學(xué)習(xí)情景四認(rèn)識(shí)微生物的遺傳與變異生物應(yīng)用技術(shù)

微生物應(yīng)用技術(shù)學(xué)習(xí)情景四

認(rèn)識(shí)微生物的遺傳與變異、生物應(yīng)用技術(shù)主要內(nèi)容說(shuō)課內(nèi)容任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變

任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變

12學(xué)習(xí)情景四認(rèn)識(shí)微生物的遺傳與變異、生物應(yīng)用技術(shù)

（1）認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變的概念以及類(lèi)型。（2）了解基因重組技術(shù)以及基因工程技術(shù)。【學(xué)習(xí)內(nèi)容】學(xué)習(xí)情景四認(rèn)識(shí)微生物的遺傳與變異、生物應(yīng)用技術(shù)

理解遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變的類(lèi)型。了解基因工程的操作步驟與應(yīng)用?！局R(shí)目標(biāo)】學(xué)習(xí)情景四認(rèn)識(shí)微生物的遺傳與變異、生物應(yīng)用技術(shù)

【技能目標(biāo)】能認(rèn)識(shí)誘變育種、基因重組技術(shù)以及基因工程技術(shù)，能應(yīng)用其在生產(chǎn)實(shí)踐中指導(dǎo)生產(chǎn)。任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變

學(xué)習(xí)情景四認(rèn)識(shí)微生物的遺傳與變異、生物應(yīng)用技術(shù)

遺傳必需有物質(zhì)基礎(chǔ)，也即遺傳信息必須由某些物質(zhì)作為攜帶和傳遞的載體。任務(wù)提出任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變

通過(guò)理論知識(shí)學(xué)習(xí)，了解微生物遺傳的物質(zhì)--DNA和RNA，了解微生物的遺傳物質(zhì)較其它生物的遺傳物質(zhì)具有多樣性，不僅存在于其細(xì)胞染色體，而且在真核微生物中的細(xì)胞器中，染色體外的質(zhì)粒，RNA病毒的RNA核酸都有遺傳信息物質(zhì)存在。任務(wù)分析任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變遺傳：指上一代生物將自身的一整套遺傳基因穩(wěn)定地傳遞給下一代，產(chǎn)生與自己相似后代的現(xiàn)象。任務(wù)實(shí)施的相關(guān)專(zhuān)業(yè)知識(shí)任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變變異：指生物體在某種外因或內(nèi)因的作用下所引起的遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)或數(shù)量的改變，使親代與子代之間，或子代各個(gè)體之間，在形態(tài)結(jié)構(gòu)或生理機(jī)能方面存在差異的現(xiàn)象。

微生物的遺傳

穩(wěn)定的，變異

普遍的；遺傳

相對(duì)的，變異

絕對(duì)的。●一、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)（一）遺傳物質(zhì)必須具備的三種基本功能（二）DNA分子的組成（三）DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)（四）DNA的半保留復(fù)制（五）遺傳因子基因●二、微生物的變異（一）基因突變

(二）染色體畸變（三）基因重組（四）微生物遺傳變異的應(yīng)用任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)（一）遺傳物質(zhì)必須具備的三種基本功能★（1）復(fù)制功能★（2）表達(dá)功能★（3）變異功能任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(二）DNA分子的組成★

DNA分子的組成單位是脫氧核苷酸?！?/p>

每個(gè)脫氧核苷酸由一分子磷酸、一分子脫氧核糖和一分子含氮堿基構(gòu)成。脫氧核糖磷酸堿基任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(二）DNA分子的組成★

堿基有:腺嘌呤（A）鳥(niǎo)嘌呤（G）胞嘧啶（C）胸腺嘧啶（T）AGCT脫氧核糖磷酸堿基A一T★

G一C任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(三）DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(三）DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)★脫氧核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵連接成脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈，兩條脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈按一定順序排列成雙螺旋立體結(jié)構(gòu)。任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(三）DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)●

雙螺旋結(jié)構(gòu)的堿基配對(duì)原則：ATGCATGC任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(四）DNA的半保留復(fù)制★DNA的雙螺旋拆分★DNA單鏈為模板；★按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則；★DNA聚合酶催化；★形成完全互補(bǔ)的新鏈●DNA的半保留復(fù)制的要點(diǎn)任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(四）DNA的半保留復(fù)制●DNA的半保留復(fù)制的結(jié)果是：新DNA分子中的兩條鏈，一條來(lái)自親代DNA分子，另一條是新合成的●

