江西省南昌市青山湖區(qū)第一中學2023-2024學年高二下學期4月期中生物試題

江西省南昌市青山湖區(qū)南昌市第一中學2023-2024學年高二下學期4月期中生物試題一、單選題1.我國古代最早釀造葡萄酒采用的是將葡萄破碎成漿的自然發(fā)酵釀酒法，后來出現(xiàn)了向葡萄汁中加入“曲蘗”的釀造方法。下列敘述正確的是（）A.用于自然發(fā)酵釀酒法的葡萄可先去皮，有利于破碎成漿B.葡萄汁中加入的“曲蘗”含有酵母菌，可加快酒精發(fā)酵C.釀造葡萄酒需使用密閉性較好的容器，定期打開蓋子放氣D.若發(fā)酵產(chǎn)物變酸，可能是容器密閉不嚴，酵母菌進行了有氧呼吸【答案】B【解析】【分析】果酒制作過程中的相關實驗操作：(1)材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進行沖洗，除去枝梗。(2)滅菌：①榨汁機要清洗干凈，并晾干。②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。(3)榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機榨取葡萄汁。(4)發(fā)酵：將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶，要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口。制葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在18℃~25℃，時間控制在10~12d左右，可通過出料口對發(fā)酵的情況進行及時的監(jiān)測?！驹斀狻緼、用于自然發(fā)酵釀酒法的葡萄不能去皮，因為皮上有野生型酵母菌，A錯誤；B、葡萄汁中加入“曲蘗”含有酵母菌，可加快酒精發(fā)酵，B正確；C、釀造葡萄酒需使用密閉性較好的容器，但不能打開蓋子放氣，防止雜菌污染，C錯誤；D、酒變酸，可能是容器密閉不嚴醋酸菌進行了有氧呼吸，D錯誤。故選B。2.微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。如圖為酵母菌的純培養(yǎng)的部分操作步驟，下列說法正確的是（）A.完成步驟④的過程中，接種環(huán)共灼燒處理了5次B.以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基中加入尿素和酚紅的目的是相同的C.該接種方法可用于獲得酵母菌的純培養(yǎng)物D接種后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將④倒置培養(yǎng)，皿蓋上標注菌種及接種日期等信息【答案】C【解析】【分析】由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③④是進行平板劃線?！驹斀狻緼、接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過灼燒來滅菌，所以完成步驟④中5次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次，防止造成污染，由此可見，完成步驟④共需灼燒接種環(huán)6次，A錯誤；B、以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基中加入尿素的目的是提供氮源，加入酚紅的目的是檢測尿素分解后形成的堿性環(huán)境，B錯誤；C、該接種方法為平板劃線法，可用于獲得酵母菌的單菌落，經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物，C正確；D、接種后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將④倒置培養(yǎng)（避免水分過快蒸發(fā)和冷凝水污染培養(yǎng)基），皿底上標注菌種及接種日期等信息，D錯誤。故選C。3.如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析錯誤的是（）A.某一稀釋度下至少涂3個平板，以減小實驗誤差B.3號試管中的樣品溶液稀釋倍數(shù)為104倍C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×107個D.該實驗需設置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，用以判斷選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用【答案】C【解析】【分析】稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外，也常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)為30-300的平板進行計數(shù)。樣品的稀釋度將直接影響平板上的菌落數(shù)目?！