臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

關(guān)于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞什么是臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞？臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（MesnchymalStemCells，MSCs）是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞，它能分化成許多種組織細(xì)胞。第2頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月間充質(zhì)干細(xì)胞間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymalstemcells，MSC）是干細(xì)胞家族的重要成員，來(lái)源于發(fā)育早期的中胚層和外胚層。MSC最初在骨髓中發(fā)現(xiàn)，因其具有多向分化潛能、造血支持和促進(jìn)干細(xì)胞植入、免疫調(diào)控和自我復(fù)制等特點(diǎn)而日益受到人們的關(guān)注。第3頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月臍帶——獲取干細(xì)胞的另一來(lái)源我國(guó)科學(xué)家2006年首次從新生嬰兒廢棄的臍帶組織中得到了一種多能干細(xì)胞，稱作臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSC)。UC-MSC具有胚胎干細(xì)胞類似的增殖能力和多向分化潛能，且來(lái)源豐富、取材方便、低病毒感染率、無(wú)倫理障礙，又沒(méi)有胚胎干細(xì)胞產(chǎn)生畸胎瘤的問(wèn)題，并且抗原性很低。不產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，異體使用無(wú)需HLA配型。第4頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月間充質(zhì)干細(xì)胞治療疾病的原理替代和修復(fù)死亡和受損傷的細(xì)胞；激活休眠和處于抑制狀態(tài)的細(xì)胞；旁分泌作用（分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、抗凋亡因子等）第5頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月涉及病癥肝臟疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病心血管疾病血液系統(tǒng)疾病骨關(guān)節(jié)疾病燒傷糖尿病MSCs可能用于治療以下疾病間充質(zhì)干細(xì)胞多向分化作為種子細(xì)胞，臨床上主要用于治療機(jī)體無(wú)法自然修復(fù)的組織細(xì)胞和器官損傷的多種難治性疾病是關(guān)鍵鑒于間充質(zhì)干細(xì)胞具有多向分化潛能、能支持造血和促進(jìn)造血干細(xì)胞植入、調(diào)節(jié)免疫以及分離培養(yǎng)操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)作為免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞，治療免疫排斥和自身免疫性疾病第6頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有臨床應(yīng)用價(jià)值?

泌尿系統(tǒng)：腎實(shí)質(zhì)的修復(fù)；?

消化系統(tǒng)：肝組織的修復(fù)；?

內(nèi)分泌系統(tǒng)：胰島細(xì)胞的修復(fù)；?

神經(jīng)系統(tǒng)：腦、脊髓損傷的修復(fù)；?

血液系統(tǒng)：化療、放療后造血系統(tǒng)的修復(fù)；?

循環(huán)系統(tǒng)：心肌修復(fù)、血管修復(fù)；?

免疫系統(tǒng)：調(diào)節(jié)免疫，移植治療時(shí)可降低免疫排斥反應(yīng)；?

衰竭器官的結(jié)構(gòu)和功能的修復(fù)和再生：最終替代組織和器官移植。第7頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月間充質(zhì)干細(xì)胞治療途徑腰穿途徑靜脈途徑局部種植介入途徑第8頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月優(yōu)勢(shì)1、取材方便：采集過(guò)程簡(jiǎn)單、無(wú)痛苦，不影響母子健康；2、細(xì)胞數(shù)量豐富：增值能力強(qiáng)，可為組織器官的修復(fù)和再生提供所需的大量細(xì)胞；3、免疫原性低：具有獨(dú)特的免疫調(diào)節(jié)功能，自體使用不引起免疫排斥反應(yīng)，異體移植還可降低免疫反應(yīng)；4、不涉及社會(huì)、倫理及法律方面的更多爭(zhēng)議。第9頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月前景干細(xì)胞治療是繼藥物治療、手術(shù)治療之后的又一場(chǎng)醫(yī)療革命。目前，發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)開(kāi)始將干細(xì)胞治療技術(shù)用于臨床治療自身免疫性疾病、心肌梗死、脊髓損傷、心力衰竭等疾病。第10頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月間充質(zhì)干細(xì)胞前景干細(xì)胞的魅力在于：一旦身體需要，這些細(xì)胞可按照發(fā)育途徑通過(guò)分裂而產(chǎn)生分化成熟的體細(xì)胞。也許在某一天，人們突然發(fā)現(xiàn)，人體器官可以在實(shí)驗(yàn)室按需要、按流程生產(chǎn)，血細(xì)胞、腦細(xì)胞、骨骼、心肌細(xì)胞、肝臟、神經(jīng)等的更換都不成問(wèn)題，即使患上白血病、帕金森氏癥和癌癥這些不治之癥也能絕處逢生。第11頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月供者篩選供者需要提供供者的既往病史、現(xiàn)病史、家族史等資料。第12頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月樣本采集運(yùn)輸要求臍帶采集標(biāo)準(zhǔn)：

