藥物定量分析

關(guān)于藥物定量分析2取樣的基本原則？

均勻、合理。藥物鑒別的目的？

判斷藥物及其制劑的真?zhèn)?。藥物檢查的目的？

純度藥物含量測(cè)定？

主要有效成分的含量。

2第2頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月3鑒別試驗(yàn)(identificationtest)：根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來(lái)判斷藥物的真?zhèn)嗡幬锏蔫b別試驗(yàn)包括：性狀和鑒別一般鑒別實(shí)驗(yàn)：是指依據(jù)某一類(lèi)藥物的共同的化學(xué)結(jié)構(gòu)或相同的理化特性，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)來(lái)鑒別藥物的真?zhèn)巍?zhuān)屬鑒別實(shí)驗(yàn)：是證實(shí)某一種藥物的依據(jù)。根據(jù)一類(lèi)藥物中每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及理化特性，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來(lái)鑒別藥物的真?zhèn)巍５?頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月4取樣的基本原則？

均勻、合理。藥物鑒別的目的？

判斷藥物及其制劑的真?zhèn)?。藥物檢查的目的？

純度4第4頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月5藥物檢查需要解決以下四個(gè)問(wèn)題？1、什么是雜質(zhì)？2、藥物中雜質(zhì)從哪里來(lái)？3、雜質(zhì)如何分類(lèi)？4、雜質(zhì)的檢查方法有哪些？如何計(jì)算?5第5頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月6什么是雜質(zhì)？1.有毒副作用的物質(zhì)

2.本身無(wú)毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)3.本身無(wú)毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)藥物純度藥物的純凈程度6第6頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月7藥物檢查需要解決以下四個(gè)問(wèn)題？1、什么是雜質(zhì)？2、藥物中雜質(zhì)從哪里來(lái)？3、雜質(zhì)如何分類(lèi)？4、雜質(zhì)的檢查方法有哪些？如何計(jì)算?7第7頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月8雜質(zhì)的來(lái)源

生產(chǎn)中引入原料中間體副產(chǎn)物降解產(chǎn)物

兩大來(lái)源

貯藏過(guò)程中產(chǎn)生水解氧化分解異構(gòu)化8第8頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月9藥物檢查需要解決以下四個(gè)問(wèn)題？1、什么是雜質(zhì)？2、藥物中雜質(zhì)從哪里來(lái)？3、雜質(zhì)如何分類(lèi)？4、雜質(zhì)的檢查方法有哪些？如何計(jì)算?9第9頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月10雜質(zhì)的分類(lèi)依雜質(zhì)來(lái)源分類(lèi)：一般雜質(zhì)：含義，品種特殊雜質(zhì)：含義依雜質(zhì)毒性分類(lèi)：依雜質(zhì)理化性質(zhì)分類(lèi)：信號(hào)雜質(zhì)毒性雜質(zhì)有機(jī)雜質(zhì)無(wú)機(jī)雜質(zhì)殘留溶劑10第10頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月11藥物檢查需要解決以下四個(gè)問(wèn)題？1、什么是雜質(zhì)？2、藥物中雜質(zhì)從哪里來(lái)？3、雜質(zhì)如何分類(lèi)？4、雜質(zhì)的檢查方法有哪些？如何計(jì)算?11第11頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月12雜質(zhì)限量：指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用百分之幾或百萬(wàn)分之幾（ppm）來(lái)表示雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格12第12頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月1313藥物的雜質(zhì)檢查法1.限量檢查法（LimitTest）對(duì)照法2.定量檢查法第13頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月14雜質(zhì)限量的計(jì)算14第14頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月15練習(xí)題：1.臨床所用藥物的純度與化學(xué)品及試劑純度的主要區(qū)別是A.所含雜質(zhì)的生理效應(yīng)不同B.所含有效成分的量不同C.所含雜質(zhì)的絕對(duì)量不同D.化學(xué)性質(zhì)及化學(xué)反應(yīng)速度不同E.所含有效成分的生理效應(yīng)不同15第15頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月162．在藥物生產(chǎn)過(guò)程中引入雜質(zhì)的途徑為

A.原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成

B.合成過(guò)程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成

C.需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成

D.所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì)

E.由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì)討論16第16頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月173.檢查維生素C中的重金屬時(shí)，若取樣量為1.0g，要求含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之十，問(wèn)應(yīng)吸取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？A.0.2mlB.0.4mlC．2mlD.1mlE.20ml17第17頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月1818第18頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月194.谷氨酸鈉中重金屬的檢查取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(10μgPb/ml)所呈顏色相比較，不得更深，重金屬限量為百萬(wàn)分之十，求取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液多少毫升？19第19頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月20討論5.藥物純度符合規(guī)定系指（）。A.含量符合藥典的規(guī)定B.純度符合優(yōu)級(jí)純?cè)噭┑囊?guī)定C.絕對(duì)不存在的雜質(zhì)D.對(duì)患者無(wú)不良反應(yīng)E.雜質(zhì)含量不超過(guò)限度規(guī)定20第20頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月21阿司匹林的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)阿司匹林AsipilinAspirinC9H8O4180.16第21頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月22本品為2-(乙酰氧基)苯甲酸。含C9H8O4不得少于99.5％?！拘誀睢?/p>

