高考生物一輪復(fù)習(xí) 1微生物培養(yǎng)技術(shù)隨堂雙基演練 中圖版選修1

第一章微生物培養(yǎng)技術(shù)選修一1．關(guān)于滅菌和消毒的不正確理解是() A．滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子 B．消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是完全相同的 C．接種環(huán)用灼燒法滅菌 D．常用滅菌方法有灼燒法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法 解析：消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，滅菌則是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 答案：B2．用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照是() A．未接種的選擇培養(yǎng)基 B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．接種了的選擇培養(yǎng)基 解析：將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循的原則是單一變量，所以與選擇培養(yǎng)基一樣接種、培養(yǎng)。 答案：C3．現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基，已知其配制時(shí)所加的成分和含量如下表，用這兩種培養(yǎng)基分別去分離土壤中的兩種微生物，你認(rèn)為它們適于分離()成分KH2PO4MgSO4·7H2ONaClCaSO4·2H2OCaCO3葡萄糖純淀粉甲培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%－－ A.甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌 B．甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌 C．甲培養(yǎng)基適于分離酵母菌；乙培養(yǎng)基適于分離真菌 D．甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型共生細(xì)菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生固氮菌 解析：固氮菌中能獨(dú)立生存的是自生固氮菌，甲培養(yǎng)基中含有的葡萄糖和淀粉是有機(jī)物，由此推出該培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型的自生固氮菌；乙培養(yǎng)基中不含有機(jī)碳源，所以可用來分離培養(yǎng)自養(yǎng)型的自生固氮菌。 答案：B4．某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。請回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題： (1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了________和________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有基本成分是________和________。 (2)對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是________。 (3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種________作為對照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 (4)培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有________種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越________。 (5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐______細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為________。 解析：考查微生物培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)。微生物生長繁殖過程中需要氮源、碳源、水分、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，有些微生物還需要特殊營養(yǎng)物質(zhì)；培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌，該過程一般在高壓蒸汽滅菌鍋中進(jìn)行；影響微生物生長繁殖的因素主要是營養(yǎng)和溫度，因此培養(yǎng)微生物時(shí)除提供適宜的營養(yǎng)外，還要提供合適的溫度；為排除無關(guān)變量的影響，該實(shí)驗(yàn)要設(shè)立空白對照，可以用無菌水代替樣品來進(jìn)行對照；在培養(yǎng)基中加入食鹽可以選擇耐鹽菌，如金黃色葡萄球菌等，這種培養(yǎng)基叫做選擇培養(yǎng)基。 答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源無機(jī)鹽水 (2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱無菌水(4)多高(5)鹽(或NaCl)選擇培養(yǎng)基5．(·寧夏卷)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮________、________和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、________、________等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。 (2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行________(消毒、滅菌)；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和________；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能________。 (3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的________。 (4)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的________。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_________________________________________________________________。 (6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 解析：解答本題需要識(shí)記微生物的培養(yǎng)條件、代謝特點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)室微生物培養(yǎng)規(guī)范和主要步驟。微生物的培養(yǎng)條件有適宜的營養(yǎng)物質(zhì)(碳源、氮源、無機(jī)鹽等)、溫度、pH、滲透壓(控制培養(yǎng)液的濃度)等。細(xì)菌具有個(gè)體微小、結(jié)構(gòu)簡單、生長周期短、繁殖快、代謝旺盛、變異類型簡單(主要是基因突變)等特點(diǎn)。在微生物實(shí)驗(yàn)操作中，防止雜菌污染是貫穿實(shí)驗(yàn)整個(gè)過程中的內(nèi)容，因此，對環(huán)境、生物材料、操作者雙手等進(jìn)行消毒，對培養(yǎng)基、接種環(huán)和培養(yǎng)儀器進(jìn)行滅菌等是微生物實(shí)驗(yàn)中的常見操作。紫外線滅菌的原理是紫外線的高能量使蛋白質(zhì)和DNA等生物分子變性，即空間結(jié)構(gòu)改變。稀釋涂布平板法是細(xì)菌分離純化的常用方法，合適的稀釋倍數(shù)是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落，依據(jù)菌落大小、形態(tài)、色澤等可以對細(xì)菌進(jìn)行鑒定或分類。 答案：(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌6．(·上海卷)氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，因其不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表。圖1表培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機(jī)鹽(無碳)蒸餾水Ⅰ號10g5g5mg5g－－1LⅡ號－－50mg5g3g適量1LⅢ號－－20～80mg5g3g適量1L(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的________。(2)培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)pH的先后順序是________。