臨床生物化學檢驗I 大題重點（大學期末復習資料）

臨床生物化學檢驗的發(fā)展趨勢

①實驗室高新技術(shù)的發(fā)展：分離與分析技術(shù)、自動化與酶法分析、標準物質(zhì)和體外診斷試劑

②快速小型化檢驗技術(shù)的發(fā)展：快速檢測試條、小型化多用途檢驗儀器

③檢驗質(zhì)量控制和系統(tǒng)評估：檢驗結(jié)果可靠有用、檢驗與臨床結(jié)合密切

臨床生物化學檢驗與臨床醫(yī)學的關(guān)系

與探討疾病發(fā)生機制的關(guān)系、與臨床疾病診斷和治療的關(guān)系（疾病診斷和早期診斷，判斷疾病

的嚴重程度和預后，治療效果監(jiān)測，健康普查和咨詢）、與臨床和基礎(chǔ)醫(yī)學研究的關(guān)系

同型半胱氨酸正常代謝:

代謝紊亂

一、同型半胱氨酸尿癥：是最常見的以HCY（同型半胱氨酸）增高為特征的代謝紊亂。主

要有三種原因：

①胱硫酸合成酶缺失（常見）。體液HCY及其前體積聚，Cys和胱氨酸下降。

生化異常：血漿同型胱氨酸（HCY的氧化形式）達到可檢測水平，血漿Met升高?尿含有同

型胱氨酸和其他含硫氨基酸如Met、甲硫氨酸硫氧化物和Cys的二硫化物和HCY。

②N5-甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)甲基酶缺失（罕見）。血漿Met不升高

③食物營養(yǎng)缺乏：缺乏維生素B6（胱硫酸合成酶的輔酶）、B12（甲硫氨酸合成酶的輔

酶）

二、與心血管疾?。焊咚紿CY能增加人體自由基的生成，是引發(fā)心血管疾病的危險因子

【臨床應用】：

血脂正常，膽固醇不高的人群。有嚴重AS性疾病和家族史人群。有早期（V50歲）冠心病、

腦血管或外周血管病癥狀的人群。服用氨甲喋吟、氨茶堿、苯妥英等人群中HCY升高的比

例較高，有進一步引發(fā)血管疾病的可能，需要聯(lián)合考慮。

繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂：主要發(fā)生在肝臟和腎臟疾患（蛋白質(zhì)營養(yǎng)紊亂）以及燒傷等。

①肝功能衰竭和氨基酸代謝失衡：肝衰竭時芳香族氨基酸（AAA）在肝臟中的降解減少，

其血漿濃度升高；而支鏈氨基酸（BCAA）在肌肉等組織中的分解沒有減少，相反因肝臟降

解胰島素減少、血漿胰島素升高，促進BCAA進入肌肉，降解增多，導致血漿BCAA濃度

下降。正常情況下BCAA/AAA=3.0~3.5,肝病時可顯著下降，比值降至1左右往往發(fā)生肝

性腦病。芳香族色氨酸、苯丙氨酸因血液濃度上升，進入腦組織的量也增加；血漿BCAA

下降又導致AAA進入腦細胞的比例增加，這些AAA在腦組織中可形成假性神經(jīng)遞質(zhì)，是

引起肝性腦病和肝昏迷的重要原因。

②腎臟疾?。河捎谀I小管損害、腎近曲小管功能障礙引起。某些腎臟疾病時僅有腎小管重吸

收氨基酸障礙（氨基酸尿）；有些病人的腎近曲小管的所有重吸收功能均受影響，已經(jīng)不僅

僅是氨基酸尿。

血清總蛋白測定

①凱氏定氮法：參考方法

優(yōu)點：準確度高，回收率達101.54%；精密度好，CV%為0.85%

缺點：操作流程長，程序復雜。各種蛋白質(zhì)含氮量在疾病狀態(tài)差異較大等，但平均為16%,

比較準確。

該法主要用作血清蛋白質(zhì)標準品定值及參考性工作，血清總蛋白常規(guī)測定中很少使用。

②雙縮胭法：是臨床測定血清總蛋白首選的常規(guī)方法

【原理】：血清中蛋白質(zhì)的兩個相鄰肽鍵（-CO-NH-）在堿性溶液中能與二價銅離子作用產(chǎn)

生穩(wěn)定的紫色絡合物。生成的紫色絡合物顏色的深淺與血清蛋白質(zhì)含量成正比，故可用來測

定蛋白質(zhì)含量。

優(yōu)點：顯色穩(wěn)定性好，干擾物質(zhì)少，試劑單一，方法簡便

缺點：靈敏度較低

干擾物質(zhì)：主要為右旋糖酊，其與反應混合液中的銅和酒石酸結(jié)合形成沉淀，影響測定結(jié)果

的準確度。此外膽紅素、血紅蛋白、脂濁、某些抗菌素和錢鹽等也可干擾結(jié)果。

血清清蛋白測定

染料結(jié)合法--國內(nèi)最常用方法是澳甲酚綠（bromcresolgreen,BCG）法，還有浪甲酚紫

（bromcresolpurple,BCP）法。BCP法比BCG法受其他血漿蛋白的干擾少，但靈敏度較低，

且與非人源性清蛋白結(jié)合力相當弱，不適合于測定動物樣本中的清蛋白，故BCP法臨床應

用較少。

【原理】：血清清蛋白（pI4.7）在pH4.2的緩沖液中帶正電荷，在有非離子型表面活性劑存在

時.，可與帶負電荷的染料BCG結(jié)合形成藍綠色復合物，其顏色深淺與清蛋白濃度成正比。

優(yōu)點：BCG法靈敏度高、操作簡便、重復性好，既可用作手工操作也可自動分析。但

缺點：該法存在問題較多，主要是試劑標準化、標準品的選用、反應時間等，如不嚴格掌握,

將會對測定結(jié)果造成嚴重影響。

反應時間：要求血清清蛋白的測定在30s內(nèi)完成（快反應），30s后球蛋白的非特異性反應增

iWjo

I型糖尿病：主要是因胰島B細胞的破壞引起胰島素絕對不足。

主要是因胰島B細胞的破壞引起胰島素絕對不足。按病因和發(fā)病機制分為：免疫介導性1

型糖尿病、特發(fā)性1型糖尿病

一、免疫介導性I型糖尿病

【病因】

遺傳易感性：與人類白細胞組織相容性抗原（HLA）有很強關(guān)聯(lián)。

環(huán)境因素：常見的有病毒感染（風疹病毒、柯薩奇B病毒等）、化學物質(zhì)、生活方式、精神

應激以及營養(yǎng)成分改變（如牛奶）等。

自身免疫機制：患者血清中存在一些自身抗體，這些抗體有的在發(fā)病前數(shù)年可以檢測到，如

血清胰島細胞胞漿抗體（ICA）、胰島素自身抗體（IAA）、谷氨酸脫竣酶自身抗體（GADA）

等。

【特點】

①、胰島P細胞的自身免疫性損傷是重要的發(fā)病機制，大多數(shù)患者體內(nèi)存在自身抗體為特征。

②、血清胰島素或C肽水平低。③、胰島B細胞的破壞引起胰島素絕對不足，且具有酮癥

酸中毒傾向，治療依賴胰島素。④、遺傳因素在發(fā)病中起重要作用，特別與HLA某些基因

型有很強關(guān)聯(lián)。⑤、任何年齡均可發(fā)病，但常見于兒童和青少年，起病較急。

二、特發(fā)性I型糖尿病

該類型少見，主要見于非洲及亞洲人。

特點是具有很強的遺傳性，胰島素明顯缺乏，容易發(fā)生酮癥酸中毒，但缺乏自身免疫機制參

與以及與HLA關(guān)聯(lián)的特點。

H型糖尿?。菏怯啥鄠€基因及環(huán)境因素綜合引起的復雜病，其病因是：遺傳+環(huán)境因素。

2型糖尿病有更強的遺傳易感性，并有顯著的異質(zhì)性。(異質(zhì)性疾?。翰∫虿皇呛芮宄?/p>

且在現(xiàn)有的研究結(jié)果中，未發(fā)現(xiàn)一個很統(tǒng)一的病因與機制)

