《白紋伊蚊雄蚊規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)要求》

ICS67.020

CCSX04

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/CIRAXXXXX—2023

白紋伊蚊雄蚊規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)要求

Technicalrequirementsforlarge-scaleproductionofAedesalbopictusmale

mosquitoes

（征求意見(jiàn)稿）

2023年8月2日

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

中國(guó)同位素與輻射行業(yè)協(xié)會(huì)發(fā)布

T/CIRAXXXXX—2023

白紋伊蚊雄蚊規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)要求

1范圍

本文件規(guī)定了白紋伊蚊（Aedesalbopictus）雄蚊規(guī)?；a(chǎn)流程和技術(shù)要求，包括工廠設(shè)施與條件、

蚊品系建立、蚊卵孵化、幼蟲(chóng)飼養(yǎng)、雌雄分離、羽化、質(zhì)量控制和關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)等。

本文件適用于在昆蟲(chóng)不育技術(shù)框架下，在工廠條件下規(guī)模化生產(chǎn)白紋伊蚊雄蚊。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T1964.3-2010農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)試驗(yàn)試蟲(chóng)養(yǎng)殖方法第3部分：白紋伊蚊

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

蚊品系mosquitostrain

白紋伊蚊。

3.2

擴(kuò)繁inbreeding

在實(shí)驗(yàn)室和工廠條件下，嚴(yán)格按照蚊蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程進(jìn)行飼養(yǎng)，擴(kuò)大種群。

3.3

蚊卵孵化率egghatchrate

孵化出幼蟲(chóng)的數(shù)量與總孵化蚊卵數(shù)量的比值。

3.4

幼蟲(chóng)飼養(yǎng)larvalrearing

將剛孵化出來(lái)的一期幼蟲(chóng)轉(zhuǎn)移到幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)中，按照幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)規(guī)律，每天給予幼蟲(chóng)一定量的食物。

幼蟲(chóng)時(shí)期約維持5～6天，經(jīng)4次蛻皮后變成蚊蛹。

3.5

蚊蛹和幼蟲(chóng)收集collectionofmosquitopupaeandlarvae

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將飼養(yǎng)盤(pán)中的幼蟲(chóng)及蛹倒入篩網(wǎng)，過(guò)濾掉水體，將幼蟲(chóng)及蛹收集在手持篩網(wǎng)中。

3.6

鹽水浸泡salinesoaking

將蚊蛹和幼蟲(chóng)混合物浸泡在一定濃度的鹽水中，可以特異性殺死蚊幼蟲(chóng)而不影響蚊蛹。

3.7

蚊蛹雌雄分離sexseparation

基于白紋伊蚊的雌蛹、雄蛹體形大小差異，通過(guò)雌雄分離儀器后，可以將雌蛹、雄蛹分離出來(lái)，并

分類(lèi)收集。

3.8

羽化eclosion

指蚊蛹蛻皮變成成蚊的過(guò)程。

3.9

混雌率femalecontaminationrate

經(jīng)雌雄分離后，混在雄蚊中雌蚊的百分率。

3.10

飛行率flightabilityrate

雄蚊成蚊在30分鐘內(nèi)自由飛離飛行測(cè)試筒的百分率。

4儀器與材料

4.1電子天平

用于蚊卵稱(chēng)重，最小讀數(shù)為0.0001g~0.00001g。

4.2孵化液

用于孵化蚊卵，稱(chēng)取0.9g的酵母蛋白胨粉加入至1000ml的純水中，攪拌均勻并密封，使酵母蛋

白胨粉完全溶解，放置在28±2℃條件下發(fā)酵24h后使用。

4.3恒溫培養(yǎng)箱

維持蚊卵在孵化過(guò)程中溫度恒定。

4.4幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)

用于飼養(yǎng)幼蟲(chóng)的塑料盤(pán)，規(guī)格51.5×36.0×5.5cm。

4.5幼蟲(chóng)食物

用于飼養(yǎng)幼蟲(chóng)的混合食物，其主要成分包括高級(jí)魚(yú)粉、蝦粉、小型甲殼類(lèi)動(dòng)物、優(yōu)質(zhì)酵母、胎貝、