(3)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基和Ⅱ號培養(yǎng)基分別屬于________培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。在Ⅱ號培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是________。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，SP1的菌體變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體被稱為________。(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知，SP1菌在________培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是________。 解析：固體培養(yǎng)基中除添加營養(yǎng)成分外，還需要加入一定量的凝固劑，如瓊脂；細(xì)菌培養(yǎng)的基本過程：配制培養(yǎng)基（稱量→溶化→溶化→調(diào)pH→分裝→加棉塞→包扎)→滅菌→擱置斜面→接種→培養(yǎng)(25℃下5～7d或37℃下24h)。根據(jù)培養(yǎng)基的用途可分為基本培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基等，題中Ⅰ號培養(yǎng)基屬于基本培養(yǎng)基，由于Ⅱ號培養(yǎng)基中的碳源僅是氯苯，因此，培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。Ⅱ號培養(yǎng)基中僅硝酸銨含有氮元素，因此，它是該培養(yǎng)基中的氮源。細(xì)菌的休眠體是芽孢。根據(jù)曲線圖可知，氯苯濃度為20mg/L時(shí)，菌體數(shù)量最先減少，最可能是由于氯苯被耗盡。 答案：(1)瓊脂(2)先調(diào)pH，后滅菌(3)通用(基本)選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗盡7．富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是指利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，制定環(huán)境條件使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點(diǎn)，從物理、化學(xué)、生物及綜合多個(gè)方面進(jìn)行選擇，如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營養(yǎng)等許多方面。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解對羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過程。 (1)本實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基為________________________________________________________________________， 碳源為__________________。 (2)實(shí)驗(yàn)原理是________________________________________________________________________。 (3)①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)⑤的菌落中大部分是降解________的微生物。 (5)⑥為__________組，⑦為________組，設(shè)置⑥的目的是_________________。 (6)⑤→⑥采用________法，接種到⑥的培養(yǎng)基中，在操作過程中為防止污染應(yīng)注意的事項(xiàng)是_______________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基，可用于具有某種代謝特點(diǎn)的微生物，本題就是為了選擇出能分解對羥基苯甲酸的微生物。該實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基的碳源為對羥基苯甲酸；全過程包括篩選→擴(kuò)大培養(yǎng)→純化→鑒定。 答案：(1)選擇培養(yǎng)基對羥基苯甲酸(2)利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解對羥基苯甲酸的微生物(3)增大分解對羥基苯甲酸微生物的比例(4)對羥基苯甲酸(5)對照實(shí)驗(yàn)說明通過富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物(6)單細(xì)胞挑取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻，同時(shí)打開皿蓋挑取菌種接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物8．(·廣東廣州六中月考)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常常需要進(jìn)行微生物的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。 (1)如圖是利用________法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步________分散到培養(yǎng)基的表面。 (2)分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)除去上述________成分，并加入________，以補(bǔ)充________源。如果要鑒別自來水中的大腸桿菌是否超標(biāo)，至少要加入________和________。 (3)三位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細(xì)菌數(shù)量。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下統(tǒng)計(jì)結(jié)果： 甲同學(xué)涂布了兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是236和260，取平均值248； 乙同學(xué)涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是210、240和250，取平均值233； 丙同學(xué)涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是21、212和256，取平均值163； 在三位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)中，只有一位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)是正確的，指出另兩位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)為什么不正確。 (4)若在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為233，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2mL)________。 答案：(1)平板劃線稀釋(2)NaNO3尿素和葡萄糖氮、碳伊紅美藍(lán)(3)甲同學(xué)只涂布了兩個(gè)平板，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說服力不夠；丙同學(xué)雖然涂布了三個(gè)平板，但其中一個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說明操作過程出現(xiàn)錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)缺乏正確性。(4)1.17×1099．有些微生物能合成纖維素酶，通過對這些微生物的研究和應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。纖維素酶可以通過微生物發(fā)酵生產(chǎn)，為了提高酶的產(chǎn)量，請你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，利用誘變育種的方法，獲得產(chǎn)生纖維素酶較多的菌株。 (1)寫出實(shí)驗(yàn)步驟： ①將培養(yǎng)好的生產(chǎn)菌株分成兩組，________。 ②制備含有________的固體培養(yǎng)基。 ③________________________________________________________________________。 ④________________________________________________________________________。 (2)預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論： ①誘變組中菌落周圍的透明圈比對照組________，說明 ________________________________________________________________________。 ②誘變組中菌落周圍的透明圈與對照組________，說明 ________________________________________________________________________。 ③誘變組中菌落周圍的透明圈比對照組小，說明______________________________ _____