化妝品中丙烯酸乙酯等40種原料的檢驗方法

附件3化妝品中丙烯酸乙酯等40種原料的檢驗方法Determinationofethylacrylateandother39kindsofcomponentsincosmetics1范圍本方法規(guī)定了氣相色譜-質(zhì)譜方法測定化妝品中丙烯酸乙酯等40種香料組分的含量。本方法適用于液態(tài)水基類、膏霜乳液類、粉類、香水類、蠟基類化妝品中丙烯酸乙酯等40種香料組分含量的測定。本方法所指的丙烯酸乙酯等40種香料組分包括丙烯酸乙酯、反式-2-丁烯酸甲基酯、5-甲基-2,3-己二酮、苧烯、反式-2-庚烯醛、烯丙基芥子油、芳樟醇、2-辛炔酸甲酯、檸檬醛、二甲基檸康酸酯、馬來酸二乙酯、香茅醇、香葉醇、α-異甲基紫羅蘭酮、苯甲醇、芐基氰、羥基香茅醛、肉桂醛、丁苯基甲基丙醛、4-苯基丁-3-烯-2-酮、丁香酚、戊基肉桂醛、茴香醇、肉桂醇、4-叔丁基苯酚、金合歡醇、異丁香酚、己基肉桂醛、對羥基茴香醚、4-乙氧基苯酚、香豆素、新鈴蘭醛、戊基肉桂醇、葵子麝香、二苯胺、苯甲酸芐酯、水楊酸芐酯、7-甲氧基香豆素、肉桂酸芐酯、7-乙氧基-4-甲基香豆素。2方法提要樣品以乙酸乙酯為溶劑提取，采用氣相色譜-質(zhì)譜法測定，以選擇離子監(jiān)測模式進行測定，根據(jù)保留時間和特征離子的相對豐度比定性、定量離子峰面積定量，以內(nèi)標法計算含量。本方法對丙烯酸乙酯等40種香料組分的檢出限、定量下限及取樣量為0.5g時的檢出濃度及最低定量濃度見表1。表1各原料的檢出限、定量下限、檢出濃度和最低定量濃度編號原料名稱檢出限(ng)定量下限(ng)檢出濃度(μg/g)最低定量濃度(μg/g)1丙烯酸乙酯0.050.151.03.32反式-2-丁烯酸甲基酯0.150.453.01035-甲基-2,3-己二酮0.150.453.0104苧烯0.150.453.0105反式-2-庚烯醛0.150.453.0106烯丙基芥子油0.050.151.03.37芳樟醇0.150.453.01082-辛炔酸甲酯0.150.453.0109檸檬醛0.150.453.01010二甲基檸康酸酯0.150.453.01011馬來酸二乙酯0.050.151.03.312香茅醇0.150.453.01013香葉醇0.150.453.01014α-異甲基紫羅蘭酮0.150.453.01015苯甲醇0.150.453.01016芐基氰0.150.453.01017羥基香茅醛0.150.453.01018肉桂醛0.150.453.01019丁苯基甲基丙醛0.150.453.010204-苯基丁-3-烯-2-酮0.050.151.03.321丁香酚0.150.453.01022戊基肉桂醛0.150.453.01023茴香醇0.150.453.01024肉桂醇0.150.453.010254-叔丁基苯酚0.150.453.01026金合歡醇0.150.453.01027異丁香酚0.150.453.01028己基肉桂醛0.150.453.01029對羥基茴香醚0.150.453.010304-乙氧基苯酚0.150.453.01031香豆素0.150.453.01032新鈴蘭醛0.150.453.01033戊基肉桂醇0.150.453.01034葵子麝香0.150.453.01035二苯胺0.150.453.01036苯甲酸芐酯0.050.151.03.337水楊酸芐酯0.150.453.010387-甲氧基香豆素0.150.453.01039肉桂酸芐酯0.150.453.010407-乙氧基-4-甲基香豆素0.150.453.0103試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格。3.1乙酸乙酯，色譜純。3.2無水硫酸鈉，優(yōu)級純。3.3對照品儲備溶液分別稱取丙烯酸乙酯等40種香料組分對照品100mg（精確到0.0001g）于100mL容量瓶中，以乙酸乙酯（3.1）溶解并定容至刻度，配成約1000μg/mL的對照品儲備溶液。3.4內(nèi)標溶液分別稱取1,4-二溴苯和4,4-二溴聯(lián)苯100mg（精確到0.0001g）于100mL容量瓶中，以乙酸乙酯（3.1）溶解并定容至刻度，配成約1000μg/mL的內(nèi)標溶液。4儀器和設(shè)備4.1氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，配EI源。4.2分析天平。4.3超聲波清洗器。4.4離心機。4.5渦旋混合儀。5分析步驟5.1混合標準系列溶液的制備分別移取適量的對照品儲備溶液（3.3）于10mL容量瓶，用乙酸乙酯（3.1）稀釋至刻度，得到100μg/mL混合標準溶液。分別準確移取適量混合標準溶液，同時準確移取0.1mL濃度為1000μg/mL的內(nèi)標溶液（3.4）至同一容量瓶，用乙酸乙酯（3.1）稀釋，配制成濃度為0.50μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL和10μg/mL的混合標準系列溶液。