本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無(wú)臭或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕氣即緩緩水解。本品在乙醇中易溶，在氯仿或乙醚中溶解，在水或無(wú)水乙醚中微溶；在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時(shí)分解。第22頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月23【鑒別】

（1）取本品約0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。（2）取本品約0.5g，加碳酸鈉試液10ml，煮沸2分鐘后，放冷，加過(guò)量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。（3)本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(光譜集209圖)一致。第23頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月24【檢查】溶液的澄清度取本品0.50g，加溫?zé)嶂良s45℃的碳酸鈉試液10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清。

第24頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月25游離水楊酸取本品0.10g，加乙醇lml溶解后，加冷水適量使成50ml，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液[取鹽酸溶液(9→100)1ml，加硫酸鐵銨指示液2ml后，再加水適量使成100m1]1ml，搖勻；30秒鐘內(nèi)如顯色；與對(duì)照液(精密稱(chēng)取水楊酸0.1g，加水溶解后，加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml，搖勻；精密量取lml，加乙醇lml、水48ml與上述新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻)比較，不得更深(0.1％)。第25頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月26易炭化物取本品0.5g，依法檢查(附錄ⅧK)，與對(duì)照液(取比色用氯化鈷液0.25ml、比色用重鉻酸鉀液0.25ml、比色用硫酸銅液0.40ml，加水使成5m1)比較，不得更深。熾灼殘?jiān)坏眠^(guò)0.1％(附錄ⅧN)。重金屬取本品1.0g，加乙醇23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依法檢查(附錄ⅧH第一法)，含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之十。第26頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月27【含量測(cè)定】取本品約0.4g，精密稱(chēng)定，加中性乙醇(對(duì)酚酞指示液顯中性)20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol／L)滴定。每lml氫氧化鈉滴定液(0.1mol／L)相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。【類(lèi)別】

解熱、消炎鎮(zhèn)痛藥。【貯藏】

密封，在干燥處保存?！局苿浚?）阿司匹林片（2）阿司匹林腸溶片（3）阿司匹林栓第27頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月28取樣的基本原則？

均勻、合理。藥物鑒別的目的？

判斷藥物及其制劑的真?zhèn)巍Ｋ幬餀z查的目的？

純度藥物含量測(cè)定？

主要有效成分的含量。

28第28頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月29

藥物的含量測(cè)定第29頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月30基本內(nèi)容一、概述二、容量分析法三、光譜分析法四、色譜分析法練習(xí)與思考第30頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月31一、概述

藥品的含量測(cè)定是指準(zhǔn)確測(cè)定藥品有效成分或指標(biāo)性成分的含量。含量測(cè)定是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量、判斷藥物優(yōu)劣和保證藥品療效的重要手段。含量測(cè)定需在鑒別無(wú)誤和雜質(zhì)檢查符合規(guī)定的基礎(chǔ)上進(jìn)行。除個(gè)別品種不收載含量測(cè)定外，原則上均按藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行含量測(cè)定。應(yīng)根據(jù)所測(cè)成分的物理化學(xué)性質(zhì)選擇相應(yīng)的測(cè)定方法。第31頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月32測(cè)定藥物含量的方法(1)容量分析法：儀器設(shè)備簡(jiǎn)單、易于操作、不需要使用化學(xué)對(duì)照品，成本低、速度較快，其準(zhǔn)確度和精密度都較高。(2)儀器分析法：當(dāng)組分復(fù)雜、干擾成分較多難于用容量分析法測(cè)定含量時(shí)，選用專(zhuān)屬性較高的儀器分析方法。第32頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月33二、容量分析法（滴定分析法）（一）概念及特點(diǎn)將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液由滴定管滴加到被測(cè)藥物的溶液中，至與被測(cè)藥物反應(yīng)完全（通過(guò)適當(dāng)方法指示），然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和被消耗的體積，按化學(xué)計(jì)量關(guān)系計(jì)算出被測(cè)藥物的含量第33頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月2024/8/1834指示劑顯示終點(diǎn)到達(dá)C滴定B+B（標(biāo)準(zhǔn)物）

