肌酸激酶檢測(cè)試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2024年修訂版）

——附件29肌酸激酶檢測(cè)試劑注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2024年修訂版）本指導(dǎo)原則旨在為醫(yī)療器械注冊(cè)申請(qǐng)人進(jìn)行肌酸激酶檢測(cè)試劑的注冊(cè)申報(bào)提供技術(shù)指導(dǎo)，同時(shí)也為醫(yī)療器械監(jiān)督管理部門對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的審評(píng)提供技術(shù)參考。本指導(dǎo)原則是對(duì)該類試劑注冊(cè)申報(bào)資料的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。如注冊(cè)申請(qǐng)人認(rèn)為有必要增加本指導(dǎo)原則不包含的研究?jī)?nèi)容，可自行補(bǔ)充。本指導(dǎo)原則是供注冊(cè)申請(qǐng)人和技術(shù)審評(píng)人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊(cè)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。需在遵循相關(guān)法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的前提下使用本指導(dǎo)原則。本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。一、適用范圍肌酸激酶檢測(cè)試劑是指用于體外定量測(cè)定人血清或血漿中肌酸激酶的活性的試劑，臨床上主要用于心肌梗死、病毒性心肌炎的輔助診斷。從方法學(xué)考慮，本指導(dǎo)原則主要適用于采用分光光度法原理，利用全自動(dòng)、半自動(dòng)生化分析儀或分光光度計(jì)，在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行肌酸激酶活性檢測(cè)的臨床化學(xué)體外診斷試劑。本文不適用于干式肌酸激酶檢測(cè)試劑。不包括用于單獨(dú)注冊(cè)的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。其他方法學(xué)的肌酸激酶檢測(cè)試劑注冊(cè)可參考本指導(dǎo)原則，但應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。注冊(cè)審查要點(diǎn)注冊(cè)申報(bào)資料的撰寫應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求及說(shuō)明》的相關(guān)要求。（一）監(jiān)管信息1.產(chǎn)品名稱產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求。產(chǎn)品名稱一般有三部分組成。第一部分：被測(cè)物名稱為肌酸激酶；第二部分：用途，如測(cè)定試劑盒；第三部分：方法或者原理，如磷酸肌酸底物法。2.分類依據(jù)根據(jù)《體外診斷試劑分類子目錄》，肌酸激酶檢測(cè)試劑管理類別為Ⅱ-4用于酶類檢測(cè)的試劑，分類編碼為6840。（二）綜述資料綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報(bào)產(chǎn)品上市歷史及其他需說(shuō)明的內(nèi)容。其中產(chǎn)品描述中應(yīng)詳述檢測(cè)原理、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評(píng)價(jià)、與同類和/或前代產(chǎn)品的比較等。與同類和/或前代產(chǎn)品的比較，應(yīng)著重從方法學(xué)、檢驗(yàn)原理、產(chǎn)品主要性能等方面詳細(xì)說(shuō)明申報(bào)產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。1.概述根據(jù)《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》和《體外診斷試劑分類子目錄》的要求，應(yīng)當(dāng)描述肌酸激酶檢測(cè)試劑通用名稱及其確定依據(jù)；描述產(chǎn)品管理類別為Ⅱ類，分類編碼為6840，明確所屬分類子目錄名稱為Ⅱ-4用于酶類檢測(cè)的試劑；描述申報(bào)產(chǎn)品預(yù)期用途；描述有關(guān)申報(bào)產(chǎn)品的背景信息概述或特別細(xì)節(jié)，如：申報(bào)產(chǎn)品的歷史概述、歷次提交的信息，與其他經(jīng)批準(zhǔn)上市產(chǎn)品的關(guān)系等。2.產(chǎn)品描述應(yīng)提供產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，產(chǎn)品組成，原材料的來(lái)源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝，檢驗(yàn)方法，質(zhì)控品賦值情況，供校準(zhǔn)品溯源情況。應(yīng)提供產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評(píng)價(jià)，包括分析性能評(píng)估、參考區(qū)間、穩(wěn)定性以及臨床評(píng)價(jià)等。提供不同包裝規(guī)格之間的差異。提供產(chǎn)品中使用的生物材料或衍生物（如適用），包括生物學(xué)來(lái)源（如人、動(dòng)物、病原體、重組或發(fā)酵產(chǎn)物）和組織來(lái)源（如血液）。