艾滋病梅毒丙肝的檢測(cè)及解釋

關(guān)于艾滋病梅毒丙肝的檢測(cè)及解釋HIV實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)第2頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月

檢測(cè)樣本HIV抗體酶免--血清/血漿，尿液快速檢測(cè)--血清/血漿/全血，唾液CD4：抗凝全血病載、基因型、耐藥：血漿

第3頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月樣本保存抗體檢測(cè)：短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可存放于2～8℃，一周以上應(yīng)存放于-20℃以下。

篩查陰性樣品，建議至少保存1～2個(gè)月；篩查陽(yáng)性樣品，無論確證結(jié)果如何，均應(yīng)將剩余的樣品保存至少10年

核酸檢測(cè)：血漿4天內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可存放于4℃，3個(gè)月以內(nèi)應(yīng)存放于-20℃以下，3個(gè)月以上應(yīng)置于-70℃以下。CD4：室溫（18～25℃）保存和運(yùn)輸。要求48小時(shí)內(nèi)染色，染色后6小時(shí)內(nèi)分析；如采血后24小時(shí)內(nèi)染色，可在染色后24小時(shí)內(nèi)分析。

第4頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月HIV抗體檢測(cè)

篩查試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)

快速檢測(cè)（RT）

確證試驗(yàn)

免疫印跡試驗(yàn)（WB）條帶免疫試驗(yàn)放射免疫沉淀試驗(yàn)（RIPA）免疫熒光試驗(yàn)（IFA）

第5頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月初篩和復(fù)檢流程

樣品初篩試驗(yàn)篩查試劑陽(yáng)性反應(yīng)陰性反應(yīng)復(fù)檢試驗(yàn)原有試劑+另一不同原理（或廠家）試劑或另外兩種不同原理（或廠家）試劑均陽(yáng)性反應(yīng)一陰一陽(yáng)均陰性反應(yīng)確證試驗(yàn)報(bào)告陰性圖1HIV抗體篩查檢測(cè)流程第6頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月確證流程

第7頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月

質(zhì)量控制試劑盒內(nèi)部對(duì)照：按照試劑盒要求設(shè)置使用室內(nèi)質(zhì)控品：外購(gòu)、陽(yáng)性對(duì)照/樣本稀釋ELISA檢測(cè)

20次內(nèi)—即刻法質(zhì)控

20次后，Levey-Jennings質(zhì)控圖更換試劑廠家必須重新制作質(zhì)控圖，同種試劑不同批號(hào)可繼續(xù)使用（注明批號(hào)）發(fā)現(xiàn)失控、位移及時(shí)查找原因，必要時(shí)重新開始質(zhì)控快速檢測(cè)更換批號(hào)進(jìn)行質(zhì)量驗(yàn)證注意反應(yīng)時(shí)間、溫度、數(shù)量控制第8頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月設(shè)備檢定、維護(hù)強(qiáng)檢設(shè)備酶標(biāo)儀、移液器、高壓鍋、溫度計(jì)（可自行比對(duì)）自行維護(hù)生物安全柜、洗板機(jī)、洗眼器、水平（梅毒）旋轉(zhuǎn)儀溫度控制冰箱、溫箱/水浴箱內(nèi)放置經(jīng)檢定（比對(duì)）的溫度計(jì)高壓滅菌放置指示卡洗眼器定期進(jìn)行維護(hù)第9頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月SOP文件（1）樣品的接收、登記、處理、保存和運(yùn)輸；（2）檢測(cè)方法和步驟；（3）試劑使用和保存；（4）儀器的使用維護(hù)和校準(zhǔn)；（5）質(zhì)量控制要求及程序；（6）結(jié)果解釋與報(bào)告；（7）保密程序；（8）實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存；（9）不確定樣品追蹤和處理；（10）實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)及實(shí)驗(yàn)室的清理和消毒。

