醫(yī)院消毒效果監(jiān)測-418

醫(yī)院消毒效果監(jiān)測

（現(xiàn)場采樣及實(shí)驗(yàn)室部分）山西省疾病預(yù)防控制中心醫(yī)院消毒質(zhì)量監(jiān)督監(jiān)測的依據(jù)《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB15982-1995《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版《醫(yī)院感染管理辦法》2006年《血液透析器復(fù)用操作規(guī)范》2005年《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》2004年版《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》GB50333-2002《一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB15980—1995《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB15979－2002《醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》GB18466－2005醫(yī)院消毒效果監(jiān)測遵循的原則

監(jiān)測人員需經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)，掌握一定的消毒知識，具備熟練的檢驗(yàn)技能；選擇合理的采樣時(shí)間(消毒后、使用前)；遵循嚴(yán)格的無菌操作。醫(yī)院消毒質(zhì)量監(jiān)測主要部門

手術(shù)室、監(jiān)護(hù)室、血透室、口腔科、內(nèi)窺鏡室、燒傷病房、層流病房、產(chǎn)房與母嬰同室、注射室、治療室、傳染病門診與病房、檢驗(yàn)科與血庫、供應(yīng)室、污水處理站及其他感染相關(guān)科室。醫(yī)院消毒質(zhì)量監(jiān)督監(jiān)測的項(xiàng)目壓力蒸汽滅菌器滅菌效果、紫外線滅菌燈照射強(qiáng)度、各類環(huán)境空氣消毒效果、工作人員手消毒效果、各類環(huán)境物體表面（含工作臺面、器械表面、公用電話、門把手等）消毒效果、使用中消毒劑菌落總數(shù)、致病菌與消毒劑濃度測定、潔凈室監(jiān)測、醫(yī)療器械消毒、滅菌效果監(jiān)測、一次性使用醫(yī)療衛(wèi)生用品質(zhì)量監(jiān)測、處理后醫(yī)院污水監(jiān)測。醫(yī)院消毒質(zhì)量監(jiān)督監(jiān)測配置主要儀器設(shè)備

衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)常規(guī)設(shè)備，采樣箱、干燥箱、高壓鍋、培養(yǎng)箱、水浴箱、冰箱、超凈臺、顯微鏡、紫外線測定儀、懸浮粒子計(jì)數(shù)器、風(fēng)速儀、溫濕度計(jì)、照度計(jì)、噪聲儀、微壓差儀（讀值分辨率為1Pa）、懸浮粒子計(jì)數(shù)器（流率不小于2.83L/min的光散射式粒子計(jì)數(shù)器）、撞擊式微生物六級采樣器、微生物檢測過濾裝置。監(jiān)測方法熱力滅菌效果的監(jiān)測方法生物監(jiān)測法指示菌株:指示菌株為耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽孢(ATCC7953或SSIK31株),菌片含菌量為5.0×105cfu/片～5.0×106cfu/片，試驗(yàn)用培養(yǎng)基為溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。檢測方法:將兩個(gè)嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心部位。（下排氣或預(yù)真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器在滅菌柜室內(nèi)，排氣口上方放置一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包）。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒,指示菌片放于中心部位的兩只滅菌試管內(nèi),將貯物盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。經(jīng)一個(gè)滅菌周期后，在無菌條件下，取出標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包或通氣貯物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng)56℃±1℃培養(yǎng)7d，觀察培養(yǎng)基顏色變化。檢測時(shí)設(shè)陰性對照和陽性對照。