人源性材料須對(duì)有關(guān)傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測(cè)予以說(shuō)明，其他動(dòng)物源及微生物來(lái)源的材料，應(yīng)當(dāng)說(shuō)明其在產(chǎn)品運(yùn)輸、使用過(guò)程中對(duì)使用者和環(huán)境是安全的，并提供相關(guān)的文件。描述有關(guān)產(chǎn)品包裝的信息，包括包裝形狀和材料。闡述申請(qǐng)注冊(cè)產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。如有參考的同類產(chǎn)品或前代產(chǎn)品，應(yīng)當(dāng)提供同類產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品的信息，并說(shuō)明選擇其作為研發(fā)參考的原因。3.預(yù)期用途用于體外定量檢測(cè)人血清或血漿中肌酸激酶的活性。應(yīng)明確適用儀器及使用方法（自動(dòng)/半自動(dòng)），樣本采集及保存裝置和/或添加劑（如抗凝劑）使用情況。明確臨床適應(yīng)證，描述其發(fā)生率、易感人群、分析物的詳細(xì)介紹及與臨床適應(yīng)證的關(guān)系，相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法。明確適用人群。明確預(yù)期使用者。4.提供申報(bào)產(chǎn)品上市歷史情況（如適用）5.其他除申報(bào)產(chǎn)品外，檢測(cè)系統(tǒng)的其他組成部分，包括但不限于：樣本處理用試劑、適用儀器、獨(dú)立軟件等基本信息，及其在檢測(cè)中發(fā)揮的作用，必要時(shí)應(yīng)提交相應(yīng)的說(shuō)明書(shū)。對(duì)于已獲得批準(zhǔn)的檢測(cè)系統(tǒng)的其他組成部分，應(yīng)當(dāng)提供注冊(cè)證編號(hào)和國(guó)家藥監(jiān)局官方網(wǎng)站公布的注冊(cè)證信息。（三）非臨床資料1.產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)管理資料申請(qǐng)人應(yīng)考慮產(chǎn)品生命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從產(chǎn)品設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)、原材料的采購(gòu)控制、生產(chǎn)、預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知和可預(yù)見(jiàn)的危害等方面的判定以及對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)和相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)控制基礎(chǔ)上，綜合評(píng)價(jià)產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)可接受程度，形成風(fēng)險(xiǎn)管理資料。應(yīng)符合GB/T42062《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單說(shuō)明產(chǎn)品應(yīng)符合《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》各項(xiàng)適用要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對(duì)于其中不適用的各項(xiàng)要求，應(yīng)當(dāng)說(shuō)明理由。3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)按照《體外診斷試劑注冊(cè)與備案管理辦法》《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行編寫。同時(shí)結(jié)合產(chǎn)品具體適用的指導(dǎo)原則或相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)以及產(chǎn)品的特點(diǎn)，明確保證產(chǎn)品安全、有效、質(zhì)量可控的各項(xiàng)性能指標(biāo)和檢驗(yàn)方法。產(chǎn)品技術(shù)要求建議不低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T1243《肌酸激酶測(cè)定試劑（盒）》的要求。3.1適用的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品應(yīng)當(dāng)符合適用的強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于強(qiáng)制性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，若申報(bào)產(chǎn)品結(jié)構(gòu)特征、技術(shù)原理、預(yù)期用途、使用方式等與強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍不一致，申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)提出不適用強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的說(shuō)明，并提供經(jīng)驗(yàn)證的證明性資料。3.2產(chǎn)品技術(shù)要求3.2.1主要性能指標(biāo)該產(chǎn)品作為定量檢測(cè)試劑主要包括以下性能指標(biāo)：外觀、裝量、試劑空白吸光度、試劑空白吸光度變化率、分析靈敏度、準(zhǔn)確度、線性、重復(fù)性、批間差、瓶間均勻性（干粉或凍干試劑適用）等性能指標(biāo)。