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小麥粉等。

4.6網(wǎng)篩

不銹鋼，60目。

4.7雌雄分離器

由兩塊大小一致的玻璃板以一定的角度貼合組成，可依據(jù)雌雄蚊蛹體形大小差異來(lái)進(jìn)行分離。

4.8羽化盒

用于盛放雄蛹，規(guī)格20×30×4cm。

4.9羽化籠

在框架上縛以蚊帳紗布制成的長(zhǎng)方形紗布籠，規(guī)格30×30×90cm，網(wǎng)孔目數(shù)40目。

4.10飛行測(cè)試筒

用于測(cè)定雄蚊的飛行能力，圓筒形，材質(zhì)透明，規(guī)格為直徑12cm和高度60cm。

5生產(chǎn)條件

5.1蚊卵孵化條件

恒溫培養(yǎng)箱溫度29±1℃，孵化時(shí)間為1~1.5h。

5.2幼蟲(chóng)飼養(yǎng)間條件

溫度27±2℃，相對(duì)濕度75±10%，光照周期12L:12D，幼蟲(chóng)飼養(yǎng)水溫度：25±2℃。

5.3羽化間條件

溫度26±2℃，相對(duì)濕度75±10%。

6生產(chǎn)流程

6.1蚊品系建立與擴(kuò)繁

從野外采集蚊幼蟲(chóng)，在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)至成蚊，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定為白紋伊蚊后，進(jìn)行混合飼養(yǎng)，建立實(shí)驗(yàn)

室種群。待種群在實(shí)驗(yàn)室中穩(wěn)定飼養(yǎng)多代，然后將實(shí)驗(yàn)室種群轉(zhuǎn)移至工廠條件下進(jìn)行飼養(yǎng)。按照蚊蟲(chóng)世

代增長(zhǎng)倍數(shù)和所需雄蚊數(shù)量進(jìn)行計(jì)劃擴(kuò)繁。

6.2蚊卵孵化

將蚊卵輕輕掃下，混勻后，根據(jù)蚊卵孵化率來(lái)確定每盤(pán)所需的蚊卵數(shù)量，根據(jù)所需蚊卵數(shù)量進(jìn)行稱(chēng)

重。白紋伊蚊蚊卵重量與數(shù)量關(guān)系參見(jiàn)附錄A表A.1。將稱(chēng)重后蚊卵轉(zhuǎn)移到15mL的離心管中，加入10mL

的孵化液，然后將管放置在恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行孵化，隨后幼蟲(chóng)轉(zhuǎn)移至幼蟲(chóng)飼養(yǎng)間進(jìn)行飼養(yǎng)。蚊卵孵化流程

參見(jiàn)附錄A圖A.1。

6.3幼蟲(chóng)飼養(yǎng)

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在幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)中加入2.5L去氯水（放置過(guò)夜的自來(lái)水），將6.2孵化出的幼蟲(chóng)轉(zhuǎn)入飼養(yǎng)盤(pán)，每盆飼

養(yǎng)4000±500條，幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)放置在幼蟲(chóng)飼養(yǎng)架上，每個(gè)幼蟲(chóng)飼養(yǎng)架可放置54個(gè)幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)。幼蟲(chóng)飼養(yǎng)

流程參見(jiàn)附錄B圖B.1。每日添加幼蟲(chóng)食物量請(qǐng)參照附錄B表B.1。

6.4鹽水浸泡

第8天（蚊卵孵化當(dāng)天算第1天），將幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)蚊蛹、幼蟲(chóng)和飼養(yǎng)水倒經(jīng)60目的過(guò)濾網(wǎng)篩，收集蚊

