GXAS-沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

Q/LB.□XXXXX-XXXX前言本文件參照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由廣西分析測(cè)試協(xié)會(huì)提出、歸口并宣貫。本文件起草單位：廣西博測(cè)檢測(cè)技術(shù)服務(wù)有限公司、廣西壯族自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院、廣西益譜檢測(cè)技術(shù)有限公司、廣西綠保環(huán)境監(jiān)測(cè)有限公司、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部亞熱帶果品蔬菜質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢測(cè)中心、廣西壯族自治區(qū)分析測(cè)試研究中心、百色市檢驗(yàn)檢測(cè)中心、廣西眾晟生物科技有限公司、廣西東盟食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心、廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院、南寧市武鳴區(qū)經(jīng)濟(jì)作物技術(shù)服務(wù)中心、橫州市綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心、廣西工商學(xué)校、北海市農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心、金秀瑤族自治縣食品藥品與計(jì)量檢驗(yàn)檢測(cè)中心、憑祥市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局。本文件主要起草人：沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法范圍本文件描述了沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑殘留量的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法。本文件適用于沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑殘留量的測(cè)定。本文件定量限溴菌腈為0.076mg/kg，氟吡菌酰胺為0.003μg/kg，亞胺唑?yàn)?.0005mg/kg。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB2763食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理試樣用乙酸乙酯浸泡超聲或渦旋振蕩提取，鹽析離心后，取上清液，經(jīng)分散固相萃取凈化，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)，外標(biāo)法定量。試劑和材料除另有說明外，在分析中僅使用分析純?cè)噭┖虶B/T6682中規(guī)定的一級(jí)水。試劑乙腈（CH3CN，CAS號(hào)：75-05-8）：色譜純。甲醇（CH3OH，CAS號(hào)：67-56-1）：色譜純。乙酸乙酯，（CH3COOC2H5，CAS號(hào)：141-78-6)：色譜純。氯化鈉（NaCl，CAS號(hào)：7647-14-5）：優(yōu)級(jí)純。硫酸鎂(MgSO4，CAS號(hào)：7487-88-9)。用前在500℃下烘5h，冷卻200℃取出，冷卻近室溫，貯存于干燥器備用。標(biāo)準(zhǔn)品溴菌腈（C6H6Br2N2，CAS號(hào)35691-65-7）標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥99%。亞胺唑（C17H13Cl3N4S，CAS號(hào)：86598-92-7）標(biāo)準(zhǔn)品：純度宜≥99%。氟吡菌酰胺（C16H11ClF6N2O，CAS號(hào)：658066-35-4）標(biāo)準(zhǔn)品：純度宜≥99%。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制溴菌腈標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1000mg/L）準(zhǔn)確稱取約10mg（精確至0.1mg）溴菌腈標(biāo)準(zhǔn)品（5.2.1）于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.2）溶解并定容，避光-18℃及以下條件保存，有效期6個(gè)月。亞胺唑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1000mg/L）準(zhǔn)確稱取約10mg（精確至0.1mg）亞胺唑標(biāo)準(zhǔn)品（5.2.2）于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.2）溶解，并定容至10mL。避光-18℃及以下條件保存，有效期6個(gè)月。氟吡菌酰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1000mg/L）準(zhǔn)確稱取約10mg（精確至0.1mg）氟吡菌酰胺標(biāo)準(zhǔn)品（5.2.3）于10mL容量瓶中，用乙腈（5.1.1）溶解，并定容至10mL。避光-18℃及以下條件保存，有效期6個(gè)月。混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（100μg/mL）分別取適量上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（3.1～3.3）于10mL容量瓶中，40℃水浴氮?dú)獯抵两?，用乙酸乙酯?.1.3）定容配制成100μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再用乙酸乙酯（5.1.3）稀釋，配制10μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，避光-18℃及以下條件保存，有效期1個(gè)月。材料乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠(PSA)：40μm～60μm。微孔過濾膜（有機(jī)相）：O.22μm或相當(dāng)者。儀器和設(shè)備氣相色譜-質(zhì)譜儀：配有電子轟擊源（EI）。分析天平：感量0.1mg和感量0.01g。組織搗碎儀。渦旋振蕩儀。超聲波清洗器。離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4500r/min。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。試樣制備試樣制備樣品取樣部位按照GB2763的規(guī)定執(zhí)行。對(duì)于個(gè)體較小的樣品，取樣后全部處理；對(duì)于個(gè)體較大的基本均勻樣品，可在對(duì)稱軸或?qū)ΨQ面上分割或切成小塊后處理；用四分法取樣或直接放入組織搗碎機(jī)中搗碎成勻漿。勻漿放入聚乙烯容器中。試樣儲(chǔ)存將試樣按照測(cè)試和備用分別存放。于-18℃及以下條件儲(chǔ)存。分析步驟提取稱取10g試樣置于50mL聚丙烯離心管中，加入10mL乙酸乙酯（5.1.3）超聲或渦旋振蕩提取15min，加入5gNaCl（5.1.4）,渦旋3min，于4500r/min離心5min，待凈化。