如試劑盒內(nèi)含有校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，應(yīng)包含校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的均勻性、質(zhì)控品可接受區(qū)間/值。3.2.2檢驗(yàn)方法產(chǎn)品的檢驗(yàn)方法需根據(jù)技術(shù)性能指標(biāo)設(shè)定，檢驗(yàn)方法需優(yōu)先采用公認(rèn)的或已頒布的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法；可參照YY/T1243《肌酸激酶測(cè)定試劑（盒）》中的試驗(yàn)方法。3.3產(chǎn)品檢驗(yàn)報(bào)告在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)上，采用在符合醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)。有適用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，應(yīng)當(dāng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)?？商峤灰韵氯我恍问降臋z驗(yàn)報(bào)告：3.3.1申請(qǐng)人出具的自檢報(bào)告。3.3.2委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢驗(yàn)報(bào)告。4.分析性能評(píng)估資料分析性能評(píng)估主要包括樣本穩(wěn)定性、適用的樣本類型、校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值、正確度、精密度、空白限、檢出限及定量限、試劑空白（空白吸光度、空白吸光度變化率）、分析靈敏度、分析特異性、測(cè)量區(qū)間及可報(bào)告區(qū)間、反應(yīng)體系等項(xiàng)目的研究資料。如申報(bào)產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要在不同機(jī)型上分別進(jìn)行分析性能評(píng)估。應(yīng)采用一個(gè)或多個(gè)機(jī)型，進(jìn)行充分的試劑分析性能建立研究，對(duì)于其他機(jī)型，應(yīng)分析各適用機(jī)型的工作原理、檢測(cè)方法、反應(yīng)條件控制、信號(hào)處理等，如基本相同，可基于風(fēng)險(xiǎn)分析對(duì)已建立的分析性能指標(biāo)進(jìn)行合理驗(yàn)證。所有適用機(jī)型驗(yàn)證的分析性能應(yīng)基本一致，如不同機(jī)型對(duì)某一檢測(cè)項(xiàng)目的某一分析性能存在差異，應(yīng)針對(duì)該差異采用不同機(jī)型進(jìn)行充分的分析性能建立研究。如不同包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個(gè)包裝規(guī)格產(chǎn)品的分析性能評(píng)估。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細(xì)說(shuō)明，具體說(shuō)明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響，采用具有代表性的包裝規(guī)格進(jìn)行分析性能評(píng)估。申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在原材料和生產(chǎn)工藝經(jīng)過(guò)選擇和確認(rèn)、質(zhì)量管理體系得到有效控制并且保證產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定的基礎(chǔ)上，進(jìn)行產(chǎn)品的分析性能評(píng)估。申請(qǐng)人應(yīng)提交對(duì)試劑進(jìn)行的所有性能研究或驗(yàn)證的研究資料，包括試驗(yàn)方法、標(biāo)準(zhǔn)、原始數(shù)據(jù)、結(jié)果、結(jié)論等詳細(xì)資料。性能評(píng)估時(shí)應(yīng)將試劑和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品及配套儀器作為一個(gè)整體進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)估整個(gè)系統(tǒng)的性能是否符合要求。有關(guān)分析性能驗(yàn)證的背景信息也應(yīng)在申報(bào)資料中有所體現(xiàn)，包括試驗(yàn)地點(diǎn)、適用儀器、試劑以及校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的規(guī)格和批號(hào)、所選用的樣本來(lái)源、樣本類型、處理方法等，應(yīng)當(dāng)采用多批產(chǎn)品進(jìn)行性能評(píng)估。具體研究方法建議參照相關(guān)國(guó)內(nèi)或國(guó)際有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評(píng)估的文件進(jìn)行。對(duì)于本試劑，建議著重對(duì)以下分析性能進(jìn)行研究：4.1樣本穩(wěn)定性應(yīng)充分考慮實(shí)際使用過(guò)程中樣本采集、處理、運(yùn)輸及保存等各個(gè)階段的條件，對(duì)不同類型樣本的穩(wěn)定性分別進(jìn)行評(píng)價(jià)并提交研究資料。對(duì)于冷凍保存的樣本還應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。