5.2樣品處理稱取0.5g試樣（蠟基類可減至0.25g），精確至0.001g，于10mL具塞比色管中，準確移取0.1mL濃度為1000μg/mL的內(nèi)標溶液（3.4），加入乙酸乙酯（3.1）8mL，渦旋振蕩2min，使試樣與提取溶劑充分混勻，冰浴超聲提取15min（工作頻率20～43KHz，200W），用乙酸乙酯（3.1）稀釋至刻度，搖勻，必要時以10000r/min離心15min。上清溶液加入2g無水硫酸鈉（3.2）脫水，經(jīng)0.45μm濾膜過濾，濾液作為待測溶液備用（供試品溶液可根據(jù)實際濃度進行適當再稀釋）。5.3參考色譜條件5.3.1參考色譜條件色譜柱：聚乙二醇20000（PEG-20M）毛細管柱（30m×0.32mm，0.50μm），或等效色譜柱；程序升溫：初始溫度40℃，保持2min，以每分鐘5℃升至240℃，保持18min；載氣：氦氣，純度≥99.999%；流速：2.0mL/min；進樣口溫度：250℃；進樣方式：不分流進樣；進樣量：1μL；5.3.2參考質(zhì)譜條件電離方式：電子轟擊電離源（EI）；電離能量：70eV；傳輸線溫度：250℃；離子源溫度：230℃；監(jiān)測方式：選擇離子監(jiān)測（SIM）。丙烯酸乙酯等40種香料組分的監(jiān)測離子及相關(guān)參數(shù)設(shè)定見表2，可根據(jù)儀器實際情況選擇監(jiān)測離子。表2各原料的監(jiān)測離子及相關(guān)參數(shù)設(shè)定表編號原料名稱保留時間（min）特征離子（m/z）推薦使用內(nèi)標1丙烯酸乙酯4.61655997312反式-2-丁烯酸甲基酯7.2616985100135-甲基-2,3-己二酮8.44657438514苧烯9.5549312113615反式-2-庚烯醛13.12055837016烯丙基芥子油14.273997210017芳樟醇18.9557193121182-辛炔酸甲酯21.5009512311119a*檸檬醛22.2226994109110二甲基檸康酸酯22.643127995919b檸檬醛23.3946984137111馬來酸二乙酯24.09399127100112香茅醇24.1026995123113香葉醇25.896699381114α-異甲基紫羅蘭酮25.935135107150115苯甲醇26.67979108107116芐基氰27.80411790116117羥基香茅醛27.943597196118肉桂醛30.014131132103119丁苯基甲基丙醛30.0231891472041204-苯基丁-3-烯-2-酮31.502131145146121丁香酚32.457164131103122戊基肉桂醛34.026129117145123茴香醇34.513138109121124肉桂醇34.599921341151254-叔丁基苯酚34.697135107150126a*金合歡醇35.184698141127異丁香酚35.730164131137126b金合歡醇35.665136161179128己基肉桂醛35.812129117216129對羥基茴香醚36.673109124811304-乙氧基苯酚37.148110138109231香豆素37.56714611890232新鈴蘭醛37.858136107192233戊基肉桂醇38.815133115148234葵子麝香39.499253268223235二苯胺40.083169167141236苯甲酸芐酯40.419105194212237水楊酸芐酯42.92691228922387-甲氧基香豆素46.017176133148239肉桂酸芐酯51.9451921932382407-乙氧基-4-甲基香豆素52.2811482041762內(nèi)標11,4-二溴苯（內(nèi)標）23.318236234155/內(nèi)標24,4-二溴聯(lián)苯（內(nèi)標）46.736312152310/注：帶“*”的為同分異構(gòu)體，之和即為其含量。5.4定性在“5.3”分析條件下，取待測溶液（5.2）與標準溶液（5.1）在相同分析條件下測定，樣品中如呈現(xiàn)特征離子的色譜峰，被測成分的特征離子峰保留時間與標準溶液對應(yīng)的保留時間一致，且選擇的特征離子的相對豐度比與相當濃度標準品溶液的特征離子的相對豐度比的最大偏差不超過表3的規(guī)定，則可以判定樣品中存在對應(yīng)的香料成分。表3定性測定時離子相對豐度的最大允許偏差相對離子豐度(k)k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%5.5定量在“5.3”分析條件下，取混合標準系列溶液（5.1）依次測定，以待測原料的系列濃度與內(nèi)標的濃度比為橫坐標，待測原料與內(nèi)標的峰面積比為縱坐標，進行線性回歸，建立標準曲線，其線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)不小于0.99。