關于藥物質量研究的一些問題

藥物質量標準一般包括哪三個方面的內容？藥物質量標準一般包括包括性狀、鑒別、檢查和含量含量測定等幾個方面。藥品質量標準是藥品的純度、成分含量、組分、生物有效性、療效、毒副作用、熱原度、無菌度、物理化學性質以及雜質的綜合表現(xiàn)。對于仿制藥的質量研究，其核心是什么研究？具體包括哪些方面？對于仿制藥研究核心是對中試三批樣品和對比制劑進行各個項目的研究，一般包括以下項目的檢測：(1)形狀和外觀；(2)鑒別：包括理化鑒別和色譜鑒別項目；(3)檢查：包括一般檢查項、微生物限度檢測、片劑的溶出度、有關物質、含量測定等。對于起始原料的質量研究，我們應收集哪些資料？如何制定起始原料的質量標準？對于起始原料的質量研究，我們需要收集提供來源廠家的企業(yè)營業(yè)執(zhí)照、組織機構代碼、生產許可、廠家COA、供應商企業(yè)標準，內控標準，自檢COA，合同，發(fā)票這等資料。起始物料質量標準中一般包括外觀、鑒別、水分、有關物質（對映異構體）、純度（含量）這些檢測項。關于純度（含量），可以使用HPLC或者GC控制純度的就用純度檢測，檢測項目寫成純度；不能使用HPLC或者GC控制質量就用滴定法、原子吸收等方法，檢測項目寫成含量；一般用面積歸一化法測試純度，如果工藝有較高要求，可以考慮用外標法制定含量測定項。對于限度的制定，以工藝的要求為主。對于有關物質，起始物料里面的雜質可能會在后續(xù)的反應中生成API的雜質，所以要在起始物料中進行控制，可根據(jù)工藝要求制定限度。如果在起始物料中有手性控制，可用HPLC、GC手性方法。關于水分，若對合成工藝有影響，則需制定這個檢測項。其他某些會影響到工藝反應或者對后續(xù)反應有影響的物料，可根據(jù)工藝實際的要求增定相關檢測項目。一般常選用哪些樣品來進行有關物質分析方法的開發(fā)？判斷該方法可行最重要的判斷標準是什么？關于有關物質的分析檢測，要先分析可能的雜質，比如說合成過程中的中間體、起始原料、副產物等，降解產物等；利用可獲得的雜質先初步建立方法，一般大于0.1%的雜質要定性，經(jīng)分析可能產生遺傳毒性雜質的要嚴加控制。判斷該方法是否可行需要對該方法進行驗證，確保該方法在樣品分析的一定范圍內準確、重現(xiàn)、可靠、耐用性。其次是對方法進行確認，即是對該方法在使用環(huán)境中適用性評估，包括人員、儀器、樣品和試劑。可用一個確定的方法老挑戰(zhàn)現(xiàn)實的分析環(huán)境，一般可對專屬性、準確度、精密度、LOQ、LOD項目進行確認。最后對該方法進行方法轉移。最終即可確定該方法的可行性。為了確保一個有關物質分析方法能順利通過正式驗證，在建立好的有關物質分析方法通常應滿足什么條件？為了確保有關物質分析方法能順利通過正式驗證，建立好的有關物質分析方法常應滿足一下幾個條件：理論塔板數(shù)：大于3000或4000；分離度：一般要求大于1.8;拖尾因子：0.8-1.2之間；待測五保留時間：最好調至20min左右。一般常選用哪些樣品來進行溶劑殘留分析方法的開發(fā)？為了確保一個溶劑殘留分析方法能順利通過驗證，建立的分析方法通常應該滿足什么指標？溶劑殘留分析方法的開發(fā)需要對反應溶劑，合成原料來源的有機溶劑和反應副產物有機溶劑種類進行研究。查閱文獻，根據(jù)合成路線，逐步確定需檢測的種類；若原料藥為購買產品，可咨詢廠家合成過程中使用的相關溶劑，然后確定。