驹斀狻緼、在同一稀釋度下、應至少對3個平板進行重復計數(shù)，然后求出平均值，減少實驗誤差，A正確；B、據(jù)圖可知，將10g土樣加入到90mL無菌水中定容至100mL后，此時錐形瓶中的稀釋倍數(shù)為10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號試管中的樣品，故3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍，B正確；C、5號試管進行稀釋涂布平板法計數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109個，C錯誤；D、要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用，需設置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落種類數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落，說明選擇培養(yǎng)基有選擇作用，D正確。故選C。4.搖擺式間歇浸沒生物反應器通過擺動架的傾斜擺動，使培養(yǎng)液周期性間歇浸沒組培苗，實現(xiàn)組培苗的快速生長。相關敘述正確是（）A.獲得組織苗的培養(yǎng)基含有水、無機鹽、蔗糖、瓊脂和激素等多種營養(yǎng)物質(zhì)B.獲得組培苗的步驟：外植體→脫分化形成胚狀體→再分化形成試管苗C.間歇擺動提高培養(yǎng)液溶氧量，有利于組培苗進行有氧呼吸，提高生長速度D.經(jīng)過間歇浸沒培養(yǎng)獲得的植株需要消毒后煉苗再移栽到經(jīng)滅菌處理的土壤中【答案】C【解析】【分析】植物組織培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素使用比例對植物細胞發(fā)育的影響：生長素用量比細胞分裂素用量，比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值適中時，促進愈傷組織的形成?！驹斀狻緼、瓊脂是凝固劑，不提供營養(yǎng)，A錯誤；B、外植體脫分化可以形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，B錯誤；C、間歇擺動提高培養(yǎng)液溶氧量，有利于組培苗進行有氧呼吸，有氧呼吸能為組培苗的生長發(fā)育提供能量，因此可以提高生長速度，C正確；D、植物組織培養(yǎng)是在無菌條件下進行的，經(jīng)過間歇浸沒培養(yǎng)獲得的植株不需要消毒處理，D錯誤。故選C5.臨床上常對羊水中胎兒脫落的細胞進行染色體分析，得出染色體數(shù)量以及結(jié)構(gòu)變異的重要信息，輔助醫(yī)生產(chǎn)前診斷。具體操作步驟如下圖所示，下列選項中說法錯誤的是（）A.秋水仙素處理可抑制紡錘體的形成，便于進行染色體分析B.實驗中低滲處理的目的是使細胞吸水膨脹，使染色體分散便于觀察C.細胞培養(yǎng)過程中需適時更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累過多危害細胞生長D.利用該技術能夠檢測鐮狀細胞貧血、唐氏綜合征等染色體異常遺傳病【答案】D【解析】【分析】動物細胞培養(yǎng)時提供提供CO2氣體是為了維持培養(yǎng)液的pH；為了減少細胞代謝產(chǎn)物積累，補充細胞消耗的營養(yǎng)物質(zhì)要定期更換培養(yǎng)液。動物細胞培養(yǎng)過程中使用抗生素處理可以防止雜菌污染?！驹斀狻緼、秋水仙素可抑制分裂前期紡錘體的形成，使細胞不能分裂導致染色體數(shù)目加倍，此時細胞中染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰，有利于進行染色體分析，A正確；B、細胞在低滲溶液中會吸水，故實驗中低滲處理的目的是使細胞吸水膨脹，使染色體分散開，便于觀察，B正確；C、細胞培養(yǎng)過程中需適時更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累過多危害細胞生長，同時也能保證營養(yǎng)供應，C正確；D、利用該技術能夠檢測唐氏綜合征等染色體異常遺傳病，不能夠檢測鐮狀細胞貧血，因為鐮狀細胞貧血是基因突變導致的，D錯誤。故選D。6.雙特異性抗體是指同時具有兩種抗原結(jié)合位點的人造抗體，研究人員用新的技術構(gòu)建了一種雙特異性抗體，該抗體可同時特異性識別肝癌細胞上的GPC-3以及T淋巴細胞表面的特殊蛋白質(zhì)CD3。下圖表示該雙特異性抗體的制備過程，下列相關敘述錯誤的是（）A.圖1中過程②可使用滅活的病毒誘導細胞融合，此方法也可用于誘導植物體細胞融合B.HAT培養(yǎng)基會抑制單個的骨髓瘤細胞和骨髓瘤-骨髓瘤細胞的增殖，而B淋巴細胞分裂能力弱，只有雜交瘤細胞可以正常增殖C.由圖2可知，該雙特異性抗體可同時識別肝癌細胞膜上的GPC-3和T淋巴細胞膜上的CD3，從而將肝癌細胞和T淋巴細胞緊密接近（將T細胞定向帶到癌細胞所在的位置），有利于T淋巴細胞特異性地殺傷肝癌細胞，促使巨噬細胞吞噬肝癌細胞D.培養(yǎng)淋巴細胞時，除必須保證環(huán)境是無菌、無毒外，還必須定期更換培養(yǎng)液，提供的氣體環(huán)境應為95%的空氣和5%的CO2【答案】A【解析】【分析】1、單克隆抗體制備的細胞來源：（1）B淋巴細胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；（2）骨髓瘤細胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖。