降糖類口服液甲苯磺丁脲等5種非法添加物基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制

背景介紹伴隨人們生活條件的改善與健康意識的增強(qiáng)，降糖類保健品的市場越來越大。面對高額利潤誘惑，不法商販在保健品中超劑量添加價(jià)格低廉、副作用明顯的降糖類西藥，增強(qiáng)產(chǎn)品功效，給國民身體健康造成了嚴(yán)重威脅。保健品中非法添加藥物檢測數(shù)據(jù)質(zhì)量直接關(guān)系到保健品市場的監(jiān)管和健康發(fā)展，本文研制降糖口服液基體中5種常見違禁藥物的基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，能夠有效保障檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠，一致可比，有效提升實(shí)驗(yàn)室的檢測能力，助力保健品市場監(jiān)管。

文章亮點(diǎn)01.采用添加法制備了降糖類口服液中甲苯磺丁脲、馬來酸羅格列酮、格列本脲、格列喹酮和瑞格列奈基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物；02.制備的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均勻性和穩(wěn)定性均良好；03.該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可用于食品檢測實(shí)驗(yàn)室相關(guān)項(xiàng)目的方法開發(fā)、日常檢測質(zhì)量控制、以及實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證等領(lǐng)域，保證實(shí)驗(yàn)室檢測數(shù)據(jù)質(zhì)量，提升檢測能力。圖文介紹1實(shí)驗(yàn)部分1.1

主要儀器與試劑1.2

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制1.3

基本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備取空白口服液樣品以8000r/min離心10min，除去沉淀以及不溶物，收集上層樣品。按照圖1流程圖制備保健品中甲苯磺丁脲、馬來酸羅格列酮、格列本脲、格列喹酮、瑞格列奈的候選物，充氮進(jìn)行分裝，共分裝170瓶，10g/瓶。1.4

樣品前處理1.5

液相色譜條件2結(jié)果與討論2.1

定值方法建立2.1.1

流動相及色譜條件的選擇由圖2可以看出，方法1中格列喹酮和瑞格列奈無法分離，方法1和方法2中甲苯磺丁脲無法與基質(zhì)干擾完全分離，干擾準(zhǔn)確定量，這兩種方法洗脫時(shí)間均較長，分析效率低。在方法3和4條件下5中化合物能夠得到很好的分離度且峰形較對稱，因方法4的洗脫時(shí)間更短，檢測效率更高，所以確定儀器方法為方法4。2.1.2

針筒過濾器（微孔濾膜）的選擇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)候選物為中藥口服液，基質(zhì)干擾雜質(zhì)較多，需要使用過濾器對樣品進(jìn)行凈化。因?yàn)榍疤幚韺?shí)驗(yàn)中提取劑為甲醇，所以選擇尼龍（Nylon）、聚醚砜（PES）、聚四氟乙烯（PTFE）3種過濾器進(jìn)行比較。由圖3可看出，尼龍膜對于馬來酸羅格列酮有明顯的吸附，聚醚砜膜對瑞格列奈有明顯的吸附，而聚四氟乙烯膜對于5種目標(biāo)物都沒有吸附，所以選擇聚四氟乙烯過濾膜對樣品進(jìn)行凈化。2.1.3

定量校準(zhǔn)方法的比較為了提高標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的準(zhǔn)確性，本文比較研究標(biāo)準(zhǔn)曲線法、單點(diǎn)校準(zhǔn)法、基質(zhì)匹配單點(diǎn)校準(zhǔn)法對定量結(jié)果的影響。結(jié)果如圖4所示，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法和單點(diǎn)校準(zhǔn)法進(jìn)行校正時(shí)，因?yàn)槭芑|(zhì)的影響，校正結(jié)果偏高，基質(zhì)匹配單點(diǎn)校準(zhǔn)法得到的結(jié)果比其他兩種方法更接近添加值，校正得到的結(jié)果準(zhǔn)確度更高，因此以基質(zhì)匹配單點(diǎn)校準(zhǔn)法作為定量校準(zhǔn)方法。2.1.4

定值方法驗(yàn)證取空白口服液，分別添加低、中、高濃度的甲苯磺丁脲、馬來酸羅格列酮、格列本脲、格列喹酮、瑞格列奈標(biāo)準(zhǔn)溶液。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。2.2

均勻性檢測結(jié)果圖5為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中格列喹酮的均勻性結(jié)果歸一化后的分布圖。由圖可知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中格列喹的均勻性良好。2.3

短期穩(wěn)定性檢驗(yàn)由于本樣品的長期穩(wěn)定性監(jiān)測還未完成6個(gè)月監(jiān)測，本部分僅報(bào)道短期穩(wěn)定性監(jiān)測結(jié)果。在4

℃條件下，分別監(jiān)測0、2、4、6、14d，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取兩瓶樣品，依次轉(zhuǎn)移到參考溫度條件（-20

℃）保存。2.4

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值

定值結(jié)果由單一實(shí)驗(yàn)室的不同分析者進(jìn)行測定得到，取獨(dú)立測量數(shù)據(jù)的平均值作為定值結(jié)果，2組獨(dú)立測量數(shù)據(jù)經(jīng)夏皮羅-威爾克法檢驗(yàn)為正態(tài)性，用狄克法和格拉布斯法判定沒有離群值。2.5

定值不確定度評估

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值的不確定度主要由定值過程引入的不確定度、均勻性引入的不確定度ubb及穩(wěn)定性引入的不確定度uss組成。2.5.1

定值過程引入的不確定度ur2.5.2

均勻性引入的不確定度瓶間不均勻性引入的不確定度ubb

=0.1（mg/kg）/19.7（mg/kg）

=0.51%。2.5.3

穩(wěn)定性引入的不確定度短期穩(wěn)定性不確定度uss

=0.1（mg/kg）/19.7（mg/kg）

=0.51%。2.5.4

合成標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值不確定度3結(jié)論本研究研制了降糖類口服液中甲苯磺丁脲、馬來酸羅格列酮、格列本脲、格列喹酮、瑞格列奈基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，均勻性良好，冷藏條件下穩(wěn)定性良好，通過優(yōu)化建立的高