DNA獨(dú)特的半保留式的自我復(fù)制，確保了DNA復(fù)制的精確，并保證一切生物遺傳性的相對(duì)穩(wěn)定。任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變二、遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(五）遺傳因子

基因：DNA分子上具有特定核苷酸順序的片斷，是一切生物體內(nèi)貯存遺傳信息、具有自我復(fù)制能力的遺傳功能單位。

細(xì)胞染色體DNA蛋白質(zhì)基因任務(wù)1認(rèn)識(shí)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)和基因突變基因相對(duì)分子質(zhì)量：6×105，約有103個(gè)堿基對(duì)。每個(gè)細(xì)菌約具有5×103~104個(gè)基因

基因控制遺傳性狀，但不等于遺傳性狀。功能：基因的精確復(fù)制保證了遺傳信息的代代相傳，遺傳性狀的表現(xiàn)都是在基因控制下個(gè)體發(fā)育的結(jié)果。三、微生物的變異

●微生物個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，繁殖迅速，比表面積大，易受外界環(huán)境的影響，所以，微生物比高等生物更容易發(fā)生變異。二、微生物的變異（四）微生物遺傳變異的應(yīng)用（一）基因突變（二）染色體畸變?nèi)笔А⒅貜?fù)、倒位、易位（三）基因重組轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、雜交1、誘變育種2、定向培育3、基因工程內(nèi)容提要三、微生物的變異（一）基因突變●基因突變：指微生物的DNA由于某種原因發(fā)生了堿基的缺失、置換或插入，改變了基因內(nèi)部原有的堿基排列順序，從而引起后代表現(xiàn)型的改變。二、微生物的變異（一）基因突變●自發(fā)性●稀有性：自發(fā)率為10-6~10-9?！癫粚?duì)稱(chēng)性：突變性狀與引起原因之間無(wú)對(duì)應(yīng)關(guān)系。●獨(dú)立性：不受其他任何基因突變率的影響。●誘變性：誘變劑可使誘變率提高10~105倍。●穩(wěn)定性：新的變異性狀是穩(wěn)定的、是可以遺傳的。●可逆性：野生型菌株既可變異為突變性菌株的正向突變，又可發(fā)生反方向的回復(fù)突變。1．基因突變特點(diǎn)二、微生物的變異（一）基因突變●按突變的條件和原因可分為自發(fā)突變和誘發(fā)突變。

自發(fā)突變★指某種微生物在自然條件下發(fā)生的基因突變。

★自發(fā)突變率極低。如：細(xì)菌一萬(wàn)到百萬(wàn)億次裂殖中才出現(xiàn)一個(gè)個(gè)別基因的突變體。

★自發(fā)突變?cè)蚴遣辉數(shù)牡蛣┝空T變劑長(zhǎng)期作用的綜合效應(yīng)或互變異構(gòu)效應(yīng)等。如：宇宙間存在的各種短波輻射等。2．基因突變的類(lèi)型二、微生物的變異（一）基因突變誘發(fā)突變★指利用物理或化學(xué)因素處理微生物群體，引起少數(shù)個(gè)體細(xì)胞的遺傳性狀發(fā)生突變?！镎T發(fā)突變，一般比自發(fā)突變頻率提高10~104倍。

★誘變因素主要包括物理因素和化學(xué)因素。主要物理誘變劑有：紫外輻射、X-射線、β-射線、γ-射線、快中子、激光和熱等?！鴫A基類(lèi)似物，如：8-氨鳥(niǎo)嘌呤（8-NG）等▲與堿基反應(yīng)的誘變劑，如：亞硝酸、烷化劑等▲移碼誘變劑，如：吖啶類(lèi)化合物等2．基因突變的類(lèi)型二、微生物的變異（一）基因突變●從篩選菌株的實(shí)用目的出發(fā)，按突變后極少數(shù)突變株的表型能否在選擇性培養(yǎng)基上迅速地選出和鑒別，分為選擇性突變和非選擇性突變。