2、雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。3、兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。4、單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強、靈敏度高，與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導彈”，直接作用于癌細胞。5、生物導彈：單克隆抗體+放射性同位素、化學藥物或細胞毒素（借助單克隆抗體的定位導向作用將藥物定向帶到癌細胞，在原位殺死癌細胞。療效高，副作用小，位置準確）。【詳解】A、使用滅活的病毒誘導細胞融合是誘導動物細胞融合特有的方法，不可以用于誘導植物體細胞融合，A錯誤；B、HAT培養(yǎng)基會抑制單個的骨髓瘤細胞和骨髓瘤-骨髓瘤細胞的增殖，而B淋巴細胞分裂能力弱，只有雜交瘤細胞可以正常增殖，從而篩選出雜交瘤細胞，B正確；C、結(jié)合圖中信息可知，該雙特異性抗體可同時識別肝癌細胞膜上的GPC-3和T淋巴細胞膜上的CD3，從而將肝癌細胞和T淋巴細胞緊密接近，即將T細胞定向帶到癌細胞所在的位置，有利于T淋巴細胞特異性地殺傷肝癌細胞，促使巨噬細胞吞噬肝癌細胞，C正確；D、細胞培養(yǎng)時，除必須保證環(huán)境是無菌、無毒外，還必須定期更換培養(yǎng)液，提供的氣體環(huán)境應為95%的空氣和5%的CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，D正確。故選A。7.將取自一個胚胎的胚胎干細胞(ES)注射到發(fā)育中的另一個胚胎內(nèi)，可發(fā)育形成擁有不同基因型細胞的嵌合體。2023年，中國科學家培育出世界上首只高比例胚胎干細胞“嵌合食蟹猴”，其多種組織中含有供體干細胞來源的細胞。下列敘述錯誤的是（）A.胚胎干細胞存在于早期胚胎中，有形成個體的潛能B.供體ES在受體胚胎內(nèi)可分化出成體干細胞C.誘導多能干細胞可作為供體ES的“替代品”培育嵌合體D.受體胚胎接受移植的最佳時機是發(fā)育至原腸胚階段【答案】D【解析】【分析】1、胚胎干細胞（簡稱ES細胞）存在于早期胚胎中，具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能。2、當卵裂產(chǎn)生的子細胞逐漸形成致密的細胞團，形似桑葚時，這時的胚胎稱為桑葚胚。桑椹胚進一步發(fā)育，細胞開始出現(xiàn)分化。聚集在胚胎一端，個體較大的細胞，稱為內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織，而沿透明帶內(nèi)壁擴展和排列的、個體較小的細胞，稱為滋養(yǎng)層細胞，它們將來發(fā)有成胎膜和胎盤?！驹斀狻緼、胚胎干細胞存在于早期胚胎中，具有發(fā)育的全能性，有形成個體的潛能，A正確；B、胚胎干細胞(ES)存在于早期胚胎中，具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能，所以供體ES在受體胚胎內(nèi)可分化出成體干細胞，B正確；C、誘導多能干細胞類似胚胎干細胞，所以誘導多能干細胞可作為供體ES的“替代品”培育嵌合體，C正確；D、受體胚胎接受移植的最佳時機是發(fā)育至桑葚胚或囊胚階段，D錯誤。故選D。8.下列有關基因工程說法中，錯誤的是（）A.基因工程的出現(xiàn)使人類有可能按照自己的意愿定向地改造生物，培育出新品種B.質(zhì)粒常作為基因工程的載體，是存在于細菌和酵母菌等生物細胞中的一種細胞器C.細菌細胞內(nèi)的基因可在植物細胞內(nèi)表達是因為所有生物共用一套密碼子D.對于基因工程或分子生物學實驗室向外排放轉(zhuǎn)基因細菌等必須嚴加管制【答案】B【解析】【分析】基因工程的原理是基因重組，需要的工具有限制酶、DNA連接酶和運載體?！驹斀狻緼、基因工程可以定向改造生物的性狀，培育新品種，A正確；B、質(zhì)粒是存在于細菌和酵母菌等生物細胞中的一種環(huán)狀DNA分子，不是細胞器，B錯誤；C、所有生物共用一套密碼子是細菌細胞內(nèi)的基因可在植物細胞內(nèi)表達的原因，C正確；D、對于基因工程或分子生物學實驗室向外排放轉(zhuǎn)基因細菌等必須嚴加管制，避免污染環(huán)境，D正確。故選B。9.大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和陰離子去垢劑（SDS）處理后，擬核DNA就會纏繞在細胞壁碎片上，靜置一段時間，質(zhì)粒分布在上清液中。利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。下列關于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的分析錯誤的是（）A.DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNAB.DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可用二苯胺試劑在沸水加熱條件下鑒定DNAC.用限制酶I和Ⅱ處理提取的產(chǎn)物，電泳出現(xiàn)圖結(jié)果，說明未提取到質(zhì)粒D.