第10頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月實(shí)驗(yàn)室記錄檢測(cè)登記表試驗(yàn)原始記錄（ELISA、快速、RPR/TURST）報(bào)告單/化驗(yàn)單復(fù)檢化驗(yàn)單—篩查陽(yáng)性填寫，信息收集完整儀器使用、維護(hù)保養(yǎng)記錄質(zhì)控資料消毒記錄廢棄物處理登記冰箱溫度記錄人員健康檔案（體檢、疫苗接種記錄，化驗(yàn)單、體檢報(bào)告）

第11頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月實(shí)驗(yàn)室生物安全

實(shí)驗(yàn)室：Ⅱ級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）

建立安全制度：S-SOP、意外事故處理預(yù)案、信息安全及保密制度培訓(xùn)和管理：全員培訓(xùn)、標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)原則個(gè)人防護(hù)：防護(hù)用品與設(shè)施、健康監(jiān)護(hù)安全操作：樣品采集與管理、儀器設(shè)備使用、利器使用消費(fèi)與污物處理

第12頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)第13頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒螺旋體--梅毒的病原體

分類：螺旋體目（Spirochaetales）螺旋體科（Spirochaetaceae）密螺旋體屬（Treponema）蒼白螺旋體種（Treponemapallidum）分幾個(gè)亞種第14頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒螺旋體（TP）小而纖細(xì)的螺旋狀微生物長(zhǎng)5～20μm，粗細(xì)<0.2μm有6～12個(gè)規(guī)則的螺旋基本結(jié)構(gòu)為一原生質(zhì)的圓柱體，為兩層膜所圍繞行動(dòng)緩慢而有規(guī)律

-圍繞其長(zhǎng)軸旋轉(zhuǎn)中前后移動(dòng)

-伸縮其圈間之距離而移動(dòng)

-全身彎曲如蛇行第15頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月

生物學(xué)特性-1免疫性：人對(duì)TP產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫。細(xì)胞免疫對(duì)感染過程的影響尚不清楚。特異性抗體：TP可導(dǎo)致人體產(chǎn)生多種抗體。其中TP的脂質(zhì)激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生的特異性抗體，在初次感染后產(chǎn)生，保持終生，但對(duì)清除機(jī)體內(nèi)的TP無作用。另一些種特異性抗體可與很多種非致病性螺旋體發(fā)生交叉反應(yīng)。第16頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月生物學(xué)特性-2反應(yīng)素：TP破壞機(jī)體組織，使組織釋放一種抗原性心磷脂,以及螺旋體自身的磷脂類物質(zhì)，可以激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生反應(yīng)素，能同從動(dòng)物如牛心肌中提取的心磷脂發(fā)生反應(yīng)，通過試驗(yàn)來檢測(cè)。反應(yīng)素水平與梅毒感染過程相平行，抗梅治療后約半年轉(zhuǎn)陰，但反應(yīng)素并非感染TP后所特有。第17頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月生物學(xué)特性-3致病性：自然條件下TP只感染人，尚未證明梅毒螺旋體能產(chǎn)生內(nèi)毒素和外毒素，致病機(jī)理尚不清楚。傳染性：感染早期傳染性最強(qiáng)，隨著病程的延長(zhǎng)傳染性越來越小。臨床上未經(jīng)治療的病人，在感染后1～2年內(nèi)最具有傳染性，一般認(rèn)為4年以上幾乎不通過性接觸傳染，但保持對(duì)胎兒的傳染性。抵抗力：TP在體外僅能存活數(shù)小時(shí)，40℃時(shí)失去傳染力，煮沸立即死亡；對(duì)干燥特別敏感，一般的消毒劑均能容易將其殺滅。血庫(kù)的血液和血漿中可存活24小時(shí)以上，三日后全部死亡。第18頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月生存條件厭氧寄生物，在人體內(nèi)可長(zhǎng)期生存，體外不易存活干燥、肥皂水及一般消毒劑如1:1000苯酚、新潔爾滅、酒精均可于短時(shí)間將其殺死在血液中4℃經(jīng)3日可死亡，故在血庫(kù)冰箱冷藏3日以上的血液就無傳染性溫度的影響：41-42℃時(shí)可生活1-2小時(shí)，在48℃僅半小時(shí)即失去感染力，100℃立即死亡。對(duì)寒冷抵抗力強(qiáng)，在0℃時(shí)，可生活48小時(shí)，如將梅毒病損標(biāo)本置于冰箱內(nèi)，經(jīng)1周仍可致病。在低溫（-78℃）保存數(shù)年，仍可保持其形態(tài)、活動(dòng)及毒性在封存的生理鹽水稀釋的組織液中可生活10小時(shí)左右在潮濕的器具或濕毛巾中，亦可生存數(shù)小時(shí)在干燥環(huán)境中可見迅速死亡第19頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月宿主梅毒螺旋體只感染人類人是梅毒的唯一傳染源第20頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月傳播途徑性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長(zhǎng)，傳染性越來越小到感染后4年，通過性接觸一般無傳染性母嬰傳播在妊娠7周時(shí)，梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染（未經(jīng)治療者），病期>4年雖已無性傳播，但妊娠時(shí)仍可傳染給胎兒,病期越長(zhǎng)，傳染性越小;第21頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)第22頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月病原學(xué)檢查原理：一期、二期梅毒時(shí)，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式進(jìn)行檢測(cè)。方法：（1）暗視顯微鏡檢查（2）鍍銀染色法（3）核酸檢測(cè)（血液標(biāo)本？）注：梅毒螺旋體目前體外人工培養(yǎng)還沒有獲得成功，僅能通過接種兔睪丸等部位進(jìn)行有限增殖。