蛹及幼蟲(chóng)，然后將其轉(zhuǎn)移至含有15%鹽水（氯化鈉）溶液中，浸泡1h，直至幼蟲(chóng)全部死亡。不同鹽水

濃度對(duì)白紋伊蚊幼蟲(chóng)和蚊蛹的存活情況參見(jiàn)附錄C表C.1和表C.2。

6.5雌雄分離

收集6.4蚊蛹，轉(zhuǎn)移至清水中，然后利用雌雄分離器來(lái)分離并分類(lèi)收集雄蛹和雌蛹。

6.6雄蛹裝籠與羽化

將6.5分離后雄蛹轉(zhuǎn)移至羽化間，取約16000只雄蛹放入羽化盒中，加入約600mL的清水，然后轉(zhuǎn)移

至羽化籠，24h后，在羽化籠上放置經(jīng)過(guò)10%糖水溶液的棉球供成蚊雄蚊吸食。48h后，將羽化盒從羽

化籠中取出。

6.7質(zhì)量控制

生產(chǎn)的雄蚊質(zhì)量控制包括重量、混雌率、飛行率。

——重量：隨調(diào)挑選6.6雄蚊700-1000只，低溫下凍暈后進(jìn)行稱(chēng)重，然后計(jì)算單只雄蚊重量。

——混雌率：隨機(jī)挑選6.6雄蚊700-1000只，凍死后，根據(jù)蚊蟲(chóng)形態(tài)學(xué)特征，記錄混入雌蚊數(shù)量，

計(jì)算混雌率。

——飛行率：隨機(jī)挑選6.6雄蚊700-1000只，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)皿中，然后將飛行測(cè)試筒豎立在培養(yǎng)皿上，

30分鐘后記錄雄蚊飛離測(cè)試筒的數(shù)量，計(jì)算飛行率。

7雄蚊規(guī)模化生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)

——雄蚊平均重量：1.0mg-1.4mg，單只雄蚊的平均重量為1.0mg~1.4mg。

——雄蚊平均混雌率：0-0.3%，每千只雄蚊中雌蚊的數(shù)量不超過(guò)3只。

——雄蚊平均飛行率：85%-100%，每千只測(cè)試雄蚊中，30min內(nèi)飛離測(cè)試筒的數(shù)量不低于850只。

8其它指標(biāo)

除上述規(guī)定雄蚊規(guī)?；a(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)，結(jié)合已有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)和中試研究結(jié)果，對(duì)其它生產(chǎn)相關(guān)指

標(biāo)建議如下：

——每千個(gè)蚊卵平均重量：6.7-8.3mg，每千個(gè)蚊卵的平均重量≥6.7mg。

——蚊卵平均孵化率：70%-90%，經(jīng)孵化后，≥70%的蚊卵能夠孵化成幼蟲(chóng)。

——幼蟲(chóng)飼養(yǎng)密度：2條/cm2-3條/cm2，以飼養(yǎng)盤(pán)表面積計(jì)算，每平方厘米幼蟲(chóng)飼養(yǎng)密度為2~3條。

——雄蛹平均獲得率：65%-80%，經(jīng)第8天收集蚊蛹、幼蟲(chóng)和雌雄分離后，真實(shí)獲得的雄蛹數(shù)量占

理論雄蛹數(shù)量的比值。

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——雄蚊平均羽化率：80%-100%，經(jīng)雌雄分離，≥80%的雄蛹能夠成功羽化為雄蚊。

9安全防護(hù)

在實(shí)驗(yàn)廠房?jī)?nèi)規(guī)模化生產(chǎn)雄蚊過(guò)程中，需要同時(shí)做好生物安全和人員安全的防護(hù)措施，需嚴(yán)格按照

附錄E《實(shí)驗(yàn)廠房安全生產(chǎn)管理?xiàng)l例》執(zhí)行，保證生物安全和人員安全。

10附加聲明

本文件所規(guī)定的白紋伊蚊雄蚊規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)要求是依據(jù)主編和參編單位在中試條件下取得的實(shí)

驗(yàn)研究結(jié)果。

在昆蟲(chóng)不育技術(shù)框架下，在工廠化條件下規(guī)?；a(chǎn)埃及伊蚊（Aedesaegypti）、致倦庫(kù)蚊（Culex

quinquefasciatus）和斯氏按蚊（Anophelesstephensi）等雄性成蚊，生產(chǎn)流程和技術(shù)指標(biāo)可參照本文件。