內(nèi)容包括建議的保存條件、添加劑(如抗凝劑)和運(yùn)輸條件(如涉及）等。樣本穩(wěn)定性內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說(shuō)明書(shū)【樣本要求】中進(jìn)行詳細(xì)描述。4.2適用的樣本類型血清是肌酸激酶（creatinekinase,CK）測(cè)定的適宜標(biāo)本，也可用肝素血漿。其他抗凝劑（如枸櫞酸、氟化物等）會(huì)抑制CK活性，因此此類血漿不宜用作CK測(cè)定。申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)適用的樣本類型及添加劑進(jìn)行適用性確認(rèn)。如試劑盒不僅適用于一種血液樣本類型，則應(yīng)進(jìn)行同源樣本檢測(cè)一致性的對(duì)比試驗(yàn)研究。研究樣本應(yīng)包含醫(yī)學(xué)決定水平附近以及低值樣本。樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明樣本的來(lái)源及制備方法。4.3校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值（如適用）4.3.1校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值可參考GB/T21415《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》的要求，提供試劑配套校準(zhǔn)品量值溯源相關(guān)資料；提供質(zhì)控品賦值及其質(zhì)控范圍確定的相關(guān)資料（應(yīng)當(dāng)提交在所有適用機(jī)型上進(jìn)行賦值和驗(yàn)證的資料）。4.3.2校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的性能驗(yàn)證可參考YY/T1549《生化分析儀用校準(zhǔn)物》、YY/T1662《生化分析儀用質(zhì)控物》的要求，對(duì)校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的均勻性、質(zhì)控品可接受區(qū)間/值進(jìn)行評(píng)價(jià)。如校準(zhǔn)品/質(zhì)控品的基質(zhì)不同于臨床常用樣本類型，還應(yīng)提交基質(zhì)效應(yīng)研究資料。”肌酸激酶項(xiàng)目有JCTLM列表參考測(cè)量程序（IFCCreferencemeasurementprocedure（37℃）forCK，NRMeth65），建議肌酸激酶校準(zhǔn)品溯源至參考測(cè)量程序。對(duì)于不能溯源到參考測(cè)量程序的申請(qǐng)人，可以自行驗(yàn)證溯源至有證參考物質(zhì)。4.4正確度申請(qǐng)人應(yīng)評(píng)估正確度并提交研究資料?？墒褂脜⒖嘉镔|(zhì)的正確度評(píng)價(jià)、方法學(xué)比對(duì)或回收試驗(yàn)的方法。本項(xiàng)目具有有證參考物質(zhì)，建議優(yōu)先采用有證參考物質(zhì)進(jìn)行正確度評(píng)價(jià)。在有證參考物質(zhì)無(wú)法獲得的前提下，可采用方法學(xué)比對(duì)或回收試驗(yàn)的方式。4.4.1參考物質(zhì)檢測(cè)采用至少兩個(gè)濃度的參考物質(zhì)，代表臨床意義相關(guān)的高、低濃度水平，進(jìn)行多次重復(fù)檢測(cè)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果平均值與參考量值計(jì)算偏倚。如參考物質(zhì)只有一個(gè)水平，且無(wú)合理稀釋方法，亦可在說(shuō)明原因的基礎(chǔ)上，僅采用一個(gè)水平的參考物質(zhì)進(jìn)行正確度評(píng)價(jià)，結(jié)果應(yīng)在申請(qǐng)人給定范圍內(nèi)。4.4.2方法學(xué)比對(duì)采用參考測(cè)量程序或國(guó)內(nèi)普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報(bào)試劑同時(shí)測(cè)定一批臨床樣品（至少40例樣本），樣本濃度應(yīng)盡量覆蓋試劑的線性區(qū)間并均勻分布。用線性回歸方法計(jì)算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)（r）及每個(gè)濃度點(diǎn)的相對(duì)偏差。結(jié)果應(yīng)滿足申請(qǐng)人的要求。如條件允許，建議與具有相同溯源性的分析系統(tǒng)作比對(duì)。樣本盡可能使用新鮮樣本。4.4.3回收試驗(yàn)將標(biāo)準(zhǔn)溶液、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或分析物純品加入臨床樣本中，配制成回收樣品，進(jìn)行檢測(cè)。標(biāo)準(zhǔn)溶液、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的體積與臨床樣本的體積比應(yīng)不會(huì)產(chǎn)生基質(zhì)的變化，一般加入體積不超過(guò)總體積的10%。檢測(cè)至少3個(gè)水平的回收樣品，代表試劑測(cè)量區(qū)間內(nèi)的高、中、低濃度，其中應(yīng)包括醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上/下限附近的濃度。每個(gè)濃度應(yīng)進(jìn)行多次重復(fù)檢測(cè)，采用檢測(cè)結(jié)果平均值計(jì)算回收率。4.5精密度精密度由隨機(jī)測(cè)量誤差決定，通常用標(biāo)準(zhǔn)差、方差或變異系數(shù)表示。精密度包括重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性。影響精密度的條件較多。