GB+27951-2021皮膚消毒劑技術(shù)要求

CCSC50中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB27951—2021代替皮膚消毒劑通用要求G國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)GB27951—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替GB27951—2011《皮膚消毒劑衛(wèi)生要求》，與GB27951—2011相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：—增加和刪除了部分規(guī)范性引用文件（見(jiàn)第2章，2011年版的第2章—更改了完整皮膚的定義（見(jiàn)3.3);—增加了原料要求（見(jiàn)第4章—?jiǎng)h除了完整皮膚和破損皮膚常用消毒劑種類(lèi)（見(jiàn)2011年版的4.1.1、4.1.2);—修訂產(chǎn)品質(zhì)量要求為技術(shù)要求（見(jiàn)第5章—增加了毒理學(xué)指標(biāo)表2中的多次皮膚刺激性試驗(yàn)，刪除了表2中的急性眼刺激試驗(yàn)、皮膚變態(tài)—增加了抗生素、抗真菌、抗病毒藥物等測(cè)定要求（見(jiàn)6.3.3);—標(biāo)簽和說(shuō)明書(shū)、注意事項(xiàng)合并為標(biāo)識(shí)（見(jiàn)第8章）。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)提出并歸口。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：—2011年首次發(fā)布為GB27951—2011;—本次為第一次修訂。Ⅰ1GB27951—2021皮膚消毒劑通用要求本文件規(guī)定了皮膚消毒劑的原料要求、技術(shù)要求、檢驗(yàn)方法、使用方法、標(biāo)識(shí)。本文件適用于完整皮膚和破損皮膚消毒的消毒劑。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T26367胍類(lèi)消毒劑衛(wèi)生要求GB/T26368含碘消毒劑衛(wèi)生要求GB/T26369季銨鹽類(lèi)消毒劑衛(wèi)生要求GB/T26371過(guò)氧化物類(lèi)消毒液衛(wèi)生要求GB/T26373醇類(lèi)消毒劑衛(wèi)生要求GB/T27947酚類(lèi)消毒劑衛(wèi)生要求GB28234酸性電解水生成器衛(wèi)生要求GB/T36758含氯消毒劑衛(wèi)生要求GB38598消毒產(chǎn)品標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)通用要求WS628消毒產(chǎn)品衛(wèi)生安全評(píng)價(jià)技術(shù)要求WS/T684消毒劑與抗抑菌劑中抗菌藥物檢測(cè)方法與評(píng)價(jià)要求WS/T685消毒劑與抗抑菌劑中抗真菌藥物檢測(cè)方法與評(píng)價(jià)要求WS/T686消毒劑與抗抑菌劑中抗病毒藥物檢測(cè)方法與評(píng)價(jià)要求消毒技術(shù)規(guī)范(2002年版）衛(wèi)生部中華人民共和國(guó)藥典(2020年版）國(guó)家藥典委員會(huì)化妝品安全技術(shù)規(guī)范(2015年版）國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1皮膚消毒殺滅或清除人體皮膚上的病原微生物，并達(dá)到消毒要求。3.2皮膚消毒劑用于人體皮膚上消毒的制劑。3.3完整皮膚人體表面無(wú)損傷的皮膚。2GB27951—20213.4破損皮膚人體表面有損傷的皮膚。4原料要求用于皮膚消毒的胍類(lèi)消毒劑應(yīng)符合GB/T26367的要求；含碘消毒劑應(yīng)符合GB/T26368的要求；季銨鹽類(lèi)消毒劑應(yīng)符合GB/T26369的要求；過(guò)氧化物類(lèi)消毒劑應(yīng)符合GB/T26371的要求；醇類(lèi)消毒劑應(yīng)符合GB/T26373的要求；酚類(lèi)消毒劑應(yīng)符合GB/T27947的要求；酸性電解水應(yīng)符合GB28234的要求；次氯酸消毒液應(yīng)符合GB/T36758的要求，以及其他符合有關(guān)規(guī)定的有效成分。4.2其他輔料或非消毒成分應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)藥典》及消毒產(chǎn)品相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范要求。應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)藥典》中純化水的要求。5技術(shù)要求值、穩(wěn)定性等理化指標(biāo)應(yīng)符合產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，有效期在12個(gè)月以上。5.2微生物指標(biāo)霉菌和酵母菌不得檢出溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌等致病性化膿菌；破損皮膚使用的消毒劑應(yīng)無(wú)菌。5.2.2殺滅微生物指標(biāo)依據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)按最低使用濃度和最短作用時(shí)間設(shè)計(jì)微生物殺滅試驗(yàn)，結(jié)果應(yīng)符合表1的要求。