1.臍帶長(zhǎng)度不得低于20cm2.臍帶兩端均在2-3cm處結(jié)扎

3.臍帶保存液在有效期內(nèi)，并且無(wú)明顯顏色變化

4.臍帶保存瓶無(wú)漏液現(xiàn)象，密封嚴(yán)實(shí)、無(wú)裂橫

5.采集套裝內(nèi)容完整，無(wú)缺失

6.采集信息登記完整、字跡清楚易辨認(rèn)

7.臍帶運(yùn)輸時(shí)間在規(guī)定范圍內(nèi)

8.溫度控制在適度范圍內(nèi)（0度-25度）第13頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月樣本接收標(biāo)準(zhǔn)臍帶的接收標(biāo)準(zhǔn)：

1.樣本信息一致、無(wú)誤，并能追溯至臍帶所有人。2.母血采集量≥5ml臍血檢測(cè)樣本采集量≥5ml3.采集套裝內(nèi)容完整，無(wú)缺失；采集信息登記完整、字跡清楚易辨認(rèn)。4.無(wú)可能造成供者基因型異常的家族史。5.供者健康調(diào)查表登記信息無(wú)異常。第14頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月

間充質(zhì)干細(xì)胞的制備方式間充質(zhì)干細(xì)胞的制備原理：臍帶華通氏膠內(nèi)富含間充質(zhì)干細(xì)胞，通過(guò)分離獲得華通氏膠后，并進(jìn)行體外培養(yǎng)，利用間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和可體外擴(kuò)增特性，可獲得更多的間充質(zhì)干細(xì)胞。組織塊分離法免疫五項(xiàng)檢測(cè)均為陰性第15頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月工藝流程簡(jiǎn)介供者篩選采集接收制備培養(yǎng)凍存復(fù)蘇發(fā)放運(yùn)輸臨床應(yīng)用信息反饋第16頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月間充質(zhì)干細(xì)胞的制備方式華通氏膠的提取與培養(yǎng)華通氏膠提?。?.消毒2.清洗3.分離出兩條動(dòng)脈和一條靜脈4.剝?nèi)∪A通氏膠5.剪碎華通氏膠（大小1mm3）6.接種至培養(yǎng)皿培養(yǎng)（密度2-3g/10cm皿）第17頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月間充質(zhì)干細(xì)胞原代培養(yǎng)細(xì)胞補(bǔ)液和換液（原代培養(yǎng)）

1.制備五天補(bǔ)液（觀察是否有細(xì)胞爬出）2.八天換液第18頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月間充質(zhì)干細(xì)胞的凍存細(xì)胞收集前須給檢測(cè)送樣做細(xì)菌檢測(cè)和流式（CD90+、CD105+、CD166+）冷凍保護(hù)劑（胎牛血清+DMSO）配制：DMSO10%冷凍方式深低溫冰箱梯度降溫第19頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月細(xì)胞治療程序1、治療前咨詢：明確診斷，明確疾病處于哪一期；

2、治療風(fēng)險(xiǎn)：分析利弊；可能的副作用；獲益

3、知情同意：第20頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月治療前準(zhǔn)備1).安全檢測(cè):菌檢；

2).個(gè)體化治療方案設(shè)計(jì)：每一位病人的治療方案，都根據(jù)其評(píng)價(jià)結(jié)果具體制定;