用瓊脂糖凝膠電泳鑒定質(zhì)粒，被染色的質(zhì)粒還需要通過紫外燈照射才能看到結(jié)果【答案】C【解析】【分析】DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。DNA不容易酒精溶液，細胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進一步分離。【詳解】A、通過分析可知，DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNA，A正確；B、DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，這樣可以去除DNA中的某些雜質(zhì)，提取的DNA可用二苯胺試劑在沸水加熱條件下生成藍色，B正確；C、限制性酶Ⅰ和限制性酶Ⅱ處理提取的產(chǎn)物，只得到一條帶，說明提取物是環(huán)狀DNA，即提取物為質(zhì)粒，C錯誤；D、用瓊脂糖凝膠電泳鑒定質(zhì)粒，被染色的質(zhì)粒還需要通過紫外燈照射才能看到結(jié)果，D正確。故選C。【點睛】10.HIV感染是引起艾滋病的原因。利用進入抑制劑阻止HIV進入靶細胞是阻止HIV感染的重要途徑。研究者按照如圖所示的途徑構(gòu)建了一種可視化的、無感染性的進入抑制劑檢測模型。下列說法正確的是（）A.env蛋白是介導HIV侵染靶細胞的重要蛋白B.進入抑制劑通過破壞env蛋白結(jié)構(gòu)阻止HIV侵染C.通過測定融合細胞中env表達量判定進入抑制劑的效果D.進行上述系統(tǒng)操作的實驗員有感染HIV的風險【答案】A【解析】【分析】艾滋?。ˋIDS）是一種危害性極大的傳染病，由感染艾滋病病毒（HIV）引起，HIV是一種能攻擊人體免疫系統(tǒng)的病毒。它把人體免疫系統(tǒng)中最重要的輔助性T細胞作為主要攻擊目標，大量破壞該細胞，使人體喪失免疫功能?！驹斀狻緼、env蛋白是介導HIV侵染靶細胞的重要蛋白，通過觀察加入抑制劑后含有env基因的細胞與HIV靶細胞的融合情況，可以得出抑制劑的效果，A正確；B、進入抑制劑通過抑制HIV與靶細胞的識別和融合過程，阻止HIV侵染，B錯誤；C、進入抑制劑抑制的是兩個細胞的融合情況，不影響env基因表達，不能通過測定融合細胞中env表達量判定進入抑制劑的效果，C錯誤；D、進行上述系統(tǒng)操作并沒有接觸到完整的病毒，沒有感染HIV的風險，D錯誤。故選A。11.甲、乙、丙三名同學分別以酵母菌為材料進行PCR擴增，再取20ul擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳，結(jié)果如圖。下列敘述錯誤的是（）A.PCR反應需要脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶和解旋酶等B.PCR以DNA半保留復制為原理，子鏈的延伸方向為5’→3’C.甲同學擴增得到DNA分子的數(shù)量比乙同學多D.丙同學所用的引物可能與甲乙同學不一樣【答案】A【解析】【分析】PCR利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。DNA具有可解離的基團，在一定的pH下，這些基團可以帶上正電荷或負電荷。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動，這個過程就是電泳。PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關。【詳解】A、PCR擴增過程不需要解旋酶，是在高溫下解旋的，A錯誤；B、PCR過程中，在引物作用下，耐高溫的DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的，B正確；C、甲同學的電泳條帶比乙同學條帶寬，說明甲同學擴增的DNA產(chǎn)物多于乙同學，C正確；D、由圖可知，丙同學擴增出來的產(chǎn)物與甲乙同學產(chǎn)物不同，其DNA不同，其堿基序列可能不同，故丙同學所用的引物可能與甲乙同學的不一樣，D正確。故選A。12.下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。下列說法正確的是（）限制酶BamHIHindⅢEcoRISmaI識別序列及切割位點G↓GATC

CC

CTAG↑GA↓AGCT

TT

TCGA↑AG↓AATT

CC

TTAA↑GCCC↓GGGGGG↑CCCA.重組DNA技術所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶和運載體B.只有用同種限制酶切割DNA產(chǎn)生的黏性末端才能互補C.用圖中質(zhì)粒和外源基因DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，可使用SmaⅠ切割D.使用EcoRⅠ同時處理質(zhì)粒和外源DNA，可能會發(fā)生質(zhì)?；蛘吣康幕虻淖陨憝h(huán)化【答案】D【解析】【分析】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）主要是從原核生物中分離純化出來的；自然界中限制酶的天然作用是破環(huán)外來基因；限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端；限制酶本身的合成是受基因控制的，因為限制酶是蛋白質(zhì)，基因指導蛋白質(zhì)的合成。