第23頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月病原學(xué)檢查的臨床意義螺旋體檢查是診斷早期梅毒的最佳方法，對(duì)于患者的早期診斷、及時(shí)治療、預(yù)后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性。第24頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法(1)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性梅毒抗體）(2)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）兩類方法。問題：為什么梅毒診斷需要上述兩類血清學(xué)檢測(cè)方法？第25頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理梅毒螺旋體一旦感染人體，宿主可對(duì)螺旋體表面的脂質(zhì)作出免疫應(yīng)答，產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體（非特異性抗體）。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的非特異性抗體可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，非特異性抗體可以逐漸減少滴度至轉(zhuǎn)為陰性。問題：臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)為什么需要做定性和定量?jī)煞N檢測(cè)方法？

第26頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)原理方法包括：（1）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)

（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）（3）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)等?；境煞质切牧字蚜字湍懝檀伎乖贵w結(jié)合形成復(fù)合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見上述方法的敏感性和特異性都基本相似第27頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理示意圖第28頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)操作要點(diǎn)1、儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀，轉(zhuǎn)速？轉(zhuǎn)幅？2、定性試驗(yàn)加樣：吸取0.05mL血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號(hào)針頭加1滴抗原反應(yīng)：水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)8分鐘(23℃-29℃），亮光下觀察結(jié)果？滴/mL，1滴=？ul第29頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)操作要點(diǎn)1、儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀，轉(zhuǎn)速、轉(zhuǎn)幅2、定性試驗(yàn)加樣：吸取0.05mL血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號(hào)針頭加1滴抗原反應(yīng)：水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)8分鐘(23℃-29℃），亮光下觀察結(jié)果60滴/mL，1滴=17ul100r/min約18mm第30頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)操作要點(diǎn)3、定量試驗(yàn)稀釋夜準(zhǔn)備：在反應(yīng)紙板圈內(nèi)加入50uL生理鹽水（根據(jù)需要確定圈數(shù)),勿將鹽水涂開加樣：吸取50uL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個(gè)圈內(nèi)。下同定性試驗(yàn)。？1:21:41:81:161:321:641:2561:1281:512定量試驗(yàn)結(jié)果判斷血清稀釋度結(jié)果？1:21:41:81:16+----？++---？++++-？問題：定量試驗(yàn)原倍血清滴度是多少？問題：定量試驗(yàn)血清稀釋需要使用試管嗎？第31頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)操作要點(diǎn)3、定量試驗(yàn)稀釋夜準(zhǔn)備：在反應(yīng)紙板圈內(nèi)加入50uL生理鹽水（根據(jù)需要確定圈數(shù)),勿將鹽水涂開加樣：吸取50uL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個(gè)圈內(nèi)。下同定性試驗(yàn)。1:11:21:41:81:161:321:641:2561:1281:512定量試驗(yàn)結(jié)果判斷血清稀釋度結(jié)果1:11:21:41:81:16+----1:1++---1:2++++-1:8第32頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月TRUST1:16非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果判斷RPR1:2561:11:21:41:81:161:11:21:41:81:161:321:641:1281:2561:5121:321:641:1281:2561:512第33頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后一期梅毒1年后轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應(yīng)仍為陽(yáng)性。