環(huán)境因素主要有人口老齡化、生活方式改變、營養(yǎng)過剩、體力活動過少、應激、化學物質(zhì)等。

【機制】

胰島素抵抗(IR)和胰島3細胞功能減退是2型糖尿病的主要發(fā)病機制，是指胰島素作用的

靶器官(主要是肝臟、肌肉和脂肪組織)對正常濃度的胰島素不能產(chǎn)生正常的生物學反應，

即胰島素敏感性降低。

胰島素抵抗的原因包括遺傳和環(huán)境兩方面因素。

在DM發(fā)生發(fā)展過程中，出現(xiàn)的高血糖和脂代謝紊亂可導致胰島素敏感性進一步降低和胰

島B細胞功能損傷，分別稱為葡萄糖毒性(glucotoxicity)和脂毒性(lipotoxicity)。

【特點】

①、常見肥胖的中老年成人，偶見于幼兒。②、起病較慢，在疾病早期階段可無明顯癥狀，

常以并發(fā)癥出現(xiàn)為首診。③、血清胰島素水平可正?；蛏愿?，在糖刺激后呈延遲釋放。④、

自身抗體呈陰性。⑤、早期單用口服降糖藥一般可以控制血糖。⑥、自發(fā)性酮癥酸中毒較少。

⑦、有遺傳傾向，但與HLA基因型無關(guān)。

糖尿病患者由于胰島素的絕對或相對不足，導致機體出現(xiàn)糖、脂肪、蛋白質(zhì)、水及電解質(zhì)等

多種物質(zhì)的代謝紊亂。

①、糖代謝紊亂：由于胰島素的絕對或相對不足，葡萄糖在肝臟、肌肉和脂肪組織的利用減

少，肝糖原分解和糖異生加速，糖原合成減少，引起血糖增高。

血糖過高如超過腎糖閾可產(chǎn)生滲透性利尿。嚴重高血糖可使細胞外液的滲透壓急劇升高，引

起腦細胞脫水，出現(xiàn)高滲性高血糖昏迷。

②、脂代謝異常：由于胰島素絕對或相對不足，脂肪合成減少，脂肪分解增加，血中游離脂

肪酸和甘油三酯濃度增加。

在胰島素嚴重不足時，因為脂肪大量分解，生成酮體過多，當超過機體對酮體的利用能力時,

造成酮血癥，嚴重時引起酮癥酸中毒。

③、蛋白質(zhì)代謝異常：由于胰島素絕對或相對不足，蛋白質(zhì)合成減少，分解加速，導致機體

出現(xiàn)負氮平衡、體重減輕、生長發(fā)育遲緩等現(xiàn)象。

糖尿病典型的臨床表現(xiàn)是“三多一少”，即多飲、多食、多尿、體量減輕。

一、糖尿病的診斷標準

1.糖尿病癥狀(如多食、多飲、多尿、體重減輕)+隨機血漿葡萄糖Nll.lmmol/L(200mg/dl)

2.空腹血漿葡萄糖(FPG)>7.0mmoi/L(126mg/dl)

3.口服葡萄糖耐量試驗2h血漿葡萄糖Nll.lmmol/L(200mg/dl)

【注］其中任何一種出現(xiàn)陽性結(jié)果，需用上述方法中的任意一種進行復查，予以證實，診

斷才能成立。mmol/L轉(zhuǎn)換mg/dl為乘以換算系數(shù)18(即分子量除以10)。

二、妊娠期糖尿病診斷標準

2007年中華醫(yī)學會圍產(chǎn)醫(yī)學分會妊娠合并糖尿病協(xié)作組通過的妊娠期糖尿病診斷標準是符

合下列標準之一，即可診斷GDM：①、兩次或兩次以上，F(xiàn)PG》5.8mmol/L；②、OGTT4

項值中2項達到或超過上述標準；③、50gGCTlh血糖211.1mmol/L。

妊娠期糖耐量受損(gestationalimpairedglucosetolerance,G1GT)：OGTT4項值中任何1項

異常即可診斷。

表11-4空腹血糖受損和糖耐量減低診斷標準(mmol/L)

項目IFGIGT

空腹血糖(FPG)6.1?6.9*<7.0

服糖后2h血糖(2hPG)<7.87.8-11.0

注：*2003年國際糖尿病專家委員會建議將IFG的診斷標準修訂為5.6~6.9mmol/L。

葡萄糖測定

測定體液葡葡糖的方法主要有氧化還原法、芳香胺縮合法及酶法三大類，目前多采用酶法。

國際臨床化學協(xié)會(IFCC)推薦的參考方法是已糖激酶(HK)法。我國推薦的方法是葡萄糖

氧化酶(GOD)法。

一、葡萄糖氧化酶法

【原理】：GOD催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸內(nèi)酯，并釋放出過氧化氫，后者在POD的催化

下，與4-氨基安替比林偶聯(lián)酚縮合為紅色醒類化合物，此化合物的生成量與葡萄糖含量成

正比。

葡萄糖+O2+H2O(GOD)f葡萄糖酸內(nèi)酯+H2O2

H2O2+4-氨基安替比林+酚(POD)-紅色醒類化合物，即Trinder反應

【評價】該方法準確度和精密度均達到臨床要求，操作簡便，推薦為血糖測定的常規(guī)檢驗。

GOD法也適于測定腦脊液葡萄糖濃度，不能直接用于尿標本葡萄糖測定。因為尿中含較高

濃度還原性物質(zhì)如尿酸、維生素C、膽紅素等的干擾，使測定值出現(xiàn)負偏差。

二、己糖激酶法

【原理】：葡萄糖在HK作用下與ATP反應生成葡萄糖-6-磷酸和ADP,前者在G-6-PD催化

下，使NADP+還原成為NADPH。生成的NADPH葡萄糖含量成正比。

葡萄糖+ATP(HK)-葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADP+(G-6-PD)-葡萄糖-6-磷酸內(nèi)酯+NADPH+H+

【評價】HK法準確度和精密度高，特異性高于GOD法，適用于自動化分析。輕度溶血、

脂血、黃疸和草酸鹽等對本方法無干擾，可用于尿糖定量。

糖化蛋白：葡萄糖可以和體內(nèi)多種蛋白質(zhì)中的氨基不可逆地結(jié)合，形成糖化蛋白，此過程不

需酶的參與，與血糖濃度和高血糖存在時間相關(guān)。

①糖化血紅蛋白（GHb）：是葡萄糖或其他糖與血紅蛋白的氨基發(fā)生非酶催化反應的物質(zhì)（一

種不可逆的糖化蛋白）。

【臨床意義】糖化血紅蛋白的形成是不可逆的，其血濃度與紅細胞壽命和該時期內(nèi)血糖的平

均濃度有關(guān)。紅細胞平均壽命約為90-120天，所以糖化血紅蛋白能反映近8~10周內(nèi)的平

均血糖水平。

②葡萄糖通過非酶促糖基化反應與血清蛋白結(jié)合，形成糖化血清蛋白（GSP）。

血漿脂蛋白中的蛋白質(zhì)部分稱為載脂蛋白（Apo）,迄今已發(fā)現(xiàn)20余種Apo。

不同脂蛋白含不同的Apo：

CM：含ApoB48而不含ApoBlOO

VLDL：除含ApoBlOO外，還含ApoCI、CII.CIII及E

LDL：幾乎只含ApoBlOO

HDL：主要含ApoAI、All

【功能】

在結(jié)合和轉(zhuǎn)運脂質(zhì)及穩(wěn)定脂蛋白的結(jié)構(gòu)上發(fā)揮主要作用；

調(diào)節(jié)脂蛋白代謝關(guān)鍵酶（如LPL、LCAT、HL）活性LCAT：卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶（血漿