A（被測(cè)物）A傳統(tǒng)分析方法；主要用于主成分含量較高的試樣分析；特點(diǎn)：簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、費(fèi)用低。第34頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月35幾個(gè)基本術(shù)語(yǔ)滴定液(標(biāo)準(zhǔn)溶液)：已知準(zhǔn)確濃度的試劑化學(xué)計(jì)量點(diǎn)：被測(cè)物與標(biāo)準(zhǔn)物按化學(xué)計(jì)量關(guān)系完全反應(yīng)的點(diǎn)。指示劑：用以指示滴定終點(diǎn)的試劑滴定終點(diǎn)：指示劑顏色變化的點(diǎn)。終點(diǎn)誤差：由于滴定終點(diǎn)和化學(xué)計(jì)量點(diǎn)的差異所引起的相對(duì)誤差.第35頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月36按藥典規(guī)定，精密標(biāo)定的滴定液（如鹽酸及其濃度）正確表示為A.鹽酸滴定液（0.152mol/L）B.鹽酸滴定液（0.1524mol/L）C.鹽酸滴定液（0.152M/L）D.0.1524M/L鹽酸滴定液E.0.152mol/L鹽酸滴定液答案：B第36頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月37例題：滴定分析中，一般利用指示劑的突變來(lái)判斷化學(xué)計(jì)量點(diǎn)的到達(dá)，在指示劑變色時(shí)停止滴定，這一點(diǎn)為：A.化學(xué)計(jì)量點(diǎn)B.滴定分析C.滴定等當(dāng)點(diǎn)D.滴定終點(diǎn)E.滴定誤差答案：D第37頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月38（二）容量分析法的分類(lèi)按化學(xué)反應(yīng)類(lèi)型分類(lèi)1.酸堿滴定法:測(cè)定物質(zhì)酸堿度計(jì)算酸堿的含量。2.沉淀滴定法:主要測(cè)定鹵素及銀的含量。3.配位滴定法（絡(luò)合滴定法）:測(cè)定金屬離子的含量。4.氧化還原滴定法：測(cè)定氧化還原性物質(zhì)的含量。非水滴定法第38頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月39（三）滴定分析的方式1.直接滴定:2.返滴定法：3.置換滴定法：4.間接滴定法：第39頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月402.返滴定法：待測(cè)物質(zhì)與滴定劑反應(yīng)很慢，或待測(cè)物是固體時(shí)，反應(yīng)不能立刻完成?？梢韵葴?zhǔn)確加入過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，使之與待測(cè)物質(zhì)反應(yīng)完全后，再用另一種標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定剩余的標(biāo)準(zhǔn)溶液。例：Al3+

過(guò)量EDTAZn2+或Cu2+標(biāo)液返滴定。例：CaCO3

過(guò)量HClNaOH標(biāo)液返滴定。第40頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月413.置換滴定法：沒(méi)有定量關(guān)系或有副反應(yīng)時(shí)，可以先用適當(dāng)試劑與待測(cè)物反應(yīng)，使其定量地置換為另一種物質(zhì)，再用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液滴定這種物質(zhì)。例：K2Cr2O7

滴定NaS2O3K2Cr2O3

過(guò)量KII2

NaS2O3

滴定。第41頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月424.間接滴定法：不能與滴定劑反應(yīng)，可以通過(guò)另外的化學(xué)反應(yīng)以滴定法間接完成。例：Ca2+

的測(cè)定。

Ca2+CaC2O4H2SO4溶解

C2O42-用KMnO4滴定第42頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月43例：TVc/I2=8.806mg/mL即：《中國(guó)藥典》規(guī)定，每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于8.806mg的維生素C。（四）容量分析法的計(jì)算問(wèn)題

1.滴定度（T）：

每1ml規(guī)定濃度的滴定液相當(dāng)于被測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量(mg)第43頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月442.滴定度的計(jì)算

aA（待測(cè)物）

+bB（滴定液）

cC+dD

ab

T/M

1×cT=c×a/b×Mc：滴定液濃度(mol/L)M：被測(cè)物分子量

第44頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月45例：用碘量法測(cè)定維生素C[M(C6H8O6)＝176.13]的含量時(shí)，碘滴定液的摩爾濃度為0.05mol/L（以I2為單元），化學(xué)反應(yīng)式如下：滴定度(T)=?

T=8.806mg/mL

C6H8O6＋I(xiàn)2→C6H6O6+2HI第45頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月463.百分含量的計(jì)算W：供試品取樣量

設(shè)至終點(diǎn)時(shí)，消耗滴定液體積為Vml則藥物理論質(zhì)量為V·T濃度校正因數(shù)（1）直接滴定法（用滴定液直接滴定被測(cè)藥物）第46頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月47例題：非那西丁含量測(cè)定：精密稱(chēng)取本品0.3630g加稀鹽酸回流1小時(shí)后，放冷，用亞硝酸鈉液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00m1。每1ml亞硝酸鈉液（0.1mol/L）相當(dāng)于17.92mg的C10H13O2N。計(jì)算非那西丁的含量為？第47頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月48例：精密稱(chēng)取青霉素鉀供試品0.4021g，按藥典規(guī)定用剩余堿量法測(cè)定含量。先加入氫氧化鈉液(0.1mol/L)25.00ml，回滴時(shí)消耗0.1015mol/l的鹽酸液14.20ml，空白試驗(yàn)消耗0.1015mol/l的鹽酸液24.68ml。求供試品的含量，每1ml氫氧化鈉液(0.1mol/L)相當(dāng)于37.25mg的青霉素鉀。

