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2025屆四川省綿陽(yáng)市高三考前熱身生物試卷注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書寫,字體工整、筆跡清楚。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效;在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.圖1、圖2表示T2噬菌體侵染大腸桿菌的兩個(gè)實(shí)驗(yàn),不正確的是A.甲處的噬菌體一定含有放射性B.乙處的噬菌體不一定含放射性C.兩個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)合起來(lái)能證明DNA是T2噬菌體的遺傳物質(zhì)D.如果培養(yǎng)2代以上,乙處含放射性的噬菌體并不增多2.如圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過程(只考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合)。若A、B分別是基因型為Hhrr、hhRr的兩個(gè)煙草品種的花粉,且這兩對(duì)基因分別位于兩對(duì)同源染色體上,由于一對(duì)隱性純合基因(rr或hh)的作用,在光照強(qiáng)度大于800lx時(shí),都不能增殖。下列敘述中正確的是()。①實(shí)驗(yàn)開始時(shí)必須用纖維素酶和果膠酶除去不利于原生質(zhì)體融合的物質(zhì)②實(shí)驗(yàn)中除了雜種細(xì)胞外,還有5種融合細(xì)胞③要想從融合細(xì)胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRr的雜種細(xì)胞,可在大于800lx光照下培養(yǎng),收集增殖分化的細(xì)胞團(tuán)④要想從融合細(xì)胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRr或Hhrr的雜種細(xì)胞,可在大于800lx光照下培養(yǎng),收集增殖分化的細(xì)胞團(tuán)⑤從理論上分析考慮,將融合細(xì)胞的培養(yǎng)液放在大于800lx光照下培養(yǎng),有5種融合細(xì)胞不能增殖分化A.①②③⑤ B.①②③ C.①③④⑤ D.①③⑤3.蘇氨酸在相關(guān)酶的作用下,通過5步反應(yīng)合成異亮氨酸。當(dāng)細(xì)胞中異亮氨酸濃度足夠高時(shí),其與蘇氨酸脫氨酶結(jié)合,抑制酶活性;當(dāng)異亮氨酸的濃度下降到一定程度時(shí),異亮氨酸脫離蘇氨酸脫氨酶,抑制解除。反應(yīng)過程如下圖所示,相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.細(xì)胞中只要蘇氨酸脫氨酶活性正常就能合成異亮氨酸B.蘇氨酸與異亮氨酸分子結(jié)構(gòu)的差異體現(xiàn)在R基團(tuán)上C.蘇氨酸脫氨酶與異亮氨酸結(jié)合后空間結(jié)構(gòu)改變,活性被抑制D.上述調(diào)節(jié)方式為負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制,能有效避免物質(zhì)浪費(fèi)4.某同學(xué)做了以下實(shí)驗(yàn):取A、B兩支試管,在A中加入煮熟的蠶豆子葉,B中加入發(fā)芽的蠶豆子葉。在兩試管中分別加入亞甲基藍(lán)溶液(亞甲基藍(lán)氧化態(tài)為藍(lán)色,還原態(tài)為無(wú)色),一段時(shí)間后倒出溶液,兩試管中的子葉都呈藍(lán)色。然后兩試管分別加水淹沒子葉,抽氣,在水面覆蓋適量石蠟油,適宜溫度下保溫一段時(shí)間后,A管子葉藍(lán)色深度不變,B管子葉藍(lán)色變淺。取出兩管子葉放在濾紙上一段時(shí)間,A管子葉藍(lán)色深度不變,B管子葉藍(lán)色深度一定程度恢復(fù)。下列分析不合理的是()A.該實(shí)驗(yàn)中抽氣并在水面覆蓋適量石蠟油的目的是隔絕空氣,制造無(wú)氧環(huán)境B.保溫后A管子葉藍(lán)色深度不變的原因是高溫導(dǎo)致酶失活,細(xì)胞無(wú)呼吸作用C.保溫后B管子葉藍(lán)色變淺的原因是亞甲基藍(lán)被無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的[H]還原D.濾紙上B管子葉藍(lán)色深度恢復(fù)的原因是子葉進(jìn)行有氧呼吸將亞甲基藍(lán)氧化5.下列有關(guān)人體細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的敘述,正確的是()A.DNA分子中一條鏈上的磷酸和核糖通過氫鍵連接B.線粒體內(nèi)O2/CO2的值比細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)的高C.主動(dòng)運(yùn)輸有助于維持細(xì)胞內(nèi)元素組成的相對(duì)穩(wěn)定D.無(wú)氧呼吸不需要O2的參與,該過程最終有[H]的積累6.枯草桿菌野生型與某一突變型的差異見下表。