醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文

醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第一篇醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第一篇在院領(lǐng)導(dǎo)的親切關(guān)懷和正確領(lǐng)導(dǎo)下，依靠兄弟科室的支持幫助，科研科全科同志團(tuán)結(jié)協(xié)作、求真務(wù)實(shí)、勤懇工作，創(chuàng)新工作思路，全年工作取得了一定的成績，現(xiàn)總結(jié)如下：

一、學(xué)科建設(shè)

重點(diǎn)學(xué)科是體現(xiàn)醫(yī)院特色和水平的重要標(biāo)志，加強(qiáng)重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)對提高醫(yī)院科技創(chuàng)新能力和學(xué)術(shù)隊(duì)伍建設(shè)具有重要的推動作用。院領(lǐng)導(dǎo)高度重視學(xué)科建設(shè)工作，提出了許多建設(shè)性意見。科研科認(rèn)真貫徹落實(shí)院領(lǐng)導(dǎo)指示精神，不斷加強(qiáng)醫(yī)院學(xué)科建設(shè)工作，著力打造國家、省、院三級學(xué)科建設(shè)體系。

1、國家級重點(diǎn)專科申報(bào)實(shí)現(xiàn)零的突破

科研科多方協(xié)調(diào)解決國家臨床?？粕陥?bào)工作的存在的問題和困難，認(rèn)真組織做好申報(bào)工作，經(jīng)過不懈努力，2月我院康復(fù)科(即康復(fù)醫(yī)學(xué)科)被國家中醫(yī)藥管理局確定為國家中醫(yī)“十二五”重點(diǎn)專科建設(shè)培育項(xiàng)目;207月呼吸內(nèi)科(即呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科)被xxx確定為國家臨床重點(diǎn)?？平ㄔO(shè)項(xiàng)目。2個(gè)國家級學(xué)科的獲批，結(jié)束了我院無國家級?？频臍v史，標(biāo)志著我院學(xué)科建設(shè)實(shí)現(xiàn)了新的突破，是醫(yī)院學(xué)科建設(shè)新的里程碑。

2、積極做好省臨床科學(xué)研究項(xiàng)目10項(xiàng);安徽省自然科學(xué)基金6項(xiàng);安徽高校省級自然科學(xué)研究項(xiàng)目12項(xiàng)，其中重點(diǎn)項(xiàng)目1項(xiàng)，一般項(xiàng)目3項(xiàng)，自籌項(xiàng)目8項(xiàng);安徽高校省級優(yōu)秀青年基金1項(xiàng);安徽省中醫(yī)藥課題2項(xiàng);蚌埠市科技計(jì)劃項(xiàng)目3項(xiàng);蚌埠醫(yī)學(xué)院課題49項(xiàng)。

3、成果方面

由我院整形外科李光早教授領(lǐng)銜的科研團(tuán)隊(duì)的最新科研成果《腓腸外側(cè)神經(jīng)-小隱靜脈營養(yǎng)血管蒂皮瓣解剖及臨床應(yīng)用研究》榮獲安徽省科技進(jìn)步三等獎。

4、著作論文方面

截止20**年12月31日，全院共發(fā)表論文345篇，其中SCI論文21篇、MEDLINE收錄論文7篇、外文期刊論文4篇、二類期刊35篇、三類期刊92篇。論文發(fā)表數(shù)量穩(wěn)步增長，高檔次論文不斷涌現(xiàn)，說明我院科技競爭力正持續(xù)提升?？蒲锌普J(rèn)真做好論文版面費(fèi)報(bào)銷工作，并將發(fā)表論文統(tǒng)計(jì)、核對、匯編成冊，為醫(yī)、教、研表彰做準(zhǔn)備工作。

5、學(xué)術(shù)活動

為活躍學(xué)術(shù)氛圍，擴(kuò)大學(xué)術(shù)交流，借建院60周年之機(jī)，在院領(lǐng)導(dǎo)的指導(dǎo)下，科研科積極邀請專家來我院講學(xué)，成功邀請到以我校著名校友***院士、等多位學(xué)者來我院講學(xué)，收到很好效果。

二、實(shí)驗(yàn)室生物安全

實(shí)驗(yàn)室生物安全關(guān)系到職工及廣大人民群眾身體健康與生命安全，科研科認(rèn)真落實(shí)xxx及省廳文件精神，提高業(yè)務(wù)水平與防范意識，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理及毒菌種的管理與檢查，規(guī)范病原微生物實(shí)驗(yàn)活動，防止病原微生物逃逸和擴(kuò)散，確保實(shí)驗(yàn)室生物安全，并順利通過了省市兩級政府主管部門組織的專項(xiàng)檢查。

三、藥物臨床試驗(yàn)管理

科研科科注重對臨床試驗(yàn)的管理，組織各專業(yè)研究人員參加國家局GCP培訓(xùn)，提高其GCP意識;響應(yīng)省藥監(jiān)局號召，積極參加藥物臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)聯(lián)系會議，與省內(nèi)同行交流機(jī)構(gòu)管理體會;嚴(yán)格試驗(yàn)審查和準(zhǔn)入，注重對受試者的保護(hù)，強(qiáng)化臨床試驗(yàn)的質(zhì)量控制，積極發(fā)現(xiàn)并組織協(xié)調(diào)試驗(yàn)過程中出現(xiàn)的問題。全年新承擔(dān)藥物臨床試驗(yàn)研究項(xiàng)目23項(xiàng)，其中國際多中心臨床研究2項(xiàng);器械臨床驗(yàn)證10項(xiàng)。

四、研究生培養(yǎng)

為進(jìn)一步加強(qiáng)我院碩士生臨床和科研工作的管理，根據(jù)國家教育部、xxx、國家中醫(yī)藥管理局、蚌埠醫(yī)學(xué)院等有關(guān)文件精神，結(jié)合醫(yī)院實(shí)際，科研科制定了《蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院研究生管理辦法》，新辦法完善了研究生在院期間管理要求;明確了培養(yǎng)流程;加大了對研究生生活補(bǔ)助力度，碩士生由原來的每月260元提高到500元、博士生提高到1500元;為醫(yī)院研究生管理提供了堅(jiān)強(qiáng)制度保障。

按學(xué)院要求，認(rèn)真組織碩士生導(dǎo)師遴選工作，共遴選出導(dǎo)師106人。

對研究生培養(yǎng)全過程進(jìn)行追蹤控制，從進(jìn)院培訓(xùn)，輪轉(zhuǎn)考核、發(fā)放補(bǔ)助、開題報(bào)告、中期考核、論文發(fā)表、直至畢業(yè)答辯離院。尤其是邀請國內(nèi)外和本院專家就研究生關(guān)心的領(lǐng)域進(jìn)行講學(xué)，拓寬了研究生視野，擴(kuò)大了研究生知識面。本年度級106位研究生全部順利通過論文答辯并獲得碩士學(xué)位，20**級125名研究生也順利進(jìn)入臨床輪轉(zhuǎn)。

五、醫(yī)學(xué)會工作

醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第二篇研究的意義:

測定ABO血型的意義有如下點(diǎn)：

(1)用于醫(yī)療輸血，血型不符合的輸血會造成輸血反應(yīng)。各種原因失血治療和搶救。

(2)手術(shù)前為防止手術(shù)中出血過多需提前備血，此時(shí)也需要檢查血型和進(jìn)行配血。

(3)新生兒溶血，當(dāng)母親與胎兒血型不合時(shí)引起血型抗原免疫所致的一種溶血性疾病。最為常見的是ABO血型系統(tǒng)所造成的ABO溶血。母親為O型血，最易發(fā)生癥或流產(chǎn)。

(4)用于器官移植術(shù)，供器官者與受器官者血型不合可導(dǎo)致和加速對移植器官的排斥。

(5)法律上可用于親子鑒定的參考，法醫(yī)學(xué)上可通過血跡或其他含有血型疑犯的身份;

(6)為保證臨床用血的需求，探索臨床用血的血型分布規(guī)律，制定適宜的采血計(jì)劃，合理調(diào)節(jié)庫存狀況，合理利用血液資源。

研究的目的

血型的鑒定方法;

血型的分型依據(jù);

3.了解抗原抗體反應(yīng)與ABO血型之間的關(guān)系;

4.了解不同地區(qū)(省份)的血型分布有什么不同

醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第三篇百合知母湯抗抑郁細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的機(jī)制研究

研究生姓名：xxx

導(dǎo)師姓名、職稱：xxxx教授

學(xué)科專業(yè)：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院

研究方向：方劑的配伍規(guī)律及臨床運(yùn)用

一研究目的與意義

1.研究目的

百合病最早見于張仲景的《金匱要略》，屬中醫(yī)情志病范疇?！督饏T﹒百合狐惑陰屬陽毒病證治》篇將“百合病”描述為：“意欲食復(fù)不能食，常默然，欲臥不能臥，欲行不行，飲食或有美時(shí)，或有不用聞食臭時(shí)，如寒無寒，如熱無熱，口苦，小便赤，諸藥不能治，得藥則劇吐利，如有神靈者，身形如和，其脈微數(shù)?！睆陌俸喜〉呐R床表現(xiàn)看，與抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)有較多的相似之處。所以現(xiàn)代不少醫(yī)家都將中醫(yī)的百合病歸屬于抑郁癥[1,2,3]。百合知母湯為治療百合病的經(jīng)典方藥之一，由百合和知母兩味藥組成。百合寧心安神，潤肺止咳;知母清熱瀉火，滋陰潤燥。百合甘寒清潤而不膩，知母苦寒降火而不燥。百合偏于補(bǔ)，知母偏于瀉。二藥伍用，一潤一清，一補(bǔ)一瀉，共奏潤肺清熱，寧心安神之效。主治陰虛或溫?zé)岵『笥酂崮┣?，以致頭昏、心煩不安、失眠等癥以及情志不遂，以致精神恍惚、不能自制等癥。故本課題旨在通過體動物實(shí)驗(yàn)揭示百合知母湯抗抑郁可能的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。

2.研究意義

抑郁癥是常見的危害人類身心健康一類精神疾病，以顯著而持久的情感或心境低落為主要特征，在WHO的一項(xiàng)流行病學(xué)調(diào)査中發(fā)現(xiàn)全世界約有10%-20%的人一生中曾有過抑郁體驗(yàn)[4]。隨著現(xiàn)代社會的生活壓力逐漸增高、工作節(jié)奏加快，人們處于應(yīng)激狀態(tài)中的機(jī)會增多，抑郁癥的發(fā)病率更逐年上升[5,6]，越來越多的患者正遭受抑郁癥的折磨，給家庭及社會造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此，加強(qiáng)抑郁癥的防治，尋找安全、有效的治療方法，具有非常重要的社會和經(jīng)濟(jì)意義。

抑郁癥發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，誘因繁多，針對某一單一環(huán)節(jié)的藥物難以取得滿意的療效，許多抗抑郁西藥存在抗抑郁譜窄、起效慢、藥價(jià)高、依從性差、副作用大及易復(fù)發(fā)等不足[7]。傳統(tǒng)的中醫(yī)學(xué)中蘊(yùn)含著豐富的心身醫(yī)學(xué)思想，其“形神合一論”，“天人合一論”就包含了廣義的心身醫(yī)學(xué)思想。因此國內(nèi)外越來越重視傳統(tǒng)中草藥及復(fù)方抗抑郁的研究，開展了廣泛而深入的實(shí)驗(yàn)研究，積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，且實(shí)驗(yàn)研究成果在臨床運(yùn)用中也取得了良好的療效，為中醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代心身醫(yī)學(xué)的融合、發(fā)展提供了新的契機(jī)。中醫(yī)心身醫(yī)學(xué)研究工作逐漸起步，心身醫(yī)學(xué)的中醫(yī)藥防治研究工作在病因病機(jī)及臨床診斷方面也取得一定的進(jìn)展[8]。

隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，抗抑郁藥物抗抑郁作用機(jī)制已由細(xì)胞外單胺遞質(zhì)途徑，逐步轉(zhuǎn)向細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，而目前針對百合知母湯抗抑郁作用機(jī)制的研究大都局限在行為學(xué)觀測、腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)內(nèi)分泌等方面。本研究采用大鼠慢性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)抑郁模型，對百合知母湯的抗抑郁作用及其細(xì)胞內(nèi)作用機(jī)制進(jìn)行研究，以期為其進(jìn)一步的新藥開發(fā)研究和臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

二研究現(xiàn)狀

1.百合病的研究現(xiàn)狀

百合病的起源

百合病始見于張仲景《金匱要略·百合狐惑陰陽毒病證治第三》篇：百合病者，百脈一宗，悉致其病也。意欲食復(fù)不能食，常默然，欲臥不能臥，欲行不能行，飲食或有美時(shí)，或有不用聞食臭時(shí)，如寒無寒，如熱無熱，口苦，小便赤，諸藥不能治，得藥則劇吐利，如有神靈者，身形如和，其脈微數(shù)。這段文字概括了百合病的主要癥狀是精神、飲食、睡眠、行為、語言、感覺的失調(diào)，與西醫(yī)學(xué)抑郁癥的主要癥狀有頗多相似之處。“百脈一宗者，分之則為百脈，合之則為一宗”因人體百脈同出一源，源病則百脈合病，周身受累，因此而得名百合病。

百合病的病因病機(jī)百合病的病因病機(jī)為傷寒熱病之后，余熱傷陰，或情志不遂，郁熱傷陰，導(dǎo)致心肺陰虛內(nèi)熱，百脈失養(yǎng)而成。病機(jī)特點(diǎn)是心肺陰虛內(nèi)熱，心神失養(yǎng)，以神志改變?yōu)橹饕R床特點(diǎn)。心肺陰虛，余邪未盡，則出現(xiàn)口苦、小便赤、脈微數(shù)。該組癥狀是百合病的主要客觀體征。百脈遍布周身，百脈失和，則行動感覺變異，如“欲臥不能臥，欲行不能行”“意欲食復(fù)不能食，飲食或有美時(shí)，或有不用聞食嗅時(shí)”“如寒無寒，如熱無熱”等。神志失和，則現(xiàn)“如有神靈者”“常默默”。

百合病的治療法則

百合病以心肺陰虛為基本病機(jī)，以滋養(yǎng)心肺、潤燥安神為治療法則。可“隨證治之”分為以下幾型：①正治法：“百合病，不經(jīng)吐、下、發(fā)汗，病形如初者，百合地黃湯主之?！卑俸喜∥唇?jīng)誤治，日雖久而病形如初者，以滋養(yǎng)心肺陰血，清熱安神為法，以百合地黃湯主之。取百合潤養(yǎng)心肺，清氣分虛熱，生地滋養(yǎng)心血，清血分虛熱，泉水煎藥，取清熱助陰，血熱從小便下行之功。諸藥合用，心肺得養(yǎng)，氣血同治，陰復(fù)熱清，百脈和調(diào)，病癥自除。②誤汗后：“百合病發(fā)汗后者，百合知母湯主之?！卑俸喜≌`用汗法，汗后陰液受傷，心肺陰虛加重，燥熱尤甚，除具備百合病的基本癥狀外，尚可出現(xiàn)津傷燥熱的心煩、少寐、口干或渴、午后潮熱、小便短少等癥候。治宜養(yǎng)陰清熱、潤澡除煩，用百合知母湯主治。③誤下后的滑石代赭湯(百合、滑石、代赭石)。④誤吐后的百合雞子湯(百合、雞子黃)。⑤久病變渴的外用百合洗方(百合)。如內(nèi)服外洗仍口渴不解，方用栝蔞牡蠣散(栝蔞根、牡蠣)。⑥久病變發(fā)熱的百合滑石散(百合、滑石)。

2.抑郁癥的研究現(xiàn)狀

抑郁癥的起源

抑郁癥是一種情感性精神障礙，臨床上以情緒低落、思維遲緩和精神運(yùn)動性抑制為特征，其它癥狀包括喪失自尊、不恰當(dāng)?shù)膬?nèi)疚感、死亡和自殺念頭、注意力集中程度降低以及睡眠和食欲減退，還可能伴有各種軀體癥狀。

抑郁癥是一種最普通的精神疾病。我國對情感性精神障礙進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查1985年：終生患病率約為12%。我國對抑郁癥的識別率低,臨床漏診率達(dá)50-60%。一般內(nèi)科醫(yī)生對包括抑郁癥在內(nèi)的心理障礙的識別率只有,約只有1/4的抑郁癥病人才能接受正規(guī)治療。有專家認(rèn)為我國抑郁癥的發(fā)病率應(yīng)為10-15%，隨著人口的逐步老齡化，抑郁癥在60歲以上人群中的發(fā)病率將高達(dá)20%～50%。1994年WHO全球調(diào)查發(fā)現(xiàn),抑郁癥的現(xiàn)癥患病率現(xiàn)癥患病率為,終生患病率為20-30%。約13-20%的人一生中曾有過至少一次抑郁體驗(yàn)。《20xx年世界衛(wèi)生報(bào)告》指出，抑郁癥目前已成為世界第四大疾患，到20xx年抑郁癥可能成為僅次于心臟病的第二大疾病，抑郁癥正在成為一個(gè)嚴(yán)重的全球問題[9-13]。

抑郁癥的發(fā)病

抑郁癥的病因十分復(fù)雜，一般認(rèn)為病因可能與遺傳、人格特征、心因因素有關(guān)。其發(fā)病機(jī)制也處于假說階段，主要包括單胺遞質(zhì)學(xué)說、神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)說、信號通路學(xué)說[14-15]。

單胺假說作為抑郁癥研究的重點(diǎn)認(rèn)為單胺類神經(jīng)遞質(zhì)(如5-輕色胺、多巴胺、去甲腎上腺素等)的失衡可導(dǎo)致抑郁的發(fā)生。大量研究亦顯示抑郁癥與遺傳、神經(jīng)、心理等因素誘發(fā)的中樞5-羥色胺(5-HT)、去甲腎上腺(Norepinephrine,NE)、多巴胺(Dopamine,DA)等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量降低及其受體功能下降有關(guān)[16-17]。有研究[18]表明抑郁模型大鼠下丘腦、紋狀體、海馬內(nèi)5-HT、NE及DA及其代謝產(chǎn)物、合成前體的含量明顯降低。這也支持了經(jīng)典的單胺遞質(zhì)學(xué)說。①5-HT：抑郁癥的發(fā)病機(jī)制涉及突觸間隙5-HT水平及5-HT受體亞型功能的失調(diào)。5-HT功能活動降低,則患者心情抑郁、食欲減退、運(yùn)動活動減少。Coppent[19]等于1965年首先提出5-HT與抑郁癥有關(guān),認(rèn)為抑郁癥是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)5-HT釋放減少,突觸間隙的含量下降而引起的。近年來,研究發(fā)現(xiàn)了很多5-經(jīng)色胺的受體亞型,使得5-HT遞質(zhì)系統(tǒng)與抑都癥發(fā)病的關(guān)系越來越受到關(guān)注。②NE：大量研究證明腦內(nèi)NE的絕對或相對缺乏會引起情緒低落、心境抑郁。Schildkraut[20]于1965年首先提出抑郁癥的發(fā)生是由于腦中NE不足所致,中樞神經(jīng)系統(tǒng)中NE含量不足則發(fā)生抑郁癥NE的缺乏可能是由于內(nèi)源性的生成釋放異常或由于NE系統(tǒng)慢性刺激所致的繼發(fā)性粍竭[21]。Bmnello[22]等指出,自從發(fā)現(xiàn)一些藥物通過改變NE代謝既能導(dǎo)致抑郁癥又能緩解抑郁癥,NE在抑郁癥中所起的作用越來越受到關(guān)注。③DA：1975年Randrup首先提出,抑郁癥的發(fā)病可能與DA有關(guān)。后來Maj等研究者證實(shí),幾乎所有長期抗抑郁治療的患者都會增加DA誘導(dǎo)的獎賞反應(yīng)。1983年Willner等提出抑郁癥存在DA功能的降低,尤其是伴隨有精神運(yùn)動遲滯的患者[23]。對抑郁癥自殺者尸檢結(jié)果提示,抑郁癥自殺患者尾狀核和伏核的DA代謝率降低[24]。

目前,抑郁癥的神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制研究中,下丘腦一垂體一腎上腺軸(HPA軸)功能亢進(jìn)是較為公認(rèn)的發(fā)病機(jī)制之一。大量研究顯示,抑郁癥患者的HPA軸功能亢進(jìn),血漿促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素CHR、促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)和皮質(zhì)醇(CORT)濃度明顯升高,而且這種功能亢進(jìn)是依賴性的,隨著抑郁的恢復(fù),HPA軸的功能也逐步恢復(fù)正常[25]。Catalan[26]等發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者下丘腦及下丘腦外的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)濃度都升高,重度抑郁組比輕度與中度抑郁發(fā)作CRF血濃度更高,且CRF與皮質(zhì)醇血濃度顯著相關(guān)。在發(fā)病機(jī)制方面，受體后信號通路及其第二信使系統(tǒng)在該病發(fā)病及治療中的作用是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。以腦內(nèi)cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein,CREB)為交匯點(diǎn)的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路正受到越來越多的關(guān)注，尤其是海馬CREB的改變。早在1996年，Nibuya[27]等就報(bào)道抗抑郁治療，大鼠海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)和齒狀回均可見CREBmRNA的表達(dá)增多。CREB可能是各種抗抑郁信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的交匯點(diǎn)。海馬CREB的表達(dá)和活化受到多種信號分子和信號通路的影響：

①腺苷酸環(huán)化酶/環(huán)磷酸腺苷/蛋白激酶A通路(AC/cAMP/PKA通路)，是研究最早的抗抑郁通路。其主要過程是：胞外信號激活胞膜上G蛋白耦聯(lián)受體→AC激活→胞內(nèi)cAMP升高(降解cAMP的酶主要是磷酸二酯酶)→PKA激活→CREB磷酸化→調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄→生物學(xué)效應(yīng)。Li和Branski[28,29]等實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)海馬cAMP通路的激活對改善抑郁癥狀起積極作用。

②酪氨酸激酶受體B/絲裂原活化蛋白激酶/核糖體S6激酶通路(TrKB/MAPK/RSK通路)，是一條和細(xì)胞生長、增殖、凋亡以及突觸可塑性密切相關(guān)的信號通路。在各種MAPK通路中，細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)信號通路與抑郁癥關(guān)系最為密切。ERK1/2通路激活的大致過程是：TrKB的激活→MAPK激酶激酶(MAPKKK,RAF)的激活→MAPK激酶(MAPKK,MEK)的激活→ERK1/2的激活→RSK的激活→CREB磷酸化→調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄→生物學(xué)效應(yīng)。抑郁癥患者的尸檢報(bào)告顯示腦內(nèi)MAPK減少可能是嚴(yán)重抑郁癥的病因之一[30]。