第34頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)臨床意義非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)方法簡(jiǎn)單、快速、敏感性和特異性較好。適用于大量人群的篩查。因治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。梅毒病期敏感性(%)特異性(%)一期86（77-99）-二期100隱性98(95-100)（一般滴度>1:8，但不排除<1:8）晚期73非梅毒-98(93-99)第35頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)特點(diǎn)假陽(yáng)性反應(yīng)技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的假陽(yáng)性反應(yīng)，經(jīng)過重復(fù)試驗(yàn)即可排除。生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)(一般滴度小于1:8），應(yīng)采用梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)如TPPA等進(jìn)行排除。假陰性反應(yīng)：前帶現(xiàn)象、后帶現(xiàn)象血清固定：臨床問題第36頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理抗原為梅毒螺旋體特異蛋白（包括螺旋體重組特異抗原），檢測(cè)梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)呈陽(yáng)性，則患者終身陽(yáng)性。問題：梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的定量試驗(yàn)在梅毒診療中有意義嗎？第37頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(cè)(RT)熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（WB）第38頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月TPPATPPA試驗(yàn)用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒與人血清中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生可見的凝集反應(yīng)，具有較高的敏感性和特異性。

TPPA是目前WHO公認(rèn)的梅毒抗原血清學(xué)試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，常用于新方法、新試劑的參照標(biāo)準(zhǔn)。第39頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月+明膠顆粒梅毒抗原+抗原致敏顆?？乖旅纛w粒血液中抗體抗原抗體凝集TPPA試驗(yàn)原理示意圖第40頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月414+：粒子光滑覆蓋整個(gè)孔底，有時(shí)邊緣有折疊3+：粒子光滑覆蓋大部分底2+：粒子光滑聚集覆蓋孔底，周圍有一細(xì)胞環(huán)1+：粒子光滑集聚覆概孔底，周圍有一明顯細(xì)胞環(huán)±：粒子沉集孔底，中央形成一小點(diǎn)–：粒子緊密沉積孔底中央

TPPA試驗(yàn)結(jié)果判讀敏感性特異性病期一期二期隱性臨床試驗(yàn)a100100100美國(guó)CDC8810010095a:均為RPR陽(yáng)性標(biāo)本第41頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月ELISA/

CLIAELISA試驗(yàn)是用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和單克隆抗體酶標(biāo)記物，形成抗原抗體復(fù)合物與酶標(biāo)記物結(jié)合，用酶聯(lián)檢測(cè)儀判定試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)。本法可用于大樣本血清檢測(cè)?；瘜W(xué)發(fā)光法的臨床應(yīng)用意義基本同ELISA化學(xué)發(fā)光法的敏感性？？第42頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒免疫層析快速檢測(cè)方法（全血法）第43頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒免疫層析快速檢測(cè)方法（血清、血漿法）第44頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)臨床意義作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(如RPR等)初篩陽(yáng)性標(biāo)本的確證試驗(yàn)，排除RPR假陽(yáng)性。不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行診斷。不能作為療效觀察的指標(biāo)。第45頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋（梅毒臨床診斷參考依據(jù)）

