菌等可在膀胱、腎臟檢出。菌群失調(diào)的概念宿主受到日糧突然變化、環(huán)境變化、患病、手術(shù)等應(yīng)激，或是濫用抗菌藥物等情況下，正常菌群中的微生物種類(lèi)、數(shù)量發(fā)生改變，菌群平衡受到破壞，即稱為菌群失調(diào)。無(wú)菌動(dòng)物（GF動(dòng)物）無(wú)菌動(dòng)物是用無(wú)菌操作方法從母體取出正常健康的胎兒，在無(wú)菌環(huán)境中，采用一切杜絕微生物傳入的手段進(jìn)行飼養(yǎng)培育而成的。這種動(dòng)物可用于研究消化道微生物與動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)的關(guān)系、免疫、腫瘤等方面的問(wèn)題。無(wú)特定病原體動(dòng)物（SPF動(dòng)物）在胎兒取出的最初兩周，飼養(yǎng)方法同無(wú)菌動(dòng)物，以后飼養(yǎng)于有屏障系統(tǒng)的室內(nèi)，嚴(yán)格防止特定病原體的感染，但可能自然感染除特定病原體以外的一般微生物。各個(gè)國(guó)家根據(jù)控制疫病規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)無(wú)特定病原體動(dòng)物有不同的要求。培育無(wú)特定病原體動(dòng)物是為生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)提供沒(méi)有特定病原體抗體的健康動(dòng)物，如培育成的SPF雞胚已大量應(yīng)用于疫苗的制造和病毒的分離鑒定。消毒與滅菌滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。消毒：殺死物體表面上的病原微生物，達(dá)到控制微生物傳染的方法,并不一定能殺死含芽胞的細(xì)菌或非病原微生物。無(wú)菌：不存在活菌的意思。防腐：防止或抑制體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。1消毒2滅菌對(duì)有害微生物的控制方法消毒是相對(duì)的，不一定達(dá)到無(wú)菌的要求。消毒是一種采用較溫和的化學(xué)、物理等方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體或動(dòng)、植物有害的病原菌，而對(duì)被消毒的對(duì)象基本無(wú)害的措施。通常采用化學(xué)方法消毒。消毒劑：用于消毒的化學(xué)藥品稱為消毒劑。例如：對(duì)皮膚、水果、飲用水進(jìn)行藥劑消毒的方法；對(duì)啤酒、牛奶、果汁和醬油等進(jìn)行消毒處理的巴氏消毒法等。

滅菌是絕對(duì)的，一定達(dá)到無(wú)菌的要求。滅菌是采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施。例如：高溫滅菌、輻射滅菌等手提式高壓蒸汽滅菌器全自動(dòng)高壓蒸氣滅菌器物理因素對(duì)微生物的影響超聲波光線與射線滲透壓濕度溫度生長(zhǎng)溫度利于微生物生長(zhǎng)繁殖，適宜于微生物培養(yǎng)、進(jìn)行試驗(yàn)、食品生產(chǎn)等。低溫大多數(shù)微生物代謝活動(dòng)減弱，生長(zhǎng)緩慢，但低溫時(shí)仍保留活性。用低溫保存疫苗、菌種等。高溫使菌體蛋白變性或凝固，酶失去活性，導(dǎo)致微生物死亡。用高溫進(jìn)行消毒滅菌。微生物的生長(zhǎng)溫度

細(xì)菌類(lèi)型

生長(zhǎng)溫度（℃）

分布最低最適最高嗜冷菌-5～010～2025～30水和冷藏環(huán)境中的細(xì)菌嗜溫菌

10～2018～2840～45腐生菌10～203740～45病原菌嗜熱菌25～4550～6070～85溫泉及堆積肥中的細(xì)菌高溫用于消毒滅菌─熱力滅菌法濕熱滅菌法煮沸法