③Ca2+/鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)蛋白依賴的蛋白激酶通路(Ca2+/CaM/CaMK通路)，通路涉及多種離子通道、受體和酶，其激活的主要過程是：胞漿內(nèi)鈣濃度升高→鈣離子與CaM結(jié)合→激活CaMK→CREB磷酸化→調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄→生物效應(yīng)。王慶松等[31]利用貓對大鼠造成急性捕食應(yīng)激，發(fā)現(xiàn)在捕食應(yīng)激后大鼠海馬細(xì)胞內(nèi)CaM信號通路調(diào)控紊亂，表現(xiàn)在細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度明顯升高，Ca2+-CaM復(fù)合體增多，CaMK的表達(dá)升高，提示海馬該信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在嚴(yán)重心理應(yīng)激所致的行為異常中可能有重要意義。

3.百合知母湯的研究現(xiàn)狀

百合的研究現(xiàn)狀

方中百合為百合科植物百合LiliumbrowniiF.E.Brownvar.colchesteriWils.、卷丹LiliumlancifoliumThunb.和細(xì)葉百合LiliumpumilumDC.的肉質(zhì)鱗莖。味甘，性微寒。入心、肺經(jīng)。本品氣味稍緩，甘中有收，既能清心肺之余熱，而斂氣養(yǎng)心、安神定魄，用于治療熱性病后、余熱末盡所引起的神思恍惚、煩躁失眠、莫名所苦的“百合病”，又能潤肺止咳，用于治療肺燥咳嗽，或肺虛久咳，或陰虛久咳、痰中帶血等癥。百合中主要含有酚酸甘油酯、苷類、生物堿及多糖，另外還含有一些磷脂、蛋白質(zhì)和無機(jī)元素。藥理研究表明百合具有抗癌、止咳、耐缺氧與抗疲勞、提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能等作用[32-34]。

知母的研究現(xiàn)狀

方中知母為百合科植物知母AnemarrhenaasphodeloidesBge.的根莖。味苦、甘，性寒。入肺、胃、腎經(jīng)。本品質(zhì)潤，苦寒不燥、，沉中有浮，降中有升。上行能清肅肺氣，以瀉肺火，潤肺燥、除煩熱、止咳嗽，用于治療溫?zé)岵。霸跉夥郑Y見高熱、煩躁、口渴、脈洪大者，以及陰虛燥咳，或肺熱咳嗽諸癥;入于中，善清胃火、除煩渴，用于治療消渴病之中消諸癥;行于下，則能瀉相火、滋腎燥，用于治療陰虛火旺、骨蒸潮熱、盜汗等癥。

知母主要含有皂苷、黃酮、雙苯吡酮、木脂素等成分?，F(xiàn)代研究表明，知母具有抗病原微生物、抗血小板聚集、降血糖、解熱、抗炎、降低轉(zhuǎn)氨酶等多種藥理活性[35-37]。

百合知母湯的研究現(xiàn)狀

百合知母湯有養(yǎng)陰清熱、除煩潤燥之效，以潤養(yǎng)心肺為大法，治療百合病誤汗后，津液受傷，虛熱較甚者。臨床上運(yùn)用百合知母湯治療乳腺增生病[38-39]、長期低熱[40]、消渴、喘證、盜汗、胃脘痛[41]、失眠[42]、抑郁[43]等癥。

三研究思路與立題依據(jù)

1.研究思路百合知母湯是《金匱要略》中治療百合病的經(jīng)典方劑。百合病的描述“百合病者，百脈一宗，悉致其病也，欲臥不能臥，欲行不能行……意欲食復(fù)不能食，常默默，如有神靈者……”主要?dú)w納為情緒障礙、軀體不適，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)有很大的相似性，因此一般將百合病歸屬于抑郁癥范疇。百合知母湯中的部分有效成分能通過提高抑郁癥大鼠大腦皮層單胺遞質(zhì)、抑制HPA軸亢進(jìn)、提高模型動物腦組織BDNF含量等途徑發(fā)揮抗抑郁效應(yīng)。

CREB可能是各種抗抑郁信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的交匯點(diǎn)?？挂钟羲幬?包括中藥)或其它治療措施可通過調(diào)節(jié)一種或幾種通路，最終激活CREB，調(diào)節(jié)BDNF等基因表達(dá)，影響神經(jīng)元增殖、分化、成熟等可塑性改變，發(fā)揮抗抑郁作用。參與調(diào)節(jié)CREB的各調(diào)節(jié)因子之間、通路之間存在復(fù)雜的交叉聯(lián)系和相互作用，共同維持著CREB活性的平衡。近年來研究提示：抑郁模型小鼠，存在神經(jīng)元蛋白和營養(yǎng)因子在海馬的表達(dá)異常，而這些變化可以被一些中藥逆轉(zhuǎn)[44]。當(dāng)前致力于闡明信號通路、CREB、營養(yǎng)因子、神經(jīng)再生之間是如何相互聯(lián)系的，以及細(xì)胞靶點(diǎn)、分子應(yīng)答、行為反應(yīng)的調(diào)節(jié)與抗抑郁之間錯(cuò)綜復(fù)雜的關(guān)系。這將有助于我們以CREB為中心了解抑郁癥的病理生理機(jī)制，并在此基礎(chǔ)上研發(fā)出療效可靠、起效迅速、副作用小、經(jīng)濟(jì)實(shí)用的新藥，尤其是幫助我們更好地認(rèn)識一些中藥抗抑郁的可能機(jī)制，更充分地利用祖國寶貴的中醫(yī)藥資源。

細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是目前抗抑郁機(jī)制研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。可被多種不同的信號路徑激活。環(huán)磷酸腺苷(cAMP)、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、鈣調(diào)蛋白激酶(CaMK)等3條通路是目前認(rèn)為與抗抑郁相關(guān)、最主要的信號通路，這3個(gè)主要上游通路最終都使CREB磷酸化，進(jìn)而調(diào)節(jié)其下游通路的基因表達(dá)，完成神經(jīng)元生化功能，而CREB是上述3種通路的交匯點(diǎn)。

前期的研究證實(shí)：百合知母湯抗抑郁的機(jī)制與提高慢性不可預(yù)見性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)抑郁(CUMS)模型大鼠海馬組織5-HT含量、提高腦組織中CREB(cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白)mRNA的表達(dá)有關(guān)(見)。有鑒于此，我們提出假設(shè)：百合知母湯抗抑郁的信號機(jī)制可能與以上三種細(xì)胞內(nèi)通路有關(guān)，三個(gè)通路在抗抑郁機(jī)制中可能會有所偏重。

圍繞假設(shè)，基于CREB磷酸化通路，本課題擬將百合知母湯作用于CUMS大鼠，運(yùn)用ELISA、RT-PCR、免疫組化、Western印記等方法，檢測大腦組織cAMP信號中cAMP和PKA、MAPK信號中TrKB和BDNF、CaMK信號中鈣調(diào)蛋白(CaM)和CaMK等關(guān)鍵因子，初步探討百合知母湯抗抑郁的信號機(jī)制,篩選出該方抗抑郁的基因靶點(diǎn)。

2.立題依據(jù)

中藥復(fù)方具有成分多、作用環(huán)節(jié)多、靶點(diǎn)多的特點(diǎn)，多環(huán)節(jié)之間具有協(xié)同效應(yīng)。因此研究中藥及其方劑的抗抑郁作用具有極大的挖掘潛力，而且對解決日益增加的抑郁患者的痛苦有重大的社會意義[45-46]。

四研究內(nèi)容及目標(biāo)

1.建立慢性不可預(yù)見性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)大鼠抑郁(CUMS)模型;

2.通過檢測用藥前后模型動物大鼠海馬組織環(huán)磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)含量變化，評價(jià)百合知母湯對抑郁癥cAMP信號的干預(yù)作用;

3.通過檢測用藥前后模型動物大鼠絡(luò)氨酸激酶受體B(TrKB)和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)含量變化，評價(jià)百合知母湯對抑郁癥MAPK信號的干預(yù)作用;

4.通過檢測用藥前后模型動物大鼠海馬組織中鈣調(diào)蛋白(CaM)和鈣調(diào)蛋白激酶(CaMK)含量變化，評價(jià)百合知母湯對抑郁癥CaMK信號的干預(yù)作用;

五擬解決的關(guān)鍵問題

通過檢測cAMP、MAPK、CaMK三條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑上重要調(diào)節(jié)因子cAMP、PKA、TrKB、BDNF、CaM、CaMK用藥前后的變化，初步評估百合知母湯對以上三個(gè)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑的干預(yù)作用，評價(jià)方劑抗抑郁的機(jī)制，以便進(jìn)一步篩選出方劑抗抑郁靶點(diǎn)。

六實(shí)驗(yàn)研究方案

1.實(shí)驗(yàn)動物SD雄性大鼠，7—12周齡，體重180—200g2.藥物制備

按照《金匱要略》中記載的方法：百合七枚(劈)(約20g)，知母三兩(切)(約10g)即百合：知母=2:1。取百合100g，知母50g，先以清水將百合浸泡12小時(shí)，當(dāng)白沫出，去其水，再加清水20xxml，武火煎開后改為文火，得百合煎煮液1000ml;再用清水20xxml，先武火后文火，得知母煎煮液1000ml;將2次煎煮液混合，文火濃縮得煎煮液1500ml。按照比例配制足夠數(shù)量百合知母湯煎煮液，放入冰箱-20℃儲存?zhèn)溆?。臨用時(shí)取出，濃縮至合適體積。為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性，所有實(shí)驗(yàn)都用同一批藥材。所有藥物的給藥劑量根據(jù)“人和動物體表面積折算的等效劑量比率表”計(jì)算而來：大鼠(200g)用藥量=人(70kg)日用劑量。每只大鼠的給藥體積為1ml/100g。

百合知母湯終濃度為(成人日用量30g)

氟西汀終濃度為(成人日用量20mg)

各組按濃度給藥28天，對照組給等體積的三蒸水。

抑郁癥模型大鼠制備

除正常對照組外，其余動物采用慢性輕度不可預(yù)見性溫和刺激結(jié)合孤養(yǎng)(CUMS)的造模方法：各造模組大鼠均單籠飼養(yǎng)，刺激因子包括禁食、禁水、4℃冰水游泳、夾尾、晃尾、潮濕墊料和傾斜45°、束縛應(yīng)激、陌生物品、空籠刺激、噪音刺激、閃光刺激、水平震蕩、晝夜顛倒等。每日隨機(jī)給予2到3種刺激，使大鼠不能預(yù)料刺激的發(fā)生以避免產(chǎn)生適應(yīng)。每種刺激交叉累計(jì)使用2-3次，持續(xù)21天，造模成功后，給藥期間繼續(xù)維持造模。建立慢性溫和不可預(yù)見性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)(CUMS)抑郁癥大鼠模型,具體操作方法如下：

(1)禁水：即24小時(shí)不予供水。具體方法為,造模當(dāng)天,上午8:00始,撤出大鼠籠內(nèi)供水瓶,禁水24小時(shí)后,于次日上午8:00正常供水。

(2)禁食：即24小時(shí)禁止進(jìn)食。具體方法為,造模當(dāng)天上午8:00始,清除鼠籠內(nèi)所有鼠糧,剝奪進(jìn)食24小時(shí)后,禁食期間供水正常。禁食后給少量碎食,然后正常詞養(yǎng).