有關物質分析方法驗證項目包括哪些？具體應如何驗證？接收標準是什么？方法驗證內容包括方法的專屬性、線性、范圍、準確度、精密度、檢出限、定量限、耐用性和系統(tǒng)適用性等。專屬性是指分析方法能夠將產品和雜質分開的特性，也稱為選擇性。對于純度檢測，可在標準品中加入產品中的已知雜質，或者直接用粗品，考察產品峰是否受到雜質的干擾。一般要求產品和雜質之間的分離度大于2.0。線性是在設定的范圍內，檢測結果與樣品中原料或產品的濃度呈線性關系的程度。一般用貯備液經(jīng)過精密稀釋，制備得到一系列被測物質的濃度(5個以上)，按濃度從小到大運行序列，以峰面積和濃度的函數(shù)作圖，再進行線性回歸計算，線性相關系數(shù)R應大于0.998。范圍指在能夠達到一定的準確度、精密度和線性時，樣品中被分析物的濃度區(qū)間。需要定量檢測的分析方法都需要對范圍進行驗證，純度檢測時，范圍應為測試濃度的80%～120%。精密度是指在規(guī)定條件下，同一均勻樣品經(jīng)多次取樣進行一系列檢測所得結果之間的接近程度。精密度一般用相對標準偏差表示，取樣檢測次數(shù)應至少6次。精密度可以從三個層次考察：重復性、中間精密度、進樣精密度。a、重復性是在相同的操作條件下、較短時間間隔內，由同一分析人員測定所得結果的精密度。一般是用100%濃度水平的樣品測定6次的結果進行評價。b、中間精密度：同一實驗室，在日期、分析人員、儀器等內部條件改變時，測定結果的精密度。c、進樣精密度：指同一樣品連續(xù)進樣至少6次測的結果的精密度。檢出限是指樣品中的被分析物能夠被檢測到的最低量，不需要準確定量。可把已知濃度樣品的信號與噪聲信號進行比較，S/N在3-5范圍內為檢出限，一般要求能夠達到進樣濃度的0.05%。S/N在10-15范圍內為定量限。耐用性是指測定條件發(fā)生小的變動時，測定結果不受影響的承受程度，耐用性主要表明方法的抗干擾能力，主要的變動因素包括：流速、色譜柱、柱溫等。經(jīng)試驗，應說明小的變動能否符合系統(tǒng)適用性試驗要求，以確保方法有效。系統(tǒng)適用性便是對整個系統(tǒng)進行評估的指標。一般系統(tǒng)適應性的要求為：分析方法能夠達到0.05%的檢出限，主峰的拖尾因子0.8-<2-0，主峰與雜質的分離度大于1.5，空白無干擾，主峰處無系統(tǒng)峰干擾。當原料藥合成工藝發(fā)生改變時，可能引入新的雜質，就需要對雜質檢查方法和含量測定方法的專屬性再進行驗證，以證明有關物質檢查方法能夠檢測新引入的雜質，且新引入的雜質對主成份的含量測定應無干擾。當分析方法發(fā)生部分改變時，如檢測波長發(fā)生改變，則需要重新進行檢測限、專屬性、準確度、精密度、線性等內容的驗證，以證明改變后的分析方法的合理性、可行性。溶劑殘留分析方法驗證項目包括哪些？具體應如何驗證？接收標準是什么？溶劑殘留分析方法驗證項目包括8大項目：專屬性、精密度、檢測限、定量限、線性、線性范圍、回收率、耐用性。專屬性，應該是各種測定的成分之間分離度達到1.5以上，并且溶劑系統(tǒng)、內標物質之間應該沒有相互干擾的現(xiàn)象。線性，研究范圍為LOQ，10%，20%，40%，60%，80%，120%殘留溶劑限度水平進行線性研究。需要列出列出以下內容：(1)殘留溶劑濃度與峰面積的線性回歸方程，要求相關系數(shù)不小于0.99；(2)