結(jié)果判定:每個(gè)指示菌片接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基都不變色，判定為滅菌合格；指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基，由紫色變?yōu)辄S色時(shí)，則滅菌過程不合格。注意事項(xiàng):監(jiān)測所用菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可，并在有效期內(nèi)使用。生物指示物監(jiān)測應(yīng)1月1次。監(jiān)測方法熱力滅菌效果的監(jiān)測方法生物監(jiān)測紫外線消毒效果的監(jiān)測紫外線燈管輻照度值的測定檢測方法:開啟紫外線燈5min后,將測定波長為253.7nm的紫外線輻照計(jì)探頭置于被檢紫外線燈下垂直距離1m的中央處，待儀表穩(wěn)定后，所示數(shù)據(jù)即為該紫外線燈管的輻照度值。結(jié)果判定:普通30w直管型紫外線燈，新燈輻照強(qiáng)度≥90μW/cm2為合格；使用中紫外線燈輻照強(qiáng)度≥70μW/cm2為合格；30W高強(qiáng)度紫外線新燈的輻照強(qiáng)度≥180μW/cm2為合格。注意事項(xiàng):測定時(shí)電壓220V±５V，溫度20℃～25℃，相對濕度＜60％，紫外線輻照計(jì)必須在計(jì)量部門檢定的有效期內(nèi)使用。監(jiān)測方法紫外線消毒效果的監(jiān)測監(jiān)測方法手消毒效果監(jiān)測手消毒效果監(jiān)測采樣時(shí)間:在消毒后立即采樣。采樣方法:被檢人五指并攏，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面積約30cm2)，并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，立即送檢。檢測方法細(xì)菌總數(shù)檢測:將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振打80次，用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種于滅菌平皿，每一樣本接種2個(gè)平皿，內(nèi)加入已溶化的45℃～48℃的營養(yǎng)瓊脂15ml～18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。采樣結(jié)果計(jì)算方法：細(xì)菌總數(shù)(cfu/cm2)=

致病菌檢測:檢測原則:致病菌的檢測依據(jù)污染情況進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測。金黃色葡萄球菌檢測增菌、分離取采樣液1ml，接種于5mlSCDLP液體培養(yǎng)基中，于36℃±1℃增菌24h。取1白金耳上述增菌液，在血平板上作劃線分離，36℃±1℃培養(yǎng)24h。觀察菌落特征:在血瓊脂平板上菌落形態(tài)為金黃色、圓形凸起、表面光滑、周圍有溶血圈。鏡檢:挑取典型菌落作涂片染色鏡檢，鏡下為革蘭陽性、成葡萄狀排列的球菌。生化反應(yīng):取可疑菌落作觸酶、葡萄糖發(fā)酵、血漿凝固酶、甘露醇發(fā)酵、新生霉素敏感試驗(yàn),均為陽性者即為金黃色葡萄球菌。監(jiān)測方法手消毒效果監(jiān)測乙型溶血性鏈球菌檢測增菌、分離:取樣品1ml，接種于1％葡萄糖肉湯，37℃增菌24h。取1白金耳增菌液在血平板上作劃線分離，36℃±1℃培養(yǎng)24h。觀察菌落特征：菌落形態(tài)為灰白色、半透明或不透明、針尖狀突起、表面光滑、邊緣整齊、周圍有β溶血圈。鏡檢：鏡下為革蘭陽性、呈鏈狀排列的球菌。生化反應(yīng)：如觸酶陰性、鏈激酶試驗(yàn)陽性、對桿菌肽敏感者,即為乙型溶血性鏈球菌。沙門菌檢測:增菌、分離:取樣品1ml，接種于SC增菌液；于36℃±1℃增菌24h。取1白金耳上述增菌液，在SS平板上作劃線分離，36℃±1℃培養(yǎng)24h。觀察菌落特征:無色、半透明，產(chǎn)硫化氫菌株中心黑色或幾乎全黑色。生化反應(yīng)：自選擇性平板上挑取可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂、尿素瓊脂、氫化鉀培養(yǎng)基、賴氨酸脫羧試驗(yàn)培養(yǎng)基，同時(shí)做靛基質(zhì)試驗(yàn)。血清學(xué)反應(yīng)：用A~F多價(jià)O血清凝集試驗(yàn)。監(jiān)測方法手消毒效果監(jiān)測效果判定Ⅰ、Ⅱ類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)≤5cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌為消毒合格。Ⅲ類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)≤10cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。Ⅳ類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)≤15cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。注意：母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的工作人員手上，不得檢出沙門菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌為消毒合格。監(jiān)測方法手消毒效果監(jiān)測物品和環(huán)境表面消毒效果的監(jiān)測