下列敘述正確的是()枯草桿菌核糖體S12蛋白55~58位氨基酸序列鏈霉素與核糖體的結(jié)合在含鏈霉素培養(yǎng)基中的存活率(%)野生型…—P—K—K—P—…能0突變型…—P—R—K—P—…不能100注:P一脯氨酸;K一賴氨酸;R一精氨酸A.突變型的產(chǎn)生是枯草桿菌的基因發(fā)生堿基對(duì)缺失或增添的結(jié)果B.鏈霉素通過與核糖體的結(jié)合,抑制了枯草桿菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄功能C.突變型的產(chǎn)生表明枯草桿菌種群的基因頻率發(fā)生了改變D.突變型枯草桿菌與野生型枯草桿菌不屬于同一個(gè)物種二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)甜味蛋白Brazzein是從一種西非熱帶植物的果實(shí)中分離得到的一種相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì),它含有54個(gè)氨基酸,是目前最好的糖類替代品。迄今為止,已己發(fā)現(xiàn)Brazzein基因在數(shù)種細(xì)菌、真菌和高等植物、動(dòng)物細(xì)胞中都能表達(dá)。請(qǐng)回答下列問題:(1)Brazzein基因除了可從原產(chǎn)植物中分離得到外,還可以通過__________的方法獲得,此方法在基因比較小,且__________已知的情況下較為適用。(2)將Brazzein基因?qū)爰?xì)菌、真菌和高等植物細(xì)胞時(shí)都可使用的常用載體是__________,構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟,其目的是__________________________________________________,同時(shí),使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用?;虮磉_(dá)載體中,除了目的基因外,還必須有____________________、復(fù)制原點(diǎn)等。(3)若受體胞是大腸桿菌,可先用Ca2+處理細(xì)胞使其______________,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與大腸桿菌混合;若受體是雙子葉植物,則常采用的方法是_____________。若受體是哺乳動(dòng)物,則可將Brazzein基因與________的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,以便從乳汁中獲得大量的Brazzein蛋白。8.(10分)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)將外源生長(zhǎng)激素基因?qū)司d羊體內(nèi)后,轉(zhuǎn)基因綿羊的生長(zhǎng)速率比普通綿羊提高30%,體型增大50%?;卮鹣铝袉栴}。(1)若要獲得豬的生長(zhǎng)激素基因,應(yīng)從豬的______________________內(nèi)提取mRNA作為模板,不能從豬其他細(xì)胞提取mRNA的原因是_____________________。以mRNA為模板,在___________酶的催化下合成cDNA,然后利用_____________________技術(shù)在體外大量擴(kuò)增生長(zhǎng)激素基因,該技術(shù)消耗的原料是dCTP、dATP、dGTP、dTTP,而不是4種脫氧核苷酸,推測(cè)原因是______________________。(2)將生長(zhǎng)激素基因?qū)刖d羊的_____________________(細(xì)胞)之前,需要先構(gòu)建________。該過程用到的工具酶是_____________________。(3)為了檢測(cè)獲得的轉(zhuǎn)基因綿羊中外源生長(zhǎng)激素基因是否表達(dá),在分子水平上,可采用的方法是______________________;在個(gè)體水平上,可以采用的鑒定方法是____________________。9.(10分)國(guó)家863計(jì)劃項(xiàng)目“利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用蛋白”取得重大進(jìn)展。目前,已經(jīng)成功獲得經(jīng)純化的抗凝血酶Ⅲ蛋白,達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。下面是制作嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器的流程圖,回答相關(guān)問題。(1)與嶗山奶山羊相比,一般不選用小鼠作為乳腺生物反應(yīng)器的主要原因是__________________。(2)PCR擴(kuò)增抗凝血酶Ⅲ基因時(shí),復(fù)性時(shí)冷卻溫度的設(shè)定是成功的關(guān)鍵,因?yàn)闇囟冗^高會(huì)破壞_____之間相應(yīng)堿基的配對(duì)。過程③為________________,此過程需將該藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,目的是______________________________________________。