血糖Glu的測(cè)定干擾預(yù)試驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)_第1頁(yè)
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關(guān)于血糖Glu的測(cè)定干擾預(yù)試驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)一、干擾原理干擾試驗(yàn)用于測(cè)定某物質(zhì)加到樣品中產(chǎn)生的系統(tǒng)誤差。干擾物濃度一定時(shí),產(chǎn)生的誤差是恒定系統(tǒng)誤差,誤差的實(shí)際大小隨干擾物的濃度而變化。干擾試驗(yàn)即用于檢驗(yàn)?zāi)撤椒ǖ奶禺愋?,也用于檢測(cè)干擾物質(zhì)對(duì)方法的干擾作用,以評(píng)價(jià)分析方法的準(zhǔn)確性。第2頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月β-D-葡萄糖+O2+H2OGODD-葡萄糖酸+H2O2

(GOD:葡萄糖氧化酶)H2O2+4-AAP+酚POD2H2+紅色醌類化合物

(4-AAP:4氨基氨替比林)(POD:過(guò)氧化物酶)第3頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月當(dāng)干擾物的濃度達(dá)到一定量時(shí),將對(duì)相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生干擾,由于vitC、尿酸等物質(zhì)對(duì)血糖測(cè)定GOD-POD法具有干擾作用,本實(shí)驗(yàn)選用vitC做GOD-POD法測(cè)血糖的干擾試驗(yàn),vitC與GOD反應(yīng)生成的H2O2發(fā)生反應(yīng),使部分H2O2不能參與第二步POD的偶聯(lián)反應(yīng),從而降低顯色強(qiáng)度,產(chǎn)生負(fù)的測(cè)定誤差。第4頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月二、樣品制備

干擾樣品血清30mmol/LVitC標(biāo)準(zhǔn)液生理鹽水基礎(chǔ)血清(ml)0.09-0.01樣品Ⅰ(ml)0.090.01-樣品Ⅱ(ml)0.090.0070.003樣品Ⅲ(ml)0.090.0050.005第5頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月三、測(cè)定方法

1、加樣

2、分光光度計(jì)測(cè)定方法:波長(zhǎng)505nm,以空白管調(diào)零,測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)管和各樣品管吸光度值,按公式計(jì)算測(cè)定結(jié)果。

試劑校準(zhǔn)(S)空白(B)基礎(chǔ)樣品干擾管123

校準(zhǔn)液(ml)

0.02—————樣品(ml)

——————蒸餾水(ml)

—0.02————基礎(chǔ)樣品(ml)

——0.02———干擾樣品1(ml)

———0.02——干擾樣品2(ml)

————0.02—干擾樣品3(ml)

—————0.02工作試劑(ml)

2.02.02.02.02.02.0

各管充分混勻置37水浴10分鐘后室溫冷卻。第6頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月四、計(jì)算與數(shù)據(jù)處理⑴計(jì)算公式:Glu含量(mmol/L)=×Cs

其中:Cs=5.55mmol/L干擾物加入量=

干擾物濃度:30mmol/L

干擾值(mmol/L)=干擾樣品測(cè)定值-基礎(chǔ)樣品測(cè)定值干擾率(%)=干擾值/基礎(chǔ)值×100⑵干擾試驗(yàn)的數(shù)據(jù)處理:

樣品GLU測(cè)得值(mmol/L)加入U(xiǎn)S值(mmol/L)干擾值(mmol/L)干擾率(%)基礎(chǔ)樣品(ml)———干擾樣品1(ml)干擾樣品2(ml)干擾樣品3(ml)

第7頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月五、參考區(qū)間干擾值即偏差,當(dāng)偏差<允許誤差,則表明干擾物引起的偏差不會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的臨床應(yīng)用價(jià)值。對(duì)于血糖測(cè)定而言,當(dāng)干擾物引起的偏差小于1/4TEa[CLIA88(臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)1988)能力對(duì)比試驗(yàn)的質(zhì)量要求規(guī)定,血糖的TEa為0.33mmol/L或10%],則不會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的臨床應(yīng)用價(jià)值,可以近似地認(rèn)為當(dāng)干擾物濃度低于該濃度時(shí)不會(huì)對(duì)血糖測(cè)定產(chǎn)生影響。第8頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月六、評(píng)價(jià)與思考當(dāng)干擾物引起的偏差小于1/4TEa時(shí),則不會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的臨床應(yīng)用價(jià)值,可近似地認(rèn)為當(dāng)干擾物濃度低于該濃度時(shí)不影響測(cè)定結(jié)果

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