采樣時(shí)間:在消毒處理后進(jìn)行采樣。采樣方法:用5cm×5cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，采樣面積≥100cm2，連續(xù)采樣4個(gè)，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，立即送檢。門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣。檢測方法:細(xì)菌總數(shù)檢測:檢測方法。小型物體表面的結(jié)果計(jì)算用cfu/件表示。致病菌檢測:檢測方法同手。結(jié)果判定Ⅰ、Ⅱ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤5cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。Ⅲ類區(qū)域細(xì)菌：總數(shù)≤10cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。Ⅳ類區(qū)域細(xì)菌：總數(shù)≤15cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。母嬰同室、早產(chǎn)兒室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門菌?？諝庀拘Ч谋O(jiān)測采樣時(shí)間:在消毒處理后、操作前進(jìn)行采樣。布點(diǎn)方法:室內(nèi)面積≤30m2，設(shè)內(nèi)、中、外對角線3點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)布點(diǎn)部位距墻壁1M處；室內(nèi)面積＞30m2，設(shè)4角及中央5點(diǎn)，4角的布點(diǎn)部位距墻壁1m處。平板暴露法:將普通營養(yǎng)瓊脂平板(直徑為9cm)放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)處，采樣高度為距地面1.5m采樣時(shí)將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露15min，蓋好立即送檢。合格標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤10cfu/m3,未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；Ⅱ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤200cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；Ⅲ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤500cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。監(jiān)測方法空氣消毒效果監(jiān)測使用中消毒液染菌量測定檢測所需中和劑：0.1%硫代硫酸鈉肉湯（含氯、含碘、過氧化物類消毒劑）、0.3%卵磷脂+3%吐溫80肉湯（洗必泰如氯己定和季安鹽類消毒劑如新潔爾滅）、0.3%甘氨酸肉湯（醛類消毒劑）方法：傾注法:用無菌吸管吸取消毒液1.0ml,加入到9.0ml含相應(yīng)中和劑的無菌生理鹽水采樣管中混勻,分別取0.5ml放入2只滅菌平皿內(nèi),加入已熔化的45℃～48℃的營養(yǎng)瓊脂15ml～18ml,邊傾注邊搖勻,待瓊脂凝固,一平板置20℃培養(yǎng)7d,觀察霉菌生長情況;另一個(gè)平板置36℃±1℃培養(yǎng)72h,計(jì)數(shù)菌落數(shù),同時(shí)按手的方法檢測致病菌。消毒液染菌量(cfu/ml)＝每個(gè)平板上的菌落數(shù)×20結(jié)果判斷:消毒液染菌量≤100cfu/ml，并未檢出致病菌為合格。注意事項(xiàng):采樣后1h內(nèi)檢測。