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文檔簡介
第一節(jié)
基因工程及其技術第4課時
將目的基因?qū)胧荏w細胞和目的基因及其表達產(chǎn)物的檢測鑒定學習目標學科核心素養(yǎng)1.闡明將目的基因?qū)胧荏w細胞的方法。2.闡明目的基因及其表達產(chǎn)物的檢測鑒定的方法。1.科學思維——列表比較目的基因?qū)氩煌荏w細胞的方法、目的基因檢測和鑒定的方法。2.科學思維——結合
指導蛋白質(zhì)合成的過程,簡述不同層次下目的基因的檢測。教材預習·必備知識全過關一、將目的基因?qū)胧荏w細胞1.
將目的基因?qū)胫参锛毎?)
主要方法:______________。農(nóng)桿菌轉化法(2)
農(nóng)桿菌雙子葉裸子酚類農(nóng)桿菌染色體
遺傳和表達2.
將目的基因?qū)氩溉閯游锛毎?)
方法①
主要方法:____________(受體細胞主要是受精卵)。②
其他方法:用__________與目的基因構建載體,去感染受體動物細胞,使目的基因?qū)雱游锛毎麅?nèi)。顯微注射法
(2)
制備過程:受精卵目的基因相同發(fā)情周期3.
將目的基因?qū)胛⑸锛毎?/p>
通透性容易感受態(tài)
感受態(tài)基因表達載體二、目的基因及其表達產(chǎn)物的檢測鑒定1.
原因:基因?qū)胧荏w細胞后,能否有效地______目的基因并產(chǎn)生相應的性狀,需要進一步做篩選和鑒定。表達2.
分子水平的檢測
同源性堿基互補配對
放射性熒光互補示蹤位置
轉錄分子雜交技術
堿基互補配對
目的基因雜交帶(3)
從蛋白質(zhì)方面進行檢測:翻譯抗原—抗體特異性抗原—抗體雜交帶3.
個體水平的檢測(1)檢測目的:對生物的特定性狀進行鑒定。(2)實例:對于導入某種魚的抗凍蛋白基因的轉基因番茄進行個體檢測,需要栽培轉基因番茄獲得果實后,再與__________比較,確定其是否具有了抗凍性狀。天然產(chǎn)品核心要點·能力素養(yǎng)全提升要點一
將目的基因?qū)胧荏w細胞
2.將目的基因?qū)氩煌毎姆椒毎愋统S梅椒ㄞD化過程特點植物細胞農(nóng)桿菌轉化法目的基因插入
質(zhì)粒的
上
轉入農(nóng)桿菌
導入植物細胞
插入植物細胞染色體的
上
目的基因表達經(jīng)濟、有效,適用于雙子葉植物和裸子植物細胞類型常用方法轉化過程特點動物細胞顯微注射法(1)受精卵
顯微注射
受精卵移植到處于相同發(fā)情周期的母畜子宮
受精卵發(fā)育
獲得具有新性狀的動物;(2)用病毒
與目的基因一起構建的載體,去感染受體動物細胞,也能使目的基因?qū)雱游锛毎麅?nèi)最為有效地將目的基因?qū)雱游锛毎姆椒ㄎ⑸锛毎?/p>
處理法
處理微生物細胞
感受態(tài)細胞
將基因表達載體與感受態(tài)細胞混合在緩沖液中
在適宜的條件下完成轉化簡便、經(jīng)濟、有效續(xù)表3.大腸桿菌和酵母菌在基因工程中都可以作為受體細胞,但又有所不同。大腸桿菌為原核細胞,而酵母菌為真核細胞(具有多種細胞器),所以酵母菌在用于生產(chǎn)需要加工和分泌的蛋白質(zhì)時比大腸桿菌更有優(yōu)勢。4.目的基因進入受體細胞內(nèi),并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程,稱為轉化。轉化的實質(zhì)是目的基因整合到受體細胞染色體基因組中。典例1
農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物,能在自然條件下侵染植物,因而在植物基因工程中得到了廣泛的運用。下圖為農(nóng)桿菌轉化法的示意圖,試回答下列問題:
單子葉植物
D
對點演練2
[多選]下列關于將目的基因?qū)胧荏w細胞的說法,正確的是(
)
BC
要點二
目的基因及其表達產(chǎn)物的檢測與鑒定1.目的基因的檢測鑒定的方法檢測水平檢測內(nèi)容方法結果顯示分子水平的檢測檢測轉基因生物的染色體上是否插入了目的基因
分子雜交技術(基因探針
轉基因生物的
)是否顯示出雜交帶檢測目的基因是否轉錄分子雜交技術(基因探針
轉基因生物的
)是否顯示出雜交帶檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)抗原—抗體雜交法是否顯示出雜交帶個體水平的檢測包括抗蟲、抗病的接種實驗,以確定是否有抗性及抗性程度;基因工程產(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品進行活性比較等
典例2
目的基因?qū)胧荏w細胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性,只有通過鑒定和檢測才能知道。下列屬于目的基因檢測和鑒定的是(
)
C
對點演練3
[2022江蘇淮安馬壩高中高二期中]下列用于判斷目的基因是否轉移成功的方法中
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