湖北省襄陽市四校2025屆高三第六次模擬考試生物試卷含解析

湖北省襄陽市四校2025屆高三第六次模擬考試生物試卷注意事項：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項的答案信息點涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．如圖為突觸傳遞示意圖，下列敘述正確的是（）A．①和③都是神經(jīng)元細(xì)胞膜的一部分B．②釋放到突觸間隙的過程中①膜面積增大C．②在突觸間隙中運送到④處需消耗能量D．②與④結(jié)合使③的膜電位呈外負(fù)內(nèi)正2．下列有關(guān)生物進(jìn)化理論的敘述。錯誤的是（）A．與自然選擇學(xué)說相比，現(xiàn)代生物進(jìn)化理論解釋了遺傳和變異的本質(zhì)B．現(xiàn)代生物進(jìn)化理論認(rèn)為生物進(jìn)化以種群為單位、以可遺傳變異為基礎(chǔ)C．新物種的形成一般離不開變異、選擇和隔離三個基本環(huán)節(jié)D．生物變異和進(jìn)化的不定向性，導(dǎo)致生物具有多樣性和適應(yīng)性3．今年肆掠非洲的蝗災(zāi)，其罪魁禍?zhǔn)资且环N棲息在沙漠中的短角蝗蟲——沙漠蝗。沙漠蝗飛行能力強(qiáng)、食量大，繁殖速度快，可聚集形成巨大蝗群，每平方公里大約40萬至8000萬只，1平方公里規(guī)模的蝗群一天進(jìn)食量相當(dāng)于1．5萬人一天進(jìn)食量。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．今年因雨水充沛，沙漠蝗種群數(shù)量呈“J”型增長B．沙漠蝗個體在水平方向的分布構(gòu)成了群落的水平結(jié)構(gòu)C．沙漠蝗數(shù)量多、食量大，啃食后的農(nóng)田由于遭到嚴(yán)重破壞將進(jìn)行初生演替D．利用信息素誘捕沙漠蝗雄蟲降低出生率屬于生物防治4．小麥種子萌發(fā)過程中，α-淀粉酶在糊粉層的細(xì)胞中合成，在胚乳中用于分解淀粉。該酶從糊粉層細(xì)胞排到細(xì)胞外的方式是（）A．萌發(fā)過程中氧氣是否充足不會影響其排出B．逆濃度梯度經(jīng)協(xié)助擴(kuò)散排出C．需要細(xì)胞膜上的載體蛋白協(xié)助D．含該酶的囊泡與細(xì)胞膜融合排出5．利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑，用于降解某種農(nóng)藥的殘留，基本流程如圖。下列敘述正確的是（）A．過程①的反應(yīng)體系中需要加入逆轉(zhuǎn)錄酶和核糖核苷酸B．過程②需使用限制酶和DNA聚合酶，是基因工程的核心步驟C．過程③需要使用NaCl溶液制備感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞D．過程④可利用DNA分子雜交技術(shù)鑒定CarE基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞6．下列有關(guān)變異及進(jìn)化的敘述，正確的是（）A．貓叫綜合征是人的第6號染色體部分缺失引起的遺傳病B．小鼠皮膚細(xì)胞的染色體中增加某一片段引起的變異屬于不可遺傳的變異C．環(huán)境條件保持穩(wěn)定，種群的基因頻率也可能發(fā)生變化D．獼猴的不同個體之間通過生存斗爭實現(xiàn)了共同進(jìn)化7．將相同的紫色洋蔥外表皮細(xì)胞分別放置在清水、1．3g/mL蔗糖溶液中進(jìn)行滲透實驗，一段時間后得到圖所示的結(jié)果。下列敘述正確的是（）A．乙細(xì)胞液泡中的色素含量不斷增大B．甲細(xì)胞在膨脹過程中細(xì)胞內(nèi)外濃度差逐漸減小C．外界溶液與細(xì)胞液只要存在濃度差，細(xì)胞就會發(fā)生滲透作用D．甲細(xì)胞在膨脹過程中水分子從其分子數(shù)相對較多向相對較少處運動8．（10分）關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述正確的是（）A．將允許特定種類的微生物生長的培養(yǎng)基稱作選擇培養(yǎng)基B．利用加入剛果紅的含纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，根據(jù)透明圈大小來篩選出能分解纖維素的細(xì)菌C．可以根據(jù)伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上紅棕色菌落的數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量D．用加入酚酞指示劑且以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，若培養(yǎng)基變紅，則該細(xì)菌能夠分解尿素二、非選擇題9．（10分）為了確定合理放牧強(qiáng)度、實現(xiàn)草原的可持續(xù)利用，科研人員在草原開展了不同放牧強(qiáng)度的實驗。