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附錄A

（資料性）

白紋伊蚊蚊卵定量與孵化流程

分別稱(chēng)取0.01g、0.02g、0.03g、0.04g、0.05g、0.06g、0.07g、0.08g、0.09g和0.10g蚊卵，然后

進(jìn)行人工計(jì)數(shù)蚊卵數(shù)量，根據(jù)蚊卵重量和數(shù)量（參見(jiàn)表A.1），可得出蚊卵重量（y）與數(shù)量（x）的關(guān)

系式：y=127611x–179.45，R2=0.9991，通過(guò)關(guān)系式計(jì)算可算得：1g≈127,000個(gè)蚊卵。

表A.1白紋伊蚊蚊卵重量與數(shù)量關(guān)系

蚊卵重量（g）數(shù)量

0.011285

0.022451

0.033907

0.045212

0.056495

0.067764

0.078854

0.0810261

0.0911793

0.1013266

圖A.1白紋伊蚊蚊卵孵化流程圖

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附錄B

（資料性附錄）

白紋伊蚊幼蟲(chóng)飼養(yǎng)流程和飼養(yǎng)食物量表

圖B.1白紋伊蚊幼蟲(chóng)飼養(yǎng)流程圖

表B.1幼蟲(chóng)飼養(yǎng)食物量表

天數(shù)（day）1234567

食物量（g）0.40.00.81.62.02.02.0

注：每盤(pán)幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)添加的食物量

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附錄C

（資料性附錄）

不同鹽水濃度對(duì)白紋伊蚊幼蟲(chóng)和蚊蛹影響

選擇孵化后第8天的白紋伊蚊幼蟲(chóng)和蚊蛹，將飼養(yǎng)水體過(guò)濾后收集幼蟲(chóng)和蚊蛹，進(jìn)行鹽水浸泡，鹽

水濃度選擇0，5，10%，15%，20%，25%和30%。將混合物與鹽水過(guò)篩（60目），濾去鹽水，然后將

篩網(wǎng)中混合物置于1升的清水中浸泡2-3次；將混合物倒入容器中，加水至30厘米，靜置5分鐘；死去的

幼蟲(chóng)會(huì)下沉于容器底部，而蚊蛹會(huì)上浮于水面，將蚊蛹輕輕倒出至收集盒中。隨機(jī)挑選雄蛹、雌蛹各100

只，放入羽化籠，48小時(shí)后觀察蚊蛹羽化率。同時(shí)設(shè)置未經(jīng)鹽水處理的對(duì)照組。

幼蟲(chóng)死亡率（%）=死亡幼蟲(chóng)數(shù)/幼蟲(chóng)數(shù)*100%

蚊蛹羽化率（%）=羽化只數(shù)/蛹數(shù)*100%

根據(jù)表C.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果，隨著鹽水濃度增加，白紋伊蚊四期幼蟲(chóng)死亡率升高，當(dāng)鹽水濃度為15%，浸

泡時(shí)間30分鐘或以上，可以完全殺滅白紋伊蚊四期幼蟲(chóng)。為保證幼蟲(chóng)死亡的穩(wěn)定性及操作可行性，選擇

鹽水濃度為15%，浸泡時(shí)間60分鐘作為目標(biāo)濃度和時(shí)間。

為觀察鹽水浸泡對(duì)蚊蛹的影響，如表C.2所示，經(jīng)鹽水浸泡后，蚊蛹依然可以正常羽化，說(shuō)明鹽水

浸泡不會(huì)對(duì)蚊蛹產(chǎn)生不利影響。

表C.1不同鹽水濃度浸泡對(duì)白紋伊蚊幼蟲(chóng)死亡率影響

浸泡時(shí)間鹽水濃度（%）

（分鐘）

0101520253035

15082.0094.0099.67100100100

30093.3399.33100100100100

45096.67100100100100100

60098.00100100100100100

75099.33100100100100100

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表C.2不同鹽水濃度浸泡對(duì)白紋伊蚊蚊蛹羽化率影響