★選擇性突變株：凡能用選擇性培養(yǎng)基（或其他選擇性培養(yǎng)條件）快速選擇出來(lái)的突變株。類(lèi)型：營(yíng)養(yǎng)缺陷型、抗性突變型、條件致死突變型★非選擇性突變型：凡不能用選擇性培養(yǎng)基（或其他選擇性培養(yǎng)條件）快速選擇出來(lái)的突變株。類(lèi)型：包括形態(tài)突變型、抗原突變型和產(chǎn)量突變型2．基因突變的類(lèi)型二、微生物的變異（一）基因突變●營(yíng)養(yǎng)缺陷型：指某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長(zhǎng)因子、堿基或氨基酸的能力，而不能在基礎(chǔ)培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)繁殖的變異類(lèi)型?？稍诩佑刑囟ㄉL(zhǎng)因子的基礎(chǔ)培養(yǎng)基平板上分離篩選。★抗性突變型：指野生菌株因基因突變而對(duì)某化學(xué)藥物或致死物理因子產(chǎn)生抗性的變異類(lèi)型?？稍诩佑邢鄳?yīng)藥物或相應(yīng)物理因子的培養(yǎng)基平板上分離篩選。2．基因突變的類(lèi)型★條件致死突變型：指某菌株或病毒在某種條件下可正常生長(zhǎng)、繁殖并正常表現(xiàn)，但由于發(fā)生基因突變，在另一條件下卻不能生長(zhǎng)、繁殖的變異類(lèi)型。二、微生物的變異（一）基因突變●形態(tài)突變型：指由突變引起的個(gè)體或菌落形態(tài)的變異類(lèi)型。如細(xì)菌鞭毛或莢膜有無(wú)，菌落表面光滑或粗糙、清晰或模糊等。

★抗原突變型：指由基因突變而引起的細(xì)胞抗原結(jié)構(gòu)發(fā)生的變異類(lèi)型。如細(xì)胞壁缺陷變異、莢膜或鞭毛成分變異等。

★產(chǎn)量突變型：指由基因突變而導(dǎo)致有用代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量明顯有別于原始菌株的變異類(lèi)型。若產(chǎn)量顯著高于原始菌株，稱(chēng)正變株，產(chǎn)量降低則稱(chēng)負(fù)變株。

2．基因突變的類(lèi)型二、微生物的變異（二）染色體畸變●染色體畸變是指染色體在結(jié)構(gòu)上有較大范圍變化的變異。既包括染色體結(jié)構(gòu)上的缺失、插入、易位和倒位，也包括染色體數(shù)目的變化。二、微生物的變異（三）基因重排●兩個(gè)獨(dú)立基因組內(nèi)的遺傳基因，通過(guò)一定的途徑轉(zhuǎn)移到一起，使基因重新組合，形成新的穩(wěn)定基因組的過(guò)程，稱(chēng)為基因重組?；蛑亟M可通過(guò)轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、雜交等手段實(shí)現(xiàn)。二、微生物的變異（三）基因重排●轉(zhuǎn)化：受體菌直接吸收來(lái)自供體菌的DNA片段，并把它整合到自己的基因組里，從而獲得供體菌部分遺傳性狀的現(xiàn)象。轉(zhuǎn)化子：通過(guò)轉(zhuǎn)化形成的雜種后代?！褶D(zhuǎn)導(dǎo)：通過(guò)缺陷噬菌體的媒介作用，把供體菌的DNA片段攜帶至受體菌細(xì)胞中，通過(guò)交換和整合，使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。轉(zhuǎn)導(dǎo)子：由轉(zhuǎn)導(dǎo)作用而獲得部分新性狀的重組細(xì)胞。雜交：通過(guò)雙親細(xì)胞的融合，使整套染色體的基因重組，或是通過(guò)雙親細(xì)胞的溝通，使部分染色體重組的現(xiàn)象。

任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

學(xué)習(xí)情景四認(rèn)識(shí)微生物的遺傳與變異、生物應(yīng)用技術(shù)微生物個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，繁殖迅速，比表面積大，易受外界環(huán)境的影響，因此人們就可以及時(shí)抓住這類(lèi)良機(jī)來(lái)選育優(yōu)良的生產(chǎn)菌種。

任務(wù)提出任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

通過(guò)理論知識(shí)學(xué)習(xí)，了解微生物遺傳變異的途徑，掌握遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)。任務(wù)分析任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