監(jiān)測方法使用中消毒液染菌量測定血透室消毒效果監(jiān)測微生物檢測：檢測項(xiàng)目：空氣、物體表面、手、使用中消毒液、透析用水、透析液、一次性醫(yī)療用品；空氣細(xì)菌培養(yǎng)有：透析廳、治療室；物體表面細(xì)菌培養(yǎng)有：操作臺、治療車、搶救車、無菌柜、藥品柜；洗手后細(xì)菌培養(yǎng)有：醫(yī)生、護(hù)士、工人；使用中消毒液細(xì)菌培養(yǎng)有：碘酒、酒精、過氧乙酸、福爾馬林、透析用水、透析液；滅菌醫(yī)療器械的染菌監(jiān)測方法血透室消毒效果監(jiān)測合格標(biāo)準(zhǔn)： 空氣細(xì)菌密度小于200個(gè)／m3為合格；物體表面細(xì)菌密度小于或等5個(gè)／cm2為合格工作人員手細(xì)菌密度小于或等5個(gè)／cm2為合格；使用中消毒細(xì)菌密度是0—100個(gè)／mL為合格；透析用水細(xì)菌數(shù)<200cfu/ml為合格；透析液細(xì)菌數(shù)<200cfu/ml為合格。滅菌醫(yī)療器械不能檢出任何微生物為合格。監(jiān)測方法血透室消毒效果監(jiān)測內(nèi)窺鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測采樣時(shí)間:在消毒滅菌后、使用前進(jìn)行采樣。內(nèi)鏡外壁采樣方法：用沾有含中和劑的棉拭子，在被檢內(nèi)鏡上從鏡頭到鏡身反復(fù)涂擦，剪切手接觸部位，將棉拭子投入到5mL含相應(yīng)中和劑的采樣管內(nèi)，立即送檢。內(nèi)鏡的內(nèi)腔面采樣時(shí)，用無菌注射器抽取10ml含相應(yīng)中和劑的緩沖液，從待檢內(nèi)鏡活檢口注入，用15ml無菌試管從活檢出口收集，及時(shí)送檢。中和劑(采樣液)：0.1%卵磷脂+1%甘氨酸+0.5%硫代硫酸鈉%5%吐溫80PBS菌落計(jì)數(shù)和致病菌檢測參照手消毒效果監(jiān)測中有關(guān)方法。監(jiān)測方法內(nèi)窺鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測合格標(biāo)準(zhǔn)：滅菌后內(nèi)窺鏡，未檢出任何微生物為合格。消毒后的內(nèi)窺鏡，細(xì)菌總數(shù)≤20cfu/件，并未檢出致病菌為合格。監(jiān)測方法內(nèi)窺鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測口腔科消毒滅菌效果的監(jiān)測監(jiān)測項(xiàng)目使用中消毒劑和滅菌劑、消毒器械、滅菌器械、醫(yī)務(wù)人員手、物體表面及空氣細(xì)菌學(xué)監(jiān)測。物體表面細(xì)菌培養(yǎng)有：操作臺、無菌柜、手機(jī)、車針、高速渦輪機(jī)頭、常用檢查及拔牙器械、潔牙機(jī)頭、刀片等；手細(xì)菌培養(yǎng)有：醫(yī)生、護(hù)士；使用中消毒液細(xì)菌培養(yǎng)有：碘酒、酒精、過氧乙酸、含氯消毒劑；滅菌醫(yī)療器械的染菌與銷毀情況有：鑷子、口鏡、探針、彎盤、吸管等。監(jiān)測方法口腔科消毒滅菌效果的監(jiān)測合格標(biāo)準(zhǔn)：空氣細(xì)菌密度是小于500個(gè)／m3為合格；物體表面細(xì)菌密度是小于或等10個(gè)／cm2為合格；工作人員手細(xì)菌密度是小于或等10個(gè)／cm2為合格；使用中消毒細(xì)菌密度是0~100個(gè)／mL為合格；滅菌醫(yī)療器械不能檢出任何微生物為合格；監(jiān)測方法口腔科消毒滅菌效果的監(jiān)測醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測醫(yī)院潔凈手術(shù)部按潔凈度分為Ⅰ級（手術(shù)區(qū)100級、周邊區(qū)1000級）、Ⅱ級（手術(shù)區(qū)1000級、周邊區(qū)10000級）、Ⅲ級（手術(shù)區(qū)10000級、周邊區(qū)100000級）、Ⅳ級（300000級）潔凈手術(shù)室和潔凈輔助用房監(jiān)測項(xiàng)目：技術(shù)指標(biāo)（風(fēng)速、換氣次數(shù)、靜壓差、噪聲、照度、溫濕度）微生物指標(biāo)（浮游菌、沉降菌）懸浮粒子監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測風(fēng)速、換氣次數(shù)監(jiān)測方法：Ⅰ級潔凈室風(fēng)速測定：在距地面0.8m（如有阻隔可抬高至阻隔面之上0.25m處），送風(fēng)口正投影區(qū)邊界0.12m內(nèi)區(qū)域均勻布點(diǎn)（測點(diǎn)間距≤0.3m），打開微風(fēng)速儀，測定各點(diǎn)風(fēng)速，按公式v=(v1+v2+v3+……+vn)/n，式中vn——每個(gè)測點(diǎn)的速度(m/s)；n——測點(diǎn)數(shù)，計(jì)算出截面的平均風(fēng)速v（m/s）。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級潔凈手術(shù)室和潔凈輔助用房換氣次數(shù)測定：當(dāng)測送風(fēng)面平均風(fēng)速時(shí)，測點(diǎn)高度在送風(fēng)面下方0.1m以內(nèi)，測點(diǎn)之間距離不應(yīng)超過0.3m。測點(diǎn)范圍為送風(fēng)口邊界內(nèi)0.05m以內(nèi)的面積，均勻布點(diǎn)。