應(yīng)根據(jù)各測(cè)量條件對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響程度的分析，設(shè)計(jì)合理的精密度試驗(yàn)方案進(jìn)行評(píng)價(jià)，包括重復(fù)性、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度、實(shí)驗(yàn)室間精密度和批間（lot-to-lot）精密度。精密度研究用樣本一般為臨床實(shí)際檢測(cè)樣本或其混合物。必要時(shí)可進(jìn)行稀釋、添加或采用基質(zhì)合理的質(zhì)控品。樣本濃度一般包括測(cè)量區(qū)間高、中、低在內(nèi)的3～5個(gè)水平，應(yīng)有醫(yī)學(xué)決定水平或參考區(qū)間上、下限濃度附近的樣本。精密度研究可能涉及多天、多地點(diǎn)檢測(cè)，應(yīng)確保樣本的穩(wěn)定性和一致性，可將樣本等分保存。4.6空白限、檢出限、定量限4.6.1空白限、檢出限與定量限的建立空白限，檢出限，定量限的建立需分別選擇多個(gè)獨(dú)立的樣本（空白樣本、低濃度水平樣本、已知濃度的低水平樣本），在多天內(nèi)進(jìn)行研究?？瞻紫蓿↙OB）一般由多個(gè)獨(dú)立的空白樣本（無(wú)分析物）的檢測(cè)結(jié)果計(jì)算獲得；檢出限（LOD）一般由多個(gè)獨(dú)立的低濃度（含有分析物）樣本的檢測(cè)結(jié)果，結(jié)合LOB進(jìn)行計(jì)算獲得。定量限（LOQ）應(yīng)滿足預(yù)設(shè)準(zhǔn)確度指標(biāo)，即考慮偏倚和精密度的要求。4.6.2空白限、檢出限與定量限的驗(yàn)證LoB，LoD，LoQ的驗(yàn)證需各選擇至少2個(gè)樣本（空白樣本、檢出限濃度樣本、定量限濃度樣本），在多天內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。每個(gè)試劑批次至少需要獲得20個(gè)檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算符合要求的檢測(cè)結(jié)果比例，如果比例符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求/預(yù)設(shè)的臨界值，則4.5.1建立的LoB，LoD，LoQ得到驗(yàn)證。一般來(lái)講，LoB總是低于LoD，而LoD則低于或等于LoQ。4.7分析特異性 應(yīng)評(píng)估干擾物質(zhì)并提交研究資料。干擾物質(zhì)研究應(yīng)當(dāng)考慮常見(jiàn)的內(nèi)源性干擾、外源性干擾和已有報(bào)道的干擾物質(zhì)等對(duì)產(chǎn)品測(cè)定結(jié)果的影響。如膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等干擾因素的研究，干擾物質(zhì)濃度的分布應(yīng)覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度，樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并對(duì)干擾的程度進(jìn)行量化。將研究結(jié)果在說(shuō)明書(shū)中進(jìn)行描述。4.8測(cè)量區(qū)間及可報(bào)告區(qū)間4.8.1線性區(qū)間及測(cè)量區(qū)間線性區(qū)間的研究，需采用高值和零濃度/低值樣本配制一系列不同濃度的樣本。所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實(shí)際檢測(cè)的樣本相似，當(dāng)建立試劑的線性區(qū)間時(shí)，需配制較預(yù)期線性區(qū)間更寬的9個(gè)左右不同濃度的樣本（不包括零濃度樣本），每個(gè)樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測(cè)。采用重復(fù)檢測(cè)均值和預(yù)期值進(jìn)行直線回歸分析，建議采用加權(quán)最小二乘回歸等分析方法，提供散點(diǎn)圖、線性回歸方程、線性相關(guān)系數(shù)（r）及線性偏差，判斷結(jié)果是否滿足可接受標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)驗(yàn)證試劑的線性區(qū)間時(shí)，需配制覆蓋整個(gè)線性區(qū)間的至少5個(gè)不同濃度的樣本，每個(gè)樣本至少重復(fù)檢測(cè)2次。測(cè)量區(qū)間，也稱分析測(cè)量區(qū)間，在該區(qū)間內(nèi)，臨床樣本在未經(jīng)稀釋、濃縮，或非常規(guī)測(cè)量程序中步驟的其他前處理情況下，檢測(cè)結(jié)果的線性偏差、不精密度和偏倚均在可接受范圍內(nèi)。測(cè)量區(qū)間下限為定量限，線性區(qū)間包含測(cè)量區(qū)間。4.8.2擴(kuò)展測(cè)量區(qū)間和可報(bào)告區(qū)間如對(duì)超出測(cè)量區(qū)間濃度的樣本可進(jìn)行稀釋后檢測(cè)，應(yīng)研究合適的稀釋液和稀釋倍數(shù)，從而確定試劑的擴(kuò)展測(cè)量區(qū)間和可報(bào)告區(qū)間。兩者上限均為測(cè)量區(qū)間上限×稀釋倍數(shù)，擴(kuò)展測(cè)量區(qū)間的下限為測(cè)量區(qū)間上限，可報(bào)告區(qū)間下限為檢出限。4.9試劑空白4.9.1試劑空白吸光度用生理鹽水測(cè)試試劑（盒），在37℃、340nm波長(zhǎng)、1cm光徑條件下，記錄測(cè)試啟動(dòng)時(shí)的吸光度（A1）和約5分鐘(t)后的吸光度（A2），A2測(cè)試結(jié)果即為試劑空白吸光度測(cè)定值。4.9.2試劑空白吸光度變化率記錄測(cè)試啟動(dòng)時(shí)的吸光度（A1）和n分鐘(T)后的吸光度（A2），計(jì)算出每分鐘吸光度變化值()，即為試劑空白吸光度變化率（A/min）。