中）

參與脂蛋白受體的識別：如HDL受體、LDLR或稱為ApoB/E受體、清道夫受體、ApoE受

體（即LRP：LDL受體相關(guān)蛋白）

脂蛋白受體：是一類位于細胞膜上的糖蛋白，這些蛋白質(zhì)能以高親和性方式與相應的脂蛋白

配體（ligand）相互作用。

目前已闡明的受體包括：1、LDL受體。2、清道夫受體。3、LDL受體相關(guān)蛋白。4、VLDL

受體。

一、LDL受體

在體內(nèi)LDL代謝中，LDL-R起雙重作用：①清除循環(huán)中的IDL,限制LDL的生成；②介

導細胞攝取LDL,增加LDL的降解。

正常情況下，約2/3的LDL經(jīng)由LDL-R途徑清除，其中肝臟起主要作用。

其他含ApoBlOO.E的脂蛋白如VLDL、B-VLDL均可與LDL-R結(jié)合，內(nèi)吞入細胞使其獲

得脂類，主要是膽固醇。

LDL-R通過介導LDL進入細胞內(nèi)，來調(diào)節(jié)膽固醇水平，用于細胞增殖、固醇類激素及膽汁

酸鹽的合成等。

二、清道夫受體

清道夫受體的配體廣泛，有：乙?；揎椈蜓趸揎椀腖DL,多聚次黃喋吟核昔酸，多聚

鳥喋吟核甘酸，硫酸右旋糖肝，絲氨酸磷脂，內(nèi)毒素等。

清道夫受體的生理功能不清，由于其與多種配體結(jié)合，因此認為其與巨噬細胞功能相關(guān)，如

黏附和宿主防御功能。

體外實驗表明，清道夫受體能介導氧化LDL（ox-LDL）進入巨噬細胞，參與動脈粥樣硬化

形成。

三、LDL受體相關(guān)蛋白（LRP）

LRP是一種內(nèi)吞性肝臟受體，能識別多種配體：①LRP是含ApoE殘粒脂蛋白的受體，如

VLDL、P-VLDL；②LRP是蛋白酶和蛋白酶抑制劑復合物的受體，如a2-巨球蛋白、

PAI-1；③LRP是毒素的受體，如綠膿桿菌的外毒素A。

四、VLDL受體

人VLDL-R分布于骨骼肌、腎臟、腦組織和脂肪組織，在肝臟僅見極低水平的受體mRNA。

VLDL-R僅對含ApoE的脂蛋白有高親和性，對LDL則呈現(xiàn)低親和性。與LDL-R不同，

VLDL-R不受膽固醇負反饋抑制

VLDL-R的生理功能尚不清楚，可能與內(nèi)源性TG從肝臟轉(zhuǎn)移至肌肉與脂肪組織有

關(guān)。VLDL-R在脂肪細胞中多見，可能與肥胖成因有關(guān)。

LDL受體途徑：LDL或其他含有apoBlOO的脂蛋白與LDL受體結(jié)合后，內(nèi)吞入細胞，經(jīng)

溶酶體酶作用，CE水解為FC并進入胞質(zhì)的代謝庫，供細胞膜等膜結(jié)構(gòu)利用，這一代謝過

程稱為

若細胞內(nèi)CH濃度升高，可出現(xiàn)：①抑制HMG-CoA還原酶，以減少自身的膽固醇合成；②

抑制LDL受體基因的表達，減少其形成，從而減少LDL的攝?。虎奂せ顑?nèi)質(zhì)網(wǎng)脂?；鵆oA

膽固醇酰轉(zhuǎn)移酶（ACAT）,使游離膽固醇在胞質(zhì)內(nèi)酯化成膽固醇酯貯存，以供細胞的需要。

通過以上作用，控制細胞內(nèi)膽固醇含量處于正常動態(tài)平衡。

高脂血癥：是指血漿中chol和/或TG水平升高。它實際上是血漿中某一類或某幾類脂蛋白

水平升高的表現(xiàn)，嚴格說來應稱為高脂蛋白血癥（hyperlipoproteinemia）。

近年來，已逐漸認識到血漿中HDL-C降低也是一種血脂代謝紊亂。因而，有人建議采用脂質(zhì)

異常血癥（dyslipidemia）,并認為這一名稱能更為全面準確地反映血脂代謝紊亂狀態(tài)。

按病因分型：

①、繼發(fā)性高脂蛋白血癥：指某些原發(fā)病在病理演變過程中造成脂蛋白代謝紊亂，而繼發(fā)出

現(xiàn)高脂蛋白血癥。如糖尿病、腎病綜合征、甲狀腺功能減退癥等。

②、原發(fā)性高脂蛋白血癥：指在排除了繼發(fā)性高脂血癥后，即可診斷為原發(fā)性高脂血癥。己

知部分原發(fā)性高脂血癥是由于先天性基因缺陷所致。

從臨床角度分型（簡易分型）：

①高膽固醇血癥：血清TC水平增高。②、混合型高脂蛋白血癥：血清TC與TG水平均增

高。③、高甘油三酯血癥：血清TG水平增高。④、低高密度脂蛋白血癥：血清HDL-C水

平減低。

【臨床表現(xiàn)】多數(shù)無任何癥狀和異常體征，常常是在進行臨床血脂檢查時被發(fā)現(xiàn)

脂質(zhì)在真皮內(nèi)沉積所引起的黃色瘤（黃瘤、黃疣）；脂質(zhì)在血管內(nèi)皮沉積所引起的動脈粥

樣硬化，產(chǎn)生冠心病和周圍血管病等；40歲以下出現(xiàn)明顯角膜老年環(huán)或眼底出現(xiàn)“番茄醬”

樣高脂蛋白血癥性視網(wǎng)膜；肝脾腫大；反復腹痛（胰腺炎）。

黃色瘤（xanthoma）：是一種異常的局限性皮膚隆凸起，其顏色可為黃色、桔黃色或棕紅色，多

呈結(jié)節(jié)、斑塊或丘疹形狀，質(zhì)地一般柔軟。主要是由于真皮內(nèi)集聚了吞噬脂質(zhì)的巨噬細胞（泡

沫細胞）又名黃色瘤細胞所致。

血清TC測定

【原理】

①、化學法：化學抽提法-ALBK法［CDC,1952/正己烷抽提，L-B反應顯色法］,用于常規(guī)