3).需要的細(xì)胞數(shù)量；4).細(xì)胞的使用方法；5).可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)及應(yīng)對(duì)措施。第21頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月間充質(zhì)干細(xì)胞質(zhì)量要求細(xì)菌檢測(cè)內(nèi)毒素檢測(cè)革蘭氏檢測(cè)支原體檢測(cè)活性檢測(cè)≥90%陰性第22頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月細(xì)胞發(fā)放1.細(xì)胞的保存(基質(zhì)：生理鹽水或者保存液）2.運(yùn)輸要求：時(shí)間、溫度3.病人信息填寫完整4.樣本檢測(cè)合格第23頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月MSC治療禁忌證：

1.懷孕。2.精神病。3.嚴(yán)重的心、肝、腎、肺功能不全。

3.不能控制的嚴(yán)重感染。

4.合并其他有致命危險(xiǎn)的疾病。5.一般受者年齡不超過(guò)65歲（個(gè)別患者>65歲）。6.自體免疫性疾病晚期。7.惡性腫瘤。8.HIV陽(yáng)性第24頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月第25頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月案例分析第26頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月干細(xì)胞臨床應(yīng)用

一、肝硬化細(xì)胞移植有可能成為肝硬化治療的最佳備選方案。越來(lái)越多的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明MSC可以橫向分化為功能性肝細(xì)胞，動(dòng)物研究表明臍帶MSC可以抑制誘導(dǎo)型的肝硬化發(fā)生，并促進(jìn)肝硬化的消退。

第27頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月臨床資料本組男10例，女2例，年齡38-63歲。均為慢性乙型肝炎，肝硬化,Child-Pugh分級(jí)B級(jí)9例，C級(jí)3例。健康嬰兒臍帶提取間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)實(shí)驗(yàn)室傳代、擴(kuò)增，取108制成40ml混懸液，第一次經(jīng)肝動(dòng)脈注入，第二次以后為靜脈輸注，每周一次，共4次。4周后復(fù)查生化指標(biāo)。第28頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月結(jié)果食欲改善、體力好轉(zhuǎn)11例（91.66%）；腹脹減輕11例（91.66%）；腹水減少、下肢浮腫減輕10例（83.33%）。12例患者術(shù)中均未發(fā)生嚴(yán)重并發(fā)癥，術(shù)后無(wú)不良反應(yīng)。第29頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月12例肝硬化患者臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植前后實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)變化

ALB(g/L)ALT(U/L)TBIL(μmol/L)PT(s)移植前

30.69±4.32122.78±89.3235.32±21.6117.89±4.49移植后4周

36.28±5.8165.67±20.6333.75±19.7115.68±4.14P值

<0.01<0.05>0.05<0.05第30頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月MSC治療肝硬化的機(jī)制

主要有以下幾個(gè)方面：1)MSC分化形成正常肝細(xì)胞，補(bǔ)充肝細(xì)胞數(shù)量，改善肝功能；2)MSC分泌細(xì)胞因子/生長(zhǎng)因子、抑制炎癥反應(yīng)；3)MSC抑制肝星形細(xì)胞，活化、阻止細(xì)胞外基質(zhì)的生成；4)MSC激活卵原細(xì)胞，促進(jìn)肝細(xì)胞再生；5)MSC降解肝內(nèi)過(guò)量的細(xì)胞外基質(zhì)。

第31頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月二、脊髓損傷臨床資料本組男11例，女4例。年齡11-48歲，平均37歲。病程4個(gè)月-5年，平均1.2年。治療前均有損傷平面以下肌力、肌張力減退，其中尿失禁9例，大便失禁7例。

第32頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月臨床資料臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞108，第一次、第三次制成混懸液20ml，其中5ml通過(guò)腰穿作椎管內(nèi)注射，另外15ml經(jīng)靜脈輸注。第二次、第四次制成混懸液40ml，作靜脈輸注。每次間隔一周，共4次為一療程。第33頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)感覺(jué)平面恢復(fù)2個(gè)椎體節(jié)段以上，肌力恢復(fù)2級(jí)及以上，肌張力恢復(fù)2級(jí)及以上，大小便能控制，達(dá)到上述之一者，為顯效。有改善但達(dá)不到上述標(biāo)準(zhǔn)，為有效。第34頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月結(jié)果15例患者，顯效5例，有效9例，無(wú)效1例。第35頁(yè),共38頁(yè)，星期六，2024年，5月三、肌萎縮側(cè)索硬化癥

肌萎縮側(cè)索硬化癥(amyotrphiclateralsclerosis，ALS)是一種累及錐體束上、下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)