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文檔簡介
熒光標記技術熒光標記技術熒光標記技術是用熒光素標記在抗體或抗原上,與相應的抗原或抗體特異性結(jié)合,然后用熒光顯微鏡觀察所標記的熒光,以分析示蹤相應的抗原或抗體的方法。其中,最常用的是熒光素標記抗體或抗抗體,用于檢測相應的抗原或抗體。該技術是標記免疫技術中發(fā)展最早的一種。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功?;驹頍晒馑卦?0-6的超低濃度時,仍可被專門的短波光源激發(fā),在熒光顯微鏡下可觀察到熒光。熒光抗體標記技術就是將抗原抗體反應的特異性,熒光檢測的高敏性,以及顯微鏡技術的精確性三者結(jié)合起來的一種免疫檢測技術。熒光素熒光素是能產(chǎn)生明顯熒光,能作為染料使用的有機化合物。主要是以苯環(huán)為基礎的芳香族化合物和一些雜環(huán)化合物。它們受到激發(fā)光(如紫外光)照射后,可發(fā)射熒光。可用于標記的熒光素有異硫氰酸熒光黃、四乙基羅丹明和四甲基異硫氰酸羅丹明,其中異硫氰酸熒光黃應用最廣,為黃色結(jié)晶??贵w經(jīng)熒光素標記后,不影響與抗原的結(jié)合能力和特異性。當熒光抗體與相應的抗原結(jié)合時,就形成了帶有熒光性的抗原抗體復合物,從而可在熒光顯微鏡下檢出抗原存在?;静襟E1.制作標本片。根據(jù)被檢樣品的不同,采用不同的制備方法,固定處理環(huán)節(jié)尤為重要。2.使熒光抗體與標本切片中組織或細胞表面的抗原進行反應。3.洗滌除去游離的熒光抗體。4.
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