測定方法評價與監(jiān)控及參考血清定值。為參考方法。

國內(nèi)由衛(wèi)生部北京老年醫(yī)學研究所生化室建立的高效液相層析法（HPLC法）也推薦作為我

國TC測定的參考方法。

②、酶法（CHOD-PAP法），即膽固醇氧化酶-過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法

膽固醇酯+H2O（膽固醇酯酶）一膽固醇+脂肪酸

膽固醇+02（膽固醇氧化酶）fA4-膽笛烯酮+H2O2

H2O2+4-氨基安替比林(過氧化物酶)一釀亞胺+H20

【臨床意義】：高膽固醇血癥是動脈粥樣硬化的重要危險因素。

血清TC在4.5mmol/L以下冠心病(CHD)較少。

CHD患者血清TC多數(shù)在5.0~6.5mmol/L。水平越高，CHD發(fā)病越多越早。

血清膽固醇每降低1%,CHD的危險性可減少2%。

血清TG測定

【原理】

①、化學法：三氯甲烷-硅酸-變色酸法(VanHandel-Caslson法)是CDC測定TG的參考方

法。用于常規(guī)測定方法的評價與監(jiān)控及參考血清的定值。

國內(nèi)由衛(wèi)生部北京老年醫(yī)學研究所生化室建立的HPLC測定總甘油和游離甘油的方法擬推

薦為我國TG測定的參考方法。

②、酶法(GPO-PAP法)，即甘油磷酸氧化酶-過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法

1995年中華醫(yī)學會檢驗分會曾推薦：GPO-PAP兩步酶法作為血清TG常規(guī)測定方法

一般臨床實驗室可采用一步GPO-PAP法，有條件的實驗室應考慮開展游離甘油的測定或采

用兩步酶法。

TG+3H2O(LPL)―甘油+3RCOOH(脂肪酸)

甘油+ATP(GK+Mg2+)fG-3-P+ADP

G-3-P+02(GPO)一磷酸二羥丙酮+H2O2

2H2O2+酚+4-APP(POD)f醒亞胺(紅色)+4H2O

去除FG干擾可用：外空白法(同時用不含LPL的酶試劑測定FG作空白)、內(nèi)空白法(兩

步法——將LPL和4-AAP組成試劑2,其余部分為試劑1)

【臨床意義】前瞻性研究分析顯示高TG也是冠心病的獨立危險因子。

冠脈造影研究觀察到富含甘油三酯脂蛋白(TRLs)與冠脈狹窄程度呈顯著正相關(guān)，支持TRLs

在冠脈粥樣硬化病變進展中起重要作用，可能作用于AS病變的早期。

雖然繼發(fā)性或遺傳性因素可升高TG水平，但臨床中大部分血清TG升高見于代謝綜合征。

血清HDL-C測定

參考方法：超速離心結(jié)合ALBK法，主要用于校準物靶值的確立和常規(guī)方法準確性的鑒定。

硫酸葡聚糖-鎂沉淀法(dextransulfatemethod,DS法)結(jié)合ALBK法被美國膽固醇參考方

法實驗室網(wǎng)絡(CRMLN)作為指定的比較方法(designatedcomparisonmethod,DCM)

建議:勻相測定法(homogeneousmethod)作為臨床實驗室測定血清HDL-C的常規(guī)方法。

【臨床意義】

目前我國的《中國成人血脂異常防治指南(2007)》將HDL-C<1.04mmol/L(40mg/dl)為

減低；N1.04mmol/L(40mg/dl)為合適水平；>1.55mmol/L(60mg/dl)為理想水平。

低HDL血癥時動脈粥樣硬化的危險性增加。

血清HDL-C水平越低，發(fā)生動脈粥樣硬化的危險性增加。血清HDL-C每降低1%,CHD

的危險性可增加2%。

血清LDL-C測定

參考方法：超速離心結(jié)合ALBK法——同HDL-C。(Beta-quantification,B-定量法)