取“5.2”項下的待測溶液進樣，測得定量離子色譜峰面積，根據(jù)標準曲線得到待測溶液中各成分的濃度，按“6”計算樣品中各原料的含量。6分析結(jié)果的表述6.1計算按下式（1）建立標準曲線，根據(jù)標準曲線得到待測溶液中各原料的濃度，按式（2）計算樣品中各原料的含量：樣品結(jié)果計算：（1）（2）式中：AR——待測原料的峰面積；AS——內(nèi)標的峰面積；CR——待測原料的系列濃度，μg/mL；CS——內(nèi)標的濃度，μg/mL；f——內(nèi)標校正的標準曲線；ω——樣品中原料的質(zhì)量分數(shù)，μg/g；ρ——從內(nèi)標校正的標準曲線得到待測組分的質(zhì)量濃度，μg/mL；V——樣品稀釋體積，本方法為10mL；m——樣品取樣量，g；D——再稀釋倍數(shù)（如未再稀釋則為1）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測試結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。6.2回收率和精密度40種原料的回收率在80.5%-119.5%之間，相對標準偏差小于10%（n=6）。標準溶液色譜圖丙烯酸乙酯，2.反式-2-丁烯酸甲基酯，3.5-甲基-2,3-己二酮，4.苧烯，5.反式-2-庚烯醛，6.烯丙基芥子油，7.芳樟醇，8.2-辛炔酸甲酯，9a.檸檬醛峰1，10.二甲基檸康酸酯，9b.檸檬醛峰2，11.馬來酸二乙酯，12.香茅醇，13.香葉醇，14.α-異甲基紫羅蘭酮，15.苯甲醇，16.芐基氰，17.羥基香茅醛，18.肉桂醛，19.丁苯基甲基丙醛，20.4-苯基丁-3-烯-2-酮，21.丁香酚，22.戊基肉桂醛，23.茴香醇，24.肉桂醇，25.4-叔丁基苯酚，26a.金合歡醇峰1，27.異丁香酚，26b.金合歡醇峰2，28.己基肉桂醛，29.對羥基茴香醚，30.4-乙氧基苯酚，31.香豆素，32.新鈴蘭醛，33.戊基肉桂醇，34.葵子麝香，35.二苯胺，36.苯甲酸芐酯，37.水楊酸芐酯，38.7-甲氧基香豆素，39.肉桂酸芐酯，40.7-乙氧基-4-甲基香豆素，ISTD1.1,4-二溴苯，ISTD2.4,4-二溴聯(lián)苯附錄A（規(guī)范性附錄）表1丙烯酸乙酯等40種原料信息編號原料名稱純度要求化學(xué)式CAS號相對分子量1丙烯酸乙酯≥98%C5H8O2140-88-5100.122反式-2-丁烯酸甲基酯≥98%C5H8O2623-43-8100.1235-甲基-2,3－己烷二酮≥98%C7H12O213706-86-0128.174苧烯≥95%C10H165989-27-5136.245反式-2-庚烯醛≥95%C7H12O18829-55-5112.176烯丙基芥子油≥98%C4H5NS57-06-799.157芳樟醇≥98%C10H18O78-70-6154.2582-辛炔酸甲酯≥98%C9H14O2111-12-6154.219檸檬醛≥98%C10H16O5392-40-5152.2410二甲基檸康酸酯≥98%C7H10O4617-54-9158.1511馬來酸二乙酯≥95%C8H12O4141-05-9172.1812香茅醇≥95%C10H20O106-22-9156.2713香葉醇≥98%C10H18O106-24-1154.2514α-異甲基紫羅蘭酮≥70%C14H22O127-51-5206.3215苯甲醇≥98%C7H8O100-51-6108.1416芐基氰≥98%C8H7N140-29-4117.1517羥基香茅醛≥98%C10H20O2107-75-5172.2618肉桂醛≥98%C9H8O104-55-2132.1619丁苯基甲基丙醛≥98%C14H20O80-54-6204.31204-苯基丁-3-烯-2-酮≥98%C10H10O122-57-6146.1921丁香酚≥98%C10H12O297-53-0164.2022戊基肉桂醛≥95%C14H18O122-40-7202.2923茴香醇≥98%C8H10O2105-13-5138.1624肉桂醇≥98%C9H10O104-54-1134.18254-叔丁基苯酚≥98%C10H14O98-54-4150.2226金合歡醇≥95%C15H26O4602-84-0222.3727異丁香酚≥98%C10H12O297-54-1164.2028己基肉桂醛≥98%C15H20O101-86-0216.3229對羥基茴香醚≥98%C7H8O2150-76-5124.14304-乙氧基苯酚≥98%C8H10O2622-62-8138.1631香豆素≥98%C9H6O291-64-5146.1432新鈴蘭醛≥95%C13H22O231906-04-4210.3133戊基肉桂醇≥95%C14H20O101-85-9204.3134葵子麝香≥98%C12H16N2O583-66-9268.2735二苯胺≥98%C12H11N122-39-4169.2336苯甲酸芐酯≥98%C14H12O2120-51-4212.2437水楊酸芐酯≥98%C14H12O3118-58-1228.25387-甲氧基香豆素≥98%C10H8O3531-59-9176.1739肉桂酸芐酯≥98%C16H14O2103-41-3238.28407-乙氧基-4-甲基香豆素≥98%C12H12O387-05-8204.23內(nèi)標11,4-二溴苯≥98%C6H4Br2106-37-6235.91內(nèi)標24,4-二溴聯(lián)苯≥98%C12H8Br292-86-4312.00