試驗(yàn)結(jié)果參考結(jié)果解釋*梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)陽(yáng)性陽(yáng)性可能為現(xiàn)癥梅毒陰性陽(yáng)性非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)假陽(yáng)性陽(yáng)性陰性臨床治愈的早期梅毒（既往感染者）或極早期梅毒陰性陰性排除梅毒感染或極早期梅毒問題：此結(jié)果解釋適用于先天（胎傳）梅毒嗎？第46頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月先天（胎傳）梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷《預(yù)防艾滋病、梅毒和乙肝母嬰傳播工作實(shí)施方案》第47頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒暴露嬰兒的評(píng)估梅毒暴露嬰兒：嬰兒RPR檢測(cè)不能使用臍帶血，因其易被母體血液污染，從而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果檢查先天梅毒臨床表現(xiàn)：非免疫性水腫、黃疸、肝脾大、鼻炎、皮疹、末端肢體假性麻痹對(duì)可疑病灶或體液進(jìn)行暗視野顯微鏡檢查第48頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月先天梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)梅毒暴露嬰兒：

暗視野顯微鏡檢梅毒螺旋體陽(yáng)性梅毒螺旋體IgM抗體陽(yáng)性*RPR/TRUST檢測(cè)陽(yáng)性，滴度比母親分娩前最近一次滴度高4倍及以上RPR/TRUST監(jiān)測(cè)隨訪中，任何一次滴度不下降或反而上升滿18月齡后，

TPPA檢測(cè)陽(yáng)性（哪一類抗體？）*IgM抗體反映近期感染，可幫助鑒別嬰兒先天梅毒第49頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月梅毒IgM抗體（TP-IgM）IgM抗體的產(chǎn)生是感染后的早期體液免疫應(yīng)答反應(yīng)。IgM分子比IgG較大，所以IgM抗體不能通過胎盤屏障。而母親的IgG抗體可以通過胎盤屏障傳給胎兒。因此若在新生兒血中檢測(cè)到IgG抗體不能作為先天梅毒的診斷依據(jù)，而IgM抗體可為先天梅毒的診斷依據(jù)。IgM抗體檢測(cè)其特異性較高，IgM抗體反映近期感染，可幫助鑒別嬰兒先天梅毒。但敏感性較低，因此，IgM抗體檢測(cè)陰性，不能排除先天梅毒感染。第50頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月先天梅毒檢測(cè)流程

嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)定量檢測(cè)梅毒暴露嬰兒母親、嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)定量檢測(cè)組織或分泌物暗視野顯微鏡檢，有條件進(jìn)行IgM抗體檢測(cè)報(bào)告母親、嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)滴度水平報(bào)告嬰兒非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)滴度水平報(bào)告暗視野顯微鏡檢或IgM抗體檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性陰性或沒有梅毒感染的癥狀有梅毒感染的癥狀

第51頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月

梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)策略思考方法選擇依據(jù)敏感性、特異性（試劑評(píng)估）操作流程（可及性）試劑的價(jià)格、結(jié)果時(shí)間（可接收性）根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略?？刹捎萌魏我活惷范狙鍖W(xué)檢測(cè)方法作為篩查試驗(yàn)。？初篩目的和方法選擇第52頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月第53頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月54陽(yáng)性

梅毒螺旋體血清試驗(yàn)

（ELISA）

陰性

報(bào)告：

ELISA陰性

陽(yáng)性

RPR定性/定量試驗(yàn)

陰性

推薦TPPA復(fù)檢

陽(yáng)性

報(bào)告：

ELISA陽(yáng)性

RPR陽(yáng)性及滴度

果

陰性

報(bào)告：

ELISA陽(yáng)性

TPPA陽(yáng)性

RPR陰性

報(bào)告：

ELISA陽(yáng)性

TPPA陰性

RPR陰性

報(bào)告：

ELISA陽(yáng)性

RPR陰性

果

第54頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)血清學(xué)檢測(cè)試劑的種類梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(cè)(RT)熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）梅毒IgM抗體檢測(cè)（IgM）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（WB）第55頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月HCV的檢測(cè)及意義第56頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月