(3)晝夜顛倒：造模當(dāng)天,上午8:00,將正常對照組大鼠轉(zhuǎn)移至其它SPF級實(shí)驗(yàn)室后,關(guān)閉本實(shí)驗(yàn)室所有電源,模仿黑夜,至20:00準(zhǔn)時(shí)打開實(shí)驗(yàn)室電源,模仿白晝,給大鼠制造晝夜顛倒的假象。

(4)夾尾：用纏裹有膠布的塑料夾,夾持鼠尾根部,時(shí)長為5min。

(5)晃尾：提住大鼠尾巴中部以每秒鐘1次的頻率,晃尾15分鐘,晃尾時(shí)力度要輕柔,避免牽拉大鼠尾尖部位,以防脫皮

(6)冰水游泳：取一直徑為30cm玻璃缸,注入適量清水后加入適量冰塊,調(diào)整水溫至4℃(根據(jù)天氣情況,適當(dāng)調(diào)整,以防凍傷),同時(shí)調(diào)整水液平面據(jù)器皿邊緣約15-20cm,然后將大鼠放入冰水中,強(qiáng)迫其游泳5min。5min后將大鼠榜出,先用干毛巾擦拭動物毛發(fā),然后用吹風(fēng)機(jī)吹干,避免感冒。每次冰水游泳結(jié)束后需撈干凈游泳器皿內(nèi)大鼠類便,避免對下一只鼠產(chǎn)生影響。

(7)高速水平震蕩：將動物放入空的鼠籠中，進(jìn)行人工振蕩，2次/秒，有效節(jié)奏連續(xù)持續(xù)5min;或者水平晃動，1次/秒，持續(xù)30分鐘

(8)噪音刺激：90分貝噪音刺激2h，盡量選在白天大鼠休息的時(shí)候給予此種刺激。

(9)束縛刺激：將大鼠束縛于500ml燒杯中2h，注意保持通氣。

(10)潮濕環(huán)境：將大鼠的墊料換以潮濕墊料，持續(xù)刺激12h。

(11)異物刺激：往大鼠籠內(nèi)放置金屬條棒，鈍性玻璃器皿的異物予以刺激，持續(xù)2h。

(12)空籠：撤掉大鼠籠里面的墊料籠子里不放置任何物品，持續(xù)12h。

(13)傾斜刺激,：該刺激因素通常在禁水后進(jìn)行,應(yīng)激動物本身饑渴,在傾斜的鼠籠中覓食覓水更為困難。

(14)閃光刺激：LED頻閃燈，頻閃頻率2次/s，持續(xù)刺激2h。

以上各種刺激的實(shí)施順序遵循由弱(輕刺激,如晝夜顛倒、禁水禁食、潮濕環(huán)境)到強(qiáng)(重刺激,如冰水游泳,夾尾，晃尾，束縛刺激，噪音，閃光等刺激)的原則,以避免刺激之間的交互作用。每日采用1種刺激,平均每種刺激被采用2—3次,同種刺激不能連續(xù)出現(xiàn),使動物不能預(yù)料刺激的發(fā)生。

4.行為學(xué)指標(biāo)的測量

主要包括1%蔗糖水消耗率、體重變化率、敞箱實(shí)驗(yàn)、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

體重變化率

分別在實(shí)驗(yàn)的第1d、15d、22d、29、36d、43d、50d、57、64d進(jìn)行。動物體重變化率(%)=(當(dāng)日測量的體重-第1天的體重)/第1天的體重。糖水消耗實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備，在安靜的環(huán)境內(nèi)訓(xùn)練動物適應(yīng)含糖飲水：第一個(gè)24h，每籠同時(shí)放置兩個(gè)完全相同的動物水瓶，兩瓶均為同等重量的1%蔗糖水;第二個(gè)24h，一瓶為1%鹿糖水,一瓶為相同重量的純凈水。然后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)階段，禁水禁食24h后,測定10小時(shí)內(nèi)大鼠1%蔗糖水?dāng)z入量。糖水偏愛率%=糖水消耗量/(糖水消耗量+清水消耗量)X100%。適養(yǎng)期間進(jìn)行三次糖水偏愛篩選,將糖水偏愛率異常的大鼠剔除,不用于正式實(shí)驗(yàn)(三次糖水偏愛測試中均只喝自來水的大鼠為異常大鼠)。測定動物在實(shí)驗(yàn)第1天、第22天、第49天、第64天糖水偏愛率的變化。

敞箱實(shí)驗(yàn)

敞箱實(shí)驗(yàn)(Open-fieldTest)是評價(jià)實(shí)驗(yàn)動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實(shí)驗(yàn)動物在陌生環(huán)境中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時(shí)間來反應(yīng)實(shí)驗(yàn)動物的自主行為與探究行為,以尿便次數(shù)反應(yīng)其緊張度。敞箱實(shí)驗(yàn)(Open-fieldTest):木質(zhì)敞箱,立方形,長、寬、高為80cmx80cmx40cm,內(nèi)側(cè)壁、底面為黑色,底面用白線劃分為面積相等的25塊正方形。室內(nèi)安靜環(huán)境下將大鼠放置于敞箱底面的中心方格內(nèi),人距離敞箱1米之外,記錄大鼠在3min內(nèi)活動頻率。以穿越底面正方形塊數(shù)為水平穿越格數(shù)(4爪均進(jìn)入方格才記數(shù),為水平運(yùn)動得分)、以兩后肢直立的次數(shù)為豎立活動次數(shù)(兩前爪騰空或攀附墻壁,為垂直運(yùn)動得分),理毛次數(shù)以及大小便次數(shù)。每只動物只測1次,測定完畢后徹底清潔敞箱再進(jìn)行下一只觀察。分別于實(shí)驗(yàn)前1天、實(shí)驗(yàn)第22天和最后1天進(jìn)行。

Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

該實(shí)驗(yàn)是對大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的檢測，主要包括定位航行實(shí)驗(yàn)和空間搜索實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)用主要裝置包括一個(gè)銀灰色圓形水池(直徑150cm)，一個(gè)白色平臺(直徑10cm)，一臺跟蹤攝像機(jī)以及與攝像機(jī)相連的計(jì)算機(jī)，池內(nèi)盛水，且水溫保持在22-24℃。最后一次敞箱實(shí)驗(yàn)結(jié)束后第二天開始，首先訓(xùn)練大鼠尋找平臺，平臺置于水面下2cm，攝像機(jī)位于水池上方約200cm，能清晰攝取到大鼠的運(yùn)動軌跡。將水池分為四個(gè)象限，將大鼠從任意一個(gè)象限放入水中，記錄其找到平臺的路徑及時(shí)間，前幾次訓(xùn)練中，若時(shí)間超過120s，則引導(dǎo)動物到平臺，并在平臺上停留10s。然后進(jìn)行定位航行與空間搜索實(shí)驗(yàn)。定位航行實(shí)驗(yàn)：訓(xùn)練結(jié)束后的第一天，保持平臺位置不動，將大鼠隨機(jī)從一個(gè)象限放入水中，開始記錄大鼠的運(yùn)動軌跡及找到平臺的時(shí)間;空間搜索實(shí)驗(yàn)：定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將平臺撤走，將動物從原平臺位置的對側(cè)放入，開始記錄120s內(nèi)大鼠的運(yùn)動軌跡及潛伏期與穿越平臺次數(shù)。以此做為對空間記憶能力的檢測指標(biāo)。

懸尾實(shí)驗(yàn)

將實(shí)驗(yàn)動物通過固定動物尾端2cm處使其頭向下懸掛，動物在該環(huán)境中拼命掙扎試圖逃跑又無法逃脫，從而提供了一個(gè)無可回避的壓迫環(huán)境，一段時(shí)間的實(shí)驗(yàn)后，記錄處于該環(huán)境的動物產(chǎn)生絕望的不動狀態(tài)的時(shí)間。動物表現(xiàn)出的這種典型的“不動狀態(tài)”，反映了一種被稱之為“行為絕望狀態(tài)”，這種行為絕望模型與抑郁癥類似，而且對絕大多數(shù)抗抑郁藥物敏感，而且其藥效與臨床藥效顯著相關(guān)。

5.尼氏染色

正常的神經(jīng)細(xì)胞都含有一定數(shù)量的尼氏小體，它們主要分布于神經(jīng)細(xì)胞的漿中，形狀有大有小，如三角形，有的為橢圓形。這些物質(zhì)能被大部分的藍(lán)色染料所染色，這些染料如焦油堅(jiān)牢紫(Cresylfastviolet)、亞甲藍(lán)(methyleneblue)、甲苯胺藍(lán)(toluidineblue)、硫董(thionin)等將其染為藍(lán)色。但是，當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞受傷后，胞質(zhì)內(nèi)的尼氏體更可發(fā)生變化，嚴(yán)重的可消失，通過觀察尼氏小體的數(shù)量可以探知神經(jīng)元的受損或修復(fù)情況。

各組大鼠分別于末次給藥后麻醉,使大鼠仰臥位固定于實(shí)驗(yàn)臺上,打開腹腔,掀起右肺,在靠近脊柱處找出下腔靜脈和腹主動脈。用止血鉗夾住腹主動脈和下腔靜脈,接著打開胸腔,用針頭經(jīng)左心室插入升主動脈,后剪開右心耳,進(jìn)行灌注。先用的生理鹽水250ml經(jīng)心臟快速灌注沖洗,再用4%的低聚甲醛,的磷酸緩沖液()350ml灌注。在灌注固定液過程中后期大鼠頸部、肩部和雙前肢逐漸變硬。灌注后取大鼠全腦,10%低聚甲醛固定48-60h。以松果體為標(biāo)志物,向頭側(cè)橫向切取3段,每段厚2mm。石蠟包埋,連續(xù)切片,片厚lOpin,切片,用于尼氏染色及后期的免疫組化。

將腦片置于甲苯胺藍(lán)(母液：甲苯胺藍(lán)1g，無水乙醇100ml。使用時(shí)按1:1比例與新鮮的溶液混合成工作液)或焦油紫(焦油紫;蒸餾水99ml;1%冰醋酸1ml)中室溫下染色30min。在75%、95%、100%酒精中各脫色1min，二甲苯透明10min，中性樹膠封片。顯微鏡下觀察照相并對尼氏染色陽性神經(jīng)元進(jìn)行計(jì)數(shù)。

6.測量生化指標(biāo)

主要包括CREB、BDNFmRNA在大鼠海馬內(nèi)的表達(dá);免疫組化檢測TrKB、ERK1/2蛋白的表達(dá);免疫印跡法檢查CaM、CaMKⅡ的表達(dá)。

逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測CREB、BDNFmRNA在大鼠海馬內(nèi)的表達(dá)首先勻漿：海馬新鮮組織約100mg,加入1ml的TRIZOL試劑,用電動勾漿器進(jìn)行勾漿;兩相分離:分裝后樣品于15到30℃孵育5分鐘。每1ml的TRIZOL試劑勾漿的樣品中加入ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15-30℃孵育2到3分鐘。4℃下120xxg離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色紛氯仿相,中間層核上層的無色的水相。RNA全部被分配于水相中,水相的體積大約是勾漿時(shí)加入的TRIZO試劑的60%;RNA沉淀:將水相轉(zhuǎn)移到新離心管中。水相與異丙醇混合以沉淀其中的RNA,加入異丙醇的量為每個(gè)樣品勻漿時(shí)加入，1mlTRIZOL試劑加ml的異丙醇，混勾后15-30℃孵育10分鐘后,于4℃12,000g離心10分鐘;RNA清洗:移去上清液,每1mlTRIZOL試劑勻漿的樣品中加入至少1ml的75%乙醇,清洗RNA沉淀。振蕩后,4℃，7500g離心5分鐘;重新溶解RNA況淀:去除乙醇溶液,空氣中干燥RNA沉淀5-10分鐘,切勿真空離心干燥，注意RNA沉淀不要完全干燥,否則將大大降低RNA的可溶性，部分溶解的RNA樣品A260/280比值將小于;溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水用槍反復(fù)吹打幾次,然后55-60℃孵育10分鐘。莰得的RNA溶液保存于-70℃;濃度測定:取少量液體用TE稀釋(一般1:100稀釋)后,讀取其在紫外分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,A260下讀值為1表示40ugRNA/ml;樣品RNA濃度(ug/ml)=A260×稀釋倍數(shù)40ug/ml;RNA純度檢測:RNA溶液的A260/A280的比值范圍應(yīng)在之間;

在無核酸酶的離心管中配制反應(yīng)液：RNA，1-5μg;逆轉(zhuǎn)錄引物(20um)，1μl;RNasefreeH2O，使總體系為μl(反應(yīng)液配制在冰上進(jìn)行)。輕輕混勻,65℃變性10min，立即置于冰上2min后加入：RNA-primermix，μl;5×RTReactionBuffer，4μl;dNTP(10mM)，2μl;RiboLockRNaseInhibitor，μl;RevertAidReverseTranscriptase，1μl?？傮w系20μl，25℃孵育10min后42℃孵育60min，70℃加熱滅活10min，-20℃保存。設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物，配制成合適濃度工作液，Realtime-PCR儀反應(yīng)體系液配制：2Xall-in-OneTMqPCRMix(含ROX)，10μl;引物(10pmol/μl)，上下游各μl;ddH2O，μl;cDNA(適度稀釋)，5μl?？傮w系20μl。反應(yīng)條件：95℃，10min,以下反復(fù)40個(gè)循環(huán);95℃,10s;60℃，20s;72℃，20s。最后結(jié)果采用2-ΔΔCT法進(jìn)行測量。

免疫組化法檢測TrKB、ERK1/2的表達(dá)

切片后,常規(guī)脫蠟至水;3%過氧化氫孵育lOmin,可以滅活內(nèi)源性酶的活性,蒸水沖洗,5minx3次;微波熱修復(fù)3min,PBS沖洗,5minx3次;滴加5%BSA封閉液,室溫孵育30min;滴加一抗,5-HTiaR一抗稀釋為1:50,PKA稀釋為1:100,CREB稀釋為1:100,4°C過夜,PBS沖洗,5minx3次;滴加二抗生物素標(biāo)記的羊抗兔IgG,37°C孵育30min,PBS沖洗,5minx3次;滴加三抗試劑SABC,37°C孵育30min,PBS沖洗,5minx3次;DAB顯色劑顯色,室溫下15inin,蒸饋水沖洗,脫水,透明,封片最后DAB顯色劑顯色，室溫下20min，蒸餾水終止反應(yīng)，常規(guī)脫水、透明、封片，顯微鏡下觀察。每只動物取相同部位的3張切片，每張切片選取3個(gè)視野，在同一放大倍數(shù)、同一光強(qiáng)度下，采用CMLAS彩色病理圖像分析系統(tǒng)，分別計(jì)算每張切片中海馬組織TrKB、ERK1/2表達(dá)的平均光密度。

免疫印跡法測定鈣調(diào)素(CaM)、鈣調(diào)蛋白激酶(CaMKⅡ)蛋白表達(dá)變化

取新鮮海馬約100mg置管中，生理鹽水沖洗兩遍，充分剪碎，離心去上清。每管加4℃裂解液1ml，繼續(xù)剪碎、混勻，低溫超聲勻漿;14000轉(zhuǎn)離心，5min，取上清備用。取上清5μl，加考馬斯亮藍(lán)3μl，去離子水95μl，595nm處，1cm光徑，蒸餾水調(diào)零，測各管OD值;根據(jù)樣品OD值調(diào)整蛋白濃度。樣品煮沸5min，冷卻后取50μg上樣;電件(12%濃縮膠：90v30min;10%分離膠：120v120min);NC膜轉(zhuǎn)印(70v120min);5%脫脂奶粉TBST溶液封閉抗體，搖床2h，TBS漂洗5min，3次。一抗孵育(兔抗人CaM、CaMKⅡ多克隆抗體1:500稀釋)，4℃過夜;二抗孵育(辣根酶標(biāo)記羊抗兔IgG1:1500稀釋)，37℃1h;掃描并分析結(jié)果，條件設(shè)置為曝光2min，CCD自動獲取圖像，同時(shí)以1:1000稀釋的小鼠抗大鼠beta-actin單克隆抗體作為內(nèi)參照，各蛋白相對表達(dá)量以相應(yīng)蛋白/beta-actin灰度值表示。

七課題創(chuàng)新性

1.本課題首次系統(tǒng)地由宏觀到微觀地進(jìn)行綜合研究，能從行為學(xué)水平→細(xì)胞形態(tài)水平→分子水平三個(gè)層次經(jīng)行分析，以期待比較完善地探索百合知母湯抗抑郁功效及其機(jī)理。

2.本課題選用了先進(jìn)的指標(biāo)，并且采用蛋白水平和mRNA水平檢測方法，檢測神經(jīng)營養(yǎng)因子及相關(guān)細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中關(guān)鍵因子的變化，以期探尋本方提高抑郁癥大鼠腦組織CREBmRNA的表達(dá)水平的進(jìn)一步信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。

八預(yù)期結(jié)果

1.成功完成大鼠抑郁癥CUMS模型的建立，構(gòu)建良好的實(shí)驗(yàn)平臺。

2.探討百合知母湯抗抑郁機(jī)制中三種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)發(fā)揮的作用，篩選百合知母湯抗抑郁的靶點(diǎn)通路。

3.預(yù)計(jì)在國內(nèi)學(xué)術(shù)期刊上發(fā)表論文2篇。

參考文獻(xiàn)

[1]吳炫靜.抑郁癥的中醫(yī)辨證治療研究[D].北京：中國中醫(yī)科學(xué)院.20xx:15-23.

[2]孫旭海.中醫(yī)精神疾病分類與癥狀的古代醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)整理研究[D].北京:中國中醫(yī)科學(xué)院.20xx:1-2.

[3]吳崇勝.抑郁癥中醫(yī)癥候診斷標(biāo)準(zhǔn)研究[D].北京:北京中醫(yī)藥大學(xué).20xx:19-21.

[4]NemeroffCB.Theneurobiologyofdepression[J].ScientificAmerican，1998，278:42.

[5]周學(xué)東，陳興寶.抑郁癥經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)研究進(jìn)展[J].上海醫(yī)藥，20xx，27(12):539-541

醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第四篇題目：不同飼料飼喂斷奶仔豬對比試驗(yàn)研究

1、畢業(yè)論文的背景及意義：

背景：

近幾年我國的養(yǎng)殖事業(yè)發(fā)展迅猛，大中小型企業(yè)如雨后春筍。尤其是養(yǎng)豬業(yè)正是如日中天。但是，還存在著不少問題，仔豬成活率低、腹瀉等等。在一定程度上制約著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。在現(xiàn)代養(yǎng)豬生產(chǎn)中，合理的仔豬飼料是養(yǎng)豬成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，它不僅影響仔豬階段的生長，還嚴(yán)重影響仔豬成年后的生產(chǎn)性能。而仔豬斷奶則是仔豬生產(chǎn)中的關(guān)鍵因素，仔豬在3~5周齡斷奶稱為早期斷奶(swineearlyweaning)。國外的早期隔離斷奶(sew)技術(shù)甚至把斷奶日齡降低到14天以下。仔豬早期斷奶的重要性和優(yōu)越性越來越被養(yǎng)豬業(yè)者所認(rèn)識。仔豬斷奶后，首先是攝入營養(yǎng)成分的改變，一是由母乳改變成吃飼料；二是由豬呵護(hù)的生活方式轉(zhuǎn)變成完全獨(dú)立的生活方式；第三是生活環(huán)境發(fā)生了巨大的改變，有產(chǎn)房轉(zhuǎn)到仔豬舍，并結(jié)識新的伙伴，另外離開了母乳的喂養(yǎng)，容易受到病源微生物的侵害而生疾病。據(jù)有關(guān)資料顯示，侯國方，徐鳳軍、王顯在杭報(bào)道顆粒飼料在制粒過程中將自身所含的淀粉糊化，使飼料易于消化吸收，提高了飼料的能量含量；同時(shí)破壞了胰蛋白酶抗?fàn)I養(yǎng)因子等，提高蛋白質(zhì)消化利用率；膨化還能限制某些脂肪酶的活性，減少飼料氧化分解，延長了飼料的保存期；制粒過程中還能殺滅原料中可能存在的沙門氏菌、大腸桿菌等病原菌，減少了仔豬腹瀉的發(fā)生。耿照銀，田正偉，彭友銀等采用相同營養(yǎng)的水平的顆粒飼料與粉狀飼料飼喂杜長大商品豬，在全程的飼養(yǎng)過程中都表現(xiàn)出了顆粒飼料的優(yōu)越性。顆粒飼料組的日增重、采食量、料肉比、千克增重飼料成本都比粉狀飼料組有所提高。

顆粒飼料與粉狀飼料相比，具有減少粉塵，防止挑食及營養(yǎng)組分分層、減少飼料浪費(fèi)提高單位時(shí)間的采食量及降低采食能耗等作用對于飼料添加劑意義特別重大，可防止飼料生產(chǎn)及運(yùn)輸中組分分離；可殺滅病原微生物，提高飼料的適口性，減少包裝運(yùn)輸費(fèi)用。但顆粒飼料在加工過程中某些營養(yǎng)成分失活，如維生素類和酶類。

意義：

本文旨在研究顆粒飼料和粉狀飼料飼喂斷奶仔豬，通過仔豬的生長發(fā)育及生產(chǎn)性能等方面進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn)，對兩種飼料的飼喂效果進(jìn)行了對比研究，為今后斷奶仔豬的飼養(yǎng)管理提供一定的理論基礎(chǔ)。

2、畢業(yè)論文的研究目標(biāo)：

本試驗(yàn)主要研究比較顆粒飼料和粉狀飼料對斷奶仔豬飼喂效果的研究，比較其平均日增重、平均采食量、料肉比、死淘率，從而養(yǎng)殖戶的提高經(jīng)濟(jì)效益。

3、畢業(yè)論文的主要研究內(nèi)容、研究方法、具體措施和研究的可行性、創(chuàng)新點(diǎn)：

研究內(nèi)容；

不同飼料飼喂對斷奶仔豬平均日增重的影響。

不同飼料飼喂對斷奶仔豬平均日采食量的影響。

不同飼料飼喂對斷奶仔豬死淘率、飼料轉(zhuǎn)化率的影響。

研究方法；

試驗(yàn)前對兩組仔豬進(jìn)行稱重，計(jì)算個(gè)體的平均體重，在試驗(yàn)結(jié)束再進(jìn)行稱重，然后計(jì)算仔豬每組的平均日增重、日耗料和料肉比根據(jù)當(dāng)時(shí)的市場物價(jià)進(jìn)行經(jīng)濟(jì)效益分析。對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因子方差分析及T檢驗(yàn)。