浸泡時(shí)間鹽水濃度（%）

（分鐘）

0101520253035

1595.5694.4410097.7898.8994.4493.33

3095.5694.4490.0094.4493.3397.7887.78

4591.1197.7896.6797.7892.2293.3392.22

6092.2296.6796.6797.7897.7896.6797.78

7587.7810097.7896.6797.7892.2292.22

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附錄D

（資料性附錄）

雄蚊規(guī)?；a(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)

（一）為驗(yàn)證生產(chǎn)雄蚊的關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)如重量與混雌率，隨機(jī)挑選700-1000只雄蚊，進(jìn)行稱(chēng)重，記

錄總重量。然后將雄蚊置于-20度冰箱，待雄蚊全部死亡后，進(jìn)行計(jì)數(shù)，并根據(jù)蚊蟲(chóng)形態(tài)學(xué)特征，記錄

混在雄蚊中雌蚊數(shù)量，分別計(jì)算單只雄蚊重量和混雌率。

單只雄蚊重量=總重量/總數(shù)量

混雌率（%）=雌蚊數(shù)量/總數(shù)量*100%

通過(guò)連續(xù)開(kāi)展30批次實(shí)驗(yàn)，根據(jù)表D.1數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，單只白紋伊蚊雄蚊的平均重量區(qū)間為

1.0-1.4mg，多數(shù)雄蚊平均重量在1.1-1.3mg之間?；齑坡士刂葡鄬?duì)較好，區(qū)間為0-0.23%。因此，為保證

穩(wěn)定性與可靠性，我們將關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)設(shè)定為雄蚊平均重量：1.0mg-1.4mg；雄蚊平均混雌率：0-0.3%。

表D.1白紋伊蚊規(guī)?；a(chǎn)雄蚊的重量與混雌率

批次總數(shù)量總重量（mg）單只雄蚊重量（mg）雌蚊數(shù)量混雌率（%）

18639501.1000

28069701.2000

37919501.2000

48639501.1000

57469701.3000

67919501.2000

774610101.3500

87759801.2600

983410101.2100

1082210001.2210.12

119359801.0500

129109901.0900

137509801.3100

149669901.0200

158679901.1400

169029901.1000

177889901.2600

1884110001.1910.12

198319901.1900

10

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2091310301.1300

2184310201.2100

2288610101.1420.23

2377010001.3000.00

2475510001.3200.00

2580410001.2400.00

2682010001.2200.00

2774510001.3400.00

2880410301.2800.00

2985410201.1900.00

307829501.2100.00

（二）為驗(yàn)證生產(chǎn)雄蚊另一個(gè)關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)飛行率，隨機(jī)挑選700-1000只昏睡的雄蚊，放置在平皿

中，立刻轉(zhuǎn)移至大籠子中（2m*2m*2m），然后將飛行測(cè)試筒（直徑12cm和高度60cm）豎立在平皿

上，等待雄蚊復(fù)蘇后自由飛離測(cè)試筒。30分鐘后，用蓋子蓋住飛行測(cè)試筒，及時(shí)記錄無(wú)法飛離測(cè)試筒的

雄蚊數(shù)量。飛行測(cè)試在室溫條件下開(kāi)展。

飛行率（%）=飛離測(cè)試筒雄蚊數(shù)量/總測(cè)試雄蚊數(shù)量*100%

通過(guò)連續(xù)開(kāi)展15批次實(shí)驗(yàn)，根據(jù)表D.2數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，雄蚊的飛行率在88.1%-95.3%之間，因此，為

保證穩(wěn)定性與可靠性，將飛行率的關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)范圍設(shè)定為85%-100%，即30分鐘內(nèi)飛離測(cè)試筒的只數(shù)