第48頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月49（2）間接滴定法1）生成物滴定法藥物+A→B滴定滴定劑2）剩余滴定法（回滴法）藥物+A（定、過(guò)量）

→················剩余的A+B→·······（回滴）······V

空白試驗(yàn)···········································V0第49頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月W司可巴比妥鈉=0.1022g，cBr2=0.05mol/L，cNa2S2O3＝0.1mol/L；V1=15.73ml，V0=23.21ml；MC12H17N2NaO3=260.27，F(xiàn)Na2S2O3＝1.038。司可巴比妥鈉的含量測(cè)定1.計(jì)算滴定度；2.計(jì)算百分含量。第50頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月51第51頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月52光譜分析法

紫外—可見(jiàn)分光光度法UV—Vis原子吸收分光光度法AAS熒光分析法

二、光譜分析法第52頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月53（一）紫外-可見(jiàn)分光光度法靈敏度高，可達(dá)10-4g/ml～10-7g/ml1.特點(diǎn)準(zhǔn)確度高，RSD（%）為2%～5%儀器價(jià)格低廉，操作簡(jiǎn)單，易普及，應(yīng)用廣泛2.朗伯-比耳定律

A=ECL

吸收系數(shù)：摩爾吸收系數(shù)ε

——

研究分子結(jié)構(gòu)

百分吸收系數(shù)

——

含量測(cè)定吸收光譜范圍：紫外：200～400nm

可見(jiàn)：400～760nm

第53頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月543.儀器的校正和檢定

吸收度準(zhǔn)確性的檢定：重鉻酸鉀的硫酸溶液，規(guī)定波長(zhǎng)處測(cè)定

，應(yīng)符合P91表1中規(guī)定波長(zhǎng)的校正：汞燈中的幾根較強(qiáng)的譜線(xiàn)或用儀器自身所帶的氘燈的特定譜線(xiàn)為參照進(jìn)行校正雜散光的檢查：一定濃度的碘化鈉和亞硝酸鈉溶液，規(guī)定波長(zhǎng)處測(cè)定透光率，應(yīng)符合P91表2中規(guī)定第54頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月554.對(duì)溶劑的要求:含雜原子的有機(jī)溶劑通常具有很強(qiáng)的末端吸收它們的使用范圍均不能小于截止使用波長(zhǎng)

石英吸收池、空氣為空白

λ(nm)溶劑+吸收池A220～240≤0.40241～250≤0.20251～300≤0.10300以上≤0.05第55頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月565.測(cè)定方法確定波長(zhǎng)要求供試品溶液的A應(yīng)在0.3～0.7

狹縫調(diào)整第56頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月57供試品溶液的吸光度對(duì)照品溶液的吸光度供試品溶液的濃度對(duì)照品溶液的濃度5.測(cè)定方法1）對(duì)照品比較法：條件：A.待測(cè)物與對(duì)照品在相同條件下測(cè)定B.待測(cè)物與對(duì)照品濃度相近第57頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月58制劑：原料藥：稀釋倍數(shù)取樣量平均片重片粉量第58頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月592）吸收系數(shù)法（絕對(duì)法）吸光度百分吸收系數(shù)液層厚度，cm，如無(wú)特別注明，L=1cm可在手冊(cè)或文獻(xiàn)中查到第59頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月60鹽酸氯丙嗪（規(guī)格1ml:10mg，E1%1cm＝915)的含量測(cè)定：精密量取本品5ml，置200ml量瓶中，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻；精密量取2ml，置100ml量瓶中，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，在254nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度為0.469。計(jì)算其百分含量。第60頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月613）計(jì)算分光光度法：

多種，具體按每種藥物規(guī)定的方法進(jìn)行如：VA的三點(diǎn)校正法4）比色法加入顯色劑后，按照對(duì)照品比較法測(cè)定。影響顯色因素很多，故需注意平行操作?？瞻兹軇喝軇?顯色劑，同法處理第61頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月62三、色譜分析法

特點(diǎn)：高靈敏度、高效能、高速度、應(yīng)用廣泛

按分離原理：吸附；分配；離子交換；排阻色譜分類(lèi)按分離方法：PC；TLC；柱色譜；GC；HPLC

根據(jù)混合物中各組分的色譜行為差異，先行分離后再在線(xiàn)或離線(xiàn)對(duì)各組分逐一進(jìn)行分析的方法，是分離分析混合物的最有力手段。第62頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月631.對(duì)儀器一般要求