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測風(fēng)速、換氣次數(shù)對于分散布置的送風(fēng)口，對每個(gè)風(fēng)口進(jìn)行檢測。每一個(gè)風(fēng)口的風(fēng)量q按下式計(jì)算：q=v×f×3600房間風(fēng)量Q按下式計(jì)算：Q=∑q房間換氣次數(shù)n按下式計(jì)算：n=Q/Fh式中v——每一個(gè)風(fēng)口上測得的平均風(fēng)速(m/s)；f——每一個(gè)風(fēng)口凈面積(m2)；F——房間的凈截面積(m2)；h——房間的凈高(m)。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測風(fēng)速、換氣次數(shù)于集中布置的送風(fēng)口，應(yīng)測出送風(fēng)面平均送風(fēng)速度，換算出房間的換氣次數(shù)。送風(fēng)面速度測點(diǎn)斷面布置送風(fēng)面平均風(fēng)速按下式計(jì)算：V平均=(v1+v2+………+vn)/n送風(fēng)量q按下式計(jì)算：q=×f0×3600房間換氣次數(shù)n按下式計(jì)算：n=Q/Fh式中f0——送風(fēng)面面積(m2)。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測風(fēng)速、換氣次數(shù)靜壓差方法：潔凈區(qū)封閉，打開微壓計(jì)，距地面0.8m，使測孔截面平行于氣流，待讀數(shù)穩(wěn)定后，計(jì)下讀數(shù)。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測溫濕度方法：室內(nèi)溫濕度測定為距地面0.8m高的中心點(diǎn)，檢測儀器為可顯示小數(shù)后一位的數(shù)字式溫濕度測量儀。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測噪聲方法：打開噪聲儀，在室中心1.1m高處進(jìn)行測量布點(diǎn)：不足15m2的房間測一點(diǎn)，超過15m2的在室中心和四角共測5點(diǎn)。注意事項(xiàng)：1、噪聲檢測宜在外界干擾較小的晚間進(jìn)行，以A聲級為準(zhǔn)。2全部噪聲測定之后，應(yīng)關(guān)閉凈化空調(diào)系統(tǒng)測定背景噪聲，當(dāng)背景噪聲與室內(nèi)噪聲之差小于10dB時(shí)，室內(nèi)噪聲應(yīng)按常規(guī)予以修正。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測照度方法：測點(diǎn)距地面0.8m，離墻面0.5m，按間距不超過2m均勻布點(diǎn)，不刻意在燈下或避開燈下選點(diǎn)，打開照度儀，待讀數(shù)穩(wěn)定后，計(jì)錄結(jié)果。注意事項(xiàng)：檢測應(yīng)在光源輸出趨于穩(wěn)定，不開無影燈，無自然采光條件下進(jìn)行。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測潔凈度（懸浮粒子數(shù)）測定按照規(guī)定的最少點(diǎn)數(shù)在潔凈區(qū)域布點(diǎn)，測點(diǎn)布置在距地面0.8m高的平面上，在手術(shù)區(qū)檢測時(shí)應(yīng)無手術(shù)臺。當(dāng)手術(shù)臺已固定時(shí)，測點(diǎn)高度在臺面之上0.25m。測試場所的凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行穩(wěn)定后，打開塵埃粒子計(jì)數(shù)器在預(yù)定采樣點(diǎn)待計(jì)數(shù)穩(wěn)定后進(jìn)行讀數(shù)記數(shù)，按公式進(jìn)行計(jì)算：A=C1+C2+…+CN／N；M=A1+A2+…+AL／L；SE=［（A1－M）2+（A2－M）2+…+（AL－M）2／L（L－1）］1/2；UCL=M+t×SE其中A：某一采樣點(diǎn)的平均粒子濃度，粒/m3；C：某一采樣點(diǎn)的粒子濃度，粒/m3；N：某一采樣點(diǎn)的采樣次數(shù)，次；M：平均值的均值，粒/m3，；L：某一潔凈室的總采樣點(diǎn)數(shù)，個(gè)；SE：平均值均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差，粒/m3；UCL：平均值均值的95%置信上限粒/m3，；t：95%置信上限的分布系數(shù)。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測潔凈度（懸浮粒子數(shù)）測定測點(diǎn)數(shù)23456789系數(shù)t6.312.922.352.132.021.941.901.86系數(shù)t當(dāng)測點(diǎn)數(shù)為9點(diǎn)以上時(shí)，UCL=M平均。