實驗結(jié)果如圖所示，回答下列問題：（1）當(dāng)草原返青時，“綠色”為食草動物提供了可以采食的信息，這種信息屬于____（填“物理”或“化學(xué)”或“行為”）信息，這一實例體現(xiàn)的信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)的作用是____。（2）由圖1實驗結(jié)果可得到的初步結(jié)論是，____。由圖2結(jié)果可推測要保持草原可持續(xù)性利用應(yīng)采用____放牧強(qiáng)度，理由是____。10．（14分）埃博拉出血熱是由埃博拉病毒（EBV）引起的病毒性出血熱。EBV與宿主細(xì)胞結(jié)合后，將核酸-蛋白復(fù)合體（-RNA）釋放至細(xì)胞質(zhì)，通過以下途徑進(jìn)行增殖。請回答下列有關(guān)問題：（1）過程②和③分別叫________________、________________。（2）請利用箭頭和文字寫出埃博拉病毒在宿主巨噬細(xì)胞中遺傳信息的流動方向。RNA蛋白質(zhì)（3）EBV病毒感染機(jī)體后，引發(fā)的特異性免疫有___________?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了5種埃博拉病毒，從該病毒遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)特點分析其易發(fā)生變異的原因是_______________________。（4）已研制出針對埃博拉病毒的DNA疫苗，其流程是將埃博拉病毒基因經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄后整合到質(zhì)粒上，構(gòu)建基因表達(dá)載體，導(dǎo)入人體皮膚。這種DNA疫苗相對普通疫苗具有_____________等優(yōu)點；但若注射劑量高，可能會整合到宿主基因組內(nèi)而引起____________安全性問題。（5）若制備埃博拉病毒的單克隆抗體，必須借助動物細(xì)胞工程中的_____________技術(shù)。11．（14分）黃瓜花葉病毒（CMV）是能侵染多種植物的RNA病毒，可危害番茄的正常生長并造成減產(chǎn)。研究人員通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)將該病毒外殼蛋白的cDNA導(dǎo)入番茄植株中，成功獲得抗CMV的番茄植株。（1）獲得CMV的RNA后，在__________的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。（2）獲得cDNA后，需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的__________片段中，然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，以實現(xiàn)對番茄細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。（3）將經(jīng)共同培養(yǎng)后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間，只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據(jù)此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA，你認(rèn)為他們做出以上判斷的理由是_________________。（4）要想確定轉(zhuǎn)基因番茄已經(jīng)成功表達(dá)出CMV外殼蛋白，需要進(jìn)行____________實驗。（5）若要驗證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力，請寫出實驗設(shè)計思路__________。轉(zhuǎn)基因番茄自交，子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3：1，由此可以得出的結(jié)論是_________（答出兩點）。12．某湖泊中存在一條食物鏈：小球藻→水蚤→魚（甲），其中甲體內(nèi)含有毒素不能作為人類的食物?，F(xiàn)向該湖泊引入以小球藻和水蚤為食的河蚌。請回答下列問題：（1）向該湖泊中引入河蚌后，河蚌和水蚤之間的種間關(guān)系是_____________________。引入河蚌會導(dǎo)致甲種群數(shù)量_______（填“升高”“下降”或“不變”），其原因是____________________。（2）調(diào)查湖泊中河蚌種群密度時常用的方法是________________________。河蚌進(jìn)入該生態(tài)系統(tǒng)后，種群數(shù)量呈“S”型增長而不呈“J”型增長，原因是______________________________________。（3）河蚌是日常生活餐桌上人們經(jīng)常食用的美食，這體現(xiàn)了生物多樣性的_________價值。從能量流動的角度分析，向該湖泊生態(tài)系統(tǒng)引入河蚌的意義在于__________________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