具體措施；

在相同環(huán)境下采用不同的飼料進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。為了給斷奶仔豬選擇合適的飼料類型，選擇日齡相近，體重相近，健康狀況良好的仔豬60頭35日齡斷奶的仔豬隨機(jī)分成兩組，采用2種類型的飼料；即顆粒飼料組和粉狀飼料組，每組三個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭，經(jīng)30d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。

顆粒飼料與粉狀飼料的主要營養(yǎng)成分指標(biāo)(%)

項(xiàng)目粗蛋白粗纖維粗灰分鈣總磷賴氨酸

顆粒飼料

粉狀飼料≥21

≥21≤4

≤4≤7

飼養(yǎng)管理：

飼喂時(shí)間是每天飼喂四次，分別是6；30、10；30、14；30、18；30進(jìn)行飼喂，任其自由采食、飲水。預(yù)試驗(yàn)期為一周，以利于仔豬適應(yīng)飼料環(huán)境等條件。

可行性：

本試驗(yàn)在普通豬場即可完成，在吉林區(qū)周邊豬場很多，我們學(xué)校也有自己的豬場。試驗(yàn)地點(diǎn)容易選擇，我們已經(jīng)學(xué)過《動物營養(yǎng)學(xué)》、《豬生產(chǎn)學(xué)》、對斷奶仔豬相關(guān)知識有一定的了解和掌握，而我在豬場實(shí)習(xí)過，對仔豬的養(yǎng)殖和管理有了一定的了解，飼養(yǎng)后的采樣結(jié)果在我們學(xué)校的實(shí)驗(yàn)室即可進(jìn)行。

創(chuàng)新點(diǎn)：

不同飼料飼喂斷奶仔豬在動物研究領(lǐng)域的應(yīng)用研究報(bào)道較少，因此，通過以斷奶仔豬作為研究對象，不同飼料對斷奶仔豬生長性能的影響，從而，確定最適合斷奶仔豬的飼料，為飼養(yǎng)斷奶仔豬而提供參考和依據(jù)。

4、主要參考資料及使用的原始資料：

[1]胡文琴，孟慶麗，王恬.不同形狀飼料對豬生產(chǎn)性能的影響[J].糧食與飼料工業(yè)，2004(5)：29~30.

[2]陳潤生，魏國生.膨化顆粒飼料飼喂仔豬實(shí)驗(yàn)[J].畜牧與獸醫(yī)，2002(1)：3~4

[3]顧平生，楊國明，張曦，等.仔豬膨脹顆粒飼料飼養(yǎng)試驗(yàn)[J].云南畜牧獸醫(yī)，2002(1)：3~4

[4]陳權(quán)軍，關(guān)則記.乳豬日糧不同處理方法(膨化、壓粒、粉狀飼料)對剛斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].當(dāng)代畜牧2001(6)：37~37

[5]耿照引，田正偉，彭友銀，等.牲豬全程飼喂顆粒飼料飼料試驗(yàn)報(bào)告[J].湖北畜牧獸醫(yī)，1999(2)：36~37

[6]姚建軍，陳月霞，等.粉狀飼料、顆粒飼料飼喂不同毛色的杜約太三元雜交商品豬試驗(yàn)[J].天津畜牧獸醫(yī)，1999、16(1)：24~25

[7]陳文存，沐學(xué)勤，范榮俊，等乳.豬優(yōu)化顆粒飼料擴(kuò)大驗(yàn)證試驗(yàn)[J].云南畜牧獸醫(yī)，2002(1)：4

[8]傅仲，汪明，范光厚.早起斷奶仔豬的生長限制因素及營養(yǎng)對策[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2005(12)：15~16

[9]盧亞萍，杜杰.斷奶仔豬腹瀉原因分析與防治[J].動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué)，2005(12)：15~16

[10]侯國方，徐鳳軍，王顯航.仔豬膨化飼料魚顆粒飼料對比試驗(yàn)(初報(bào))[J].飼料與畜牧，1997(3)：10~11

5、畢業(yè)論文的進(jìn)度安排：

(1)20XX年4月：準(zhǔn)備開題，完成開題報(bào)告。

(2)20XX年5月～2013年1月：試驗(yàn)前的準(zhǔn)備，試驗(yàn)場的選擇，試驗(yàn)材料的用品的搜集，試驗(yàn)場的打掃、消毒，仔豬的選擇。正式試驗(yàn)。

(3)20XX年2月：撰寫論文，上交初稿。

(4)20XX年3～4月：修改論文。

(5)20XX年4月末：論文定稿。

醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第五篇為了全面落實(shí)市教科所未來五年教育科研工作的指示精神，全面落實(shí)我鎮(zhèn)擬定的《教育科研工作五年規(guī)劃》，實(shí)現(xiàn)科研興校的整體構(gòu)想，將承擔(dān)的科研課題有序地穩(wěn)步實(shí)施，特制定本方案。

一、指導(dǎo)思想

堅(jiān)持一切從實(shí)際出發(fā)的原則，做到理論與實(shí)踐的最佳結(jié)合；堅(jiān)持勇于探索，敢于創(chuàng)新的方針，發(fā)揚(yáng)求真、求實(shí)、求是的科研品格；堅(jiān)持以應(yīng)用研究為主體；堅(jiān)持全面強(qiáng)化，全面滲透，全面推進(jìn)的工作思路，使科研工作切實(shí)為教育教學(xué)改革服務(wù)，為提高我鎮(zhèn)教育教學(xué)質(zhì)量服務(wù)，為促進(jìn)教師專業(yè)化發(fā)展服務(wù)，為打造一支適應(yīng)教學(xué)改革的高、精、尖的教師隊(duì)伍服務(wù)。

二、整體目標(biāo)

1、十二五期間，我鎮(zhèn)確立的主課題為《新課程改革理念與各學(xué)科融合》，圍繞主課題向語文、數(shù)學(xué)、英語學(xué)科拓展，從面形成了語文學(xué)科與思品學(xué)科的融合，數(shù)學(xué)教學(xué)中如何培養(yǎng)學(xué)生自主意識，如何創(chuàng)設(shè)教學(xué)情境；英語學(xué)科如何培養(yǎng)學(xué)生探究能力等子課題。從而形成了我鎮(zhèn)十二五期間教育科研的整體框架。為教師群體參研奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

2、各校要緊緊圍繞我鎮(zhèn)擬定的主課題，結(jié)合本校專任教師的教學(xué)實(shí)際確立好子課題，緊密結(jié)合教師的科研能力及學(xué)生的學(xué)習(xí)現(xiàn)狀，通過理論學(xué)習(xí)、調(diào)查、討論、分析等手段，對所擬課題進(jìn)行深入研究，形成校校有課題，全員都參與的科研氛圍。

3、以校本研修為載體，開展校本研究，課題確立后，校長要幫助指導(dǎo)教師積極立項(xiàng)，研究具體的策略與方法，確保此項(xiàng)工作穩(wěn)步實(shí)施。

4、加強(qiáng)科研科普信息傳遞力度，通過校本培訓(xùn)，提高專任都的理論水平與專業(yè)化能力；通過調(diào)查研究，掌握第一手材料，為指導(dǎo)青年教師參與研究做樣子、鋪路子、當(dāng)參謀；能過理論講座，專家引領(lǐng)為教師參與科研做好充分準(zhǔn)備。

5、集中抓好科研工作，從而達(dá)到在研究狀態(tài)下工作，在工作過程中研究的目標(biāo)。

三、具體要求

1、學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)是教育科研的第一責(zé)任人。

首先要成立科研工作領(lǐng)導(dǎo)小組，使之成為科研工作的組織者、探索者和實(shí)踐者，各校參與科研的人數(shù)不得少于60%。

其次，要建立校本科研制度，力爭做到制度化、經(jīng)?；⒖茖W(xué)化，并與教師的考核緊密結(jié)合起來。

再次，領(lǐng)導(dǎo)要率先參與科研，堅(jiān)持用自己的觀點(diǎn)研究對策及方法，成果與教師共同研討，在同伴互助中思進(jìn)，在探索與完善中升華。

2、參研教師要圍繞子課題在個(gè)性中尋找共性，要教學(xué)情境中甄別與評價(jià)，致力于為師生提供一個(gè)自主學(xué)習(xí)、合作探究、完善自我的空間與舞臺，使自己的研究成果真正成為學(xué)生終生受益的源動力。

3、采取自下而上和自上而下的評價(jià)體系，即各校專任教師從教學(xué)實(shí)際出發(fā)，確定好子課題，經(jīng)各校篩選后擇優(yōu)上報(bào)，然后由中心校按計(jì)劃要求定期檢查指導(dǎo)，注重研究過程，注重方法及步驟，注重科研方案及實(shí)驗(yàn)報(bào)告寫法的指導(dǎo)，中心校責(zé)成專人為各學(xué)校提交的子課題進(jìn)行跟蹤指導(dǎo)，使此項(xiàng)工作健康有序地實(shí)施。

醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第六篇醫(yī)學(xué)開題報(bào)告范文模板

立論依據(jù)

(包括研究意義、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀分析，并附主要參考文獻(xiàn)及出處)

對基礎(chǔ)研究，著重結(jié)合國際科學(xué)發(fā)展趨勢，論述本課題的科學(xué)意義;

對應(yīng)用基礎(chǔ)研究，著重結(jié)合學(xué)科前沿、圍繞國民經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展中的重要科技問題，論述其應(yīng)用情景。

研究意義：

新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎(NEC)是新生兒時(shí)期嚴(yán)重威脅生命的消化系統(tǒng)急癥，以早產(chǎn)兒、小于胎齡兒發(fā)病者較多，在NICU患兒中的發(fā)病率高達(dá)10%，是早產(chǎn)兒死亡的重要原因之一。

臨床以腹脹、腹瀉、黏液血便和膽汁樣嘔吐為主要表現(xiàn)，腹部X線平片以腸壁囊樣積氣為特征，腸道病變范圍可局限或廣泛，回腸累及最多，黏膜呈凝固性壞死，粘膜下層彌漫性出血或壞死，嚴(yán)重者腸壁全層壞死甚至穿孔。

目前有很多方法用于診斷NEC。

除了可以根據(jù)臨床表現(xiàn)診斷外，腹部X線片是最常用的輔助檢查方法，雖然其用于診斷NEC的特異度較高，但對于早期診斷NEC幫助不大，

目前也有很多關(guān)于IL-8、IL-10、IL-1受體拮抗劑等生化指標(biāo)用于診斷NEC的研究，但缺乏較好的用于早期診斷NEC的血生化指標(biāo)。

TLR是由Nomuria等在哺乳動物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)與果蠅Toll蛋白相似的一種蛋白。

TLR在不同細(xì)胞的表達(dá)和識別不同細(xì)胞因子在多種疾病的發(fā)病機(jī)制中起重要作用，目前研究發(fā)現(xiàn)TLR參與腫瘤、腸道免疫性疾病等多種疾病的發(fā)病。