此法測定的LDL-C,實際上包括脂蛋白(a)[Lp(a)]和中間密度脂蛋白(IDL)的膽固醇含量。主

要用于校準物靶值的確立和常規(guī)方法準確性的鑒定。

建議：勻相測定法作為臨床實驗室測定血清LDL-C的常規(guī)方法。

【參考范圍】

成人2.07-3.37mmol/L(80-130mg/dl)。

目前我國的《中國成人血脂異常防治指南(2007)》將LDL-C分成3個水平：

<3.37mmol/L(130mg/dl)為合適范圍；3.37~4.12mmol/L(130-159mg/dl)為邊緣升高；》

4.14mmol/L(160mg/dl)為升高。

【臨床意義】

血清LDL-C水平隨年齡增加而升高。高脂、高熱量飲食、運動少和精神緊張等也可使LDL-C

水平升高。

LDL屬于致動脈粥樣硬化脂蛋白，其血中水平越高，動脈粥樣硬化的危險性越大。

失水：由于水攝入過少和/或水丟失過多而引起細胞外液減少。根據(jù)血漿鈉濃度的變化分

為高滲性、等滲性和低滲性失水三種。

常見原因：①消化道丟失，如嘔吐、腹瀉、消化道梗阻等；②腎臟丟失，如尿崩癥、腎小

管疾病、糖尿病等；③肺臟丟失，如由于呼吸道、神經(jīng)系統(tǒng)疾病造成的呼吸加快、加深；④

皮膚丟失，如高熱、劇烈運動大量出汗；⑤燒傷等造成的創(chuàng)面滲出；⑥各種原因造成的水

攝入不足。

一、高滲性失水：以水丟失為主。(1)血漿滲透壓增高[>295mOsm/(kg?H2O)]。(2)血

漿[Na+]>150mmol/L或[Cl-]+[HC03-]>140mmol/Lo

二、低滲性失水：以電解質(zhì)丟失為主。血漿[Na+]<130mmol/L,[Cl-]+[HC03-]<

120mmol/Lo

三、等滲性脫水：血漿[Na+]：130~150mmol/L?[Cl-]+[HC03-]:120~140mmol/Lo

水過多(水腫)：是水在體內(nèi)過多潴留的一種病理狀態(tài)。若過多的水進入細胞內(nèi)，導致細胞

內(nèi)水過多則稱為水中毒。按照體液晶體滲透壓的不同，水腫可分為高滲性(鹽中毒)、等滲

性和低滲性(水中毒)水腫。

一、高滲性水腫：見于高張鹽水或高張NaHC03的大量輸入。血漿Na+濃度增高(>

150mmol/L)>血漿滲透壓增高

二、低滲性水腫：見于急性和慢性腎功能衰竭。(1)血Na+被稀釋，出現(xiàn)稀釋性低鈉血癥(低

于130mmol/L)?(2)血漿滲透壓降低,(3)尿量增多,尿鈉減少。

三、等滲性水腫：亦稱全身性水腫?？稍l(fā)于心臟、肝、腎等疾病。通過醛固酮和ADH使

水、鈉排出減少，體內(nèi)水、鈉潴留，ECF增多，但滲透壓正常。

血氣：血液中的氣體，包括02、C02、N2及空氣中其它的氣體。主要是指參與物質(zhì)代謝和

氣體交換有關(guān)的02、C02兩種氣體。

血氣分析：通過測定血液pH、P02、PC02和碳酸氫鹽(HC03-)等幾項指標，了解心肺的

功能狀況，評價病人呼吸、氧化及酸堿平衡狀態(tài)。

標本的采集：

(1)取血前病人的準備：讓病人處于安靜舒適狀況，盡量使病人的呼吸穩(wěn)定。特別注意正

在治療過程中病人的采血。

(2)動脈血的采集：稅動脈、肱動脈、股動脈和足背動脈都可以進行采血。

A.使用密封性好的2ml或5ml無菌玻璃注射器。B.抗凝劑選用肝素鈉。C.針進入血管后，

動脈血自動進入注射器，取1?2ml血液。D.注射器不能回吸，排出第一滴血立即用橡皮帽

封住針頭。.注射器放在手掌中雙手來回搓動20秒，立即送檢。

(3)動脈化毛細血管血的采集：采血部位45℃熱水熱敷，使局部毛細血管血液中P02或

PC02分壓值與毛細血管動脈端血液中的數(shù)值相近。

采集標本一定要按要求嚴格操作，要特別注意避免標本與空氣接觸，及時排除采集時混入血

樣中的小氣泡，密封好標本容器。另外在檢測時要注意將標本充分混勻。

酸堿平衡紊亂:體內(nèi)酸性或堿性物質(zhì)過多，或者肺和腎功能障礙使調(diào)節(jié)酸堿平衡的功能障礙,

使血漿中［HC03-］、［H2co3］的濃度及其比值的變化超出正常范圍。【會出計算題】

1、酸血癥或酸中毒（acidosis）：HC03-/H2C03<20/1,血漿pH<7.35。

2、堿血癥或堿中毒（alkalosis）：HC03-/H2C03>20/1,血漿pH>7.45。

3、代謝性酸中毒（metabolicacidosis,代酸）：原發(fā)性血漿HC03-濃度下降。

相關(guān)指標變化：①血液pH可正常（完全代償）或降低（代償不全）；②［HC03-］原發(fā)性下降；

③PC02代償性下降；④血清K+（由細胞內(nèi)轉(zhuǎn)移至細胞外）增高，當固定酸增多時，AG

增高；如HC03-丟失過多時，AG正常，［K+］下降（由于K+的丟失）而［CL］增高。

4、代謝性堿中毒（metabolicalkalosis,代堿）：原發(fā)性HC03-增多。

相關(guān)指標變化：①血液pH可正常（完全代償）或升高（代償不全）；②［HC03-］原發(fā)性升高;

③PC02代償性上升（代償往往不全）。

5、呼吸性酸中毒（respiratoryacidosis,呼酸）：原發(fā)性H2c03增多。

相關(guān)指標變化：①血液pH可正常（完全代償）或下降（代償不全）；②血漿PC02原發(fā)性

升高；③HC03-濃度代償性升高。

6、呼吸性堿中毒（respiratoryalkalosis,呼堿）：原發(fā)性H2c03減少。

相關(guān)指標變化：①血液pH可正常（完全代償）或升高（代償不全）；②PC02原發(fā)性下降；

③HCO3-濃度代償性下降；④［C1-］增高，［K+］輕度降低，AG輕度增多。

一、相加型二重酸堿平衡紊亂：兩種性質(zhì)的酸中毒或堿中毒同時存在，pH明顯變化，PC02

和［HC03-］呈反向變化。

①代謝性酸中毒合并呼吸性酸中毒：有明顯的pH降低。②代謝性堿中毒合并呼吸性堿中毒：

pH明顯升高。

二、相抵型二重酸堿平衡紊亂：一型酸中毒伴有另一型堿中毒。

①代謝性酸中毒伴呼吸性堿中毒。②呼吸性酸中毒伴代謝性堿中毒。③代謝性酸中毒伴代謝

性堿中毒：pH變化不明顯；［HC03-］與PC02變化相反，有不同程度的抵消。

三、三重性酸堿平衡紊亂：常見為代謝性酸、堿中毒加呼吸性酸中毒或堿中毒：①呼吸性酸

中毒型，②呼吸性堿中毒型。

一、了解病史

了解酸堿平衡紊亂的誘發(fā)原因：呼吸因素還是代謝因素、酸中毒還是堿中毒；

根據(jù)病情進展估計酸堿失衡持續(xù)的時間：急性還是慢性；

有無缺氧、病人用藥、給氧與電解質(zhì)情況；腎功能、肺功能等檢查結(jié)果。

二、指標初步分析

主要看pH、PC02、HC03-（或BE）這三項。

LpH異常如pH<7.35為酸中毒，pH>7.45為堿中毒。

①根據(jù)HC03-與PC02哪個指標變化方向與pH的變化相對應來確定代謝性的還是呼吸性

的。

②如HC03-與PC02變化方向都與pH的變化相應，則根據(jù)HC03-與PC02哪個偏離正常均

值幅度大來確定代謝性的還是呼吸性的。

2.pH正常

①如HC03-和PC02中有一個偏離正常，則選擇偏離正常者來確定呼吸性的還是代謝性的。

②如HC03-和PC02都偏離正常，根據(jù)HC03-與PC02哪個偏離正常均值幅度大來確定呼

吸性的還是代謝性的。

③如HC03-和PC02都正常，則跳過第三步代償預估值的分析，進入第四步AG和電解質(zhì)

的分析。

三、代償預估值計算及分析

代謝性酸堿紊亂時，原發(fā)性變化指標為［HC03-］,PC02出現(xiàn)代償性變化。

呼吸性酸堿紊亂時，原發(fā)性變化指標為PC02,［HC03-］出現(xiàn)代償性變化。

1.測定值在代償預估值范圍內(nèi)