4.10分析靈敏度用已知活性的樣品測(cè)試試劑（盒），記錄試劑（盒）在37℃、340nm波長(zhǎng)、1cm光徑條件下的吸光度變化率。按照申請(qǐng)人規(guī)定的分析靈敏度計(jì)算公式計(jì)算分析靈敏度。4.11反應(yīng)體系（如適用）資料由申請(qǐng)人保存，技術(shù)審評(píng)如需要時(shí)提交。反應(yīng)體系研究資料包括樣本的制備方式（采集和處理）、樣本要求、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件、校準(zhǔn)方法（如有）、質(zhì)控方法等。5.穩(wěn)定性研究一般應(yīng)包含研究方案、報(bào)告和數(shù)據(jù)三部分內(nèi)容。5.1實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（貨架有效期）提交至少三批申報(bào)產(chǎn)品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究資料。明確儲(chǔ)存的環(huán)境條件（如溫度、濕度和光照）及有效期。5.2使用穩(wěn)定性提交申報(bào)產(chǎn)品實(shí)際使用期間穩(wěn)定性的研究資料，應(yīng)包括所有組成成分的開(kāi)封穩(wěn)定性。適用時(shí)提交復(fù)溶穩(wěn)定性、機(jī)載穩(wěn)定性及凍融次數(shù)研究資料等。如產(chǎn)品中包含校準(zhǔn)品，還應(yīng)提交校準(zhǔn)頻率或校準(zhǔn)穩(wěn)定性研究資料。明確產(chǎn)品使用的溫度、濕度條件等。5.3運(yùn)輸穩(wěn)定性提交申報(bào)產(chǎn)品可在特定或者預(yù)期的條件下運(yùn)輸?shù)难芯抠Y料，應(yīng)說(shuō)明產(chǎn)品正確運(yùn)輸?shù)沫h(huán)境條件（如溫度、濕度、光照和機(jī)械保護(hù)等）。同時(shí)說(shuō)明產(chǎn)品的包裝方式以及暴露的最差運(yùn)輸條件。6.參考區(qū)間按照《體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊(cè)審查指導(dǎo)原則》的要求建立或驗(yàn)證參考區(qū)間。肌酸激酶在正常男性人群和女性人群中具有濃度差異，建議參考區(qū)間按性別（男性、女性）進(jìn)行分組。7.其他資料7.1主要原材料研究資料和生產(chǎn)工藝研究資料資料由申請(qǐng)人保存，技術(shù)審評(píng)如需要時(shí)提交。主要原材料的研究資料包括主要原材料的來(lái)源、選擇、制備方法的研究資料，質(zhì)量分析證書(shū)，主要原材料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定和檢驗(yàn)資料。如涉及企業(yè)參考品，還應(yīng)提交企業(yè)參考品的研究資料，包括來(lái)源、組成、量值確認(rèn)等。生產(chǎn)工藝的研究資料一般包括工作液的配制、分裝和凍干（如適用）等。7.2三批產(chǎn)品的生產(chǎn)及自檢記錄提供三批產(chǎn)品生產(chǎn)及自檢記錄的復(fù)印件。如產(chǎn)品包含校準(zhǔn)品和（或）質(zhì)控品，還應(yīng)提供校準(zhǔn)品的賦值記錄和質(zhì)控品在所有適用機(jī)型上的定值記錄。7.3證明產(chǎn)品安全性、有效性的其他非臨床研究資料（四）臨床評(píng)價(jià)資料肌酸激酶檢測(cè)試劑已列入《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄（2021年）》，申請(qǐng)人應(yīng)按照《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)并提交相關(guān)資料。申請(qǐng)人也可通過(guò)臨床試驗(yàn)的方式進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)，臨床試驗(yàn)的倫理、方案的制定以及報(bào)告的撰寫等臨床試驗(yàn)資料均應(yīng)符合《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的要求，相關(guān)資料簽章應(yīng)符合《醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。下面著重介紹與肌酸激酶檢測(cè)試劑預(yù)期用途有關(guān)的臨床背景情況。肌酸激酶催化肌酸被三磷酸腺苷（ATP）磷酸化的反應(yīng)及其逆反應(yīng)。CK是由兩個(gè)亞基（B和M）組成的二聚體。CK主要分布于骨髓肌和心肌，也分布于腦、胃腸道、膀胱等組織，但含量低，肝臟和紅細(xì)胞基本不含CK。血清CK測(cè)定主要用于骨骼肌和心肌損傷相關(guān)疾病的實(shí)驗(yàn)診斷。急性心肌梗死時(shí)血清CK升高，CK升高一般出現(xiàn)于梗死后2-4小時(shí)，10-24小時(shí)達(dá)峰值，3-4天恢復(fù)正常。血清CK極度升高主要見(jiàn)于全身性肌肉疾病，各種類型的進(jìn)行性肌萎縮時(shí)，血清CK明顯增高。病毒、細(xì)菌等的肌肉感染（如心肌炎、皮肌炎等）血清CK升高。神經(jīng)因素引起的肌萎縮，如脊髓灰白質(zhì)炎時(shí)，CK一般正常。CK增高還見(jiàn)于腦血管意外、腦膜炎、甲狀腺功能減退等患者。一些非疾病因素如劇烈運(yùn)動(dòng)、各種插管及手術(shù)、肌內(nèi)注射氯丙嗦（冬眠靈）和抗生素等也可能引起CK活性增高。如申請(qǐng)人申請(qǐng)的產(chǎn)品超出以上描述的范圍，應(yīng)按照《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》進(jìn)行臨床試驗(yàn)并提交相關(guān)資料。