最少測定點(diǎn)區(qū)域最少測定點(diǎn)數(shù)Ⅰ級手術(shù)區(qū)5Ⅰ級周邊區(qū)8Ⅱ、Ⅲ級手術(shù)區(qū)3Ⅱ周邊區(qū)6Ⅲ級周邊區(qū)4Ⅳ級及分散布置的潔凈室（面積＞30m2）4Ⅳ級及分散布置的潔凈室（面積≤30m2）2注意事項(xiàng)：1、每次采樣的最小采樣量：100級區(qū)域?yàn)?.66L，以下各級區(qū)域?yàn)?.83L。2、在100級區(qū)域檢測時(shí)，采樣口應(yīng)對著氣流方向；在其他級別區(qū)域檢測時(shí)，采樣口均向上。3、當(dāng)檢測含塵濃度時(shí)，檢測人員不得多于2人，都應(yīng)穿潔凈工作服，處于測點(diǎn)下風(fēng)向的位置，盡量少動作。4、當(dāng)檢測含塵濃度時(shí)，手術(shù)室照明燈應(yīng)全部打開。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測潔凈度（懸浮粒子數(shù)）測定評判標(biāo)準(zhǔn)潔凈度100級:大于等于0.5μm的塵粒數(shù)大于350粒／m3(0.35粒/L)到小于等于3500粒／m3(3.5粒/L)；大于等于5μm的塵粒數(shù)為0。潔凈度1000級:大于等于0.5μm的塵粒數(shù)大于3500粒／m3(3.5粒/L)到小于等于35000粒／m3(35粒/L)；大于等于5μm的塵粒數(shù)小于等于300粒／m3(0.3粒／L)。潔凈度10000級:大于等于0.5μm的塵粒數(shù)大于35000粒／m3(35粒/L)到小于等于350000粒／m3(350粒／L)；大于等于5μm的塵粒數(shù)大于300粒／m3(0.3粒/L)到小于等于3000粒／m3(3粒/L)。潔凈度100000級:大于等于0.5μm的塵粒數(shù)大于350000粒／m3(350粒/L)到小于等于3500000粒／m3(3500粒／L)；大于等于5μm的塵粒數(shù)大于3000粒／m3(3粒／L)到小于等于30000粒／m3(30粒／L)。潔凈度300000級:大于等于0.5μm的塵粒數(shù)大于3500000粒／m3(3500粒／L)到小于等于10500000粒／m3(10500粒/L)；大于等于5μm的塵粒數(shù)大于30000粒／m3(30粒／L)到小于等于90000粒／m3(90粒/L)。沉降菌濃度當(dāng)用沉降法測定沉降菌濃度時(shí)，細(xì)菌濃度測點(diǎn)數(shù)既要不少于被測區(qū)域含塵濃度測點(diǎn)數(shù)，又應(yīng)滿足表規(guī)定的最少培養(yǎng)皿(不含對照皿)數(shù)的要求，采樣點(diǎn)可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上。當(dāng)送風(fēng)口集中布置時(shí)，應(yīng)對手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)分別檢測；當(dāng)送風(fēng)口分散布置時(shí)，全室統(tǒng)一檢測。采樣后的培養(yǎng)皿，應(yīng)立即置于37℃條件下培養(yǎng)24h，然后計(jì)數(shù)生長的菌落數(shù)，計(jì)算平均值。菌落數(shù)的平均值均四舍五入進(jìn)位到小數(shù)點(diǎn)后1位。

監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測沉降菌濃度被測區(qū)域潔凈度級別最少平皿數(shù)100級131000級510000級3100000級2300000級2注意事項(xiàng)：1、細(xì)菌濃度宜在其他項(xiàng)目檢測完畢，對全室表面進(jìn)行常規(guī)消毒之后進(jìn)行。2、不論用何種方法檢測細(xì)菌濃度，都必須有2次空白對照。第1次對用于檢測的培養(yǎng)皿做對比試驗(yàn)，每批一個(gè)對照皿。第2次是在檢測時(shí)，每室或每區(qū)1個(gè)對照皿，對操作過程做對照試驗(yàn)：模擬操作過程，但培養(yǎng)皿打開后應(yīng)又立即封蓋。兩次對照結(jié)果都必須為陰性。整個(gè)操作應(yīng)符合無菌操作的要求。監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測沉降菌濃度沉降菌最少培養(yǎng)皿數(shù)微生物評判標(biāo)準(zhǔn)等級手術(shù)室名稱沉降法(浮游法)細(xì)菌最大平均濃度空氣潔凈度級別手術(shù)區(qū)周邊區(qū)手術(shù)區(qū)周邊區(qū)Ⅰ特別潔凈手術(shù)室0.2/30min·φ90皿(5個(gè)/m3)0.4個(gè)/30min·φ90皿(10個(gè)/m3)100級1000級Ⅱ標(biāo)準(zhǔn)潔凈手術(shù)室0.75/30min·φ90皿(25個(gè)/m3)1.5個(gè)/30min·φ90皿(50個(gè)/m3)1000級10000級Ⅲ一般潔凈手術(shù)室2個(gè)/30min·φ90皿(75個(gè)/m3)4個(gè)/30min·φ90皿(150個(gè)/m3)10000級100000級Ⅳ準(zhǔn)潔凈手術(shù)室5個(gè)/30min·φ90皿(175個(gè)/m3)300000級浮游菌濃度當(dāng)采用浮游法測定浮游菌濃度時(shí)，細(xì)菌濃度測點(diǎn)數(shù)應(yīng)和被測區(qū)域的含塵濃度測點(diǎn)數(shù)相同，且宜在同一位置上。