●自發(fā)突變與育種●誘變育種●基因工程任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

任務(wù)實(shí)施的相關(guān)專(zhuān)業(yè)知識(shí)一、自發(fā)突變與育種★從生產(chǎn)中選育：微生物會(huì)以一定頻率發(fā)生自發(fā)突變，抓住良機(jī)來(lái)選育優(yōu)良的生產(chǎn)菌種。污染噬菌體的發(fā)酵液

抗噬菌體的再生菌；酒精工業(yè)中：分生孢子為白色的糖化菌“上酒白種”，宇佐美曲霉3578自發(fā)突變，糖化率比原菌株強(qiáng)，培養(yǎng)條件也比耗菌株粗放。

任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

★定向培育優(yōu)良菌種是指適當(dāng)控制微生物的生活環(huán)境條件，用物理因素和化學(xué)試劑來(lái)誘導(dǎo)微生物向著人們需要的方向變異的過(guò)程?！镌诠I(yè)廢水生物處理中，它是一條非常有效的途徑。

★如：在滿(mǎn)足營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、水溫、pH值等條件下，對(duì)加入酚、氰等污染物的生活污水處理廠的活性污泥進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的定向培育（又稱(chēng)馴化）。任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

一、自發(fā)突變與育種★誘變育種是指利用物理或化學(xué)誘變劑處理微生物，使之發(fā)生突變，然后采用合理的方法，把符合育種目的的優(yōu)良突變株篩選出來(lái)的過(guò)程。★誘變育種的優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便易行，工作進(jìn)程快、結(jié)果既可以提高產(chǎn)量、改進(jìn)質(zhì)量，又可以增加品種、簡(jiǎn)化工藝等。★目前使用最廣泛的一種育種手段。★如：三十年來(lái)，青霉素發(fā)酵單位持續(xù)大幅度增長(zhǎng)，由2單位/毫升提高到7萬(wàn)單位/毫升。二、誘變育種任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

操作環(huán)節(jié)很多，因工作目的、育種對(duì)象和操作者的安排而有所差異。最基本環(huán)節(jié)卻是雷同的

1.誘變育種的基本環(huán)節(jié)

二、誘變育種任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

選種方式有兩種

從自然界和生產(chǎn)中進(jìn)行。1.從自然界中選種步驟：采樣

增殖培養(yǎng)

純種分離

測(cè)定生產(chǎn)性能

二、誘變育種任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

(1)采樣根據(jù)微生物的生態(tài)特點(diǎn)從自然界取樣分離所需菌種過(guò)程。采樣地點(diǎn)的選擇要求：富含預(yù)篩選菌種枯枝、落葉和朽木

富含產(chǎn)纖維素酶的菌種果皮上、果樹(shù)下土壤富含酵母菌海洋富含耐鹽和低溫菌土壤微生物大本營(yíng)，富含細(xì)菌和放線菌。

采樣方法:

選好地點(diǎn)后用無(wú)菌取樣工具取樣后裝入預(yù)先消毒過(guò)的密封容器內(nèi)（牛皮袋、塑料袋、磨口瓶），密封保存，做好標(biāo)記（采樣地點(diǎn)、時(shí)間、環(huán)境情況等）二、誘變育種任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

(2)增殖培養(yǎng)

給菌種提供一些有利于所需菌株生長(zhǎng)或不利于其他菌株生長(zhǎng)的條件以促使所需菌株大量繁殖，從而有利于分離它們。增殖培養(yǎng)次數(shù)根據(jù)樣品中所含需要菌種的多少定?？刂埔蛩貎蓚€(gè)：養(yǎng)分和培養(yǎng)條件養(yǎng)分：碳源糖、淀粉、纖維素或石油培養(yǎng)條件：PH、溫度二、誘變育種任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

(3)純種分離

從含有混雜各種微生物的樣品中，分出我們所需要的菌種。方法:劃線、稀釋分離、單孢直接挑取法和菌絲尖端切割法。同時(shí)選擇和控制培養(yǎng)條件:控制營(yíng)養(yǎng)成分、控制培養(yǎng)基酸堿度、控制培養(yǎng)溫度、添加抑制劑、熱處理、通氣條件的控制二、誘變育種任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