Y軸截距絕對值與100%線性濃度水平響應值比值應小于5%。(3)

計算殘差平方和；

(4)

報告Y軸截距95%置信區(qū)間；(5)

每個濃度水平三次重復進樣峰面積RSD不大于10%。準確度，取100%樣品進行6次平行進樣或選取80%、100%、120%

三種濃度，每一濃度配制3份，用9次測定結果評價方法的回收率。殘留溶劑的回收率需在80%-120%內。精密度，(a)重復性，在限度值的50～150％范圍內，測定成分的回收率的相對標準差為“15％以下”就可以了。(b)中間精密度，多個試驗者、多根試驗用色譜柱、改變試驗日期等各種因素進行6次以上的試驗，從不同試驗日的方差分析結果來評價中間精密度。一般采用判定標準為“各測定值平均值的偏差（％）在±15%以內”。檢測限，信噪比3：1的濃度作為檢測限。定量限，采用回收率達到90～110％的最小進樣量進行確定即可。范圍，選用限度值的1~150％即可。耐用性，將試驗條件中各參數(shù)進行變化，就可以得到耐用性評價的結果了。改變檢測器溫度、分流比、柱溫，如果此時各測定組分之間的分離狀態(tài)良好，各溶劑的定量值與在標準中設定的條件下得到的數(shù)值沒有統(tǒng)計學差異，就說明該試驗方法耐用性良好。重量含量分析方法驗證項目包括哪些？具體應如何驗證？接收標準是什么？(1)準確度，該指標主要是通過回收率來反映。驗證時一般要求分別配制濃度為80％、100％和120％的供試品溶液各三份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率。可接受的標準為：各濃度下的平均回收率均應在98.0%-102.0%之間，9個回收率數(shù)據(jù)的相對標準差（RSD）應不大于2.0%。(2)線性，線性一般通過線性回歸方程的形式來表示。具體的驗證方法為：在80％至120％的濃度范圍內配制6份濃度不同的供試液，分別測定其主峰的面積，計算相應的含量。以含量為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y），進行線性回歸分析。可接受的標準為：回歸線的相關系數(shù)（R）不得小于0.998，Y軸截距應在100％響應值的2％以內，響應因子的相對標準差應不大于2.0%。(3)精密度1）重復性：配制6份相同濃度的供試品溶液，由一個分析人員在盡可能相同的條件下進行測試，所得6份供試液含量的相對標準差應不大于2.0%。2）中間精密度：配制6份相同濃度的供試品溶液，分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試，所得12個含量數(shù)據(jù)的相對標準差應不大于2.0%。(4)專屬性，可接受的標準為：空白對照應無干擾，主成分與各有關物質應能完全分離，分離度不得小于2.0。以二極管陣列檢測器進行純度分析時，主峰的純度因子應大于980。(5)檢測限，主峰與噪音峰信號的強度比應在3-5之間。(6)定量限，主峰與噪音峰信號的強度比應應在10-15。另外，配制6份定量限濃度的溶液，所測6份溶液主峰的保留時間的相對標準差應不大于2.0%。(7)耐用性，柱溫變化±5℃、流速相對值變化±20％時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測試兩次?？山邮艿臉藴蕿椋褐鞣宓耐衔惨蜃硬坏么笥?.0，主峰與雜質峰必須達到基線分離；各條件下的含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對標準差應不大于2.0%。(8)系統(tǒng)適應性，配制6份相同濃度的供試品溶液進行分析，主峰峰面積的相對標準差應不大于2.0%，主峰保留時間的相對標準差應不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質峰必須達到基線分離，主峰的理論塔板數(shù)應符合質量標準的規(guī)定。自制標準品的標化通常包括哪些檢項？是否有標準？含量的計算公式是什么？自制標準品的標化通常包括有關物質，殘留溶劑的種類和含量，結構確證（包括對骨架結構、構型、結晶水或結晶溶劑、晶型的確證），熾灼殘渣及重金屬，無機鹽。無論創(chuàng)新藥還是已有國家標準藥品，研發(fā)的根本原則都應圍繞安全、有效和質量可控進行充分的研究。