(3)過程①需將重組質(zhì)粒注入受精卵內(nèi),而不是動(dòng)物體細(xì)胞內(nèi),其原因是_______________________。(4)在進(jìn)行過程⑤之前,需取囊胚期的___________細(xì)胞做性別鑒定;隨后對(duì)篩選的胚胎進(jìn)行分割獲得同卵雙胎。胚胎分割時(shí),要將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割的原因是______________________________。10.(10分)歷史上塞罕壩林場(chǎng)由于過度采伐,土地日漸貧瘠,森林覆蓋率只有1.4%。自1962年,塞罕壩林場(chǎng)三代建設(shè)者在“黃沙遮天日,飛鳥無(wú)棲樹”的荒漠沙地上艱苦奮斗、甘于奉獻(xiàn),使森林覆蓋率達(dá)到80%,創(chuàng)造了荒原變林海的人間奇跡?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)對(duì)遭受破壞的塞罕壩林場(chǎng)進(jìn)行恢復(fù),就是要恢復(fù)林場(chǎng)的結(jié)構(gòu)和功能。林場(chǎng)生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括__________和__________兩方面,人工種植品種選擇的標(biāo)準(zhǔn)是_______________。(答出兩點(diǎn))(2)荒原變林海的過程中,該群落的單位面積CO2吸收量顯著上升,原因是:__________。(3)為了防治害蟲,林場(chǎng)建設(shè)者施用人工合成的性引誘劑誘殺害蟲的雄性個(gè)體來(lái)降低害蟲的發(fā)生率,其原理是______________。(4)塞罕壩林場(chǎng)的主要樹種為針葉松,其常見病蟲害之一為松毛蟲。林場(chǎng)建設(shè)者提出了防治松毛蟲的兩種方案:方案一是噴施高效農(nóng)藥;方案二是投放松毛蟲的天敵松毛蟲寄生蜂。請(qǐng)對(duì)上述兩種方案進(jìn)行評(píng)價(jià):____________________。11.(15分)蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用,而且對(duì)人體沒有影響。我國(guó)科學(xué)家欲獲得高效表達(dá)蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥,做了相關(guān)研究。(1)研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒,得到重組質(zhì)粒,再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細(xì)胞懸液中,獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。(2)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)效率很低,研究者推測(cè)不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好,因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物(引物B和C中都替換了一個(gè)堿基),并按圖2方式依次進(jìn)行4次PCR擴(kuò)增,以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點(diǎn)的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物?請(qǐng)?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”,若不選用該引物則劃“×”)。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4(3)研究者進(jìn)一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌,提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì),用_________方法檢測(cè)并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物,判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。為檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物的生物活性,研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長(zhǎng)滿了植物病菌的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,比較_________的大小,以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。(4)作為微生物農(nóng)藥,使用時(shí)常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌,其優(yōu)點(diǎn)是_________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、C【解析】