(4)生產(chǎn)性能測(cè)定方法：初篩和復(fù)篩①初篩:在培養(yǎng)皿內(nèi)將菌種進(jìn)行比較粗放的測(cè)定，測(cè)出某些菌株有無(wú)所需要的性能，不能精確測(cè)出含量及性能的大小。②復(fù)篩：將初篩選出的菌株精確地測(cè)出其發(fā)酵性能。方法：液體搖瓶培養(yǎng)法、固體培養(yǎng)法、小型臺(tái)式發(fā)酵罐法。

二、誘變育種任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

2.從生產(chǎn)中選種

在生產(chǎn)過(guò)程中，經(jīng)常注意那些菌體形態(tài)或菌落性狀以及某些生理性能上自然發(fā)生變異的微生物，將它們挑選出來(lái)，進(jìn)行比較試驗(yàn)，有時(shí)可以選出更加理想的菌種。

二、誘變育種任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

二、誘變育種2.誘變育種工作中的幾個(gè)原則★選擇簡(jiǎn)便有效的誘變劑

★挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株

★處理單孢子(或單細(xì)胞)液

★選用最適劑量

★利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)

★利用和創(chuàng)造形態(tài)、生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)

★設(shè)計(jì)和采用高效篩選方案和方法

任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

3.營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選

二、誘變育種營(yíng)養(yǎng)缺陷型：指通過(guò)誘變而產(chǎn)生的，在一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（如氨基酸、維生至少和堿基等）的合成能力上出現(xiàn)缺陷，因此必須在基本培養(yǎng)基中加入相誚的有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分才能正常生長(zhǎng)的變異菌株。野生型：變異前的原始菌株任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

☆基本培養(yǎng)基：表示方式：“［-］”，凡能滿(mǎn)足某一菌種的野生型或原養(yǎng)型*菌株?duì)I養(yǎng)要求的最低成分的合成培養(yǎng)基。

☆完全培養(yǎng)基：表示方式：“［+］”在基本培養(yǎng)基中加入一些富含氨基酸、維生至少和堿基之類(lèi)的天然物質(zhì)，以滿(mǎn)足該微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型都能生長(zhǎng)的培養(yǎng)基

☆補(bǔ)充培養(yǎng)基：表示方式："［A］"、"［B］"，本培養(yǎng)基上只是有針對(duì)性地加上某一種或幾種其自身不能合成的營(yíng)養(yǎng)成分，以滿(mǎn)足相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。

二、誘變育種

3.營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選

任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的用途：※研究代謝途徑和雜交、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和原生質(zhì)體融合等遺傳規(guī)律所必不可少的標(biāo)記菌種※氨基酸、維生素或堿基等物質(zhì)生物測(cè)定的試驗(yàn)菌種；※用作發(fā)酵生產(chǎn)核苷酸、氨基酸等代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)菌株；※生產(chǎn)菌種雜交育種中必不可少的帶有特定標(biāo)記的親本菌株。

二、誘變育種

3.營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選

任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷菌株的環(huán)節(jié)：誘變、淘汰野生型、檢出和鑒定。

二、誘變育種

3.營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選

任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷菌株的環(huán)節(jié)：二、誘變育種

3.營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選

●誘變劑處理

●淘汰野生型：抗生素法或菌絲過(guò)濾法。青霉素法

細(xì)菌;制霉菌素法

真菌菌絲過(guò)濾

絲狀真菌●檢出缺陷型：夾層培養(yǎng)法、限量補(bǔ)充培養(yǎng)法、逐個(gè)檢出法、影印接種法。

●鑒定缺陷型

任務(wù)2微生物遺傳變異的應(yīng)用技術(shù)

◆

夾層培養(yǎng)法：先在培養(yǎng)皿上倒薄一層不含菌的基本培養(yǎng)基。經(jīng)培養(yǎng)后，在皿底用筆對(duì)首次出現(xiàn)的菌落一一作好記號(hào)，然后再澆一薄層第四導(dǎo)培養(yǎng)基--完全培養(yǎng)基。再經(jīng)培養(yǎng)后出現(xiàn)的新菌落，多數(shù)是營(yíng)養(yǎng)缺陷型。二、誘變育種

3.營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選

◆限量補(bǔ)充培養(yǎng)法：把誘變處理后的細(xì)胞接種在含有微量蛋白胨的基本培養(yǎng)基上，野生型就迅速長(zhǎng)成較大的菌落，而缺陷型則生長(zhǎng)緩慢，并只能形成