如果研制的已有國家標準藥品與已上市產品的藥學基礎相同，即原料藥的合成路線、工藝條件以及所用原材料、試劑和溶劑的來源、規(guī)格等均一致，并經(jīng)驗證研制產品與已上市產品質量一致、生物等效，則研制產品可以橋接已上市產品的安全性、有效性以及質量控制信息。含量=API的質量標準中的限度應如何制定？API質量標準限度應能保證用此API的生產制劑產品能在整個效期內符合其質量標準。但是，如果之際中存在與API相同的降解雜質，需考慮為API制訂更為嚴格的內部質量標準。在PII階段的API最好能進行破壞性降解實驗，這些數(shù)據(jù)有助于將來進行穩(wěn)定性研究時穩(wěn)定性測試項目的選擇；在PIII階段的API要對于有可能支持為生物生長的無菌產品建立合適的微生物限度；適用于臨床使用的產品最大的允許雜志限度不得超過于非臨床毒理研究中產品的量；API中大于0.1%的雜質必須進行定性。12、中間體的質量標準如何制定？對于API來說，其強制降解實驗的意義何在？包括哪些內容？對于實驗結果的判斷，主要應關注哪些方面？強制降解試驗是指將原料藥或制劑置于比較劇烈的試驗條件下，考察其穩(wěn)定性的一系列試驗。強制降解試驗的目的主要就是為了驗證降解產物分析方法的專屬性。一般而言，該試驗的目的主要有以下兩方面。一是通過考察藥品在一系列劇烈條件下的穩(wěn)定性，了解該藥品內在的穩(wěn)定特性及其降解途徑與降解產物。例如，通過高溫降解試驗，可以了解所考察的藥品在高溫條件下是否穩(wěn)定，如果不穩(wěn)定，大致在何種條件下不穩(wěn)定，該藥品又是通過何種降解途徑得到何種降解產物。其二，這些試驗也能在一定程度上對有關物質分析方法用于檢查降解產物的專屬性進行驗證。根據(jù)強制降解試驗的目的，該項試驗一般應考察藥品在酸、堿、高溫、強光、氧化等因素影響下的穩(wěn)定性。對固體狀態(tài)的原料藥而言，一般還需分別考察該原料藥在固體和溶液狀態(tài)下的穩(wěn)定性。另外，為全面了解該藥品的穩(wěn)定特性及其降解途徑，還可根據(jù)情況進行以上因素綜合存在時的強制降解試驗，例如，可以考察樣品溶液分別在中性、酸性或堿性條件下對高溫或強光的穩(wěn)定性等。對于實驗結果的判斷要注意一下幾個方面：(1)對于采用HPLC法測定降解產物時，以主成分計算一般降解10％即可。并需要采用有效的方法對降解產物進行檢測，需要報告測定的回收量，通常應達到90％左右，以證明檢測方法的有效性。(2)對于破壞性試驗時降解量較大的降解產物，建議結合穩(wěn)定性研究中加速試驗和長期試驗的具體雜質數(shù)據(jù)，參考ICH對新原料藥中雜質的規(guī)定（每日服用最大劑量不超過2克時，鑒定閾值為0.10％；每日服用最大劑量超過2克時，鑒定閾值為0.05％），必要時進行定性分析，并作為已知雜質，根據(jù)安全性數(shù)據(jù)，采用已知雜質對照，確定合理的限度，訂入質量標準。不能采用已知雜質進行對照時，可通過測定降解產物、主成分在測定波長處的吸收系數(shù)，分析兩者的差異。若兩者吸收系數(shù)相差較大時，建議采用響應因子校正后進行有效控制；如果兩者吸收系數(shù)相差較小，建議采用自身對照法或峰面積歸一化法進行有效控制。(3)破壞性試驗產生的降解產物的個數(shù)比較多，采用HPLC法測定時，需考慮主成分與降解產物之間、降解產物相互之間的分離度，保證降解產物峰與主峰、降解產物峰之間有良好的分離度。另外，對于原料藥，分離度符合要求也應考慮到主藥與起始原料、各合成中間體是否有良好的分離度；對于制劑，應注意輔料、輔料降解產物的干擾。需要值得一提的是色譜條件的確定通常以最難分離的兩個降解產物或降解產物與主成分之間的分離度符合要求作為依據(jù)之一。(4)對于創(chuàng)新藥物的破壞性試驗來說，峰純度分析非常重要，一是可以了解降解產物的特性；二是可以有效地檢出和控制雜質。檢測峰純度通常采用二級管陣列檢測器或者液質連用技術分析測定各色譜峰的純度，說明在主峰中、各降解產物峰中有沒有包含其它峰。簡單地通過觀察峰形判斷峰的純度沒有說服力。14、原料藥穩(wěn)定性實驗通常包括哪些實驗？分別所用樣品批次？考察項目通常包括哪些？時間點如何設置？原料藥穩(wěn)