A.甲處噬菌體是利用被35S或32P標(biāo)記的大腸桿菌培養(yǎng)出的子代噬菌體,其一定含有放射性,A正確;B.噬菌體利用大腸桿菌的原料進(jìn)行DNA的半保留復(fù)制,子一代噬菌體都含有32P,子二代噬菌體則不一定含有32P,故乙處的噬菌體不一定含放射性,B正確;C.乙處的噬菌體不一定含放射性,圖2實(shí)驗(yàn)不能證明DNA是T2噬菌體的遺傳物質(zhì),C錯(cuò)誤;D.由于DNA復(fù)制的半保留特點(diǎn),每個(gè)噬菌體復(fù)制n代,含32P的噬菌體占2/2n,即培養(yǎng)2代以上,乙處含放射性的噬菌體所占比例越來(lái)越小,D正確。故選C。2、D【解析】
植物體細(xì)胞雜交時(shí),先要用酶解法(纖維素酶和果膠酶)去除細(xì)胞壁,得到原生質(zhì)體;再用化學(xué)方法(聚乙二醇)或物理方法(電激、離心和振動(dòng))來(lái)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,若只考慮兩個(gè)原生質(zhì)體的融合,誘導(dǎo)融合產(chǎn)生細(xì)胞團(tuán)(只考慮兩個(gè)原生質(zhì)體的融合)有6種基因型,即HHrr、hhrr、hhRR、HhRr、Hhrr、hhRr,其中HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr的個(gè)體不能分化,只有同時(shí)具備了H和R基因才能夠分化。【詳解】①在植物體細(xì)胞雜交的實(shí)驗(yàn)中,為了便于原生質(zhì)體的融合,需要用溫和的方法去除細(xì)胞壁,細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,所以去除細(xì)胞壁時(shí)用纖維素酶和果膠酶,①正確;
②根據(jù)基因的自由組合定律可以看出,A的花粉即配子的基因型為Hr、hr,B的花粉基因型為hR、hr,誘導(dǎo)融合產(chǎn)生細(xì)胞團(tuán)(只考慮兩個(gè)原生質(zhì)體的融合)共有6種基因型,即HHrr、hhrr、hhRR、HhRr、Hhrr、hhRr,其中4種屬于雜種細(xì)胞,②錯(cuò)誤;
③根據(jù)題干信息,“一對(duì)隱性純合基因(rr或hh)的作用,在光照強(qiáng)度大于800lx時(shí),都不能生長(zhǎng)”,只有同時(shí)具備了R和H基因才能夠分化,即只有HhRr的細(xì)胞團(tuán)能分化,③正確;
④根據(jù)題干信息,“一對(duì)隱性純合基因(rr或hh)的作用,在光照強(qiáng)度大于800lx時(shí),都不能生長(zhǎng)”,則基因型為hhRr或Hhrr的雜種細(xì)胞不能在大于800lx光照下培養(yǎng),④錯(cuò)誤;
⑤從理論上分析考慮,將融合細(xì)胞的培養(yǎng)液放在大于800Ix光照下培養(yǎng),只有HhRr能生長(zhǎng),另外5種融合細(xì)胞都不能增殖分化,⑤正確。
故選D。3、A【解析】
結(jié)合題意和題圖分可知,蘇氨酸經(jīng)5步反應(yīng)合成異亮氨酸的過程,需要蘇氨酸脫氨酶,而該酶的活性受異亮氨酸含量的影響。異亮氨酸越多,越容易與該酶結(jié)合而抑制其活性,導(dǎo)致合成異亮氨酸合成減少,這是一種負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制?!驹斀狻緼、異亮氨酸的合成不僅需要蘇氨酸脫氨酶,B→C、C→D、D→E、E→異亮氨酸也需要酶催化其反應(yīng),A錯(cuò)誤;B、不同氨基酸結(jié)構(gòu)的差異體現(xiàn)在R基團(tuán)上,B正確;C、異亮氨酸濃度足夠高時(shí)會(huì)與蘇氨酸脫氨酶結(jié)合,空間結(jié)構(gòu)改變,活性被抑制,C正確;D、細(xì)胞內(nèi)的這種負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制能有效避免物質(zhì)浪費(fèi),D正確。故選A。4、D【解析】
該題是一道關(guān)于呼吸作用實(shí)驗(yàn)分析題,呼吸作用的實(shí)質(zhì)是氧化分解有機(jī)物,釋放能量。有氧呼吸的總反應(yīng)式:C6H12O6+6O2+6H2O6CO2+12H2O+能量(大量);無(wú)氧呼吸的總反應(yīng)式:C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量(少量)。【詳解】A、實(shí)驗(yàn)中加水淹沒子葉、抽氣,在水面上覆蓋適量石蠟油,創(chuàng)設(shè)無(wú)氧環(huán)境,A正確;B、A管放入的是煮熟的蠶豆子葉,高溫處理子葉細(xì)胞酶已失活,不能進(jìn)行呼吸作用,所以A管子葉37℃保溫后不變色,B正確;C、保溫后B管子葉細(xì)胞進(jìn)行無(wú)氧呼吸,產(chǎn)生的[H]能使亞甲基藍(lán)還原,B管子葉藍(lán)色變淺,C正確;D、取出子葉放在濾紙上,創(chuàng)設(shè)有氧環(huán)境,通過子葉有氧呼吸將還原的亞甲基藍(lán)氧化,使濾紙上B管子葉藍(lán)色變深,D錯(cuò)誤。故選D?!军c(diǎn)睛】本實(shí)驗(yàn)將實(shí)驗(yàn)過程和實(shí)驗(yàn)結(jié)果全部呈現(xiàn)出來(lái),要求學(xué)生分析A、B兩試管中的子葉顏色發(fā)生變化及不變色的原因。另外,題干中有“亞甲基藍(lán)氧化態(tài)為藍(lán)色,還原態(tài)后為無(wú)色”的信息提示,能起到引導(dǎo)學(xué)生辨別答題方向的作用。5、C【解析】