丙型病毒性肝炎為法定傳染性疾病。第57頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月Alberti,JHepatol1999;31:17-24Seef,Hepatology2002;36:S35-46Fanetal,WorldJGastroenterol2004;10:2867-2869感染后20年HCV感染患者比例100%慢性丙肝患者比例85%肝硬化患者比例10-50%肝癌患者比例1-23%丙肝相關(guān)死亡率患者比例4-15%在全球，丙肝是死亡率第十的傳染性疾病在中國(guó)，丙肝是死亡率第五的傳染性疾病丙肝：高危害通常為沉默感染，人體感染HCV20年、或更長(zhǎng)時(shí)間無任何癥狀表現(xiàn)。第58頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月丙肝：無預(yù)防性疫苗，但可治愈丙肝疾病將是中國(guó)的沉重經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān):1170-2160億元/年乙型肝炎疫苗的推廣，新感染病例顯著下降；由于丙型肝炎缺乏有效的預(yù)防性疫苗，有可能成為影響人民健康的主要肝臟疾病我國(guó)首部《丙肝防治指南》所指出的，通過聚乙二醇干擾素+利巴韋林，使用足夠劑量治療一年，丙肝的治愈率可以達(dá)到七、八成左右，這也是目前國(guó)際上丙肝治療的最佳方案。GhanyM,etal.Hepatology2009;49:1335–74第59頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月第60頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月中國(guó)丙肝臨床早期篩查亟待加強(qiáng)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)與信息服務(wù)中心，施小明,等.疾病監(jiān)測(cè)2006;21:493.185/358465/1826100/432數(shù)據(jù)源自國(guó)內(nèi)30個(gè)省(自治區(qū)、直轄市)共250家醫(yī)療機(jī)構(gòu)，采樣15501例，有效樣本13714例丙肝是中國(guó)漏報(bào)率最高的法定傳染病第61頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月假陰性和假陽(yáng)性是困惑抗HCV檢測(cè)的主要問題間接法自身的缺陷可能出現(xiàn)假陽(yáng)性和IgM的漏檢。采用第2代(Abbott)和第3代(Ortho)EIA試劑，假陽(yáng)性率可達(dá)30%抗原位點(diǎn)的選擇以及抗原的純化是影響檢測(cè)靈敏度和特異性的重要因素；SLE,RA，某些感染性疾病等引起高濃度的免疫球蛋白造成假陽(yáng)性（RF的干擾；高濃度非特異性IgG可吸附到固相載體上或包被的抗原上）SOD超氧化歧化酶干擾廠家之間的靈敏度和特異性存在著一定差異，從而導(dǎo)致抗-HCV檢測(cè)結(jié)果不一致；同一廠家的不同批試劑間亦會(huì)有較大差異。第62頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月采用間接ELISA法檢測(cè)抗體是評(píng)估HCV感染的初篩手段HCV特異性抗體陽(yáng)性反映了患者體內(nèi)病毒存在，一旦抗HCV陽(yáng)性，終生難以轉(zhuǎn)陰。HCV抗體檢測(cè)的雙抗原夾心ELISA法HCV抗原檢測(cè)方法的建立HCV的RNA和抗原在患者體內(nèi)呈間歇陽(yáng)性；病毒基因型復(fù)雜易變異，基因水平的檢測(cè)質(zhì)量不夠穩(wěn)定；重組免疫印跡實(shí)驗(yàn)（RIBA）被認(rèn)為是HCV監(jiān)測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。必須規(guī)范HCV實(shí)驗(yàn)檢測(cè)評(píng)估和報(bào)告體系第63頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月Chiron公司推出了相應(yīng)的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)—重組免疫印跡實(shí)驗(yàn)（RIBA）。RIBA被認(rèn)為是HCV抗體檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。HCV抗體檢測(cè)結(jié)果不一致的標(biāo)本，使用確認(rèn)試劑檢測(cè)。至少2條HCV特異性條帶且為≥1+的條帶反應(yīng)模式判讀為陽(yáng)性結(jié)果。陰性為無HCV特異性反應(yīng)條帶。Recombinantimmunoblotassay(RIBA)OthertestssuchasMatrixHCV2.0(Abbott),Liatek-III(Organon),Inno-LiaHCVAbIII(Innogenetics),MurexWesternblot(Abbott),DeciscanHCVPlus(Bio-Rad)andHCVblot3.0(Genelabs)RIBA被認(rèn)為是HCV抗體檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。第64頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月HCVBlot3.0（MP，麗珠）