固定相種類(lèi)、流動(dòng)相組分、檢測(cè)器類(lèi)型不得任意改變

其他均可適當(dāng)改變色譜圖20分鐘內(nèi)記錄完畢2.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱的理論板數(shù)：n=5.54(tR/Wh/2)2

分離度：R=2（tR2

–

tR1)/(W1+W2);應(yīng)大于1.5重復(fù)性：對(duì)照液連續(xù)進(jìn)樣5次，峰面積RSD≤2.0％拖尾因子：T=W0.05h/2Ａ應(yīng)在0.95～1.05流出方向（一）HPLC法第63頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月64（1）內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定供試品中主成分含量對(duì)照品+內(nèi)標(biāo)物→對(duì)照溶液，進(jìn)樣，測(cè)定，計(jì)算校正因子

3.在含量測(cè)定中的應(yīng)用供試品+內(nèi)標(biāo)→供試品溶液，進(jìn)樣，測(cè)定供試品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，計(jì)算含量第64頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月65

（2）外標(biāo)法測(cè)定供試品主成分含量供試品→供試品溶液對(duì)照品→對(duì)照品溶液進(jìn)樣，測(cè)定，計(jì)算含量

缺點(diǎn)：不易準(zhǔn)確控制進(jìn)樣量，宜用定量環(huán)進(jìn)樣第65頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月661.對(duì)GC儀器一般要求

載氣：氮?dú)?/p>

色譜柱：填充柱或毛細(xì)管柱填充柱：內(nèi)徑2～4mm，長(zhǎng)1～10m，內(nèi)裝吸附劑高分子多孔小球或涂漬固定液的載體

毛細(xì)管柱：內(nèi)徑0.2～0.5mm，長(zhǎng)10～100m，一般為空心柱，內(nèi)壁或載體經(jīng)涂漬或交聯(lián)固定液檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器色譜圖：30分鐘內(nèi)記錄完畢（二）GC法色譜適用性實(shí)驗(yàn)、測(cè)定法：同HPLC第66頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月67第二節(jié)樣品分析的前處理方法

第一節(jié)定量分析樣品的前處理方法一、概述1.結(jié)構(gòu)特征與分析方法之間的關(guān)系(2)含金屬有機(jī)藥物

(1)含鹵素有機(jī)藥物R-X（F，Cl,Br,I）

鹵素與脂肪鏈相連R-X結(jié)合較不牢固，不需有機(jī)破壞

含金屬有機(jī)藥物R-O-Me，有機(jī)酸或酚的金屬鹽/配位化合物；結(jié)合不牢固，可直接測(cè)定

有機(jī)金屬藥物R-Me

，結(jié)合牢固，適當(dāng)處理后測(cè)定

鹵素與芳環(huán)相連Ar-X結(jié)合牢固，需/不需有機(jī)破壞泛影酸三氯叔丁醇富馬酸亞鐵硬脂酸鎂醋酸苯汞第67頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月682.藥物分析中常用的分析方法經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法第68頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月69二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法終點(diǎn)：鄰二氮菲(+Fe3+)溶于熱稀礦酸Fe2+鈰量法Ce4+Fe3+指示劑:鄰二氮菲(+Fe2+)紅色淡藍(lán)色（一）直接測(cè)定法例如：富馬酸亞鐵的含量測(cè)定第69頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月70（二）經(jīng)水解后測(cè)定法

CCl3-C(CH3)2-OH+4NaOH

(CH3)2CO+3NaCl+HCOONa+2H2O

NaCl+AgNO3AgCl↓+NaNO3AgNO3+NH4SCNAgSCN↓+NH4NO3

△

Mg(C17H35COO)2+H2SO4

MgSO4+2C17H35COOH

H2SO4+2NaOHNa2SO4

+2H2O

1.堿水解后測(cè)定法適用于X與脂肪鏈相連的鹵代烷烴例如：三氯叔丁醇的含量測(cè)定

2.酸水解后測(cè)定法

例如：硬脂酸鎂的含量測(cè)定

第70頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月71（三）經(jīng)還原分解后測(cè)定法

指示劑：曙紅鈉終點(diǎn)：黃→紅適用于A(yíng)r-I的藥物例如：泛影酸的含量測(cè)定第71頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月72三、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法－－－－凱氏定氮法金屬原子、鹵素等與C結(jié)合牢固者，必須有機(jī)破壞藥物分析中常用的有機(jī)破壞的方法有干法破壞濕法破壞