每次采樣應(yīng)滿足表規(guī)定的最小采樣量的要求，每次采樣時(shí)間不應(yīng)超過30min。計(jì)算方法：平均濃度（個(gè)/m3）=菌落數(shù)/采樣量×1000菌落數(shù)為六個(gè)平皿菌數(shù)總和（個(gè)）其中：采樣量為流量與時(shí)間之積（升）評判標(biāo)準(zhǔn)見沉降菌監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測浮游菌濃度浮游菌最小采樣量被測區(qū)域潔凈度級別最小采樣量(m3)100級0.61000級0.0610000級0.03100000級0.006300000級0.006監(jiān)測方法醫(yī)院潔凈手術(shù)部監(jiān)測浮游菌濃度一次性醫(yī)療用品檢驗(yàn)檢測適用于臨床上使用的所有的一次性使用醫(yī)療用品、醫(yī)療用品經(jīng)滅菌處理后是否達(dá)到無菌標(biāo)準(zhǔn)。無菌檢驗(yàn)應(yīng)在1000級潔凈室內(nèi)的100級工作臺上或潔凈度為100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，避免微生物污染；對單向流空氣區(qū)域及工作臺面，必須進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)無菌檢驗(yàn)前準(zhǔn)備洗脫液無菌檢查：于無菌檢查前3d，向需氧-厭氧菌培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基內(nèi)各接種1.0mL洗脫液，分別置30℃～35℃與20℃～25℃條件下，培養(yǎng)72h后應(yīng)無菌生長。培養(yǎng)基無菌檢查：于無菌檢查前3d，將未種菌的需氧-厭氧菌培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基分別置30℃～35℃與20℃～25℃條件下，培養(yǎng)72h后應(yīng)無菌生長。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)陽性對照菌懸液制備：于無菌試驗(yàn)前一天，取金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26003]普通瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物1接種環(huán)，接種于需氧-厭氧菌培養(yǎng)基內(nèi)，在30℃～35℃培養(yǎng)16h～18h備用。用時(shí)以無菌生理鹽水稀釋至1：106（10cfu/ml～100cfu/ml）。取白色念珠菌[CMCC（F）98001]真菌瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物1接種環(huán)種于相同培養(yǎng)基內(nèi)，于20℃～25℃培養(yǎng)24h備用。用時(shí)以無菌生理鹽水稀釋至1：100（10cfu/ml～100cfu/ml）。無菌室與試驗(yàn)臺消毒：對無菌室地面與桌面以及試驗(yàn)臺臺面擦凈消毒后，將無菌試驗(yàn)用的培養(yǎng)基、洗脫液、供試品及其他需用器材放妥。開啟紫外線燈消毒1h。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)檢驗(yàn)操作程序：工作人員穿戴無菌隔離衣、帽、口罩、鞋后進(jìn)入無菌室，用70%乙醇棉球消毒雙手。將供試品外包裝用70%乙醇擦拭消毒后放于試驗(yàn)臺上。取需氧-厭氧培養(yǎng)管與真菌培養(yǎng)管各一支，打開蓋（或塞）置試驗(yàn)臺上，直至樣本無菌檢查試驗(yàn)完畢。蓋上蓋（或塞）與供試品一起培養(yǎng)，作為陰性對照。按無菌操作要求打開供試品外包裝，按以下規(guī)定方法制備樣本接種需氧-厭氧培養(yǎng)管與真菌培養(yǎng)管。檢測樣本的制作：檢測數(shù)量每批樣品首次檢測時(shí)，檢測1/4樣本，分別在所選的最小銷售包裝內(nèi)抽取。必要時(shí)進(jìn)行復(fù)測。復(fù)測時(shí)，檢測2/4樣本，分別在所選的最小銷售包裝內(nèi)抽取。以下的樣本制作均按首次檢測設(shè)計(jì)，復(fù)測時(shí)樣本量加倍。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)樣本制作敷料、手術(shù)衣等非管道類樣本。取2個(gè)包裝內(nèi)的樣本，于不同部位剪取約1cm×3cm大小的樣片21片，接種需氧-厭氧菌培養(yǎng)管5管與真菌培養(yǎng)管2管。每培養(yǎng)管含培養(yǎng)基40mL，各接種3片樣片。