【詳解】A、重組DNA技術所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶，運載體不是酶，A錯誤；B、不同種限制酶切割DNA產(chǎn)生的黏性末端也可能互補，B錯誤；C、由于目的基因內(nèi)部含有SmaI的切割位點，故不能使用SmaI切割目的基因，C錯誤；D、使用EcoRI同時處理質(zhì)粒和外源DNA，可能會發(fā)生質(zhì)?；蛘吣康幕虻淖陨憝h(huán)化，故可用兩種限制酶切割質(zhì)粒和外源DNA，防止自身環(huán)化，D正確。故選D。二、多選題13.自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如圖。以下敘述正確的是（）A.步驟①土樣應取自當?shù)乇韺油寥溃徊襟E③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細胞計數(shù)板來計數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點是不添加氮源【答案】ACD【解析】【分析】微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斀狻緼、自生固氮菌是需氧型生物，步驟①土樣應取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；B、自生固氮菌是異養(yǎng)型生物，可用血細胞計數(shù)板或稀釋涂布平板法來計數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯誤；C、步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中，C正確；D、根據(jù)培養(yǎng)基中菌落的分布特點可知，步驟④為稀釋涂布平板法接種，所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點是不添加氮源，利用的是空氣中的氮氣，D正確。故選ACD。14.柑橘花葉病毒（CiMV）能引起柑橘果皮出現(xiàn)各種綠色花紋，使其商業(yè)價值下降。CiMV外殼蛋白中11-475殘基（485taa）的肽具有較強的免疫原性。為及早發(fā)現(xiàn)并消除受感染的樹木，研究人員利用動物細胞工程技術開發(fā)了一種針對CiMV的靈敏且快速的兔源性單克隆抗體（mAb）診斷試劑盒。下列說法正確的是（）A.制備mAb過程中，需用CiMV的485aa對實驗兔進行多次免疫處理B.可用PEG處理已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，促使二者融合C.經(jīng)選擇培養(yǎng)后的雜交瘤細胞在體外擴大培養(yǎng)可以獲得大量mAbD.該診斷試劑盒利用了mAb與CiMV的485aa特異性結(jié)合的原理【答案】ABD【解析】【分析】1、單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。2、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。②用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導彈”?！驹斀狻緼、制備mAb過程中，需用CiMV的485aa對實驗兔進行多次免疫處理，得到產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞，A正確；B、PEG促融法可以促使PEG處理已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，B正確；C、經(jīng)選擇培養(yǎng)后的雜交瘤細胞在體外擴大培養(yǎng)或注射到兔腹腔內(nèi)增殖均可以獲得大量mAb，C錯誤；D、該診斷試劑盒利用了mAb與CiMV的485aa特異性結(jié)合的原理，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點，D正確。故選ABD。15.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將抗蟲基因?qū)胗衩准毎@得抗蟲植株。下列說法正確的是A.若對已知序列的抗蟲基因進行大量擴增，應用PCR技術B.將重組的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒噴灑到玉米傷口上，可成功轉(zhuǎn)化C.利用害蟲接種實驗可從分子水平檢測目的基因是否進入了玉米細胞D.將抗蟲基因?qū)爰毎|(zhì)可避免通過花粉傳播進入其他植物【答案】AD【解析】【分析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是用這種方法獲得的）：①農(nóng)桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。