有氧呼吸的過程:
第一階段:在細(xì)胞質(zhì)的基質(zhì)中。
反應(yīng)式:1C6H12O6(葡萄糖)2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]+少量能量(2ATP)
第二階段:在線粒體基質(zhì)中進(jìn)行。
反應(yīng)式:2C3H4O3(丙酮酸)+6H2O20[H]+6CO2+少量能量(2ATP)
第三階段:在線粒體的內(nèi)膜上,這一階段需要氧的參與,是在線粒體內(nèi)膜上進(jìn)行的。
反應(yīng)式:24[H]+6O21②H2O+大量能量(34ATP)無(wú)氧呼吸的過程:
第一階段:在細(xì)胞質(zhì)的基質(zhì)中。
反應(yīng)式:1C6H12O6(葡萄糖)2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]+少量能量(2ATP)
第二階段:在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)
反應(yīng)式:2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]2C2H5OH(酒精)+2CO2【詳解】A、DNA分子中一條鏈上的磷酸和脫氧核糖通過磷酸二酯鍵連接,A錯(cuò)誤;B、氣體分子出入線粒體的方式為自由擴(kuò)散,氧氣從細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)進(jìn)入線粒體,而二氧化碳從線粒體進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),由此可知線粒體內(nèi)O2/CO2的值比細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)的低,B錯(cuò)誤;C、主動(dòng)運(yùn)輸滿足了細(xì)胞對(duì)所需物質(zhì)的需求,進(jìn)而有助于維持細(xì)胞內(nèi)元素組成的相對(duì)穩(wěn)定,C正確;D、無(wú)氧呼吸不需要O2的參與,但該過程最終不會(huì)出現(xiàn)[H]的積累,D錯(cuò)誤。故選C。6、C【解析】
分析表格可知,野生型的核糖體S12蛋白第55?58位的氨基酸序列為?P?K?K?P?,而突變型的氨基酸序列為?P?R?K?P?,即基因突變導(dǎo)致蛋白質(zhì)中一個(gè)氨基酸改變,該突變是由于基因中一個(gè)堿基對(duì)發(fā)生替換引起的?!驹斀狻緼、由分析可知,該突變是由于基因中一個(gè)堿基對(duì)發(fā)生替換引起的,A錯(cuò)誤;
B、鏈霉素通過與核糖體結(jié)合抑制其翻譯功能,B錯(cuò)誤;
C、突變型的產(chǎn)生表明枯草桿菌種群的基因頻率發(fā)生了改變,C正確;
D、突變型枯草桿菌與野生型枯草桿菌仍屬于同一個(gè)物種,新物種產(chǎn)生的標(biāo)志是生殖隔離,D錯(cuò)誤。
故選C。【點(diǎn)睛】本題結(jié)合表格考查了基因突變、遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的有關(guān)知識(shí),要求考生能夠識(shí)記基因突變的定義、特征等,能夠根據(jù)表格信息確定突變型的抗性,識(shí)記核糖體上發(fā)生的是遺傳信息的翻譯過程。二、綜合題:本大題共4小題7、人工合成)核苷酸序列質(zhì)粒使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)(或成為感受態(tài)細(xì)胞)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法乳腺蛋白基因【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)獲取目的基因的方法主要有兩種:一是從供體細(xì)胞(或基因文庫(kù))中獲取,另一種是人工合成目的基因。人工合成目的基因的方法適合用于基因比較小、核苷酸序列已知的情況。(2)常用的基因載體是質(zhì)粒,構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時(shí),使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等。(3)若受體細(xì)胞是大腸桿菌,可先用Ca2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài);若受體是雙子葉植物,則常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;若受體是哺乳動(dòng)物,通常將目的基因?qū)肴橄偌?xì)胞,可將Brazzein基因與乳腺蛋白基因啟動(dòng)子調(diào)控組件重組在一起,可從取其乳汁中獲得所需物質(zhì)?!