在其中一加有樣本的需氧-厭氧培養(yǎng)管中接種1.0mL金黃色葡萄球菌稀釋懸液作為陽性對照。注射針、針灸針、縫合針、棉簽等樣本。在所選7個(gè)最小銷售包裝內(nèi)樣品中，各選1支為一個(gè)樣本，分別接種于需氧-厭氧培養(yǎng)管5管與真菌培養(yǎng)管2管，每管含培養(yǎng)基15.0mL，在其中一支加有樣本的需氧-厭氧菌培養(yǎng)管中接種1.0mL金黃色葡萄球菌稀釋懸液作為陽性對照。輸液（血）器等導(dǎo)管類樣本。在所選7個(gè)最小銷售包裝內(nèi)樣品中，各選1支為一個(gè)樣本，各以無菌注射器吸取5.0mL～10.0mL無菌洗脫液注入管內(nèi)往返搖蕩5次。將各樣本洗脫液分別接種需氧-厭氧菌培養(yǎng)管5管與真菌培養(yǎng)管2管。培養(yǎng)管含培養(yǎng)基15.0mL，每管接種樣本洗脫液1.0mL。在其中一支加有樣本洗脫液的需氧-厭氧菌培養(yǎng)管中接種1.0mL金黃色葡萄球菌稀釋懸液作為陽性對照。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)注射器樣品。在所選7個(gè)最小銷售包裝內(nèi)樣品中，各選1支為一個(gè)樣本，各吸取經(jīng)滅菌合格的洗脫液2mL～10mL，將芯桿抽取至全程刻度，振搖5次。將各管洗脫液分別接種需氧-厭氧菌培養(yǎng)管5管與真菌培養(yǎng)管2管。洗脫液接種量，對1mL注射器為0.5mL；2mL注射器為1.0mL；5mL～10mL注射器為2.0mL；20mL～50mL注射器為5.0mL。培養(yǎng)管中的培養(yǎng)基量，對洗脫液接種量在2mL以下者，每管為15.0mL；接種量在5mL者，每管為40.0mL。在其中一支加有樣本洗脫液的需氧-厭氧菌培養(yǎng)管中接種1.0mL金黃色葡萄球菌稀釋懸液作為陽性對照。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)其他樣本。不能用上述方法處理的，可用無菌棉拭子涂抹法采樣。每個(gè)樣本涂采面積不得少于25cm2。采樣后將棉簽直接剪入培養(yǎng)管中。每次檢測7個(gè)樣本，分別接種需氧-厭氧菌培養(yǎng)管5管與真菌培養(yǎng)管2管，每支培養(yǎng)管含培養(yǎng)基15.0mL。在其中一支加有采樣棉拭子的需氧-厭氧菌培養(yǎng)管中接種1.0mL金黃色葡萄球菌稀釋懸液作為陽性對照。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)將上述接種樣本或接種樣本洗脫液、采樣棉拭子后的需氧-厭氧菌培養(yǎng)管、陽性對照管與陰性對照管同時(shí)放入30℃～35℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)、連續(xù)培養(yǎng)5d，逐日觀察培養(yǎng)結(jié)果。將上述接種樣本或接種樣本洗脫液、采樣棉拭子后的真菌培養(yǎng)管、陽性對照管與陰性對照管同時(shí)放入20℃～25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)、連續(xù)培養(yǎng)7d，逐日觀察培養(yǎng)結(jié)果。陽性對照管應(yīng)有菌生長，陰性對照應(yīng)無菌生長，否則試驗(yàn)重做。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)結(jié)果判定:陽性對照在24h內(nèi)應(yīng)有菌生長，陰性對照在培養(yǎng)期間應(yīng)無菌生長，如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或雖顯混濁，經(jīng)培養(yǎng)后不能從外觀上判斷時(shí)，可取培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種入另一支相同的培養(yǎng)基中或斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48h～72h后，觀察是否再現(xiàn)混濁或在斜面上有無菌落生長，并在轉(zhuǎn)種的同時(shí)，取培養(yǎng)液少量，涂片染色，用顯微鏡觀察是否有菌生長。經(jīng)證明并非有菌生長，判為滅菌合格；如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管中任何1管顯混濁并證實(shí)有菌生長，應(yīng)重新取樣，分別同法復(fù)試2次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否則判為滅菌不合格。監(jiān)測方法醫(yī)療器械消毒、滅菌效果的監(jiān)測無菌檢驗(yàn)注意事項(xiàng)送檢時(shí)間不得超過6h，若樣品保存于0℃～4℃，則不得超過24h。被采樣本表面積＜100cm2取全部表面；被采樣本表面積≥100cm2，取100cm2。若消毒因子為化學(xué)消毒劑,采樣液中應(yīng)加入相應(yīng)中和劑。監(jiān)測