生物化學(xué)與分子生物學(xué)：生化專題

生化專題

基因表達(dá)調(diào)控一、基因表達(dá)的概念基因組(genome):一個(gè)細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息或整套基因?；虮磉_(dá)(geneexpression)：基因經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯，產(chǎn)生具有特異生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)分子的過(guò)程。全部表達(dá)都會(huì)翻譯么？tRNArRNA

2007A-168.基因組是指A、以轉(zhuǎn)錄組學(xué)為基礎(chǔ)的研究領(lǐng)域B、一種生物體具有的所有遺傳信息的總和C、研究基因的結(jié)構(gòu),功能及表達(dá)產(chǎn)物的學(xué)科領(lǐng)域D、包過(guò)轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)等內(nèi)容的科學(xué)領(lǐng)域答案：B解析：一個(gè)細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息或整套基因稱為基因組。2002A-29．下列關(guān)于“基因表達(dá)”概念的敘述，錯(cuò)誤的是

A．基因表達(dá)具有組織特異性B．基因表達(dá)具有階段特異性

C．基因表達(dá)均經(jīng)歷基因轉(zhuǎn)錄及翻譯過(guò)程

D.某些基因表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)分子

E.有些基因表達(dá)水平受環(huán)境變化影響答案：C

基因表達(dá)的多級(jí)調(diào)控基因激活轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄后加工mRNA降解

蛋白質(zhì)降解等蛋白質(zhì)翻譯翻譯后加工修飾2009A-38.基因調(diào)控的基本控制點(diǎn)是A.mRNA從細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)B.轉(zhuǎn)錄起始C.轉(zhuǎn)錄后加工D.蛋白質(zhì)翻譯及翻譯后加工答案：B二、基因表達(dá)的時(shí)間性及空間性（一）時(shí)間特異性按功能需要，某一特定基因的表達(dá)嚴(yán)格按特定的時(shí)間順序發(fā)生，稱為基因表達(dá)的時(shí)間特異性。多細(xì)胞生物基因表達(dá)的時(shí)間特異性又稱階段特異性。從侵入細(xì)菌到溶菌不同階段，噬菌體DNA的表達(dá)表現(xiàn)為：A、細(xì)胞特異性B、組織特異性C、空間特異性D、階段特異性答案：D（二）空間特異性在個(gè)體生長(zhǎng)全過(guò)程，某種基因產(chǎn)物在個(gè)體按不同組織空間順序出現(xiàn)，稱之為基因表達(dá)的空間特異性?；虮磉_(dá)伴隨時(shí)間順序所表現(xiàn)出的這種分布差異，實(shí)際上是由細(xì)胞在器官的分布決定的，所以空間特異性又稱細(xì)胞或組織特異性。三、基因表達(dá)的方式按對(duì)刺激的反應(yīng)性，基因表達(dá)的方式分為：（一）組成性表達(dá):某些基因在一個(gè)個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)，被稱為管家基因。管家基因較少受環(huán)境因素影響，在個(gè)體各個(gè)生長(zhǎng)階段的大多數(shù)或幾乎全部組織中持續(xù)表達(dá)被視為組成性基因表達(dá)。2010A-37．組成性基因表達(dá)的正確含義是A．在大多數(shù)細(xì)胞中持續(xù)恒定表達(dá)

B．受多種機(jī)制調(diào)節(jié)的基因表達(dá)c．可誘導(dǎo)基因表達(dá)D．空間特異性基因表達(dá)答案：A（二）誘導(dǎo)和阻遏表達(dá)在特定環(huán)境信號(hào)刺激下，相應(yīng)的基因被激活，基因表達(dá)產(chǎn)物增加，這種基因稱為可誘導(dǎo)基因?？烧T導(dǎo)基因在特定環(huán)境中表達(dá)增強(qiáng)的過(guò)程，稱為誘導(dǎo)。如果基因?qū)Νh(huán)境信號(hào)應(yīng)答是被抑制，這種基因是可阻遏基因?？勺瓒艋虮磉_(dá)產(chǎn)物水平降低的過(guò)程稱為阻遏。