②轉(zhuǎn)化：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上進入農(nóng)桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達?！驹斀狻緼、PCR技術是體外復制特定目的基因片段的技術，若對已知序列的抗蟲基因進行大量擴增，應用PCR技術，A正確；

B、將重組的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌，再用農(nóng)桿菌去侵染玉米才可能成功轉(zhuǎn)化，B錯誤；

C、利用害蟲接種實驗可從個體水平檢測目的基因是否進入了玉米細胞，C錯誤；

D、將抗蟲基因?qū)爰毎|(zhì)可避免通過花粉傳播進入其他植物，導致基因污染，D正確。

故選AD?！军c睛】本題考查基因工程的相關知識，解題關鍵是識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項。16.科學家將鼠抗人大腸癌單克隆抗體基因（ND-1）與酵母胞嘧啶脫氨酶基因（CD）融合，在大腸桿菌中成功地表達了單鏈抗體與酶融合蛋白，這類蛋白的療法稱為由抗體介導的酶解前藥療法（ADEPT）。ND-1—CD融合基因的構(gòu)建方法如圖所示。下列有關敘述正確的是（）A.圖中兩條雜交鏈的獲得至少需要經(jīng)過2次擴增循環(huán)B.圖中雜交鏈延伸生成ND-1——CD融合基因的過程應不用加入引物C.獲得的融合基因在構(gòu)建好基因表達載體后可直接被正常狀態(tài)的大腸桿菌吸收D.該融合蛋白應是利用抗體部分特異性的識別人大腸癌細胞并將酶帶到靶部位【答案】ABD【解析】【分析】PCR技術：（1）定義：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；（2）原理：DNA復制；（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物；（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、能量；（5）過程：高溫變性，DNA雙鏈解旋；低溫復性，引物與互補鏈DNA結(jié)合；中溫延伸，在耐高溫的DNA聚合酶作用下合成子鏈。【詳解】A、經(jīng)過一次循環(huán)得到的雜交鏈，引物2端和引物3端都為相應鏈的5?'端，不可直接延伸子鏈，為了使雜交鏈順利延伸子鏈，至少需要經(jīng)過2次循環(huán)才能得到如圖所示的引物2端和引物3端都為相應鏈的3?'端雜交鏈，A正確；B、雜交鏈延伸生成ND-1——CD

融合基因的過程中，不需要加入引物，兩條母鏈的起始位置的堿基序列即為引物，可以作為子鏈合成的引物，為DNA聚合酶提供3'端，B正確；C、需要利用氯化鈣處理大腸桿菌獲得感受態(tài)細胞，獲得的融合基因在構(gòu)建好基因表達載體才能更好的被大腸桿菌吸收，C錯誤；D、抗體可以特異性識別抗原成分，故該融合蛋白應是利用抗體部分特異性的識別人大腸癌細胞并將酶帶到靶部位，D正確。故選ABD。三、非選擇題17.下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方，請根據(jù)表格和所學知識回答下列相關問題。成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4指示劑瓊脂含量（g）10．05．05．02．00．212．0將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL（1）若根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于_____________培養(yǎng)基。制備固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、_______________；培養(yǎng)基中蛋白胨的作用主要是為微生物生長提供_______________等營養(yǎng)物質(zhì)。（2）在微生物培養(yǎng)的過程中，為防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行_______________；操作者的雙手需要進行清洗和_______________。（3）圖中圖1和圖2是培養(yǎng)某細菌的結(jié)果圖，其對應的接種方法分別是：_______________和_______________，這兩種方法接種后培養(yǎng)基上都可以得到由單個細胞繁殖所形成的_______________。（4）以下過程中所利用的主要微生物的細胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌較相似的有。A.制作果酒 B.由果酒制作果醋C.制作泡菜 D.制作腐乳【答案】（1）①.鑒別②.倒平板③.氮源和維生素（2）①.滅菌②.消毒（3）①.稀釋涂布平板法②.平板劃線法③.菌落（4）BC【解析】【分析】1、選擇培養(yǎng)基是將允許特定種類的微生物生長、同時抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基；鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品，使培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化，從而區(qū)別不同類型的微生物的培養(yǎng)基。