單純性酸堿紊亂：原發(fā)變化指標改變后病程已達到或超過代償器官代償所需要的時間，可診

斷為單純性酸堿紊亂。

混合性的酸堿紊亂：由于病程時間不夠而尚未代償或代償不充分，則可認為是混合性的酸堿

紊亂。例如：代謝性酸中毒在［HC03-］下降后病程不到12h,但PC02已下降到代償預估值

范圍內(nèi)，說明合并呼吸性堿中毒。

2.測定值在代償預估值范圍外

病程時間短未達到代償時限：①測定值（與代償變化方向一致）未能達到代償預估值，可

診斷為單純性酸堿紊亂，部分代償。②測定值（與代償變化方向一致）超過代償預估值可診

斷為混合性的酸堿紊亂。

病程達到或超過代償所需要的時間

原發(fā)指標改變后病程已達到或超過代償器官代償所需要的時間，其測定值不在代償預估值范

圍內(nèi)，則可認為是混合性的酸堿紊亂。

四、AG值和電解質(zhì)分析判斷

經(jīng)上述分析如存在由于固定酸增多引起的代謝性酸中毒，通過計算AG值進一步確定。

如沒有發(fā)現(xiàn)代謝性酸中毒存在，而AG值增高，說明同時合并代謝性酸中毒。

代謝性酸中毒同時合并代謝性堿中毒或混合性代謝性酸中毒（高AG代謝性酸中毒合并高氯

性代謝性酸中毒），用計算代償預估值無法判斷，此時AG值和電解質(zhì)的分析對診斷非常有

意義。

1.AG差值和［HC03-］的差值

計算AG差值和［HC03-］的差值，看兩個差值是否相等。

假設AG由參考值12上升為20,而［HC03-］由參考值24下降為16,那么AAG=△［HCO3-］,

為單純性高AG代謝性酸中毒。

如果AAGWA［HCO3-］即為混合性，AAG>△［HCO3-］,即為高AG代謝性酸中毒合并

代謝性堿中毒；如果△AG<A［HCO3-］,此時Cl-濃度也增高，即為高AG代謝性酸中毒合

并高氯性代謝性酸中毒。

2.［C1-］差值和［HCO3-］的差值

若A［HCO3-］,為單純性高氯性代謝性酸中毒；如果A［C1-］￥△［HCO3-］即為混

合性。A［Cl-］>A［HCO3-］,即為高氯性代謝性酸中毒合并代謝性堿中毒。這種判斷可靠性

較低，因為［C1-］受很多因素的影響。

五、三重性酸堿平衡紊亂判斷

需根據(jù)pH、PCO2、HCO3-以及AG值、代償預估值、潛在［HCO3-］、電解質(zhì)和病史綜合

判斷。

按照前述第1和第2兩步確定呼吸性的酸堿平衡紊亂的類型，并計算其代償預估值。

根據(jù)高AG值確定代謝性酸中毒的存在。

計算潛在［HCO3-］,如潛在IHCO3-］大于代償預估值，則說明同時有代謝性堿中毒的存在。

三重性酸堿平衡紊亂的代謝性酸中毒既可以是高AG代謝性酸中毒，也可以是高氯（正常AG）

性代謝性酸中毒。

高AG代謝性酸中毒與呼吸性酸中毒、呼吸性堿中毒及代謝性堿中毒并存時，其增高的AG

值不變，因而可作為判斷高AG代謝性酸中毒的理論依據(jù)。

六、動態(tài)觀察綜合分析：多次復查進行動態(tài)觀察一一做出可靠診斷以及發(fā)現(xiàn)新的異常。

血清鈉、鉀測定

一、ISE法

【原理】：利用電極電位和離子活度的關(guān)系來測定被測離子活度的一種電化學分析法。

核心一一指示電極(帶有對被測離子選擇性響應的敏感膜，膜的一面與被測離子的溶液相接

觸、另一面則與電極內(nèi)所充的一定活度的被測離子溶液和內(nèi)參比電極接觸，膜內(nèi)外的離子活

度的差異引起離子從高濃度向低濃度遷移，從而產(chǎn)生電位改變)

【評價】

優(yōu)點：選擇性好(多數(shù)情況下共存離子的干擾小，組成復雜的試樣往往不需分離處理即可直

接測定。)、靈敏度高(可達10-5?10-8mmol/L)、線性范圍寬(m+為10-6-10-1111010叩,

K+為3X10-5?Imol/L,Cl-為5X10-5?lmol/L)、溶血/黃疸不影響測定、對有色/渾濁溶液

都可進行分析、設備簡單，分析速度快，易于自動化，標本用量少，應用范圍廣。

缺點：電極具有一定壽命，使用一段時間后電極會老化.

二、酶法

A.Na+的酶法測定：Na+激活B-半乳糖甘酶水解鄰硝基酚-B-D-半乳糖苛(ONPG),產(chǎn)生

在420nm波長有特征吸收光譜的產(chǎn)物鄰-硝基酚。鄰-硝基酚產(chǎn)生的速率與Na+離子濃度呈正

比。

B.K+的酶法測定：利用一定量的K+增強色氨酸酶的活性，用測定該反應酶活性的改變來判

斷K+濃度。另有利用K+對丙酮酸激酶的激活作用來測定K+的濃度。

三、FES法

【原理】：根據(jù)火焰中激發(fā)態(tài)回降到基態(tài)時發(fā)射的光譜強度進行定量分析。

【應用】：血清、尿液、腦脊液及胸腹水中K+、Na+等測定。

【定量方法工內(nèi)標法、外標法

內(nèi)標法是將樣本用含有一定濃度參比元素如鋰(Li+)或能(Cs+)的溶液稀釋后，同時測

定鈉、鉀和鋰或鈉的電信號、根據(jù)鈉、鉀的電信號和鋰或葩的電信號進行鈉、鉀含量的計算。

外標法是用不同濃度的鈉、鉀標準液制成標準曲線，然后對標本進行測定并從標準曲線上查

得鈉、鉀的濃度。

【評價】

優(yōu)點：精密度較高、特異性好、成本低廉等。

不足：使用丙烷等燃氣，給實驗室?guī)砹税踩[患。

血清氯測定

1.ISE法簡便、快速、準確

2.硫氟酸汞比色法

【原理】：Hg(SCN)2+2C1-一HgC12+2SCN-,3SCN-+Fe3+-Fe(SCN)3,硫甄酸鐵復合

物在480nm波長有吸收峰。

【評價】：分析范圍為80?125mmol/L。反應對溫度敏感，吸光度隨溫度升高而增加。

3.汞滴定法

【原理】：用標準硝酸汞溶液滴定標本里的CL,2C1-+Hg(NO3)2-HgC12+2NO3-,過量

的硝酸汞與二苯卡巴腺指示劑反應形成紫色復合物，根據(jù)硝酸汞的消耗量計算出濃度。

鐵的代謝

體內(nèi)存在形式：功能鐵和儲存鐵。主要吸收部位：十二指腸及空腸上段。主要吸收形式：

Fe2+。主要排泄途徑：腎臟、糞便和汗腺

【作用】：維持正常造血功能、參與體內(nèi)氧的轉(zhuǎn)運、交換和組織呼吸過程、增強免疫功能、

對其他微量元素代謝的影響（缺鐵可致鋅、鉆、鎂、鉛的代謝障礙）

血清鐵和總鐵結(jié)合力測定

血清鐵測定、血清總鐵結(jié)合力測定

鐵飽和度=血清鐵/血清總鐵結(jié)合力X100%

【原理】：血清中的三價鐵與運鐵蛋白結(jié)合成復合物，在酸性介質(zhì)中鐵從復合物中解離出來,

再被還原劑還原呈二價鐵，在發(fā)色劑（亞鐵嗪、雙聯(lián)叱咤等）作用下產(chǎn)生有色絡合物，其顏

色深淺與鐵的量成正比。

【評價】

①分光光度法：首選方法，可自動化分析，也可手工操作。②AAS法：儀器設備復雜、費

用昂貴，可靠性較差

【臨床意義】

（1）血清鐵降低：①缺鐵性貧血；②某些疾病，如細菌性感染等。

（2）血清鐵增高：①溶血性貧血；②再生障礙性貧血；③反復輸血者；④肝炎。

銅測定

【原理】：

雙環(huán)己酮草酰二蹤比色法：加鹽酸于血清中，使血清中與蛋白質(zhì)結(jié)合的銅游離出來，再用三

氯醋酸沉淀蛋白質(zhì)，濾液中的銅離子與~反應，生成穩(wěn)定的藍色化合物，與同樣處理的標準

液比較，即可求得。

【評價】

AAS法（靈敏、準確，但儀器昂貴）；雙環(huán)己酮草酰二腺比色法（選擇性較好，靈敏度低，

需去蛋白質(zhì)，不宜自動化）；5-Br-PADA,即2-［5-濱-毗咤偶氮］-5-二乙氨基酚法（可自動化,

靈敏度較高）。

【臨床意義】

血清銅增高見于：①肝內(nèi)、外膽汁淤滯；②各種感染、白血病、貧血、心肌梗死及淋巴瘤

等。③風濕病、甲狀腺功能亢進、妊娠或注射雌性激素等。

血清銅降低見于：①肝豆狀核變性；②營養(yǎng)不良、腎病綜合征及燒傷等所致的低蛋白血癥。

性別、年齡、月經(jīng)周期與妊娠均可導致血清銅的生理性變化。

鋅測定

【原理】

Br-PADAP比色法：血清沉淀蛋白后被維生素C還原高價鐵離子及銅離子成低價，F(xiàn)e2+、

Cu2+和Zn2+均能同家化物生成穩(wěn)定的復合物。用水合氯醛選擇性地釋放鋅，使鋅與2-［（5-

濱-2-毗唾）-偶氮卜5-二乙基氨基苯酚（5-Br-PADAP）反應生成紅色復合物，在550nm處比色測

定。與同樣處理的標準品比較，求得血清鋅含量。

碳酸酊酶再激活法測定原理：Zn2+是碳酸酊酶（CA）的輔助因子，用毗咤-2,6-二竣酸透析

可將CA中的Zn2+去除，得到脫輔基CA（apoCA）。用5%三氯醋酸沉淀血清蛋白質(zhì)，上清

液采用脫輔基CA與血清Zn2+混合將CA激活，測定脫輔基CA被激活的活性，即是血清

鋅的含量。

【評價】AAS（推薦方法）；比色法（選擇性不佳，干擾因素多）；酶法（測定準確、敏

感、特異性強）

【臨床意義】

血清鋅降低見于：①酒精性肝硬化及慢性肝臟疾??；②急、慢性傳染病、急性組織損傷（如

急性心肌梗塞）等③腎病綜合征，慢性腎功能不全；④胃腸道吸收障礙、糖尿病等；⑤肺癌

及惡性淋巴瘤等。

血清鋅增高見于：兒童不適當補鋅，工業(yè)污染中的急性鋅中毒，亦可見、于甲狀腺機能亢進、

高血壓等。

激素對鈣磷代謝的調(diào)節(jié):