军c(diǎn)睛】基因工程步驟:目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定;要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)。8、垂體細(xì)胞生長(zhǎng)激素只在垂體細(xì)胞中表達(dá),在其他細(xì)胞中不表達(dá)逆轉(zhuǎn)錄酶PCR這些物質(zhì)作用除了能為反應(yīng)提供原料,還能提供能量受精卵基因表達(dá)載體限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶抗原—抗體雜交轉(zhuǎn)基因羊的體重和生長(zhǎng)速率【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、基因工程的基本工具為限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體?!驹斀狻浚?)生長(zhǎng)激素只在垂體細(xì)胞中表達(dá),在其他細(xì)胞中不表達(dá),所以如果要獲得豬的生長(zhǎng)激素基因,應(yīng)從豬的垂體細(xì)胞內(nèi)提取mRNA作為模板,以mRNA為模板在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成cDNA,利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因,根據(jù)ATP可以為細(xì)胞提供能量進(jìn)行推測(cè),采用的原料是dCTP、dATP、dGTP、dTTP,而不是4種脫氧核苷酸,原因是這些物質(zhì)作用除了能為反應(yīng)提供原料,還能提供能量。(2)動(dòng)物的常用的受體細(xì)胞是受精卵,導(dǎo)入之前需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體,需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。(3)基因的表達(dá)最終形成蛋白質(zhì),所以在分子水平上可以采用抗原—抗體雜交技術(shù),在個(gè)體水平上測(cè)定轉(zhuǎn)基因羊的體重和生長(zhǎng)速率。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)、重點(diǎn)考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作過程,能準(zhǔn)確判斷圖中各步驟的名稱及采用的生物技術(shù)。9、小鼠產(chǎn)奶量少兩種引物分別于兩條模板鏈基因表達(dá)載體的構(gòu)建使目的基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性十分困難滋養(yǎng)層防止影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育【解析】
圖示是利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用蛋白的流程圖,其中①表示卵細(xì)胞的采集和培養(yǎng),②表示精子的采集和獲取,③表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建,④表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,⑤表示胚胎移植?!驹斀狻浚?)該工程的目的是“利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用蛋白”,因此相比較于山羊,小鼠的產(chǎn)奶量很少;(2)氫鍵受熱易分解,在PCR擴(kuò)增抗凝血酶Ⅲ基因時(shí),需要將引物加到兩條模板鏈上,溫度過高會(huì)破壞兩種引物分別于兩條模板鏈的堿基對(duì);③將目的基因與質(zhì)粒重組,因此屬于基因表達(dá)載體的構(gòu)建;將該藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起可以使目的基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá);(3)相比較于動(dòng)物體細(xì)胞,受精卵的全能性更強(qiáng),體細(xì)胞的化程度高,恢復(fù)全能性十分困難;(4)在進(jìn)行胚胎移植之前,若要進(jìn)行性別鑒定,可以取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè);在胚胎分割時(shí),要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。【點(diǎn)睛】該題的難點(diǎn)是對(duì)圖中各項(xiàng)技術(shù)進(jìn)行判定,整個(gè)863計(jì)劃項(xiàng)目綜合了基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程,考察了學(xué)生對(duì)現(xiàn)代生物科技專題的一個(gè)綜合把握情況。10、生態(tài)系統(tǒng)的組成成分營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)(食物鏈和食物網(wǎng))耐旱、本地物種生產(chǎn)者增多且群落垂直結(jié)構(gòu)復(fù)雜,單位面積不同的植物對(duì)光能的利用率上升,總光合速率上升破壞害蟲正常的性別比例降低種群的出生率,從而降低害蟲的種群密度噴灑高效農(nóng)藥可降低生物多樣性,導(dǎo)致蟲害再次爆發(fā);還會(huì)造成環(huán)境污染;放養(yǎng)松毛蟲寄生蜂可以長(zhǎng)期控制害蟲數(shù)量,維持生態(tài)平衡,同時(shí)不會(huì)造成環(huán)境污染【解析】