在人類體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的TLR家族共有10個(gè)成員，其中TLR4是近年來研究較多的其中一個(gè)，TLR4主要表達(dá)在內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及DC上。

I-FABP是由小腸單層柱狀上皮細(xì)胞分泌的一種小分子蛋白質(zhì)，占成熟的細(xì)胞基質(zhì)蛋白的2%。

本研究旨在通過檢測NEC患兒血清中的TLR4及腸型脂肪酸結(jié)合蛋白，監(jiān)測其在NEC中的動態(tài)變化，作為NEC嚴(yán)重程度的生化指標(biāo)，可為輔助診斷NEC提供依據(jù)，達(dá)到早期干預(yù)的目的。

國內(nèi)外研究現(xiàn)狀分析：

TLR4上調(diào)導(dǎo)致NEC發(fā)生的機(jī)制研究

與LPS結(jié)合后，被激活的TLR4可以通過髓樣分化因子88(MyD88)依賴性和非依賴性兩個(gè)途徑介導(dǎo)炎癥因子的釋放。

其中MyD88依賴性途徑主要介導(dǎo)NF-kB活化和細(xì)胞因子產(chǎn)生，而MyD88的非依賴性途徑主要誘導(dǎo)LPS的干擾素(IFN)，以及干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP10)基因、糖皮質(zhì)激素衰減反應(yīng)基因16(GARG-16)、

干擾素調(diào)節(jié)基因1(IRG-1)的表達(dá)和DC的成熟，激活下游NF-kB、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)p38信號通路，誘導(dǎo)促炎癥因子如白細(xì)胞介素-1(IL-1)6、12和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等的表達(dá)。

Chan等研究發(fā)現(xiàn)，TLR4激活后能影響腸道粘膜的修復(fù)能力，此與其減少腸道細(xì)胞增殖、降低內(nèi)皮細(xì)胞基底部粘附力及減少內(nèi)皮細(xì)胞移動到受損位置的數(shù)量。

究證明，TLR4通過抑制細(xì)胞的增殖分化作用于wnt-β-5信號系統(tǒng)，使腸道粘膜修復(fù)能力受損，加重NEC的病理變化。

最新研究表明，TLR4不僅可以與LPS結(jié)合誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)、損傷腸道粘膜導(dǎo)致NEC發(fā)生，許多分子蛋白如纖維結(jié)合蛋白、透明質(zhì)酸。

硫酸肝素等均能激活TLR4，在無外來病原菌時(shí)TLR4表達(dá)可能增高，釋放大量炎癥因子從而發(fā)生NEC的炎癥瀑布鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。

這一發(fā)現(xiàn)，可以解釋一些無明顯感染因素引起的NEC。

細(xì)菌及其產(chǎn)物如何引起腸上皮細(xì)胞的損傷探討

血小板活化因子(PAF)在NEC的發(fā)生中起重要作用。

有研究應(yīng)用缺氧、低溫、人工喂養(yǎng)、細(xì)菌感染等方法制成了NEC的動物模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)腸上皮的PAF及其受體的表達(dá)增高，阻斷PAF的受體表達(dá)后NEC的發(fā)生率明顯下降。

PAF表達(dá)增高可使腸壁血管通透性增高、白細(xì)胞游出、細(xì)胞粘附分子的合成增多及活性氧生成增加，從而損傷腸壁。

有研究表明，PAF可活化腸上皮細(xì)胞的STAT，使磷酯酶A2及內(nèi)皮素一1的合成增加，并可通過上bax的表達(dá)而誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞凋亡，從而損傷腸上皮細(xì)胞、破壞細(xì)胞問的連接而引起細(xì)菌移位

關(guān)于醫(yī)學(xué)開題報(bào)告范文精選精選3篇工作報(bào)告。

另外，PAF還可誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞產(chǎn)生TLR4，后者可活化IKK，從而激活NFxB而引起炎癥級聯(lián)反應(yīng)。

如果敲除TLR4，則NEC的發(fā)生率明顯降低，說明TLR4在NEC的發(fā)生中也有重要作用。

沈滌華等研究表明IFABP可以作為早期腸缺血較理想的生物學(xué)指標(biāo)，國外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)NEC患兒血清I-FABP水平明顯升高，且與NCE嚴(yán)重程度有關(guān)。

Thuijls等研究發(fā)現(xiàn)重癥NEC患兒在早期血I-FABP水平即明顯升高。

當(dāng)臨床出

現(xiàn)輕度腹脹，大便隱血陽性懷疑NEC時(shí)，血、尿IFABP水平在發(fā)展成為重癥NEC的患兒

會明顯高于診斷為其他疾病和病情穩(wěn)定在NECI期或Ⅱ期的患兒。

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醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第七篇課題研究開題報(bào)告

課題名稱：科研課題管理系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)

1、選題意義和背景。

研究背景近年來，隨著教育改革的不斷深入推進(jìn)，我國教育科研事業(yè)得到了蓬勃發(fā)展，國內(nèi)各級各類教育科研機(jī)構(gòu)也涌現(xiàn)出了許多新的科研項(xiàng)目，這些科研項(xiàng)目的研究對解決教育教學(xué)中的實(shí)踐問題具有重大意義，給教育行政部門的決策選擇提供了一定的借鑒參考。然而隨著教育科研項(xiàng)目、課題的不斷增多，教育科研成果的不斷涌現(xiàn)，教育科研部門的科研管理任務(wù)也越來越繁重，基于傳統(tǒng)的“手工+紙質(zhì)”或是常規(guī)辦公軟件等管理方式己經(jīng)不能滿足目前科研管理的需求。如何加強(qiáng)科研信息的管理、提高科研質(zhì)量、降低科研成本并爭取最優(yōu)化效益，是各級各類科研管理部門當(dāng)前面臨的主要問題。隨著我國教育信息化進(jìn)程的不斷加快，教育管理信息化的深入開展為這些問題的解決帶來了新的契機(jī)，目前國內(nèi)己有部分教科研管理機(jī)構(gòu)都實(shí)現(xiàn)了業(yè)務(wù)管理的信息化，教科研管理的信息化已是大勢所趨。

陜西省教科所作為全省唯一從事教育科學(xué)研究(包括教學(xué)研究)的省級研究機(jī)構(gòu)，其主要職能之一就是承擔(dān)全省基礎(chǔ)教育和職業(yè)教育科學(xué)研究的規(guī)劃、指導(dǎo)與管理，以及教育科學(xué)研究成果的推廣與普及。陜西省是教育大省，近年來教科所承擔(dān)的教育科研課題逐年增多，課題申報(bào)數(shù)量也逐年遞增，這使得課題管理人員任務(wù)繁重，工作效率低下，導(dǎo)致課題的審理周期漫長，影響了課題研究的進(jìn)度。

研究的目的和意義

研究意義本研究是在教育信息化的背景下，結(jié)合實(shí)際情況與需要，對教育科研管理信息化途徑的探索，具有很大的意義，主要體現(xiàn)在以下五個(gè)方面：

(1)將信息化手段應(yīng)用于教科研管理工作中，有助于提高管理水平和效率，降低管理成本;

(2)改變傳統(tǒng)的教科研課題申報(bào)、評審方式，有利于課題申報(bào)者便捷地申報(bào)課題、評審專家高效公正地評審課題，排除評審過程中“人情關(guān)系”的干擾，保證評審的客觀性和公平性;

(3)實(shí)現(xiàn)了縣(區(qū))級、市級、高校、省級科研管理部門在線審核，通過多層逐級審核的方式，便于對課題研究過程的調(diào)控，提高了課題的研究質(zhì)量;

(4)課題管理系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)課題研究過程信息分類存儲、課題研究進(jìn)展及審核狀態(tài)查詢等功能，課題研究過程中的材料及最終的研究成果也會被分類存儲，形成教育科研資源庫，非常有利于科研資源的整合和成果的應(yīng)用推廣;

(5)目前國內(nèi)省級層面的教科研課題管理系統(tǒng)的建設(shè)和應(yīng)用較少，本系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)是對教科研管理信息化的探索與嘗試，對國內(nèi)類似平臺的`建設(shè)和研究具有一定的借鑒價(jià)值。

2、論文綜述/研究基礎(chǔ)。

課題管理是教育科研管理的重要組成部分。遵循教育科學(xué)研究規(guī)律，把握課題管理的基本要求，實(shí)施科學(xué)規(guī)范有效的管理，是促進(jìn)科研多出成果、出好成果的必然要求。[2]為了解目前國內(nèi)教育科研課題管理的現(xiàn)狀，筆者對國內(nèi)教科研管理機(jī)構(gòu)的設(shè)置狀況和省級教科研課題管理方式兩個(gè)方面進(jìn)行了調(diào)研，具體情況如下。C1)國內(nèi)教科研管理機(jī)構(gòu)設(shè)置狀況我國的教育科研管理部門是由上而下進(jìn)行設(shè)置的，從國家到省級再到市級和縣(區(qū))級，最后到各個(gè)學(xué)校，都設(shè)置有教育科研管理機(jī)構(gòu)，這些機(jī)構(gòu)形成了一個(gè)龐大的管理機(jī)構(gòu)體系。

在國家層面，中國教育科學(xué)研究院(前身為中央教育科學(xué)研究所)是教育部直屬的國家級綜合性教育科學(xué)研究機(jī)構(gòu)，擔(dān)負(fù)著國內(nèi)科研管理體制、運(yùn)行機(jī)制的建設(shè)任務(wù)。[3]在省級層面，教育科研管理機(jī)構(gòu)為各省的教育科學(xué)研究院或教育科學(xué)研究所，例如陜西省為陜西省教科所，其他各省(直轄市)均設(shè)置有同種類型的機(jī)構(gòu)，其業(yè)務(wù)范圍雖然因地域差異會有所不同，但其基本職責(zé)一致，主要負(fù)責(zé)全省的教育科研課題的規(guī)劃、指導(dǎo)與管理，以及科研成果的推廣與應(yīng)用。在市級和縣級層面，一般設(shè)有市教研室或縣教研室，主要負(fù)責(zé)本地區(qū)基礎(chǔ)教育科研的管理。隨著信息技術(shù)手段在教科研管理中的應(yīng)用，國內(nèi)少部分省、直轄市級教育科研機(jī)構(gòu)開始嘗試?yán)眯畔⒒氖侄螌?shí)現(xiàn)對課題的管理，具體表現(xiàn)為不同特點(diǎn)的課題管理系統(tǒng)的開發(fā)與應(yīng)用，這些已有的課題管理系統(tǒng)按照應(yīng)用方式可以分為如下兩類。

第一類主要是離線的單機(jī)課題管理系統(tǒng)，教科研管理人員在陸續(xù)收到課題的材料之后，利用系統(tǒng)記錄課題的申報(bào)信息、材料提交情況、評審狀況、經(jīng)費(fèi)使用情況以及結(jié)題情況等，并且能夠?qū)σ陨闲畔⑦M(jìn)行索引查詢。此種類型的課題管理系統(tǒng)實(shí)質(zhì)上是一個(gè)單機(jī)的軟件，只能起到存儲信息的作用，然而課題的研究是一個(gè)動態(tài)過程，相關(guān)的信息和數(shù)據(jù)會隨之變化，這就要求課題管理部門及時(shí)對課題信息進(jìn)行手動更新和調(diào)整，效率較低，此外由于這種方式只能通過定期地對數(shù)據(jù)整理來把握課題的相關(guān)信息，因此得出的數(shù)據(jù)相對滯后。