據(jù)圖分析，圖示為突觸的結(jié)構(gòu)示意圖，突觸的結(jié)構(gòu)包括突觸前膜、突觸間隙和突觸后膜，圖中①表示突觸前膜，②表示神經(jīng)遞質(zhì)，③表示突觸后膜，④表示神經(jīng)遞質(zhì)的受體?！驹斀狻緼、①和③分別表示突觸前膜和突觸后膜，其中突觸前膜一定是神經(jīng)元細(xì)胞膜的一部分，而突觸后膜不一定是神經(jīng)元細(xì)胞膜的一部分，如肌肉細(xì)胞膜也可以作為突觸后膜，A錯誤；B、突觸小泡與①突觸前膜融合，釋放神經(jīng)遞質(zhì)到突觸間隙，因此該過程中突觸前膜的面積增大，B正確；C、②是神經(jīng)遞質(zhì)，在突觸間隙中通過擴(kuò)散的方式運送到突觸后膜上的④受體，該過程不消耗能量，C錯誤；D、若②是抑制性的神經(jīng)遞質(zhì)，則其與④受體結(jié)合后，③突觸后膜的膜電位仍然表現(xiàn)為外正內(nèi)負(fù)，D錯誤。故選B。2、D【解析】

現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的基本觀點：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實質(zhì)在于種群基因頻率的改變；突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料；自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進(jìn)化的方向；隔離是新物種形成的必要條件?！驹斀狻緼、達(dá)爾文的自然選擇學(xué)說是在拉馬克的用進(jìn)廢退和獲得性遺傳的觀點基礎(chǔ)上形成的，但不能科學(xué)地解釋遺傳和變異的本質(zhì)，現(xiàn)代生物進(jìn)化理論能夠解釋遺傳和變異的本質(zhì)，A正確；B、現(xiàn)代生物進(jìn)化理論認(rèn)為種群是生物進(jìn)化的基本單位，可遺傳變異（突變和基因重組）為生物進(jìn)化提供原材料，是進(jìn)化的基礎(chǔ)，B正確；C、突變和基因重組、自然選擇及隔離是物種形成過程的三個基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種形成，C正確；D、變異為進(jìn)化提供基礎(chǔ)，生物的變異是不定向性的，進(jìn)化的方向是定向的，D錯誤。故選D?！军c睛】解答此題要求考生識記現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項。3、D【解析】

1、種群是在一定空間和時間內(nèi)，同種生物所有個體的集合體。種群的特征包括數(shù)量特征、遺傳特征和空間特征，其中種群密度是種群最基本的數(shù)量特征。種群是生物進(jìn)化和繁殖的基本單位，生物進(jìn)化的實質(zhì)是種群基因頻率的定向改變。2、群落的空間結(jié)構(gòu)：（1）垂直結(jié)構(gòu)：植物群落的垂直結(jié)構(gòu)表現(xiàn)垂直方向上的分層性，其中植物的垂直結(jié)構(gòu)決定了動物的垂直分層。（2）水平結(jié)構(gòu)：水平方向上由于光照強(qiáng)度地形明暗濕度等因素的影響，不同地段上分布著不同的生物種群?！驹斀狻緼、沙漠蝗種群數(shù)量急劇增加，但環(huán)境中存在沙漠蝗的天敵等制約因素，種群數(shù)量增長并非理想條件下的“J”型增長，A錯誤；B、沙漠蝗個體在水平方向的分布屬于種群的空間特征，不是群落的水平結(jié)構(gòu)，B錯誤；C、沙漠蝗數(shù)量多、食量大，啃食后的農(nóng)田的土壤還保留部分種子或繁殖體，并非進(jìn)行初生演替，C錯誤；D、利用信息素誘捕沙漠蝗雄蟲，從而降低出生率，既能控制害蟲，又不影響生態(tài)環(huán)境，屬于典型的生物防治方法，D正確。故選D。4、D【解析】