基因工程在體外將目的DNA片段與能自主復(fù)制的載體連接，形成重組DNA分子，進(jìn)而在受體細(xì)胞中復(fù)制、擴(kuò)增，從而獲得單一DNA分子的大量拷貝。工具酶功能限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別特異序列，切割DNADNA連接酶使DNA切口封合或使兩個(gè)DNA分子或片段連接堿性磷酸酶切除末端磷酸基反轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA；替代DNA聚合酶I進(jìn)行填補(bǔ)，標(biāo)記或DNA序列分析末端轉(zhuǎn)移酶

3′羥基末端進(jìn)行同聚物加尾DNA聚合酶Ⅰ合成雙鏈cDNA分子或片段連接；缺口平移制作高比活性探針；DNA序列分析；填補(bǔ)3′末端Klenow片段具有完整DNA聚合酶I的5

3

聚合、35

外切活性。常用于cDNA第二鏈合成，雙鏈DNA3末端標(biāo)記等多核苷酸激酶催化多聚核苷酸5′羥基末端磷酸化，或標(biāo)記探針2001X-146．重組DNA技術(shù)中常用到的酶是

A．限制性核酸內(nèi)切酶B．DNA連接酶C．DNA解鏈酶D．反轉(zhuǎn)錄酶答案：ABD

重組DNA技術(shù)操作的主要步驟載體質(zhì)粒噬菌體病毒目的基因（外源基因）基因組DNA

cDNA人工合成PCR產(chǎn)物限制酶消化開(kāi)環(huán)載體DNA目的基因連接酶重組體轉(zhuǎn)化體外包裝，轉(zhuǎn)染帶重組體的宿主篩選表型篩選酶切電泳鑒定菌落原位雜交2005X-136.在分子克隆中目的DNA可來(lái)自:A.原核細(xì)胞基因組DNAB．真核細(xì)胞基因組DNAC．PCB合成的DNAD．真核細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA答案：ABCD2009X-161、重組DNA技術(shù)中，可用于獲取目的基因的方法有：ABA、化學(xué)合成法B、PCRC、WesternblottingD、基因敲除答案：AB1.化學(xué)合成法已知氨基酸序列推測(cè)DNA序列2.基因組DNA文庫(kù)限制性核酸內(nèi)切酶：是識(shí)別DNA的特異序列,并在識(shí)別位點(diǎn)或其周?chē)懈铍p鏈DNA的一類內(nèi)切酶。常見(jiàn)的是II型。Ⅱ類酶識(shí)別序列特點(diǎn)—回文結(jié)構(gòu)GGATCCCCTAGG2004A-31.能識(shí)別DNA特異序列并在識(shí)別位點(diǎn)或其周?chē)懈铍p鏈DNA的一類酶是A.核酸外切酶B.核酸內(nèi)切酶C.限制性核酸外切酶D.限制性核酸內(nèi)切酶E.核酸末端轉(zhuǎn)移酶答案：D2011A-38．下列選項(xiàng)中符合Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶特點(diǎn)的是:AA．識(shí)別的序列是回文結(jié)構(gòu)

B．沒(méi)有特異酶解位點(diǎn)C.同時(shí)有連接酶活性D．可切割細(xì)菌體內(nèi)自身DNA答案：A限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列不相同，切割DNA后產(chǎn)生相同粘性末端稱為配伍未端。3.