表1殺滅微生物指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)作用時(shí)間a/懸液定量殺滅對(duì)數(shù)值載體定量殺滅對(duì)數(shù)值金黃色葡萄球菌(ATCC6538)殺滅試驗(yàn)≤5.0≥5.00≥3.00銅綠假單胞菌(ATCC5442)殺滅試驗(yàn)≤5.0≥5.00≥3.00白色念珠菌(ATCC10231)殺滅試驗(yàn)≤5.0≥4.00≥3.00皮膚現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)（自然菌）≤5.0≥1.0ba注射或穿刺部位皮膚消毒時(shí)間≤1b皮膚現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)術(shù)前皮膚消毒后殘留菌數(shù)≤5.03GB27951—20215.3安全性要求依據(jù)WS628和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行毒理學(xué)試驗(yàn)，結(jié)果應(yīng)符合表2的要求。表2毒理學(xué)指標(biāo)項(xiàng)目判定指標(biāo)急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)實(shí)際無(wú)毒或低毒一次破損皮膚刺激試驗(yàn)（破損皮膚消毒劑，應(yīng)進(jìn)行該試驗(yàn)）無(wú)刺激或輕度刺激一次皮膚刺激性試驗(yàn)（偶爾用）無(wú)刺激或輕度刺激多次皮膚刺激性試驗(yàn)（反復(fù)用）無(wú)刺激或輕度刺激一項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)陰性注：偶爾用指偶爾使用或間隔數(shù)日使用；反復(fù)用指每日使用或連續(xù)數(shù)日使用。鉛的含量汞的含量包括各種處方藥成分如抗生素、抗真菌、抗病毒藥物、激素等以及同名原料和衛(wèi)生行政部門(mén)規(guī)定的禁用物質(zhì)。6檢驗(yàn)方法6.1理化指標(biāo)的測(cè)定有效成分含量按相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行測(cè)定。值的測(cè)定按《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版）的方法進(jìn)行測(cè)定。按《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版）的方法進(jìn)行測(cè)定。6.2微生物指標(biāo)的檢驗(yàn)6.2.1微生物污染指標(biāo)檢驗(yàn)菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌、致病菌及無(wú)菌檢驗(yàn)按附錄A執(zhí)行。6.2.2殺滅微生物試驗(yàn)按《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版）、相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行測(cè)定。4GB27951—20216.3安全性要求檢驗(yàn)按《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版）、相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行測(cè)定。按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版）的方法進(jìn)行測(cè)定。按WS/T684、WS/T685、WS/T686等方法進(jìn)行測(cè)定。7使用方法霉菌和酵母菌不得檢出溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌；使用中破損皮膚消毒劑應(yīng)符合出廠(chǎng)要求；懷疑感染與皮膚消毒劑有關(guān)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行目標(biāo)微生物檢驗(yàn)，有污染時(shí)不得使用。適用于皮膚擦拭、沖洗、噴灑，常用皮膚消毒劑推薦使用劑量與方法見(jiàn)附錄B。8.1標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)應(yīng)符合GB38598的要求。8.2皮膚消毒劑應(yīng)用液葡萄糖酸氯己定或醋酸氯己定含量≤45g/L,三氯羥基二苯醚消毒劑有效含量8.3避免與拮抗藥物同用。8.4過(guò)敏者慎用。8.5有效期內(nèi)使用。8.6使用碘酊消毒后，應(yīng)脫碘。8.7外用消毒劑，不得口服，置于兒童不易觸及處。8.9儲(chǔ)存應(yīng)符合GB/T26371、GB/T26373要求，易燃易爆者，遠(yuǎn)離火源。5GB27951—2021附錄A（規(guī)范性）微生物污染指標(biāo)檢驗(yàn)方法A.1菌落總數(shù)檢測(cè)方法A.1.1.4胰蛋白凍大豆肉湯培養(yǎng)基(TPS)、普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、經(jīng)中和劑鑒定試驗(yàn)合格的中和劑。A.1.2.1樣品處理：取消毒劑5.0mL(g),加入到45.0mL經(jīng)中和劑鑒定試驗(yàn)合格的中和劑的無(wú)菌TPSA.1.2.2操作步驟：用無(wú)菌吸管吸取1∶10稀釋液2mL,分別注入兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)，每皿1mL。