（五）產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽樣稿1.產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的格式應(yīng)符合《醫(yī)療器械說(shuō)明書(shū)和標(biāo)簽管理規(guī)定》《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫指導(dǎo)原則》的要求。產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請(qǐng)人提交的注冊(cè)申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對(duì)此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明參考文獻(xiàn)的相關(guān)信息。以下內(nèi)容僅對(duì)肌酸激酶檢測(cè)試劑說(shuō)明書(shū)的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，說(shuō)明書(shū)其他內(nèi)容應(yīng)根據(jù)《體外診斷試劑說(shuō)明書(shū)編寫指導(dǎo)原則》要求進(jìn)行編寫。1.1【產(chǎn)品名稱】產(chǎn)品名稱由三部分組成：被測(cè)物名稱、用途、方法或原理。例如：肌酸激酶測(cè)定試劑盒（磷酸肌酸底物法）。不建議用比色法、速率法、IFCC推薦方法等作為產(chǎn)品的方法命名。產(chǎn)品的名稱中均不應(yīng)當(dāng)出現(xiàn)樣本類型、定性/定量等內(nèi)容。1.2【包裝規(guī)格】注如不同包裝規(guī)格對(duì)應(yīng)不同的機(jī)型，應(yīng)分別明確適用機(jī)型。1.3【預(yù)期用途】第一段說(shuō)明試劑用于體外定量測(cè)定人樣本（血清和/或血漿）中肌酸激酶的活性。第二段應(yīng)詳細(xì)說(shuō)明預(yù)期用途。包括適用人群，相關(guān)的臨床適應(yīng)證和檢測(cè)目的等，例如：臨床上用于心肌梗死、病毒性心肌炎的輔助診斷、肌肉疾病的輔助診斷和中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的輔助診斷。1.4【檢驗(yàn)原理】根據(jù)產(chǎn)品采用的方法學(xué)說(shuō)明檢驗(yàn)的原理，測(cè)定原理的描述應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要組成成分、被測(cè)物和產(chǎn)物的關(guān)系進(jìn)行描述，必要時(shí)可結(jié)合圖示方法描述。以磷酸肌酸底物法為例，檢驗(yàn)原理可描述為：磷酸肌酸在CK的催化下轉(zhuǎn)變成肌酸，同時(shí)ADP磷酸化成ATP，然后通過(guò)（己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脫氫酶）偶聯(lián)反應(yīng)，最終使NADP轉(zhuǎn)變成NADPH，可在特定波長(zhǎng)（如：340nm）進(jìn)行測(cè)定。1.5【主要組成成分】應(yīng)明確以下內(nèi)容：1.5.1試劑盒提供的試劑組分的名稱、比例或濃度，各組分是否可以互換；如果對(duì)于正確的操作很重要，應(yīng)提供其生物學(xué)來(lái)源、活性及其他特性；如含有校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，應(yīng)說(shuō)明其主要組成成分及其生物學(xué)來(lái)源，校準(zhǔn)品應(yīng)注明其定值及溯源性，溯源性至少應(yīng)寫明溯源到的最高級(jí)別，包括：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的發(fā)布單位及編號(hào)，質(zhì)控品應(yīng)明確靶值范圍。注明校準(zhǔn)品或質(zhì)控品是否具有批特異性。1.5.2對(duì)于非試劑組分，如試驗(yàn)用耗材（如塑料滴管）、定值單（靶值單）、校準(zhǔn)卡等，應(yīng)注明相關(guān)信息。1.5.3對(duì)于試劑盒中不包含，但對(duì)檢驗(yàn)必需的試劑組分，應(yīng)列出此類試劑的名稱、配制方法及其他相關(guān)信息。1.6【儲(chǔ)存條件及有效期】對(duì)試劑盒的效期穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性（如適用）、開(kāi)瓶穩(wěn)定性（如適用）等信息作詳細(xì)介紹。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。不同組分保存條件及有效期不同時(shí)，應(yīng)分別說(shuō)明，產(chǎn)品總有效期以其中效期最短的為準(zhǔn)。增加“生產(chǎn)日期、使用期限或者失效日期見(jiàn)標(biāo)簽”的字樣。注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“室溫”，應(yīng)明確貯存溫度，如2℃～8℃，有效期12個(gè)月。穩(wěn)定期限應(yīng)以月或日或小時(shí)為單位。1.7【適用儀器】說(shuō)明可適用的儀器，并提供與儀器有關(guān)的必要信息以便用戶能夠作出最好的選擇。應(yīng)寫明具體適用儀器的型號(hào)，不能泛指某一系列儀器。1.8【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：1.8.1樣本采集前對(duì)患者的要求：如采集時(shí)間、采集順序等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。