(一)濕法破壞H2SO4-HNO3法H2SO4-HClO4法H2SO4-硫酸鹽法H2SO4-H2O2,HNO3-KMnO4法等第72頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月73（二）干法破壞2.氧瓶燃燒法適用于含鹵素、S、P等有機(jī)藥物分析的前處理，也用于某些藥物中Se及砷鹽的檢查1.高溫?zé)胱品訜o(wú)水Na2CO3、硝酸鎂、氫氧化鈣或ZnO以助灰化第73頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月741）儀器裝置500ml,1000ml,2000ml,磨口、硬質(zhì)玻璃錐形瓶2）稱(chēng)樣固體樣；液體樣；軟膏類(lèi)樣品要求3）燃燒分解操作法4）吸收液的選擇用于X、S、Se等的鑒別、檢查、含量測(cè)定時(shí)多數(shù)是H2O或H2O-NaOH；少數(shù)為H2O-NaOH-H2O2.第74頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月75應(yīng)用示例：碘苯酯的測(cè)定返回第75頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月76第三節(jié)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證均需對(duì)分析方法進(jìn)行驗(yàn)證驗(yàn)證內(nèi)容：準(zhǔn)確度、精密度、專(zhuān)屬性、檢測(cè)限、定量限、線(xiàn)性、范圍和耐用性目的：證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測(cè)要求。起草藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)工藝變更制劑組分改變?cè)治龇椒ㄐ抻喌?6頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月77一、準(zhǔn)確度是指用該方法測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值接近的程度，用回收率表示（一）含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度1.原料藥：可用已知純度對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)定；或與已知準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較第77頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月782.制劑：考察其他組分和輔料對(duì)回收率的影響①用含已知量被測(cè)物的制劑各組分混合物（包括制劑輔料）進(jìn)行測(cè)定，回收率計(jì)算同原料藥②向制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定③與已知準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較第78頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月79（二）具體做法：測(cè)定高、中、低三個(gè)濃度，n=3,共9個(gè)數(shù)據(jù)來(lái)評(píng)價(jià)回收率；用UV和HPLC法時(shí)，一般回收率可達(dá)98.0%～102.0%；容量法可達(dá)99.7%～100.3%第79頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月80回收率試驗(yàn)精密稱(chēng)取鹽酸小檗堿約40mg，按處方比例加入其它組分和輔料，用適量沸騰的0.05mol/LH2SO4

溶解。放冷置室溫，定量轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，并稀釋至刻度。過(guò)濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液5.00ml于100ml量瓶中并稀釋至刻度，按所選定的方法計(jì)算回收率。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表。三波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定連蒲雙清片中鹽酸小檗堿的含量第80頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月81回收率試驗(yàn)取連蒲雙清片粉適量（約相當(dāng)于鹽酸小檗堿40mg)，精密稱(chēng)取，精密加入鹽酸小檗堿約40mg

，用0.05mol/LH2SO4

溶解。放冷置室溫，定量轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，并稀釋至刻度。過(guò)濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液5.00ml于100ml量瓶中定容，按所選定的方法計(jì)算回收率。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表。三波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定連蒲雙清片中鹽酸小檗堿的含量第81頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月822.

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)

1.

標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD或S）二、精密度（一）精密度表示方法第82頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月83（二）驗(yàn)證內(nèi)容

1.

重復(fù)性

在相同條件下,由一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度.

2.

中間精密度

在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果的精密度。

3.

重現(xiàn)性

在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度。（三）數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限第83頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月84三、專(zhuān)屬性指在其他成分(如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等)可能存在下，采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定方法，均應(yīng)考察其專(zhuān)屬性（一）鑒別反應(yīng)應(yīng)能與其它共存的物質(zhì)或相似化合物區(qū)分，不含被測(cè)組分的樣品均應(yīng)呈現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。第84頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月85（二）含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定

色譜法和其他分離法，應(yīng)附代表性的圖譜，以說(shuō)明專(zhuān)屬性。圖中應(yīng)注明各組分的位置，色譜法中分離度應(yīng)符合要求。在能獲得雜質(zhì)的情況下，可加到試樣中，考察對(duì)結(jié)果的干擾。在雜質(zhì)和降解物不能獲得的情況下，可用已驗(yàn)證方法或藥典方法進(jìn)行對(duì)照；也可用對(duì)試樣加速破壞的方法，比較兩種方法。第85頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月86

四、檢測(cè)限（LOD)

是指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低濃度或量，是限度檢驗(yàn)指標(biāo)。它無(wú)需準(zhǔn)確定量，只要指出高于或低于該規(guī)定的濃度或量即可。1.目視法用含已知濃度被測(cè)物的試樣進(jìn)行分析，目視確定能被可靠地檢測(cè)出的被測(cè)物的最低濃度或量，常用于顯色鑒別法，TLC2.當(dāng)用GC和HPLC法時(shí)，一般以S/N＝2或3時(shí)的相應(yīng)濃度來(lái)確定檢測(cè)限。第86頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月87

五、定量限（LOQ)