2、接種微生物常用的接種方法由平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種接種方法。后者可以用來計數(shù)。由于當兩個或多個細胞連在一起時，平板上顯示的只是一個菌落，故統(tǒng)計的菌落常常比活菌的實際數(shù)目少，在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，故可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物?！拘?詳解】分析表格可知，該培養(yǎng)基加入了指示劑，屬于鑒別培養(yǎng)基，制備固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板；培養(yǎng)基中蛋白胨可以為微生物的生長主要提供氮源和維生素等。【小問2詳解】在微生物培養(yǎng)的過程中，無菌技術是獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵，為防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行嚴格滅菌；同時，操作者的雙手需要進行清洗和消毒?！拘?詳解】圖1和圖2是培養(yǎng)大腸桿菌的結(jié)果圖，圖1所示接種方法為稀釋涂布平板法，圖2所示接種方法為平板劃線法，這兩種方法接種后培養(yǎng)基上都可以得到由單個細胞繁殖所形成的菌落，根據(jù)菌落的特點可對微生物的種類進行判斷?！拘?詳解】A、制作果酒所用的菌種是酵母菌，酵母菌是真核生物，與大腸桿菌在細胞結(jié)構(gòu)上有明顯的差異，A錯誤；B、由果酒制作果醋所用的菌種是醋酸菌，醋酸菌和大腸桿菌一樣屬于原核生物，細胞結(jié)構(gòu)中沒有真正的細胞核，與題意相符，B正確；C、制作泡菜所用的菌種為乳酸菌，乳酸菌與大腸桿菌都屬于原核生物，細胞結(jié)構(gòu)相似，與題意相符，C正確；D、制作腐乳所用的主要菌種為毛霉，毛霉屬于真核生物，與大腸桿菌在結(jié)構(gòu)上有明顯的不同，D錯誤。故選BC。18.HER2是一種定位于細胞膜上的表皮生長因子受體，HER2過度表達與惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展密切相關。為開發(fā)用于治療HER2過度表達的惡性腫瘤單克隆抗體偶聯(lián)藥物（抗HER2-ADC），科研人員開展了相關研究，實驗流程如圖1所示。回答下列問題：（1）在制備抗HER2-ADC的過程中，需要用____________對小鼠多次進行免疫，以期獲得相應的B淋巴細胞。過程②和③分別表示篩選出______________、_________________。（2）抗HER2-ADC作為靶向藥殺傷HER2過度表達的惡性腫瘤細胞的效果較為明顯，其原因是______________。（3）為研究抗HER2-ADC對HER2過度表達的胃癌細胞代謝的影響，科研人員選取人乳腺癌細胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突變小鼠）、多種化療藥物和試劑（磷酸緩沖液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠單抗、曲妥珠單抗——美坦新聯(lián)藥物、磷酸緩沖液等）進行了相關實驗。①將乳腺癌細胞BT-474移植到裸鼠體內(nèi)，待腫瘤體積達到200mm3時將裸鼠分為4組并分別給藥處理，空白對照組的給藥處理是注射_______________________，一段時間后檢測裸鼠體內(nèi)腫瘤的體積，結(jié)果如圖2所示。②實驗結(jié)果表明，抗HER2-ADC對BT-474細胞的凋亡具有促進作用，且效果較其他藥物更好。③后續(xù)可通過研究抗HER2-ADC____________________________等情況，為抗HER2-ADC進入臨床實驗奠定數(shù)據(jù)基礎?！敬鸢浮浚?）①.HER2②.雜交瘤細胞③.分泌抗HER2抗體的雜交瘤細胞（2）HER2過度表達的惡性腫瘤細胞表面的HER2多，與抗HER2-ADC結(jié)合的概率高（3）①.等劑量的磷酸緩沖液②.在動物體內(nèi)的代謝、對正常細胞的毒性【解析】【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！拘?詳解】特定抗原刺激后可獲得產(chǎn)生對應抗體的B淋巴細胞，結(jié)合題干，在制備抗HER2-ADC的過程中，需要用HER2對小鼠多次進行免疫，獲得分泌抗HER2抗體的B淋巴細胞；過程②為特定的選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細胞（該培養(yǎng)基上未融合細胞的和同種融合的細胞都死亡），過程③為抗體檢測，目的是篩選產(chǎn)生特定抗體（分泌抗HER2抗體）的雜交瘤細胞?！拘?詳解】正常細胞和HER2過度表達的惡性腫瘤細胞都能產(chǎn)生HER2，但是HER2過度表達的惡性腫瘤細胞表面的HER2多，與抗HER2-ADC結(jié)合的概率高，因而抗HER2-ADC可作為靶向藥殺傷HER2過度表達的惡性腫瘤細胞。