不低于測(cè)試數(shù)量的85%。

表D.2白紋伊蚊規(guī)?；a(chǎn)雄蚊的飛行率

批次總測(cè)試雄蚊數(shù)量飛離測(cè)試筒雄蚊數(shù)量飛行率（%）

1100093493.4

295089293.9

3100090190.1

485779492.7

584878892.9

684878392.3

7100088188.1

885881895.3

995787291.1

10100095395.3

1190383091.9

1285278792.4

1395387892.1

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1490082191.2

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附錄E

（資料性附錄）

實(shí)驗(yàn)廠房安全生產(chǎn)管理?xiàng)l例

[1]廠房為密閉空間，在主要進(jìn)出口處設(shè)置有緩沖間、風(fēng)幕機(jī)，室內(nèi)空調(diào)口、下水口全部添加篩網(wǎng)，

防止蚊蟲(chóng)逃逸風(fēng)險(xiǎn)。

[2]廠房?jī)?nèi)需安裝新風(fēng)系統(tǒng)，保證通風(fēng)效果，降低異味產(chǎn)生。

[3]廠房?jī)?nèi)空調(diào)和新風(fēng)系統(tǒng)，每6個(gè)月需進(jìn)行深度清潔一次，保證有害生物不超標(biāo)。

[4]廠房?jī)?nèi)消防安全指示必須明確，并需定期檢查消防器械。

[5]廠房?jī)?nèi)嚴(yán)禁使用各類(lèi)殺蟲(chóng)劑。

[6]每天及時(shí)做好衛(wèi)生工作，保持廠房?jī)?nèi)干凈、整潔。

[7]生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的廢棄物需按照生物安全和環(huán)保要求進(jìn)行，如廢水需經(jīng)過(guò)過(guò)濾后才可以按照生

活污水排放；蚊蟲(chóng)需統(tǒng)一收集后放置在-20度冰箱過(guò)夜才能按照生物垃圾進(jìn)行運(yùn)輸和處理。

[8]技術(shù)人員必須經(jīng)過(guò)生物安全知識(shí)培訓(xùn)才能進(jìn)入廠房。

[9]技術(shù)人員操作時(shí)必須穿著合適的工作服或者防護(hù)服，戴好口罩和防護(hù)帽，穿著勞保鞋等。

[10]生產(chǎn)過(guò)程中技術(shù)人員必須嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行，科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)、準(zhǔn)確做好各項(xiàng)記錄。

[11]具有發(fā)燒、咳嗽等癥狀技術(shù)人員不得進(jìn)入廠房?jī)?nèi)。

[12]技術(shù)人員每年至少進(jìn)行一次健康檢查，取得健康合格證之后方可進(jìn)入廠房開(kāi)展工作。

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參考文獻(xiàn)

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前言

本文件按照GB/T1.1-2020給出的規(guī)則起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。

本文件由中國(guó)同位素與輻射行業(yè)協(xié)會(huì)提出并歸口。

本文件起草單位：中山大學(xué)、中大核昆生物技術(shù)（東莞）有限公司。

本文件主要起草人：。

I

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白紋伊蚊雄蚊規(guī)?；a(chǎn)技術(shù)要求

1范圍

本文件規(guī)定了白紋伊蚊（Aedesalbopictus）雄蚊規(guī)?；a(chǎn)流程和技術(shù)要求，包括工廠設(shè)施與條件、

蚊品系建立、蚊卵孵化、幼蟲(chóng)飼養(yǎng)、雌雄分離、羽化、質(zhì)量控制和關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)等。

本文件適用于在昆蟲(chóng)不育技術(shù)框架下，在工廠條件下規(guī)?；a(chǎn)白紋伊蚊雄蚊。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T1964.3-2010農(nóng)藥登記用衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑室內(nèi)試驗(yàn)試蟲(chóng)養(yǎng)殖方法第3部分：白紋伊蚊

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

蚊品系mosquitostrain

白紋伊蚊。

3.2

擴(kuò)繁inbreeding

在實(shí)驗(yàn)室和工廠條件下，嚴(yán)格按照蚊蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程進(jìn)行飼養(yǎng)，擴(kuò)大種群。