小分子物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞方式包括自由擴(kuò)散、協(xié)助擴(kuò)散、主動運輸，利用的是細(xì)胞膜的選擇透過性；大分子物質(zhì)和顆粒物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的方式是胞吞和胞吐，利用的是細(xì)胞膜的流動性。根據(jù)題干信息分析，α-淀粉酶化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，是生物大分子，生物大分子進(jìn)出細(xì)胞的方式是胞吞胞吐，因此既不是順濃度梯度也不是逆濃度梯度，更不是通過離子通道排出，而是通過囊泡包裹與細(xì)胞膜融合以胞吐方式排出，該過程需要消耗能量，借助于細(xì)胞膜的流動性完成?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析已知，α-淀粉酶排到細(xì)胞外的方式為胞吐，需要消耗能量，而氧氣參與有氧呼吸供能，因此α-淀粉酶的排出與氧氣是否充足有關(guān)，A錯誤；B、α-淀粉酶排到細(xì)胞外的方式為胞吐，而不是協(xié)助擴(kuò)散，B錯誤；C、α-淀粉酶排到細(xì)胞外的方式為胞吐，利用的是細(xì)胞膜的流動性，不需要載體蛋白的協(xié)助，C錯誤；D、α-淀粉酶是通過囊泡包裹與細(xì)胞膜融合以胞吐方式排出的，D正確。故選D。5、D【解析】

分析圖解：圖中過程①表示利用mRNA通過反轉(zhuǎn)錄法合成相應(yīng)的DNA；過程②表示構(gòu)建基因表達(dá)載體（基因工程核心步驟）；過程③表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；過程④表示通過篩選獲得工程菌?！驹斀狻緼、過程①表示通過反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶和脫氧核糖核苷酸，A錯誤；B、過程②需使用限制酶和DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，是基因工程的核心步驟，B錯誤；C、過程③常用Ca2+處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態(tài)細(xì)胞，C錯誤；D、過程④可利用DNA分子雜交技術(shù)鑒定CarE基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，D正確。故選D。6、C【解析】

染色體異常遺傳病包括染色體結(jié)構(gòu)異常遺傳病（如貓叫綜合征）和染色體數(shù)目異常遺傳?。ㄈ?1三體綜合征）。共同進(jìn)化是指不同物種之間、生物與無機(jī)環(huán)境之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展?！驹斀狻緼、貓叫綜合征是人的第5號染色體部分缺失引起的遺傳病，A錯誤；B、小鼠皮膚細(xì)胞的染色體中增加某一片段引起的變異屬于可遺傳的變異（染色體結(jié)構(gòu)變異），B錯誤；C、環(huán)境條件保持穩(wěn)定，種群的基因頻率也可能發(fā)生變化，如基因突變等原因?qū)е?，C正確；D、共同進(jìn)化是指不同物種之間、生物與無機(jī)環(huán)境之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展，D錯誤。故選C。7、B【解析】

根據(jù)題干信息分析，將紫色洋蔥外表皮細(xì)胞放置在清水中會吸水，由于細(xì)胞壁的保護(hù)作用，細(xì)胞的體積略有增大，如細(xì)胞甲所示；將紫色洋蔥外表皮細(xì)胞放置在1.3g/mL蔗糖溶液中，由于細(xì)胞液濃度小于蔗糖溶液濃度，細(xì)胞失水而發(fā)生質(zhì)壁分離，如乙細(xì)胞所示?！驹斀狻緼、乙細(xì)胞液泡中的色素含量不變，濃度增加，A錯誤；B、甲細(xì)胞在膨脹過程中不斷吸水，因此細(xì)胞內(nèi)外濃度差逐漸減小，B正確；C、甲細(xì)胞的細(xì)胞液與外界溶液存在濃度差，但是其并不能繼續(xù)通過滲透作用吸水，C錯誤；D、甲細(xì)胞在膨脹過程中，水分子從其分子數(shù)相對較多處向相對較少處擴(kuò)散，該過程中水分子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量多于出細(xì)胞的數(shù)量，D錯誤。故選B。8、A【解析】