是指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。

雜質(zhì)和降解產(chǎn)物進(jìn)行定量測(cè)定時(shí)，要求LOQ。常用信噪比法確定定量限，一般以S/N=10時(shí)相應(yīng)的濃度進(jìn)行測(cè)定。第87頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月88六、線(xiàn)性

是指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度或量直接呈正比關(guān)系的程度。

回歸方程的相關(guān)系數(shù)（r）越接近1，表明線(xiàn)性越好可用一貯備液經(jīng)精密稀釋?zhuān)蚍謩e精密稱(chēng)樣，制備一系列（至少5份）供試液進(jìn)行測(cè)定，以響應(yīng)值對(duì)濃度作圖，建立回歸方程，求出r。如UV：制備一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)系列，濃度點(diǎn)n=5A=0.3-0.7建立回歸方程C=aA+b，

r＞0.9999第88頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月89七、范圍

如原料藥和制劑含量測(cè)定：應(yīng)為測(cè)試濃度的80%～120%制劑含量均勻度檢查：應(yīng)為測(cè)試濃度的70%～130%。溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定：應(yīng)為限度的±20%。是指達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線(xiàn)性、測(cè)試方法適用的高低限度或量的區(qū)間。第89頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月90

八、耐用性

是指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。典型的變動(dòng)因素有：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時(shí)間等。HPLC變動(dòng)因素有：流動(dòng)相組成與pH，色譜柱，柱溫，流速等。GC變動(dòng)因素有：色譜柱，固定相，擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等。

第90頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月91

分析方法效能指標(biāo)的具體應(yīng)用：1.用于鑒別試驗(yàn)：只要求專(zhuān)屬性、耐用性2.用于原料藥中雜質(zhì)測(cè)定和制劑中降解產(chǎn)物測(cè)定的方法：①用于定量：除檢測(cè)限不要求外，其余指標(biāo)均要求。②限度檢查：只要求檢測(cè)限、專(zhuān)屬性、耐用性3.原料、制劑的含量測(cè)定及溶出度測(cè)定：不要求檢測(cè)限和定量限，其余均要求。第91頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月92練習(xí)與思考[A型題]1．相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示的應(yīng)是A．準(zhǔn)確度B．回收率C．精密度D．純凈度E．限度第92頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月932．表示兩變量指標(biāo)A與C之間線(xiàn)性相關(guān)程度常用A．相關(guān)規(guī)律B．比例常數(shù)C．相關(guān)常數(shù)D．相關(guān)系數(shù)E．精密度第93頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月94

1～4A．空白試驗(yàn)B．對(duì)照試驗(yàn)C．回收試驗(yàn)D．鑒別試驗(yàn)E．檢測(cè)試驗(yàn)1．以同量的溶劑替代供試品同法進(jìn)行測(cè)定試驗(yàn)2．在供試液中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)物或已知量的被測(cè)物后，同法進(jìn)行測(cè)定試驗(yàn)3．用已知量的純物質(zhì)作為試樣，同法進(jìn)行測(cè)定試驗(yàn)4．取少許水楊酸，加水溶解，加三氯化鐵試液，顯紫堇色ACDB[B型題]第94頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月95[X型題]1．藥物分析方法的效能指標(biāo)有

A．檢測(cè)限B．耐用性C．準(zhǔn)確度D．專(zhuān)屬性E．代表性2．對(duì)藥物中雜質(zhì)進(jìn)行檢查時(shí)，要求所用的檢查方法應(yīng)具有

A．耐用性B．專(zhuān)屬性C．檢測(cè)限D(zhuǎn)．準(zhǔn)確度E．線(xiàn)性與范圍第95頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月963．用信噪比表示檢測(cè)限時(shí)，信噪比一般應(yīng)為

A．1∶1B．2∶1C．3∶1

D．4∶1E．5∶1

返回第96頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月97１.在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度稱(chēng)為（）A.精密度B.耐用性C.準(zhǔn)確度D.線(xiàn)性E.范圍2.用HPLC測(cè)得兩組分的保留時(shí)間分別為8.0min和10.0min，峰寬分別為2.8mm和3.2mm，記錄紙速為5.0mm/min，則兩峰的分離度為（）

A.3.4

B.3.3

C.4.0

D.1.7

E.6.8第97頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月983.用直接滴定法測(cè)定阿司匹林原料藥的含量，若供試品的稱(chēng)樣質(zhì)量為m(g)，氫氧化鈉滴定液的濃度為c(mol/l)，消耗氫氧化鈉滴定液的體積為V(ml)，1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l)相當(dāng)于18.02mg的阿司匹林，則含量的計(jì)算公式為（）第98頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月99４.準(zhǔn)確度是指用某分析方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般以（）A.百分回收率表示B.偏差表示C.標(biāo)準(zhǔn)偏差表示D.相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示E.重現(xiàn)性表示５.回收率屬于藥物分析方法驗(yàn)證指標(biāo)中的（）

