北京義翹神州-國(guó)內(nèi)外生物制品病毒安全控制要點(diǎn)及相關(guān)策略分析

國(guó)內(nèi)外生物制品病毒安全控制要點(diǎn)及相關(guān)策略分析北京義翹神州科技股份有限公司AnalysisofDomesticandInternationalVirusSecurityControlPointsandRelatedStrategiesforBiologicsSinoBiologicalInc.CONTENT生物制品病毒污染源及污染事故1國(guó)內(nèi)外病毒安全相關(guān)法規(guī)及綜述2病毒污染篩查和檢測(cè)方法3病毒污染風(fēng)險(xiǎn)控制策略4SinoBiologicalInc.生物制品病毒污染源及污染事故01相關(guān)病毒及來(lái)源病毒污染事件回顧內(nèi)源性病毒污染外源性病毒污染SinoBiologicalInc.相關(guān)病毒及來(lái)源存在潛在病毒污染風(fēng)險(xiǎn)治療用生物制品病毒污染來(lái)源藥物活性成分源制造過(guò)程工程細(xì)胞A.昆蟲(chóng)、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞工程細(xì)胞（細(xì)菌）主庫(kù)：細(xì)胞源于受病毒感染的動(dòng)物，建立細(xì)胞系使用了病毒；建立細(xì)胞系使用了受污染的生物試劑，如胰蛋白酶、動(dòng)物血清等；建立細(xì)胞系操作過(guò)程中受病毒污染；

其他制造過(guò)程使用：動(dòng)植物來(lái)源的物料，存在病毒污染風(fēng)險(xiǎn)的物料被外源性病毒污染的物料；

其他污染工程細(xì)菌B.工程菌（存在病毒污染風(fēng)險(xiǎn)）C.工程菌（不存在病毒污染風(fēng)險(xiǎn)）NA組織或者體液D.人的組織或者體液組織或者體液的供體受到病毒感染；

組織或體液受交叉污染；

其他

E.動(dòng)物的組織或者體液基因治療、體細(xì)胞治療及其制品使用受病毒污染的工程細(xì)胞（細(xì)菌）；

其他采集、制造和使用等過(guò)程中的交叉污染SinoBiologicalInc.MediaandSupplementsGMPFailureEndogenous/LatentBVDVPolyomavirusCircovirusEHDVBluetongueTSEsBPVCircovirusMVMHantavirusReovirusLCMSendaivirusEctromeliavirusAdenovirusMousePneumoniaVirusMLVEnterovirusRetrovirusHerpesvirusCircovirusParamyxovirus

相關(guān)病毒及來(lái)源SinoBiologicalInc.病毒污染事件回顧1980年1990年2000年2010年HBVNANBHV/HCVHIVHAV/B19WNV,Dengue,H1N1,H5N1注：NANBHV：非甲非乙型肝炎病毒；