生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)。荒原變林海的過程中,生態(tài)系統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)復(fù)雜化,植被增加,且隨著生產(chǎn)者增多群落垂直結(jié)構(gòu)也變的復(fù)雜,單位面積不同的植物對(duì)光能的利用率上升,單位面積CO2吸收量顯著上升,使群落的總光合速率上升。由于性別比例影響種群的出生率,可通過破壞害蟲正常的性別降低害蟲的種群密度。【詳解】(1)生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)(食物鏈和食物網(wǎng))。建立生態(tài)系統(tǒng)應(yīng)遵循協(xié)調(diào)與平衡原理,即人工種植品種選擇與當(dāng)?shù)丨h(huán)境相適應(yīng)的物種,最好是耐旱或本地物種。(2)荒原變林海的過程中,該群落的單位面積CO2吸收量顯著上升,是因?yàn)橹脖辉黾?,生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)者增多且群落垂直結(jié)構(gòu)復(fù)雜,單位面積不同的植物對(duì)光能的利用率上升,總光合速率上升。(3)為了防治害蟲,林場(chǎng)建設(shè)者施用人工合成的性引誘劑誘殺害蟲的雄性個(gè)體來(lái)降低害蟲的發(fā)生率,其原理是通過破壞害蟲正常的性別比例來(lái)降低種群的出生率,從而降低害蟲的種群密度。(4)噴施高效農(nóng)藥可以防治松毛蟲,但噴灑高效農(nóng)藥可降低生物多樣性,導(dǎo)致蟲害再次爆發(fā),還會(huì)造成環(huán)境污染。而如果采用生物防治的方法,即投放松毛蟲的天敵松毛蟲寄生蜂,既可以長(zhǎng)期控制害蟲數(shù)量,維持生態(tài)平衡,同時(shí)也不會(huì)造成環(huán)境污染?!军c(diǎn)睛】生物防治、農(nóng)藥防治、人工物理防治等都能消滅害蟲,生物防治就是利用生物來(lái)防治病蟲害。噴施高效農(nóng)藥可以防治松毛蟲,但由于松毛蟲存在抗藥性的變異,往往不能全部殺死害蟲,反而過一段時(shí)間后會(huì)導(dǎo)致蟲害再次爆發(fā)。11、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒(pET質(zhì)粒)抗原-抗體雜交抑菌圈對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全;不會(huì)造成基因污染;有效成分純度較高【解析】
(一)基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1)來(lái)源:主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。(2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶(E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶)的比較:①相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別:E?coliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái);而T4DNA連接酶來(lái)源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵.DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。3、“分子運(yùn)輸車”——載體(1)載體具備的條件:①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的獲取1、目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成.人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復(fù)制(2)過程:第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建1、目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2、組成:目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。(2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的尾端。(3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)
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