另取1mL注入9mL無(wú)菌TPS試管中，并震蕩20s或振打80次，充分混勻，制成1∶100稀釋液。吸取2mL,分別注入兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)，每皿1mL。如樣品含菌量高，還可再繼續(xù)稀釋?zhuān)糠N稀釋度應(yīng)換1支吸管。將融化并冷至45℃~50℃的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注到平皿內(nèi)，每皿約15mL,隨即轉(zhuǎn)動(dòng)平板，使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h±2h。另取一個(gè)不加樣品的無(wú)菌平皿，加入約15mL普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h±2h,為空白對(duì)照。A.1.2.3結(jié)果報(bào)告：先用肉眼觀(guān)察，點(diǎn)數(shù)菌落數(shù)，然后再用放大5倍~10倍的放大鏡檢查，以防遺漏。記下各平板的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度各平板生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)。判定結(jié)果時(shí)，應(yīng)選取菌落數(shù)在30個(gè)~300個(gè)范圍之內(nèi)的平板計(jì)數(shù)，乘以稀釋度報(bào)告1mL(g)消毒劑中所含菌落的總數(shù)(CFU),以CFU/mL(g)表示。若所有的稀釋度均無(wú)菌生長(zhǎng)，報(bào)告數(shù)為<10CFU/mL(g)。A.2霉菌和酵母菌檢測(cè)方法A.2.1.1壓力蒸汽滅菌器、潔凈工作臺(tái)、28℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱。A.2.1.4胰蛋白凍大豆肉湯培養(yǎng)基(TPS)、沙堡羅瓊脂培養(yǎng)基、經(jīng)中和劑鑒定試驗(yàn)合格的中和劑。A.2.2試驗(yàn)步驟mL分別注入無(wú)菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度接種2個(gè)平皿，注入融化并冷至45℃~50℃的沙堡羅瓊脂培養(yǎng)基，充分搖勻。凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置28℃±1℃培養(yǎng)72h±2h,計(jì)數(shù)平板內(nèi)生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌數(shù)。若有霉菌蔓延生長(zhǎng)，為避免影響其他霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)時(shí)，于48h±2h應(yīng)及時(shí)將此平板取出計(jì)數(shù)。另取一個(gè)不加樣品的無(wú)菌平皿，加入約15mL沙堡羅瓊。6GB27951—2021A.2.2.3脂培養(yǎng)基，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置28℃±1℃培養(yǎng)72h±2h,為空白對(duì)照。A.2.2.4結(jié)果報(bào)告：先點(diǎn)數(shù)每個(gè)平板上生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌菌落數(shù)，求出每個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)。判定結(jié)果時(shí)，應(yīng)選取菌落數(shù)在10CFU~150CFU的平板計(jì)數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)即為每毫升（或每克）消毒劑中所含的霉菌和酵母菌數(shù)。以CFU/mL(g)表示。若所有的稀釋度均無(wú)菌生長(zhǎng)，報(bào)告數(shù)為A.3致病菌檢測(cè)方法A.3.1金黃色葡萄球菌檢測(cè)方法增菌培養(yǎng)A.3.1.2.3分離培養(yǎng)：自上述增菌培養(yǎng)液中，取1~2接種環(huán)培養(yǎng)24h~48h。本菌在血瓊脂平板上菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周?chē)腥苎Α.3.1.2.4染色鏡檢：挑取分純菌落，涂片，進(jìn)行革蘭染色，鏡檢。金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽(yáng)性菌，排列成葡萄狀，無(wú)芽孢，無(wú)夾膜，致病性葡萄球菌，菌體較小，直徑約為0.5μm~1μm。A.3.1.2.5甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述可疑菌落接種于甘露醇培養(yǎng)基，于36℃±1℃培養(yǎng)24h,發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸者為陽(yáng)性?！?h肉湯培養(yǎng)物0.5mL?；靹颍?6℃±1℃恒溫箱或恒溫水浴中，每30min觀(guān)察一次，6h之內(nèi)如呈現(xiàn)凝塊即為陽(yáng)性。