3.3

蚊卵孵化率egghatchrate

孵化出幼蟲(chóng)的數(shù)量與總孵化蚊卵數(shù)量的比值。

3.4

幼蟲(chóng)飼養(yǎng)larvalrearing

將剛孵化出來(lái)的一期幼蟲(chóng)轉(zhuǎn)移到幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)中，按照幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)規(guī)律，每天給予幼蟲(chóng)一定量的食物。

幼蟲(chóng)時(shí)期約維持5～6天，經(jīng)4次蛻皮后變成蚊蛹。

3.5

蚊蛹和幼蟲(chóng)收集collectionofmosquitopupaeandlarvae

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將飼養(yǎng)盤(pán)中的幼蟲(chóng)及蛹倒入篩網(wǎng)，過(guò)濾掉水體，將幼蟲(chóng)及蛹收集在手持篩網(wǎng)中。

3.6

鹽水浸泡salinesoaking

將蚊蛹和幼蟲(chóng)混合物浸泡在一定濃度的鹽水中，可以特異性殺死蚊幼蟲(chóng)而不影響蚊蛹。

3.7

蚊蛹雌雄分離sexseparation

基于白紋伊蚊的雌蛹、雄蛹體形大小差異，通過(guò)雌雄分離儀器后，可以將雌蛹、雄蛹分離出來(lái)，并

分類(lèi)收集。

3.8

羽化eclosion

指蚊蛹蛻皮變成成蚊的過(guò)程。

3.9

混雌率femalecontaminationrate

經(jīng)雌雄分離后，混在雄蚊中雌蚊的百分率。

3.10

飛行率flightabilityrate

雄蚊成蚊在30分鐘內(nèi)自由飛離飛行測(cè)試筒的百分率。

4儀器與材料

4.1電子天平

用于蚊卵稱(chēng)重，最小讀數(shù)為0.0001g~0.00001g。

4.2孵化液

用于孵化蚊卵，稱(chēng)取0.9g的酵母蛋白胨粉加入至1000ml的純水中，攪拌均勻并密封，使酵母蛋

白胨粉完全溶解，放置在28±2℃條件下發(fā)酵24h后使用。

4.3恒溫培養(yǎng)箱

維持蚊卵在孵化過(guò)程中溫度恒定。

4.4幼蟲(chóng)飼養(yǎng)盤(pán)

用于飼養(yǎng)幼蟲(chóng)的塑料盤(pán)，規(guī)格51.5×36.0×5.5cm。

4.5幼蟲(chóng)食物

用于飼養(yǎng)幼蟲(chóng)的混合食物，其主要成分包括高級(jí)魚(yú)粉、蝦粉、小型甲殼類(lèi)動(dòng)物、優(yōu)質(zhì)酵母、胎貝、

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小麥粉等。

4.6網(wǎng)篩

不銹鋼，60目。

4.7雌雄分離器

由兩塊大小一致的玻璃板以一定的角度貼合組成，可依據(jù)雌雄蚊蛹體形大小差異來(lái)進(jìn)行分離。

4.8羽化盒

用于盛放雄蛹，規(guī)格20×30×4cm。

4.9羽化籠

在框架上縛以蚊帳紗布制成的長(zhǎng)方形紗布籠，規(guī)格30×30×90cm，網(wǎng)孔目數(shù)40目。

4.10飛行測(cè)試筒

用于測(cè)定雄蚊的飛行能力，圓筒形，材質(zhì)透明，規(guī)格為直徑12cm和高度60cm。

5生產(chǎn)條件

5.1蚊卵孵化條件

恒溫培養(yǎng)箱溫度29±1℃，孵化時(shí)間為1~1.5h。

5.2幼蟲(chóng)飼養(yǎng)間條件

溫度27±2℃，相對(duì)濕度75±10%，光照周期12L:12D，幼蟲(chóng)飼養(yǎng)水溫度：25±2℃。

5.3羽化間條件

溫度26±2℃，相對(duì)濕度75±10%。

6生產(chǎn)流程

6.1蚊品系建立與擴(kuò)繁

從野外采集蚊幼蟲(chóng)，在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)至成蚊，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定為白紋伊蚊后，進(jìn)行混合飼養(yǎng)，建立