1、選擇培養(yǎng)基是指在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。使用選擇培養(yǎng)基可以富集篩選目的微生物。2、鑒別培養(yǎng)基是依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計。【詳解】A、允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基，A正確；B、篩選分解纖維素的細(xì)菌是根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈，B錯誤；C、大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長時菌落呈黑色，C錯誤；D、鑒定尿素分解菌的試劑是酚紅指示劑，D錯誤。故選A。【點睛】本題考查常見的選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，考生根據(jù)微生物的生長習(xí)性，在熟記教材的基礎(chǔ)上識記常見的選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。二、非選擇題9、物理調(diào)節(jié)生物的種間關(guān)系，以維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定隨放牧強(qiáng)度增加、放牧?xí)r間延長，物種豐富度降低中度隨放牧?xí)r間延長，中度放牧草地上總生物量變化最小【解析】

分析題圖：圖1實驗結(jié)果可知：隨放牧強(qiáng)度增加、放牧?xí)r間延長，物種豐富度降低；圖2實驗結(jié)果可知：隨放牧?xí)r間延長，中度放牧草地上總生物量變化最小。【詳解】（1）草原返青時，“綠色”為食草動物提供了可以采食的物理信息，這種信息能夠調(diào)節(jié)生物的種間關(guān)系，以維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。（2）由圖1實驗結(jié)果可得到的初步結(jié)論是：隨放牧強(qiáng)度增加、放牧?xí)r間延長，物種豐富度降低。圖2結(jié)果顯示隨放牧?xí)r間延長，中度放牧草地上總生物量變化最小，因此要保持草原可持續(xù)性利用應(yīng)采用中度放牧強(qiáng)度。【點睛】本題考查了群落的特征及生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞等相關(guān)知識，意在考查考生的審題能力、獲取有效信息的能力，難度適中。10、翻譯RNA復(fù)制細(xì)胞免疫和體液免疫EBV的遺傳物質(zhì)RNA是單鏈，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，容易突變DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，便于運輸和保存（不會誘發(fā)針對載體自身免疫反應(yīng)等）破壞正常細(xì)胞功能等動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合【解析】試題分析：本題以圖文結(jié)合的形式，綜合考查學(xué)生對中心法則的、特異性免疫及其應(yīng)用、生產(chǎn)單克隆抗體等知識的理解和掌握情況。解答此類問題需熟記并理解相關(guān)的基礎(chǔ)知識、形成知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，依據(jù)題圖中呈現(xiàn)的信息，準(zhǔn)確識別圖中數(shù)字所示生理過程，進(jìn)而進(jìn)行相關(guān)問題的解答。(1)分析圖示可知，過程②為以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的翻譯過程；③為以mRNA為模板合成-RNA的RNA復(fù)制過程。(2)結(jié)合對(1)分析可知：埃博拉病毒在宿主巨噬細(xì)胞中遺傳信息的流動方向為。(3)EBV病毒為寄生生物，感染機(jī)體后可引發(fā)細(xì)胞免疫和體液免疫。埃博拉病毒（EBV）的遺傳物質(zhì)RNA是單鏈，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，容易突變。(4)與普通疫苗相比，利用基因工程研制的DNA疫苗具有DNA分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、便于運輸和保存等優(yōu)點；但若注射劑量高，可能會整合到宿主基因組內(nèi)而引起破壞正常細(xì)胞功能等(5)若制備埃博拉病毒的單克隆抗體，必須借助動物細(xì)胞工程中的動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合技術(shù)。11、逆轉(zhuǎn)錄酶Ti質(zhì)粒的T-DNA重組表達(dá)載體同時含有卡那霉素和青霉素抗性基因，只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織抗原-抗體雜交用等量強(qiáng)致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄（普通番茄），在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，觀察它們對CMV的抗性目的基因整合到受體細(xì)胞的一條染色體上，獲得的轉(zhuǎn)基因親本為雜合子【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不同。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。4、目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)；④個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體DNA上。因此，獲得cDNA后，需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA片段中，然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，以實現(xiàn)對番茄細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。（3）重組表達(dá)載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織，據(jù)此可知生出愈傷組織的外植體都已成功導(dǎo)入了cDNA。（4）檢測目的基因是否表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)，需要進(jìn)行抗原-抗體雜交實驗。（5）若要驗證轉(zhuǎn)基因番茄具有較好的抗CMV能力，應(yīng)進(jìn)行個體水平上的鑒定，自變量為番茄植株的種類，即用等量強(qiáng)致病力的CMV分別感染轉(zhuǎn)基因番茄與未轉(zhuǎn)基因的番茄（普通番茄）