維生素D依賴性佝僂?。╒DDR）又稱假性維生素D缺乏癥。其特點為：

腎小管上皮細胞1-a-羥化酶先天性缺陷、常染色體隱形遺傳、維生素D缺乏癥狀典型，發(fā)

病早、大劑量活性維生素D治療可使疾病緩解。

維生素D抵抗（vitaminDresistance）：機體對正常劑量甚至大劑量的維生素D或

1,25-（OH）2D3的低反應或無反應現(xiàn)象。

其特點為：維生素D受體基因突變（常染色體隱性遺傳，常見的有三個主要位點：Q259E、

G319V和R73X）、臨床上具有典型的佝僂病癥狀和體征、約50%的患者對任何形式的維生

素D治療無效。

骨代謝的生物化學測定

一、骨形成標志物的測定

1、骨鈣素（OC）的測定：骨鈣素又稱骨丫-竣基谷氨酸蛋白（BGP）,是由成骨細胞合成

和分泌的一種活性多肽，主要生理功能是維持骨的正常礦化速率。

血骨鈣素是反映骨代謝狀態(tài)的一個特異和靈敏的生化指標。測定BGP的方法應用最多的是

放射免疫法和酶聯(lián)免疫法。

2、骨性堿性磷酸酶（B-ALP）測定：ALP是在堿性條件下催化磷酸酯水解的酶類，B-ALP

來自成骨細胞，是骨形成的特異性標志物。

血清B-ALP測定方法：總體分為電泳法和非電泳法應用較多的方法是放射免疫法HPLC

是目前B-ALP測定分辨率最高的方法。

B-ALP增高常見于：①甲狀腺、甲狀旁腺功能亢進，②惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移，③佝僂病、骨

軟化病，④骨折和絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥等

B-ALP測定意義：①骨病早期診斷骨病，②療效的評價和預后的判斷，③骨轉(zhuǎn)移癌的病

程和治療效果的監(jiān)測

3、I型膠原前肽測定：I型膠原前肽是膠原的延伸段，多檢測I型前膠原竣基前肽（PICP）

來評價骨形成。

PICP的檢測大多采用R1A和電化學發(fā)光免疫分析（ECL）,血清中I型膠原前肽水平在一定

范圍內(nèi)是反映成骨細胞活動和骨形成以及反映I型膠原合成速率的特異指標。

二、骨吸收標志物的測定

1、尿羥月甫氨酸（HOP）：是體內(nèi)膠原代謝的終產(chǎn)物之一，尿HOP排出量可以反映骨吸收和

骨轉(zhuǎn)換程度。

尿HOP增高見于：兒童生長期、甲狀旁腺功能亢進、骨轉(zhuǎn)移癌、慢性腎功能不全、畸形

性骨炎、佝僂病和軟骨病高轉(zhuǎn)換的骨質(zhì)疏松患者，但尿HOP指標特異性較差，也缺乏靈敏

性。

尿HOP測定方法：分光光度法離子交換色譜法和反相HPLC法。

2、I型膠原降解產(chǎn)物：毗咤酚，脫氧口比唾酚、1型膠原交聯(lián)N末端肽、I型膠原交聯(lián)C末

端肽。I型膠原降解產(chǎn)物是反映骨吸收和骨轉(zhuǎn)換的良好指標。

（1）脫氧毗咤酚（D-Pyr）和毗唾酚（Pyr）是I型膠原分子之間構(gòu)成膠原纖維的交聯(lián)物

尿中Pyr和D-Pyr濃度是反映骨膠原降解和骨吸收的最靈敏和特異的生化指標之一，尿中

D-Pyr的含量通常用尿肌酊來校正

常用方法：HPLC-熒光檢測法、競爭性酶免疫法

（2）I型膠原交聯(lián)C末端肽（CTX）和I型膠原交聯(lián)N末端肽（NTX）均是I型膠原分解

的產(chǎn)物。

血清CTX水平是破骨細胞膠原降解的靈敏指標：①與骨形態(tài)計量學骨吸收參數(shù)呈顯著正相

關(guān)，②與其它骨吸收生化指標如Pyr和D-Pyr呈正相關(guān)；常用ELISA法測定。

（3）抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）：TRAP主要存在于破骨細胞，血TRAP水平主要反映