1.8.2樣本采集：說(shuō)明采集方法及樣本類型，如有血漿樣本，應(yīng)注明對(duì)抗凝劑的要求。中度及重度溶血時(shí)，因紅細(xì)胞釋放出AK、ATP及G6PD,可能影響延滯時(shí)間并產(chǎn)生副反應(yīng)，應(yīng)說(shuō)明是否應(yīng)避免使用此類樣本。1.8.3樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件及期限、運(yùn)輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)。對(duì)儲(chǔ)存樣本的添加劑要求等。肌酸激酶活性不穩(wěn)定，血清保存期間易喪失活性，應(yīng)說(shuō)明標(biāo)本采集后的樣本處理及保存要求。1.8.4因血清中含有肌酸激酶抑制劑，使用水基質(zhì)進(jìn)行稀釋可能會(huì)產(chǎn)生稀釋偏差。所以當(dāng)測(cè)定值超出線性上限時(shí)，應(yīng)說(shuō)明使用廠家提供的專用稀釋液或明確稀釋方法，并給出稀釋最大倍數(shù)說(shuō)明。1.9【檢驗(yàn)方法】詳細(xì)說(shuō)明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：1.9.1試劑配制方法（如有）、注意事項(xiàng)。1.9.2試驗(yàn)條件：溫度、時(shí)間、儀器波長(zhǎng)、試劑用量、樣本用量、反應(yīng)類型等以及試驗(yàn)過(guò)程中的注意事項(xiàng)。1.9.3校準(zhǔn)：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項(xiàng)、校準(zhǔn)有效期及需要重新校準(zhǔn)的情況及推薦的校準(zhǔn)周期。1.9.4質(zhì)量控制：質(zhì)控品的使用方法、對(duì)質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。如質(zhì)控不合格應(yīng)提供相關(guān)的解決方案。1.9.5試驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算或讀取。1.10【參考區(qū)間】應(yīng)注明常用樣本類型的正常參考區(qū)間，并簡(jiǎn)要說(shuō)明參考區(qū)間確定的方法。簡(jiǎn)單介紹設(shè)定該參考區(qū)間所選健康人群的區(qū)域特征，建議注明以下字樣“由于地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考區(qū)間”。1.11【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】說(shuō)明可能對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素；說(shuō)明在何種情況下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。1.12【檢驗(yàn)方法的局限性】說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，不能單獨(dú)作為確診或排除病例的依據(jù)。說(shuō)明該檢驗(yàn)方法由于哪些原因會(huì)使測(cè)量結(jié)果產(chǎn)生偏離，或測(cè)量結(jié)果還不能完全滿足臨床需要。如：干擾（膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等）等。1.13【產(chǎn)品性能指標(biāo)】1.13.1概括描述每項(xiàng)分析性能研究如準(zhǔn)確度、精密度、分析靈敏度、試劑空白、線性區(qū)間、分析特異性等適用項(xiàng)目的研究方法和結(jié)果。1.13.2概括描述臨床評(píng)價(jià)包括免于臨床試驗(yàn)的臨床評(píng)價(jià)和臨床試驗(yàn)的方法和結(jié)果。1.14【注意事項(xiàng)】1.14.1注明必要的注意事項(xiàng)，如本品僅用于體外診斷等。1.14.2如該產(chǎn)品含有人源/動(dòng)物源性物質(zhì)（如：血清），應(yīng)給出具有潛在感染性的警告，包括生物安全注意事項(xiàng)、使用時(shí)注意事項(xiàng)、廢棄物注意事項(xiàng)等。1.14.3廢棄物處理應(yīng)明示按我國(guó)法律法規(guī)規(guī)定處理，有特殊處理方式的應(yīng)明示，含有毒有害物質(zhì)的應(yīng)明示物質(zhì)名稱（如：疊氮鈉）。1.14.4其它注意事項(xiàng)。如：使用不同生產(chǎn)商的試劑對(duì)同一份樣本進(jìn)行檢測(cè)可能會(huì)存在差異。1.15【標(biāo)識(shí)的解釋】如有圖形或符號(hào)，請(qǐng)解釋其代表的意義?？蓞⒖枷嚓P(guān)標(biāo)準(zhǔn)YY/T0466.1《醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號(hào)第1部分：通用要求》。1.16【參考文獻(xiàn)】注明引用參考文獻(xiàn)，參考文獻(xiàn)格式應(yīng)符合GB/T7714《文后參考文獻(xiàn)著錄規(guī)則》。1.17【基本信息】1.7.1注冊(cè)人與生產(chǎn)企業(yè)為同一企業(yè)的，按以下格式標(biāo)注基本信息：注冊(cè)人/生產(chǎn)企業(yè)名稱、住所、聯(lián)系方式、售后服務(wù)單位名稱、聯(lián)系方式、生產(chǎn)地址、生產(chǎn)許可證編號(hào)或者生產(chǎn)備案憑證編號(hào)。1.7.2委托生產(chǎn)的按照以下格式標(biāo)注基本信息：注冊(cè)人名稱、住所、聯(lián)系方式、售后服務(wù)單位名稱、聯(lián)系方式、受托生產(chǎn)企業(yè)名稱、生產(chǎn)地址、生產(chǎn)許可證編號(hào)或