附錄B（資料性附錄）丙烯酸乙酯等40種原料的結(jié)果確證如GC-MS方法中檢出結(jié)果存在不確定因素，實驗室可根據(jù)自身條件和需求采用GC-MS/MS方法進行確證。在相同的試驗條件下，如樣品中檢出的色譜峰的保留時間與標準溶液中對應(yīng)成分一致，所選擇的監(jiān)測離子對的相對豐度比與相當濃度標準溶液的離子對相對豐度比的偏差不超過表1規(guī)定范圍，則可判斷樣品中存在對應(yīng)的待測原料。表1結(jié)果確證時相對離子豐度比的最大允許偏差相對離子豐度(k)k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%參考色譜條件色譜柱：聚乙二醇20000（PEG-20M）毛細管柱（30m×0.32mm，0.50μm），或等效色譜柱；程序升溫：初始溫度40℃，保持2min，以每分鐘5℃升至240℃，保持18min；載氣：氦氣，純度≥99.999%；流速：2.0mL/min；進樣口溫度：250℃；進樣方式：不分流進樣；進樣量：1μL；參考質(zhì)譜條件電離方式：電子轟擊電離源（EI）；電離能量：70eV；傳輸線溫度：250℃；離子源溫度：230℃；監(jiān)測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；丙烯酸乙酯等40種香料組分的MRM參數(shù)對見表2，可根據(jù)儀器實際情況選擇監(jiān)測離子對。表2各原料的MRM參數(shù)編號原料名稱特征離子對碰撞能量/V特征離子對碰撞能量/V特征離子對碰撞能量/V1丙烯酸乙酯99.00>53.101999.00>71.101699.00>81.10162反式-2-丁烯酸甲基酯69.00>66.904085.00>53.001669.00>67.004035-甲基-2,3-己二酮85.00>57.101657.00>55.001685.00>55.00224苧烯93.00>77.101693.00>51.002593.00>91.10165反式-2-庚烯醛83.00>55.101670.00>55.001983.00>53.00166烯丙基芥子油99.00>71.001699.00>54.101999.00>67.10167芳樟醇93.00>77.101693.00>51.002593.00>91.101682-辛炔酸甲酯95.00>55.101695.00>67.1016123.00>55.10169'*檸檬醛94.00>79.101694.00>77.102294.00>51.102810二甲基檸康酸酯127.00>59.0016127.00>99.1016127.00>69.00169檸檬醛84.00>55.101669.00>53.101684.00>53.101911馬來酸二乙酯99.00>71.0016127.00>99.0016127.00>71.101612香茅醇95.00>55.101695.00>67.101695.00>53.101913香葉醇93.00>77.101693.00>51.002593.00>91.101614α-異甲基紫羅蘭酮135.00>91.1016135.00>79.1016150.00>91.101915苯甲醇108.00>79.101679.00>77.101679.00>51.101916芐基氰117.00>90.101690.00>63.0022117.00>64.102517羥基香茅醛71.00>53.101659.00>57.001971.00>55.002818肉桂醛131.00>77.0025131.00>103.1016132.00>103.101919丁苯基甲基丙醛189.00>131.1016189.00>91.1019147.00>117.1019204-苯基丁-3-烯-2-酮145.00>115.1022146.00>103.1019145.00>91.102521丁香酚164.00>103.1022164.00>77.1028164.00>149.101622戊基肉桂醛117.00>91.1019117.00>115.1016129.00>127.101923茴香醇109.00>77.0016138.00>109.1016109.00>94.101624肉桂醇13