破骨細胞活性和骨吸收狀態(tài)。

血漿TRAP增高見于：原發(fā)性甲狀旁腺機能亢進、慢性腎功能不全、畸形性骨炎骨轉(zhuǎn)移癌、

卵巢切除術(shù)后、高轉(zhuǎn)換率的骨質(zhì)疏松等；

血漿TRAP降低見于：骨吸收降低的疾病，如甲狀旁腺功能降低。

TRAP活性測定方法：免疫法（缺少特異性識別骨TRAP的檢測方法）。

血清鈣測定

一、總鈣測定：

【標本】：血清或低濃度肝素抗凝血漿

【測定方法工滴定法、比色法、火焰光度法、原子吸收分光光度法、同位素稀釋質(zhì)譜法等

決定性方法：同位素稀釋-質(zhì)譜法（IFCC）

參考方法：原子吸收分光光度法（IFCC）

常規(guī)方法：鄰甲酚醐絡合酮（O-CPC）法（衛(wèi)生部）

二、離子鈣測定

【標本】：血清、低濃度肝素抗凝血漿或全血

【測定方法】：生物學法、透析法、超濾法、金屬指示劑法、ISE法等

①參考方法：ISE法

【原理】Nernst方程式：在一定條件下，ISE的電位與溶液中的被測離子濃度的對數(shù)成正比

【評價】操作簡便、快速、重復性好；準確度和敏感性高，影響因素少

②O-CPC法：

【原理】（總）鈣+鄰甲酚醐絡合銅（OCPC）（pH=10.0,8-羥基噬咻）一紫紅色絡合物，

這種紫紅色絡合物在575nm處有最大吸收峰，其吸光度與血清鈣含量在一定范圍內(nèi)成正比,

經(jīng)與同樣處理的鈣標準液比較，即可求得血清鈣含量。

【評價】

優(yōu)點：操作簡便、快速、穩(wěn)定，同時適于手工和自動化分析，

缺點：反應體系的pH值對結(jié)果影響較大

血清磷測定

【標本】：血清、肝素化血漿

【常用方法】：磷鋁酸還原法、磷銅酸紫外分光光度法、酶法、原子吸收分光光度法、同位

素稀釋質(zhì)譜法等

決定性方法：同位素稀釋質(zhì)譜法

常規(guī)方法：磷鋁酸紫外分光光度法、磷鋁酸還原法

①磷銅酸還原法

【原理】：無機磷+鋁酸鍍H+-磷車目酸（硫酸亞鐵或吐米爾）->鋁藍（650nm）

鑰藍在650nm處有最大吸收峰，其吸光度與血清磷含量在一定范圍內(nèi)成正比，經(jīng)與同樣處

理的磷標準液比較，即可求得血清磷含量。

【評價】方法簡便、快速，穩(wěn)定。體系中加入TritonX-100等表面活性劑，則不需要除蛋白

即可直接測定

②酶法

【原理】

無機磷+次黃噪吟核甘（喋嶺核甘磷酸化酶）一核糖-1-磷酸+次黃噤吟

次黃喋吟（黃喋吟氧化酶）f尿酸+H202,H2O2發(fā)生Trinder反應

【評價】血清磷測定的發(fā)展方向

顯色穩(wěn)定，線性范圍寬，干擾因素小，可用于自動化分析。但所用的酶試劑比較貴

血清鎂測定

【標本工血清（非鈣離子絡合抗凝劑）

【測定方法】：比色法、原子吸收分光光度法、酶法、同位素稀釋質(zhì)譜法等

決定性方法：同位素稀釋質(zhì)譜法

【參考方法工原子吸收分光光度法

常規(guī)方法：甲基麝香草酚藍（MTB）比色法、Calmagite染料結(jié)合法

①比色法

【原理】：Mg2++MTB（EGTA掩蔽鈣離子）一藍紫色復合物（600nm）

EGTA：乙二醇二乙酸二胺四乙酸

【評價】：方法簡單、實用，可用于自動化分析。采血后應盡快分離血清，而且避免溶血

②酶法

【原理】

【評價】：成本低廉、影響因素小，線性范圍寬。但試劑穩(wěn)定性欠佳，4℃下只能保存2周左

右

(-)膽紅素形成過多一一溶血性黃疸

【成因】

1、溶血性：先天性的紅細胞膜、血型不合輸血、脾亢等溶血。

2、非溶血性：如惡性貧血、珠蛋白生成障礙等無效造血。

【代謝特點工高未結(jié)合膽紅素血癥

1、血中未結(jié)合膽紅素含量增高；總膽紅素升高，結(jié)合膽紅素僅為總膽紅素的20%。

2、未結(jié)合膽紅素不能由腎小球濾過，故尿中無膽紅素排出。

3、肝最大限度地處理和排泄膽紅素，因而腸道中形成的膽素原增多，糞便排出的膽素原也

增多，糞便顏色加深。

4、尿中排出的膽素原也相應增加，膽紅素陰性。

I發(fā)生機制

(-)肝細胞處理能力下降一一肝細胞性黃疸

【成因】膽紅素攝取障礙、膽紅素結(jié)合障礙、膽紅素轉(zhuǎn)運障礙、膽紅素排泄障礙

【代謝特點工高未結(jié)合和結(jié)合膽紅素血癥

1、血中兩種膽紅素含量都增高?？偰懠t素升高，結(jié)合膽紅素占總膽紅素的35%以上。

2、結(jié)合膽紅素可由腎小球濾過，尿中出現(xiàn)膽紅素。

3、結(jié)合膽紅素在肝內(nèi)生成減少，糞便顏色變淺。

4、尿中膽素原含量變化不定。一方面是從腸吸收的膽素原不能有效地隨膽汁排出，使血中

膽素原增加，尿中膽素原增加；另一方面是肝實質(zhì)性損傷及炎癥、腫脹等造成肝、膽管阻塞,

結(jié)合膽紅素不能排入腸道，尿中膽素原減少。

I發(fā)生機制：

（三）膽紅素排泄障礙一一阻塞性黃疸

【成因】膽道梗阻致膽紅素排泄障礙.如膽結(jié)石、膽道蛔蟲或腫瘤壓迫等所致的膽道梗阻。

【代謝特點】：高結(jié)合膽紅素血癥

1、血中結(jié)合膽紅素含量增高，總膽紅素升高，結(jié)合膽紅素占總膽紅素的50%以上。

2、結(jié)合膽紅素能被腎小球濾過，尿中出現(xiàn)膽紅素。

3、膽紅素不易或不能隨膽汁排入腸道，因而腸腔膽素原很少或缺失，糞便顏色變淺或呈灰

白色。

4、尿中排出的膽素原也相應變少，膽紅素陽性。

I發(fā)生機制

總膽紅素與直接膽紅素的測定

①改良J-G法

【原理】重氮試劑：亞硝酸鈉+對氨基苯磺酸

加速劑(咖啡因+苯甲酸鈉)：破壞游離膽紅素分子內(nèi)氫鍵，使之與重氮試劑反應生成偶氮

膽紅素

堿性酒石酸鈉：使吸光度由530f598nm

疊氮鈉(或抗壞血酸)：中止反應，防止游離膽紅素緩慢反應

【評價】

優(yōu)點：靈敏度高精密度、準確度好、誤差因素少、10℃?37℃不受溫度變化影響，呈色反應

在2h內(nèi)非常穩(wěn)定

缺點：不適用于自動化分析，嚴重溶血可使結(jié)果偏低，易受脂血干擾

②膽紅素氧化酶法

膽紅素氧化酶(BOD)催化膽紅素氧化生成膽綠素，并進一步將其氧化成淡紫色化合物；

在460nm處吸光度值的下降與血清中膽紅素濃度成正比。

BOD在堿性環(huán)境中可氧化所有膽紅素成分；而在酸性條件下，未結(jié)合膽紅素不被氧化。故

可根據(jù)最適pH差別分別測定總/直接膽紅素。

【評價】

優(yōu)點：特異性好靈敏度高重復性好，精密度較重氮反應法高、抗干擾能力優(yōu)于重氮法、溶血

干擾小

缺點：試劑較為昂貴

總膽汁酸酶循環(huán)法測定膽汁酸

【原理】：血清總膽汁酸在3a羥基類固醇脫氫酶(3a-HSD)的催化下生成3-酮類固醇，

同時將硫代氧化型輔酶I(Thio-NAD+)特異性地氧化形成硫代還原型輔酶I(Thio-NADH),

3-酮類固醇在3a-HSD和還原型輔酶I(NADH)作用下，形成膽汁酸和氧化型輔酶I

(NAD+)。樣本中的膽汁酸在多次酶循環(huán)的過程中被放大，同時使生成的Thio-NADH擴增。

測定Thio-NADH在405nm處吸光度的變化，求得總膽汁酸的含量。

Thio-NAD+/Thio-NADH+H+

1JJ2

膽汁酸--羥基類固醇脫氫酶3-酮類固醇

47\3

NAD+'NADH+H+

反應：If2f3-4,循環(huán)...，最后在405nm處測硫代NADH

【臨床應用】：肝細胞損傷、膽道梗阻、門脈分流、生理性升高

肝功能檢查指標的選擇應遵循如下原則：

①應根據(jù)檢查指標本身的應用價值，盡可能選用相對靈敏和特異的實驗項目；②根據(jù)肝臟疾

病檢查目的進行合理選擇；③常規(guī)檢查應選用診斷價值高、操作簡便、結(jié)果可靠、易于標化

等功能的指標

思路：貯備、代償、再生能力強一防漏檢/多項試驗組合反映功能全貌/與病原學、病理

學、影像學檢查相結(jié)合/結(jié)合臨床、全面分析、綜合判斷

肝臟貯備功能檢查

口引味菁綠（ICG）清