cDNA文庫(kù)4.聚合酶鏈反應(yīng)PCR2012A-38.可以利用逆轉(zhuǎn)錄酶作為工具酶的作用是DA.質(zhì)粒的構(gòu)建B.細(xì)胞的轉(zhuǎn)染C.重組體的篩選D.目的基因的合成重組DNA技術(shù)主要步驟載體質(zhì)粒噬菌體病毒目的基因（外源基因）基因組DNA

cDNA人工合成PCR產(chǎn)物限制酶消化開(kāi)環(huán)載體DNA目的基因連接酶重組體轉(zhuǎn)化體外包裝，轉(zhuǎn)染帶重組體的宿主篩選表型篩選酶切電泳鑒定菌落原位雜交載體：供插入目的基因并導(dǎo)入宿主細(xì)胞表達(dá)或復(fù)制的工具克隆載體：插入外源DNA序列被擴(kuò)增特意設(shè)計(jì)的載體，包括質(zhì)粒、噬菌體、病毒DNA、酵母人工染色體質(zhì)粒-小型環(huán)狀雙鏈DNA分子克隆載體具備條件：1.自主穩(wěn)定復(fù)制2.多克隆位點(diǎn)：識(shí)別3.遺傳標(biāo)記便于篩選-抗生素4.分子量小，拷貝多2003X-136、下列關(guān)于質(zhì)粒載體的敘述，正確的是ABCDA、具有自我復(fù)制能力B、有些質(zhì)粒常攜帶抗藥性基因C、為小分子環(huán)狀DNAD、含有克隆位點(diǎn)答案：ABCD2011A-39作為克隆載體的最基本條件是A、DNA分子量較小B、環(huán)狀雙鏈DNA分子C、有自我復(fù)制功能D、有一定遺傳標(biāo)志答案：C2006A-33．下列DNA中一般不用作克隆載體的是BA．質(zhì)粒DNAB．大腸桿菌DNAC.病毒DNAD．噬菌體DNAE．酵母人工染色體答案：B2002A-30．在基因工程中將目的基因與載體DNA拼接的酶是

A．DNA聚合酶I

B．DNA聚合酶III

C．限制性內(nèi)切核酸酶

D．DNA連接酶E.反轉(zhuǎn)錄酶

答案：D重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法：轉(zhuǎn)化：質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌物理生化不分家轉(zhuǎn)導(dǎo)：噬菌體導(dǎo)入細(xì)胞半導(dǎo)體轉(zhuǎn)染：重組DNA導(dǎo)入真核細(xì)胞病毒（DNA）感染將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法有：BCDA、接合B、轉(zhuǎn)化C、轉(zhuǎn)導(dǎo)D、轉(zhuǎn)染答案：BCD1995X140．從帶有遺傳信息的mRNA構(gòu)建成DNA重組體，要利用ABCDA．質(zhì)粒B．限制性核酸內(nèi)切酶C．DNA連接酶D．反轉(zhuǎn)錄酶答案：ABCD解析：重組過(guò)程為mRNA在反轉(zhuǎn)錄酶作用下合成與mRNA互補(bǔ)的cDNA(目的DNA)；組裝到質(zhì)粒中去；借限制性核酸內(nèi)切酶將質(zhì)粒切開(kāi)，利用DNA連接酶將質(zhì)粒DNA與DNA連接起來(lái)。重組體篩選：1.直接選擇法(1)抗藥性標(biāo)記選擇(2)標(biāo)志補(bǔ)救：α互補(bǔ)篩選(3)分子雜交法：原位雜交、Southern印跡2.免疫學(xué)方法如免疫化學(xué)方法及酶免檢測(cè)分析等2010X-160．DNA重組技術(shù)中，用來(lái)篩選重組體的方法有A．標(biāo)志補(bǔ)救B．分子雜交C．特異性抗體與產(chǎn)物結(jié)合

D．紫外分光光度計(jì)分析答案：ABC基因診斷與基因治療GeneticDiagnosisandGeneTherapy基因治療：將某種遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到患者細(xì)胞內(nèi)使其發(fā)揮作用，以達(dá)到治療疾病目的的方法?；痉椒ǎ海?011、2013年已考）1、基因矯正2、基因置換3、基因增補(bǔ)（主要）4、