【小問3詳解】①HER2-ADC、曲妥珠單抗、曲妥珠單抗—美坦新聯(lián)藥物都是治療癌細胞的藥物，根據(jù)實驗設計的對照原則與單一變量原則可知，空白對照組應注射等劑量的磷酸緩沖液。②根據(jù)實驗結(jié)果可知，抗HER2-ADC組裸鼠的腫瘤體積最小，且比初始腫瘤體積小，說明抗HER2-ADC對BT-474細胞的凋亡具有促進作用，且效果較其他藥物更好。③實驗僅研究了抗HER2-ADC對腫瘤細胞代謝的影響，后續(xù)可通過研究抗HER2-ADC在動物體內(nèi)的代謝、對正常細胞的毒性等情況，為抗HER2-ADC進入臨床實驗奠定數(shù)據(jù)基礎。19.線粒體中某基因突變可引發(fā)萊氏綜合征（LeighSyndrome）。醫(yī)學工作者用來自卵子捐獻者的健康線粒體取代了母親卵子中的缺陷線粒體，隨后用父親的精子使融合后的卵子受精，誕生出世界首位“三親嬰兒”。下圖為“三親嬰兒”技術路線示意圖，回答下列問題：（1）該技術涉及_______________等操作（至少答兩項）。（2）在促使捐獻者及母親超數(shù)排卵時，不宜長期過量使用性激素的原因是_____________。（3）圖示重組卵母細胞應培養(yǎng)至______（時期），才具備與精子受精的能力，人工授精前需對精子進行_____處理。（4）“三親嬰兒”技術被認為可能有助于治療某些不明原因的不孕不育癥，并提高體外受精的成功率。醫(yī)學工作者提出另一種“三親嬰兒”的技術路線：先___________________，然后將其細胞核轉(zhuǎn)移到另一個細胞核已提前被移除的受精卵中。這樣的受精卵也有三個遺傳學親本，并且不攜帶母親的致病線粒體DNA。【答案】（1）動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、胚胎移植、早期胚胎培養(yǎng)等（2）長期過量使用的性激素會通過負反饋調(diào)節(jié)，導致性腺萎縮（3）①.MII②.獲能（4）先讓父母雙方的生殖細胞完成受精過程，產(chǎn)生受精卵【解析】【分析】據(jù)圖分析：圖示表示三親嬰兒的培育過程，由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術、體外受精技術、早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術等。所得三親嬰兒細胞的細胞質(zhì)來自健康的捐獻者，細胞核基因一半來自母親，一半來自父親，所以三親嬰兒融合了三親的遺傳物質(zhì)。

【小問1詳解】該技術涉及核移植技術、體外受精技術、早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技等操作?！拘?詳解】性激素的合成受下丘腦-垂體-性腺軸的調(diào)節(jié)，通過長期過量使用性激素刺激母體，性激素會通過負反饋調(diào)節(jié)抑制垂體功能，導致性腺萎縮。【小問3詳解】卵母細胞要處于MII才具備受精能力，所以重組卵母細胞應培養(yǎng)至MII期。精子要經(jīng)過獲能處理才具備受精能力，所以人工授精前要對精子進行獲能處理?！拘?詳解】可以先形成受精卵后再對受精卵的核進行移植，也能達到同樣的目的。20.淀粉液化是淀粉加工業(yè)中的一個重要工藝，傳統(tǒng)的方法是加入外源耐高溫α淀粉酶，工藝復雜且成本較高?，F(xiàn)通過基因工程技術將地衣芽孢桿菌的耐高溫α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，直接獲得含有耐高溫α淀粉酶的淀粉類原料，從而簡化工藝，降低成本?；卮鹣铝袉栴}：（1）篩選具有耐高溫α-淀粉酶基因的地衣芽孢桿菌，可將菌種接種至富含淀粉的LB培養(yǎng)基，在__________條件下培養(yǎng)一段時間，向培養(yǎng)基表面滴加碘液，選取透明圈較大的菌落。（2）圖1為耐高溫α-淀粉酶基因，請根據(jù)圖中給出的部分堿基序列設計PCR擴增該基因的引物，引物序列分別為_____________________、___________________（標明3'端和5'端）。除引物、耐高溫的DNA聚合酶等，PCR的緩沖溶液中一般要添加Mg2+，其作用是__________________。（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，圖2為構(gòu)建表達載體所用Ti質(zhì)粒，根據(jù)基因表達載體的結(jié)構(gòu)組成分析，“X”應為_____________。目的基因應插入Ti質(zhì)粒的______________，因為_________________________?！敬鸢浮浚?）高溫（2）①.5'ATCCGTGGCTG3'②.5'CTACGGATTCA3'③.激活DNA聚合酶（3）①.啟動子②.T-DNA③.T-DNA可轉(zhuǎn)移到受體細胞并整合到受體細胞的染色體DNA上?！窘馕觥俊痉治觥縋CR是聚合酶鏈式反應的簡稱，指在引物指導下由酶催化的對特定模板（克隆或基因組DNA）的擴增反應，是模擬體內(nèi)DNA復制過程，在體外特異性擴增DNA片段的一種技術?！拘?詳解】地衣芽孢桿菌具有耐高溫的特點，因此可將菌種接種至富含淀粉的LB培養(yǎng)基，在高溫條件下培養(yǎng)一段時間。【小問2詳解】引物的方向應該與模版反向，而