同時(shí)以已知血漿凝固酶陽(yáng)性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物及肉湯培養(yǎng)基各0.5mL,分別加入無(wú)菌1∶4血漿0.5mL,混勻，作為對(duì)照。凡在上述選擇平板上有可疑菌落生長(zhǎng)，經(jīng)染色鏡檢，證明為革蘭陽(yáng)性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性者，可報(bào)告檢出金黃色葡萄球菌。A.3.2銅綠假單胞菌檢測(cè)方法壓力蒸汽滅菌器恒溫培養(yǎng)箱(A.3.2.1.4普通肉湯、十六烷基三甲基溴化銨培養(yǎng)基、綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基、明膠培養(yǎng)基、硝酸鹽蛋白陳水培養(yǎng)基、普通瓊脂斜面培養(yǎng)基、1%二甲基對(duì)苯二胺溶液。GB27951—2021增菌培養(yǎng)取樣品稀釋液接種到倍濃縮的普通肉湯中。置1℃培養(yǎng)18h~24h。如有銅綠假單胞菌生長(zhǎng)，培養(yǎng)液表面多有一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。A.3.2.2.3分離培養(yǎng)：從培養(yǎng)液的薄膜處挑取培養(yǎng)物，劃線(xiàn)接種在十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板上，置36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基上其菌落扁平無(wú)定型，向周邊擴(kuò)散或略有蔓延，表面濕潤(rùn)，菌落呈灰白色，菌落周?chē)囵B(yǎng)基常擴(kuò)散有水溶性綠色色素。A.3.2.2.4染色鏡檢：挑取可疑菌落，涂片，革蘭染色，鏡檢為革蘭陰性菌者應(yīng)進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)。A.3.2.2.5氧化酶試驗(yàn)：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無(wú)菌玻璃棒挑取銅綠假單胞菌可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對(duì)苯二胺溶液，在15s~30s之內(nèi)，出現(xiàn)粉紅色或紫紅色時(shí)，為氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性；若培養(yǎng)物不變色，為氧化酶試驗(yàn)陰性。A.3.2.2.6綠膿菌素試驗(yàn)：取可疑菌落2個(gè)~3個(gè)，分別接種在綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基上，置36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h,加入氯仿3mL~5mL,充分振蕩使培養(yǎng)物中的綠膿菌素溶解于氯仿液內(nèi)，待氯仿提取液呈藍(lán)色時(shí)，用吸管將氯仿移到另一試管中并加入1mol/L的鹽酸1mL左右，振蕩后，靜置片刻。如上層鹽酸液內(nèi)出現(xiàn)粉紅色到紫紅色時(shí)為陽(yáng)性，表示被檢物中有綠膿菌素存在。A.3.2.2.7硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養(yǎng)物，接種在硝酸鹽蛋白陳水培養(yǎng)基中，置36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h,觀(guān)察結(jié)果。凡在硝酸鹽陳水培養(yǎng)基內(nèi)的小倒管中有氣體者，即為陽(yáng)性，表明該菌能還原硝酸鹽，并將亞硝酸鹽分解產(chǎn)生氮?dú)?。A.3.2.2.8明膠液化試驗(yàn)：挑取可疑銅綠假單胞菌的純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h,取出放冰箱10min~30min,如仍呈溶解狀或表面溶解時(shí)即為明膠液化試驗(yàn)陽(yáng)性；如凝固不溶者為陰性。A.3.2.2.942℃生長(zhǎng)試驗(yàn)：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，放在42℃±1℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24h~48h,銅綠假單胞菌能生長(zhǎng)，為陽(yáng)性，而同屬的熒光假單胞菌則不能生長(zhǎng)。被檢消毒劑經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實(shí)為革蘭陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素試驗(yàn)均為陽(yáng)性者，即可報(bào)告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌；如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)三者為陽(yáng)性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌。A.3.3乙型溶血性鏈球菌檢測(cè)方法壓力蒸汽滅菌器恒溫培養(yǎng)箱。肽紙片。