A.精密度B.準(zhǔn)確度C.檢測(cè)限D(zhuǎn).定量限

E.線(xiàn)性與范圍第99頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月100６.中國(guó)藥典規(guī)定紫外分光光度法測(cè)定中，溶液的吸收度應(yīng)控制在（）

A.0.00～2.00

B.0.3～1.0

C.0.2～0.8

D.0.1～1.0

E.0.3～0.77.GC、HPLC法中的分離度（Ｒ）的計(jì)算公式為(

)

第100頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月101１.選擇氧瓶燃燒法所必備的實(shí)驗(yàn)物品包括（）

A.磨口硬質(zhì)玻璃錐形瓶B.鉑絲C.氫氣

D.無(wú)灰濾紙E.凱氏燒瓶多項(xiàng)選擇題２.有機(jī)鹵素藥物常用的測(cè)定方法有（）

A.直接回流后測(cè)定法B.堿性還原后測(cè)定法C.氧瓶燃燒分解后測(cè)定法D.直接絡(luò)合滴定法E.硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)液直接滴定法第101頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月102.含鹵素及含金屬有機(jī)藥物，測(cè)定前預(yù)處理的方法可以采用（）

A.堿性還原法B.堿性氧化法C.氧瓶燃燒法

D.堿熔融法E.直接回流法第102頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月103５.干法破壞應(yīng)注意的是（）

A.加熱溫度應(yīng)在420℃以下，以防止被測(cè)金屬化合物的揮發(fā)

B.應(yīng)灰化完全

C.樣品應(yīng)先大火加熱炭化后，小火加熱使樣品灰化

D.破壞后不溶的灰分，不應(yīng)棄去

E.可加入高錳酸鉀、H2O2多項(xiàng)選擇題第103頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月104一、最佳選擇題1．含溴有機(jī)化合物經(jīng)氧瓶燃燒后生（）。A.紫色煙霧B.棕色煙霧C.黃色煙霧D.白色煙霧E.紅色煙霧2．測(cè)定鹵素原子與脂肪碳鏈相連的含鹵素有機(jī)藥物（如三氯叔丁醇）的含量時(shí)，通常選用的方法是（）。A.直接回流后測(cè)定法B.直接溶解后測(cè)定法C.堿性還原后測(cè)定法D.堿性氧化后測(cè)定法E.原子吸收分光光度法第104頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月105三氯叔丁醇的含量測(cè)定是含鹵素藥物測(cè)定鹵素的代表性方法，這種方法是（）。A.酸水解法B.堿水解法C.堿氧化法D.堿熔法E.堿還原法第105頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月106含金屬有機(jī)藥物亞鐵鹽的含量測(cè)定一般采用（）。A.氧化后測(cè)定B.直接容量法測(cè)定C.比色法測(cè)定D.灼燒后測(cè)定E.重量法測(cè)定第106頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月1077．有機(jī)鹵素藥物中的鹵原子為芳環(huán)的取代基時(shí)，為使其轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)鹵素離子，應(yīng)該采用的方法是（）。A.將藥物溶于溶劑，加堿后，回流使其溶解B.將藥物溶于堿溶液，加強(qiáng)還原劑，加熱回流，使其裂解C.將藥物溶于堿溶液，加強(qiáng)氧化劑，加熱回流，使其裂解D.氧瓶燃燒法E.凱氏定氮法第107頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月1088．三氯叔丁醇的含量測(cè)定，采用氧瓶燃燒后剩余銀量法，以稀硫酸鐵銨為指示劑，用硫氰酸銨滴定剩余的硝酸銀，在滴定之前加鄰苯二甲酸二丁酯的作用是（）。A.防止AgCl轉(zhuǎn)化為AgSCN

B.促使AgCl轉(zhuǎn)化為AgSCNC.防止Fe3＋水解D.防止其他陰離子（如）的干擾E.使終點(diǎn)易于辨認(rèn)第108頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月10910．三氯叔丁醇采用銀量法測(cè)定含量，其樣品前處理方法為（）。A.堿性條件下回流B.堿性條件下還原C.酸性條件下還原D.酸性條件下水解E.以上都不是11．測(cè)定碘與苯相連的含鹵素有機(jī)藥物（如碘苯酯）的含量時(shí)，通常選用方法是（）。A.直接回流后測(cè)定法B.直接溶解后測(cè)定法C.氧瓶燃燒后測(cè)定法D.堿性氧化后測(cè)定法E.原子吸收分光光度法第109頁(yè),共120頁(yè)，星期六，2024年，5月11012．測(cè)定氧與金屬鍵相連的含金屬有機(jī)藥物（如富馬酸亞鐵）的含量時(shí)，通常選用方法是（）。A.直接測(cè)定法B.汞齊化測(cè)定法