（18/36T）

3+質(zhì)控帶(血清加樣）

核抗原帶NS3-1NS3-2NS4NS5

1+質(zhì)控帶(試劑加樣)GST質(zhì)控帶注：1，2，3為陽(yáng)性樣本4為陰性樣本萬(wàn)泰HCVRIBA試劑（24T）第65頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月幾個(gè)月前報(bào)告“陽(yáng)性”，目前報(bào)告“陰性”？臨界值標(biāo)本、弱陽(yáng)性標(biāo)本，如何處理？產(chǎn)婦發(fā)現(xiàn)抗-HCV陽(yáng)性，可以哺乳嗎？

無輸血及血制品史偶爾在外治療牙病三家醫(yī)院結(jié)果為什么不一致？

A院“S/CO3.5”，B院“弱陽(yáng)”，C院“陰性”老人內(nèi)鏡術(shù)后檢查抗-HCV陽(yáng)性，惹上麻煩？問題舉例第66頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月結(jié)果“時(shí)（-）時(shí)（+）”ELISA（+）、膠體金（-）”第67頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月醫(yī)院檢測(cè)（-）、而血站檢測(cè)（+）”嬰幼兒結(jié)果“（弱+）”第68頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月某方法孕婦多次出現(xiàn)“（假+）”并非僅僅是孕婦出現(xiàn)“（假+）”第69頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月對(duì)于不是很強(qiáng)的“（+）”結(jié)果的處理出現(xiàn)“（+）”結(jié)果時(shí)的處理方式第70頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月遇見這樣的事情，您不困惑？第71頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月二、丙型肝炎病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中的策略第72頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月《丙型肝炎病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》

2011年9月20日頒布實(shí)施起草單位：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心使用范圍：全國(guó)所有的丙型肝炎病毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室解釋權(quán)：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心實(shí)施：衛(wèi)生部授權(quán)，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心發(fā)布實(shí)施第73頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月在臨床診斷中規(guī)定了HCV抗體篩查陽(yáng)性反應(yīng)后必須進(jìn)行補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)（免疫印跡或核酸檢測(cè)）在臨床診斷中引入S/CO比值的使用明確了丙肝檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第74頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月基本原則1.對(duì)于篩查試驗(yàn)陰性樣品，不需要做進(jìn)一步檢測(cè)，可報(bào)告“抗HCV陰性”2.對(duì)于篩查試驗(yàn)陽(yáng)性樣品，可選擇S/CO比值進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)，或非S/CO比值的補(bǔ)充試驗(yàn)

a.高比值，可報(bào)告“抗HCV陽(yáng)性”，不需要做補(bǔ)充試驗(yàn)；低比值，應(yīng)做RIBA.此方案適合特定的篩查試劑（已證實(shí)高比值，>95%補(bǔ)充試驗(yàn)陽(yáng)性）。

b.所有篩查試驗(yàn)陽(yáng)性標(biāo)本，均進(jìn)行RIBA；或先作HCVRNA檢測(cè)，陰性標(biāo)本再測(cè)RIBA第75頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年，5月■補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)：

免疫印跡試驗(yàn)

HCVRNA檢測(cè)HCV抗體的檢測(cè)方法■篩查試驗(yàn)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)z體金快速試驗(yàn)化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)免疫熒光試驗(yàn)第76頁(yè),共87頁(yè)，星期六，2024年