7GB27951—2021增菌培養(yǎng)取樣品稀釋夜接種到倍濃縮的葡萄糖肉湯培養(yǎng)A.3.3.2.3分離培養(yǎng)：從培養(yǎng)液的薄膜處挑取培養(yǎng)物，劃線(xiàn)接種在血平板上，置36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。乙型溶血性鏈球菌在血平板上菌落形態(tài)為灰白色、半透明或不透明、針尖狀突起、表面光滑、邊緣整齊、周?chē)笑氯苎?。A.3.3.2.4染色鏡檢：挑取可疑的菌落，涂片，革蘭染色，鏡下為革蘭陽(yáng)性、呈鏈狀排列的球菌。A.3.3.2.5觸酶試驗(yàn)：用接種環(huán)挑取培養(yǎng)18h~24h單個(gè)菌落放在潔凈玻片上，用滴管在玻片的細(xì)菌上滴加30%H2O2（操作順序不能顛倒，否則易出現(xiàn)假陽(yáng)性）立刻觀(guān)察有無(wú)冒泡，并記錄結(jié)果，有氣泡者為陽(yáng)性，乙型溶血性鏈球菌呈陰性。A.3.3.2.6鏈激酶試驗(yàn)：吸取草酸鉀血漿0.2mL(0.02g草酸鉀加5mL人血漿混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清加入無(wú)菌肉湯培養(yǎng)物和氯化鈣混勻，放入36℃±1℃水浴中，每2min觀(guān)察一次（一般10min內(nèi)可凝固待血漿凝固后繼續(xù)觀(guān)察并記錄溶化的時(shí)間，如2h內(nèi)不溶化，移入培養(yǎng)箱觀(guān)察24h的結(jié)果，如全部溶化為陽(yáng)性；24h仍不溶解者為陰性。A.3.3.2.7桿菌肽敏感試驗(yàn)：將被檢菌濃菌液涂于血平板上，用無(wú)菌鑷子取含0.04單位桿菌肽紙片放在平板表面上。同時(shí)以已知陽(yáng)性菌株作對(duì)照，于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h,有抑菌帶者為陽(yáng)性。被檢消毒劑經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，經(jīng)證實(shí)為革蘭陽(yáng)性、呈鏈狀排列的球菌，觸酶陰性、鏈激酶試驗(yàn)陽(yáng)性、對(duì)桿菌肽敏感者，即可報(bào)告為檢出乙型溶血性鏈球菌。A.4無(wú)菌檢驗(yàn)A.4.1.2無(wú)菌試驗(yàn)用真菌培養(yǎng)基（以下簡(jiǎn)稱(chēng)真菌培養(yǎng)基）。A.4.1.4100級(jí)潔凈室或100級(jí)層流超凈工作臺(tái)（以下分別簡(jiǎn)稱(chēng)潔凈室與超凈臺(tái)）。A.4.2采樣前準(zhǔn)備采樣后進(jìn)行培養(yǎng)。平均菌落數(shù)≤1.0CFU/平板為合格。A.4.2.2需氧-厭氧培養(yǎng)基培養(yǎng)性能檢查：接種1.0mL含10個(gè)以下的藤黃微球菌［菌懸液置培養(yǎng)后含個(gè)以下的生孢梭菌菌懸液置同樣條件亦應(yīng)生長(zhǎng)良好。A.4.2.3真菌培養(yǎng)基培養(yǎng)性能檢驗(yàn)：接種1.0mL含50CFU以下的白色念珠菌［candidaalbicans，菌懸液置培養(yǎng)后應(yīng)生長(zhǎng)良好。A.4.2.4中和劑無(wú)菌檢查：于無(wú)菌檢查前3d,向需氧-厭氧菌培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基內(nèi)各接種1.0mL中和劑，分別置30℃~35℃與20℃~25℃條件下，培養(yǎng)72h后應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。A.4.2.5培養(yǎng)基無(wú)菌檢查：于無(wú)菌檢查3d,將未種菌的需氧-厭氧菌培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基分別置與條件下培養(yǎng)后應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。A.4.2.6陽(yáng)性對(duì)照菌懸液制備：于無(wú)菌試驗(yàn)前一天，取金黃色葡萄球菌[CMCC(B)26003]普通瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物1接種環(huán)，接種于需氧-厭氧菌培養(yǎng)基內(nèi)，在30℃~35℃培養(yǎng)16h~18h備用。用時(shí)以89GB27951—2021A.4.2.7無(wú)菌室與試驗(yàn)臺(tái)消毒：對(duì)無(wú)菌室地面與桌面以及試驗(yàn)臺(tái)臺(tái)面擦凈消毒后，將無(wú)菌試驗(yàn)用的培養(yǎng)基、洗脫液、供試品及其他需用器材放妥。開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈消毒1h。A.4.3試驗(yàn)步驟A.4.3.1工作人員穿戴無(wú)菌隔離衣、帽、口罩、鞋后進(jìn)入無(wú)菌室，用75%乙醇消毒雙手。A.4.3.2將供試品外包裝用75%乙醇擦拭消毒后放于試驗(yàn)臺(tái)上。A.4.3.4取1∶10稀釋的樣品7mL分別接種到于需氧-厭氧培養(yǎng)管5管與真菌培養(yǎng)管2管，每管含培養(yǎng)基9mL,在其中一支加有樣本的需氧-厭氧菌培養(yǎng)管中接種1.0mL金黃色葡萄球菌稀釋?xiě)乙鹤鳛殛?yáng)性對(duì)照。取需氧-厭氧培養(yǎng)管與真菌培養(yǎng)管各1支，打開(kāi)蓋（或塞）置試驗(yàn)臺(tái)上，直至樣本無(wú)菌檢查試驗(yàn)完畢。蓋上蓋（或塞）與供試品一起培養(yǎng)，作為陰性對(duì)照。A.4.3.5將上述接種消毒劑稀釋液