凈化吸取8.1中上層清液5mL于內(nèi)含1000mg無水硫酸鎂（5.1.5）、200mgPSA（5.4.1）的塑料離心管中，旋渦2min，于4500r/min下離心5min。準(zhǔn)確吸取3mL上清液于l5mL離心管中，40℃水浴氮?dú)獯抵良s0.8mL，用乙酸乙酯（5.1.3）定容至1.0mL，過微孔濾膜(5.4.2)，轉(zhuǎn)進(jìn)樣小瓶用于測(cè)定。測(cè)定儀器參考條件儀器參考條件如下：色譜柱：5％苯基-95％甲基聚硅氧烷石英毛細(xì)管柱；30m×O.25mm×O.25μm或相當(dāng)者；色譜柱溫度：40℃保持2min，然后以20℃/min程序升溫至180℃，保持2min；再以10℃/min升溫至280℃，保持5min；載氣：氦氣，純度≥99.999%，流速1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度：280℃；進(jìn)樣量：1μL；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；電子轟擊源：70eV；離子源溫度：230℃；GC-MS接口溫度：280℃；選擇離子監(jiān)測(cè)：每種化合物分別選擇一個(gè)定量離子，2～3個(gè)定性離子。每組所有需要檢測(cè)的離子按照出峰順序，分時(shí)段分別檢測(cè)。每種化合物的保留時(shí)間、定量離子、定性離子及定量離子與定性離子的豐度比值，參見附錄A。基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線空白樣品按照8.1、8.2進(jìn)行前處理得到空白基質(zhì)溶液。精確吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，逐級(jí)用空白基質(zhì)溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.010mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.400mg/L、0.800mg/L、1.000mg/L的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，根據(jù)儀器性能和檢測(cè)需要選擇不少于5個(gè)濃度點(diǎn)，供氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定。以農(nóng)藥定量離子的質(zhì)量色譜圖面積為縱坐標(biāo)、相對(duì)應(yīng)的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。定性及定量保留時(shí)間被測(cè)試樣中目標(biāo)農(nóng)藥色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時(shí)間相比較.相對(duì)誤差應(yīng)在±2.5%之內(nèi)。離子豐度比在相同實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí).如果檢出的色譜峰的保留時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)樣相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，目標(biāo)化合物選擇的離子均出現(xiàn)，而且同一檢測(cè)批次，對(duì)同一化合物，樣品目標(biāo)化合物的離子豐度比與質(zhì)量濃度相當(dāng)?shù)幕|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液相比，其允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在這種農(nóng)藥或相關(guān)化學(xué)品。如果不能確證，應(yīng)重新進(jìn)樣，以掃描方式（有足夠靈敏度）或采用增加其他確證離子的方式或用其他靈敏度更高的分析儀器來確證。本方法的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GC-MS選擇離子監(jiān)測(cè)質(zhì)量色譜圖參見附錄B。定性時(shí)離子豐度比的最大允許偏差單位為百分比離子豐度比＞50＞20～50＞10～20≤10允許相對(duì)偏差±20±25±30±50定量外標(biāo)法定量。試樣溶液的測(cè)定將基質(zhì)匹配目標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和試樣溶液依次注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，保留時(shí)間和離子豐度比定性，測(cè)得定量離子的質(zhì)量色譜圖峰面積，待測(cè)樣液中農(nóng)藥的響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測(cè)的定量測(cè)定線性范圍之內(nèi)，超過線性范圍時(shí)應(yīng)根據(jù)測(cè)定濃度進(jìn)行適當(dāng)倍數(shù)稀釋后再進(jìn)行分析。平行試驗(yàn)按以上步驟對(duì)同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)測(cè)定?？瞻自囼?yàn)除不加試樣外，采用完全相同的測(cè)定步驟進(jìn)行操作。結(jié)果計(jì)算試樣中各農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，單位為毫克每千克(mg/kg)，按公式(1)或公式(2)計(jì)算。 ω=ρ1×A×V3×V1 ω=ρ2×V3×式中：ω—試樣中各被測(cè)物殘留量的數(shù)值，單位為毫克每千克(mg/kg)；ρ1—基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測(cè)物的質(zhì)量濃度的數(shù)值，單位為毫克每升(mg/L)；ρ2—從基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線中得到的試樣溶液中被測(cè)物的質(zhì)量濃度的數(shù)值，單位為毫克每升(mg/L)；A—試樣溶液中被測(cè)物的質(zhì)量色譜圖峰面積；As—基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測(cè)物的質(zhì)量色譜圖峰面積；V1—提取液的體積，單位為毫升(mL)；V2—移取凈化液的體積，單位為毫升(mL)；V3—樣液最終定容體積，單位為毫升(mL)；m—試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克(g)。

（資料性）

溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑農(nóng)藥及其代謝物的相關(guān)化學(xué)品和內(nèi)標(biāo)化合物的保留時(shí)間、定量離子、定性離子及定量離子與定性離子的比值見表A.1。溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑農(nóng)藥及其代謝物的相關(guān)化學(xué)品和內(nèi)標(biāo)化合物的保留時(shí)間、定量離子、定性離子及定量離子與定性離子的比值序號(hào)農(nóng)藥中文名農(nóng)藥英文名保留時(shí)間(min)定量離子定性離子1定性離子2定性離子31溴菌腈bromothalonil6.52766.052.0106.079.02氟吡菌酰胺fluopyram15.994173.