流通蒸汽滅菌法

巴氏消毒法

高壓蒸汽滅菌法干熱滅菌法

火焰滅菌法

熱空氣滅菌法煮沸法方法100℃，10～20min，殺滅細(xì)菌繁殖體；加入1%碳酸鈉或2%～5%石炭酸，可增強(qiáng)滅菌效果。所

用

儀

器

煮沸消毒器

適

用

范

圍

外科手術(shù)器械、注射器等。流通蒸汽滅菌法（間歇滅菌法）方法100℃的蒸汽30min，將被滅菌物品放于37℃溫箱3～4小時(shí)或過(guò)夜，第二天再100℃蒸30min，如此連續(xù)3d。儀器：用蒸籠或流通蒸汽滅菌器。適用范圍：某些不耐高溫的培養(yǎng)基。

巴氏消毒法（巴斯德首創(chuàng)

）類(lèi)型與方法低溫巴氏消毒法

：63～65℃，30min。高溫巴氏消毒法

：71～75℃，15s。超高溫巴氏消毒法（UHT）：132℃保持1～2s，迅速冷卻至10℃以下

（冷擊）。適用范圍

鮮乳、果汁、葡萄酒等食品。優(yōu)點(diǎn)

可殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定微生物，而不嚴(yán)重破壞其營(yíng)養(yǎng)成分和風(fēng)味。高壓蒸汽滅菌法條件和效果

0.105MPa、121.3℃、15～30min完全滅菌所用儀器

高壓蒸汽滅菌器

適用范圍耐高溫、高壓、不怕潮濕的物品，如各種培養(yǎng)基、金屬器械、工作服。全自動(dòng)高壓蒸氣滅菌器火

焰

滅

菌

法灼燒滅菌主要用于接種環(huán)、試管、金屬器械的滅菌。焚燒滅菌主要用于傳染病病畜禽及實(shí)驗(yàn)感染動(dòng)物的

尸體、墊料及其他污染物的滅菌。熱空氣滅菌法條件和效果

160℃維持1～2h，滅菌儀器

電熱干燥箱適用范圍

高溫下不損壞、不變質(zhì)的物品，如各種玻璃器皿、瓷器、金屬器械等的滅菌。干燥的影響影

響干燥使微生物代謝會(huì)發(fā)生障礙，生長(zhǎng)繁殖受阻，還可引起蛋白質(zhì)變性和鹽度升高而逐漸導(dǎo)致微生物死亡。應(yīng)

用常用干燥法保存飼草、飼料、皮張、藥物等。不同微生物耐干燥時(shí)間有長(zhǎng)有短巴氏桿菌、淋球菌和鼻疽桿菌：幾天；結(jié)核分支桿菌：90天；細(xì)菌的芽孢：幾年至幾十年。不同滲透壓條件下微生物的生存狀態(tài)高滲：“質(zhì)壁分離”，微生物生長(zhǎng)被抑制甚至死亡。低滲：吸水膨脹，甚至破裂，但微生物較耐低滲。等滲：保持活力

。

應(yīng)用利用鹽腌、糖漬等方法保存食品或果品；常在細(xì)菌人工培養(yǎng)基中或制備細(xì)菌懸液時(shí)加入適量氯化鈉，以保持滲透壓的相對(duì)平衡。超

聲

波：頻率在20000～200000Hz的聲波稱超聲波。

作用原理：震蕩殺菌：使微生物細(xì)胞內(nèi)含物劇烈震蕩而被破壞。氧化殺菌：因在水溶液中超聲波能產(chǎn)生過(guò)氧化氫。熱

效

應(yīng)：破壞細(xì)胞的酶系統(tǒng)?？栈饔茫杭丛谝后w中形成許多真空狀態(tài)的小空腔，空腔崩破產(chǎn)生的巨大壓力使細(xì)胞裂解。臨床應(yīng)用：主要用于粉碎細(xì)胞，提取細(xì)胞組分試驗(yàn)研究及保藏食品等。光線射線類(lèi)型作用原理作用特點(diǎn)應(yīng)用可見(jiàn)光原理不