3、論文的理論依據(jù)、研究方法、研究內(nèi)容。

本研究的主要內(nèi)容包括以下幾個(gè)方面：

首先，對國內(nèi)省級教科研課題管理現(xiàn)狀進(jìn)行調(diào)研，了解目前我國各級教科研管理機(jī)構(gòu)的設(shè)置情況，把握省級教科研機(jī)構(gòu)的科研管理方式。

其次，對陜西省教科研課題管理的現(xiàn)狀和需求進(jìn)行深入調(diào)查，確定系統(tǒng)的功能流程以及用戶分類和角色，同時(shí)調(diào)研國內(nèi)已有的省級教科研課題管理系統(tǒng)，總結(jié)歸納其可借鑒的功能特點(diǎn)，制定系統(tǒng)的需求分析書。根據(jù)需求分析書對系統(tǒng)的功能模塊進(jìn)行設(shè)計(jì)，從使用者的角度出發(fā)，系統(tǒng)可分為五個(gè)模塊：用戶信息管理模塊、課題發(fā)布模塊、課題申報(bào)及材料上傳模塊、課題審核模塊及課題查閱模塊等。角色共有六大類：普通注冊會員、縣(區(qū))級科研管理員、市級科研管理員、高?？蒲泄芾韱T、教科所課題管理員及課題評審專家等，對每一模塊的功能結(jié)構(gòu)進(jìn)行詳細(xì)設(shè)計(jì)。確定系統(tǒng)開發(fā)所使用的技術(shù)、工具和數(shù)據(jù)庫的類型，并對數(shù)據(jù)庫的概念結(jié)構(gòu)、邏輯結(jié)構(gòu)以及主要的數(shù)據(jù)表結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)，最終形成系統(tǒng)的總體設(shè)計(jì)書。

最后，在系統(tǒng)總體設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)上，利用選定的開發(fā)技術(shù)和工具對系統(tǒng)的各個(gè)模塊進(jìn)行開發(fā)與實(shí)現(xiàn)，并對初步完成的系統(tǒng)進(jìn)行試運(yùn)行和測試，完善系統(tǒng)的各項(xiàng)功能。

研究方法：

(1)文獻(xiàn)研究法在論文寫作初期，筆者搜集了大量的文獻(xiàn)資料，包括教育科學(xué)研究的相關(guān)理論、教科研管理的政策文件、教科研課題管理的實(shí)施辦法、當(dāng)代教育管理理論、管理信息系統(tǒng)理論及軟件工程理論等。通過對資料的整理分析，理清了目前我國教科研課題管理的現(xiàn)狀，明確了本系統(tǒng)開發(fā)的方向。

(2)訪談法在本系統(tǒng)開發(fā)的初期，筆者多次與省教科所課題管理人員進(jìn)行交流溝通，主要了解他們開展課題管理工作的業(yè)務(wù)流程、所發(fā)布課題的類型、課題評審方式等信息，并且對他們所期望的課題管理系統(tǒng)應(yīng)具有的功能進(jìn)行了詳細(xì)的訪談，以此為依據(jù)制定了系統(tǒng)的需求分析。在后期的設(shè)計(jì)及開發(fā)過程中，階段性地進(jìn)行溝通協(xié)商，及時(shí)解決存在的問題。

(3)結(jié)構(gòu)化開發(fā)方法本文總體上遵循了軟件工程開發(fā)的方法和思想，具體按照結(jié)構(gòu)化開發(fā)方法的原則和步驟，對系統(tǒng)進(jìn)行了設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)。

4、研究條件和可能存在的問題。

在系統(tǒng)的兼容性方面，由于系統(tǒng)的開發(fā)技術(shù)及工具較新，系統(tǒng)中的小部分內(nèi)容在IE9版本以下的游覽器中瀏覽時(shí)會出現(xiàn)界面的不兼容現(xiàn)象，但不影響正常功能的使用;

在功能方面，雖然課題管理的基本業(yè)務(wù)流程能夠滿足，但是總體來講不夠完善，例如缺少課題經(jīng)費(fèi)管理、用戶的支持服務(wù)等功能，需要在后續(xù)的工作中繼續(xù)進(jìn)行開發(fā)完善。

預(yù)期的結(jié)果。

2.梳理了陜西省教科研課題管理部門的科研管理流程及業(yè)務(wù)范圍，對教科研課題管理系統(tǒng)的需求進(jìn)行了分析;

3.根據(jù)需求分析對系統(tǒng)的各個(gè)功能模塊進(jìn)行了詳細(xì)設(shè)計(jì)，以流程圖的形式展現(xiàn)各個(gè)子模塊的工作過程。在數(shù)據(jù)庫設(shè)計(jì)部分，分析了系統(tǒng)中所需要用到的各項(xiàng)信息以及各項(xiàng)信息的屬性，并對概念結(jié)構(gòu)、邏輯結(jié)構(gòu)及物理結(jié)構(gòu)三個(gè)階段進(jìn)行了詳細(xì)的設(shè)計(jì)，最終定義了各個(gè)數(shù)據(jù)庫表的結(jié)構(gòu)和字段，并對各個(gè)表的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了詳細(xì)的設(shè)計(jì)

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醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第八篇醫(yī)院科研工作總結(jié)首先，**院長以“加快醫(yī)院科研及學(xué)科建設(shè)發(fā)展”為題作了**醫(yī)院科研學(xué)科工作匯報(bào)。報(bào)告中，***院長首先提出了“十二.五”期間醫(yī)院科研、學(xué)科建設(shè)總體目標(biāo)及20**年工作重點(diǎn)及目標(biāo)?？傮w目標(biāo)主要體現(xiàn)在“新增省部級工程中心和重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室”、“申報(bào)省部級創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)”“新增省級重點(diǎn)學(xué)科”“力爭科研項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)、SCI論文數(shù)及國家級、省部級獎項(xiàng)的突破”等幾個(gè)方面。工作重點(diǎn)在于啟動醫(yī)院重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)，新一輪省級重點(diǎn)學(xué)科申報(bào)及建設(shè)工作;科技平臺、課題、專利及成果申報(bào);完善科技評估體系及科室科研考核辦法;加強(qiáng)優(yōu)秀青年科技者培養(yǎng)，設(shè)立青年基金;加強(qiáng)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心的建設(shè);積極開展學(xué)術(shù)交流。緊接著，***院長又做了題為“加快組織臨床與基儲醫(yī)學(xué)與工科結(jié)合的科研團(tuán)隊(duì)的實(shí)施方案”的報(bào)告，分別就“創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)”“特色基地建設(shè)”“加強(qiáng)學(xué)科交叉”等做了闡述。最后，***院長還指出了醫(yī)院目前大團(tuán)隊(duì)意識、科研管理能力不強(qiáng)、思路欠清晰等問題。希望學(xué)?？茖W(xué)研究部重視***院科研工作的開展，將***院作為臨床與基儲醫(yī)學(xué)與工科、文科結(jié)合的試驗(yàn)田。

接下來，中南大學(xué)科學(xué)研究部8位主任、副主任分別做了簡短發(fā)言，對***院科研方面取得的成績表示祝賀、鼓舞，同時(shí)也指出了醫(yī)院目前工作中存在的問題，并針對這些問題提出了建設(shè)性的建議。

隨后，院長陳方平發(fā)表了講話，他說道：***院建院時(shí)間短，實(shí)力相對較弱，要發(fā)揮比較優(yōu)勢、走差異化道路;要理清思路、明確目標(biāo)、強(qiáng)化理念，爭創(chuàng)特色型、服務(wù)型、效率型的三型醫(yī)院;要堅(jiān)持六抓六提升及醫(yī)院“十二.五”發(fā)展的三大重點(diǎn)工程建設(shè);要建立學(xué)科、人才培養(yǎng)，平臺建設(shè)的大思維;要創(chuàng)新思維、強(qiáng)調(diào)“大湘雅”“大醫(yī)學(xué)”的概念;要堅(jiān)持鼓勵學(xué)科交叉，形成大團(tuán)隊(duì)，整合優(yōu)勢去參與競爭。最后，陳院長還表示“***院很年輕、很有活力，前進(jìn)的欲望非常強(qiáng)烈，希望學(xué)校繼續(xù)支持，經(jīng)常指導(dǎo)***院的科研工作”。

會后，各學(xué)科主任紛紛表示受益匪淺，李啟厚副處長的講座更是使他們轉(zhuǎn)變了觀念、明確了目標(biāo)、開拓了思路、深化了科研理念，今后的工作中他們將更加重視科研工作及學(xué)科間的`交叉整合，爭取用更多的科研成果、科技獎勵為***院乃至中南大學(xué)的發(fā)展添磚加瓦!

醫(yī)學(xué)課題研究設(shè)計(jì)模板范文第九篇一、科研課題開題報(bào)告的含義與作用

著名的物理學(xué)家愛因斯坦說過，提出一個(gè)問題比解決一個(gè)問題更重要。

何謂有價(jià)值、有創(chuàng)見性的問題?這樣的問題從何而來呢?這需要研究者長期實(shí)踐、細(xì)心觀察和深思熟慮。當(dāng)課題或自己提出的問題贏得社會認(rèn)可后，就要把自己的研究方案設(shè)計(jì)好，即撰寫科研課題開題報(bào)告。

科研課題開題報(bào)告(研究設(shè)計(jì))就是課題研究方案的設(shè)計(jì)、規(guī)劃和制定。換言之，就是當(dāng)課題方向確定之后，課題負(fù)責(zé)人在調(diào)查研究的基礎(chǔ)上撰寫的報(bào)請上級批準(zhǔn)的選題計(jì)劃。開題報(bào)告主要說明這個(gè)課題有價(jià)值進(jìn)行研究，自己有條件進(jìn)行研究以及準(zhǔn)備如何開展研究等問題，也可以說是對課題的論證和設(shè)計(jì)。

撰寫科研課題開題報(bào)告是提高選題質(zhì)量和水平的重要環(huán)節(jié)，正如學(xué)者文翁說過，“搞好開題報(bào)告的主要目的是促使大家理清研究思路，完善研究設(shè)計(jì)”。制定課題研究計(jì)劃和安排，是為解決自己提出的問題提供探索的途徑?？蒲姓n題開題報(bào)告，它初步規(guī)定了課題研究各方面的具體內(nèi)容和步驟，對整個(gè)研究工作的順利開展起著關(guān)鍵的作用。對于科研經(jīng)驗(yàn)較少的人來講，一個(gè)好的方案，可以使他們明確課題研究的方向，避免發(fā)生進(jìn)行一段時(shí)間后不知道下一步干什么的情況，保證整個(gè)研究工作有條不紊地進(jìn)行?？梢哉f，課題開題報(bào)告水平的高低，是一個(gè)課題質(zhì)量與水平的重要反映。沒有科學(xué)的開題報(bào)告(研究設(shè)計(jì))，就沒有科學(xué)而有價(jià)值的成果

二、撰寫科研課題開題報(bào)告的基礎(chǔ)性工作

寫好科研課題開題報(bào)告要了解它們的基本結(jié)構(gòu)與寫法，但“汝果欲學(xué)詩，功夫在詩外”，重要的還是要做好基礎(chǔ)性工作。首先，要了解別人在這一領(lǐng)域研究的基本情況。研究工作最根本的特點(diǎn)就是要有創(chuàng)造性，熟悉