Dengue：登革熱SinoBiologicalInc.VirusCellYearCompanyEHDVCHO1993BioferonGmbHMVMCHO1996GenentechMVMCHO1996GenentechReovirusHomo1Kidney1999AbbottLabsVesivirus2117CHO2003Boehringer-IngelheimMVMCHO2006AmgenVesivirus2117CHO2008GenzymeVesivirus2117CHO2009GenzymeMVMCHO2009MerrimackVesivirus2117CHO2009GenzymeHumanadenovirusHEK2932010EliLillyVesivirus2117CHO2010GenzymePCV-1Vero2010GlaxoSmithKlineCacheValleyvirusCHO2011AmgenMVMCHO2011AmgenMVMCHO2011MerrimackMVMBHK-212013FMD病毒污染事件回顧工程細(xì)胞來(lái)源治療用生物制品的病毒污染事故SinoBiologicalInc.內(nèi)源性病毒污染源工程細(xì)胞工程細(xì)胞來(lái)源導(dǎo)致的病毒污染工程細(xì)胞構(gòu)建過(guò)程可能導(dǎo)致病毒污染工程細(xì)胞各級(jí)制備過(guò)程均有可能引入病毒污染組織或者體液人、動(dòng)物的組織或者體液（或來(lái)源于植物）供體存在的病毒污染組織或體液在取材、運(yùn)輸及保存過(guò)程導(dǎo)致的病毒污染風(fēng)險(xiǎn)SinoBiologicalInc.外源性病毒污染源物料控制受病毒污染的物料動(dòng)物來(lái)源原輔料缺少風(fēng)險(xiǎn)物料檢驗(yàn)放行措施物料存儲(chǔ)缺少必要的隔離措施物料在倉(cāng)儲(chǔ)過(guò)程中被動(dòng)物污染人員控制缺少健康檔案管理，操作人員自身攜帶病毒人員培訓(xùn)不足，操作人員未按照規(guī)定執(zhí)行正確操作設(shè)施環(huán)境設(shè)施不密封設(shè)備清潔無(wú)效人流、物流、廢物流交叉污染共線生產(chǎn)的交叉污染過(guò)程監(jiān)測(cè)缺少必要的過(guò)程控制策略和中控檢測(cè)計(jì)劃SinoBiologicalInc.國(guó)內(nèi)外病毒安全相關(guān)法規(guī)及綜述02國(guó)內(nèi)病毒安全相關(guān)法規(guī)國(guó)外病毒安全相關(guān)法規(guī)病毒安全相關(guān)法規(guī)總體要求SinoBiologicalInc.國(guó)內(nèi)病毒安全法規(guī)發(fā)布時(shí)間文件名稱闡述重點(diǎn)使用范圍2002關(guān)于進(jìn)一步加強(qiáng)牛源性及其他相關(guān)藥品監(jiān)督管理的公告污染源控制，原材料控制生物制品2003人用單克隆抗體質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則單克隆抗體制品的綜合要求單克隆抗體2003任用重組DNA制品質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則重組DNA制品的綜合要求重組DNA制品2003細(xì)胞培養(yǎng)用牛血清生產(chǎn)和質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則污染源控制，原材料控制生物制品2005生物組織提取制品和真核細(xì)胞表達(dá)制品的病毒安全性評(píng)價(jià)技術(shù)審評(píng)一般原則病毒安全性評(píng)價(jià)單克隆抗體/重組DNA制品/生物組織提取制品2005疫苗生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)的技術(shù)審評(píng)一般原則疫苗的綜合要求疫苗20112010版GMP，附錄4血液制品血液制品的綜合要求血液制品2017細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）細(xì)胞治療產(chǎn)品的綜合要求細(xì)胞治療產(chǎn)品2018細(xì)胞治療產(chǎn)品申請(qǐng)臨床試驗(yàn)藥學(xué)研究和申報(bào)資料的考慮要點(diǎn)細(xì)胞治療產(chǎn)品的綜合要求細(xì)胞治療產(chǎn)品SinoBiologicalInc.國(guó)內(nèi)病毒安全法規(guī)發(fā)布時(shí)間文件名稱闡述重點(diǎn)使用范圍2020《中國(guó)藥典》2020年版三部凡例-基本要求生物制品的綜合要求生物制品2020《中國(guó)藥典》2020年版三部生物制品通則-生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制生物制品的綜合要求生物制品生產(chǎn)用原輔料2020《中國(guó)藥典》2020年版三部生物制品通則-生物制品生產(chǎn)檢定用動(dòng)物細(xì)胞基質(zhì)制備及質(zhì)量控制污染源控制，細(xì)胞基質(zhì)的控制單克隆抗體/重組DNA蛋白制品2020《中國(guó)藥典》2020年版三部生物制品通則-血液制品生產(chǎn)用人血漿污染源控制，血漿病毒檢測(cè)血液制品2020《中國(guó)藥典》2020年版三部生物制品通則-生物制品病毒安全性控制病毒安全控制的一般原則和具體要求生物制品2020《中國(guó)藥典》2020年版三部（通則3302）外源病毒因子檢查法病毒檢測(cè)生物制品2020《中國(guó)藥典》2020年版三部（通則3303）鼠源性病毒檢查法病毒檢測(cè)生物制品2020《中國(guó)藥典》2020年版三部（通則3306）血液制品生產(chǎn)用人血漿病毒核酸檢測(cè)技術(shù)要求病毒檢測(cè)生物制品2020《中國(guó)藥典》2020年版三部（通則3604）新生牛血清病毒檢測(cè)生物制品SinoBiologicalInc.國(guó)外病毒安全法規(guī)病毒安全性評(píng)價(jià)相關(guān)法規(guī)發(fā)布時(shí)間國(guó)家/區(qū)域文件名稱闡述重點(diǎn)適用范圍1999ICHICHQ5A（R1）：ViralSafetyEvaluationofBiotechnologyProductsDerivedfromCellLinesofHumanorAnimalOrigen

人體或動(dòng)物細(xì)胞來(lái)源的生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全評(píng)價(jià)病毒安全性評(píng)價(jià)生物制品2016EUEP.5.1.7（9.5）：Viralsafety

病毒安全病毒安全性要求生物制品2006EUEMEA/CHMP/BWP/398498/2005:GuidelineonVirusSafetyEvaluationofBiotechnologicalInvestigationalMedicinalProducts

生物技術(shù)新型藥物產(chǎn)品的病毒安全性評(píng)價(jià)指南病毒安全性評(píng)價(jià)單克隆抗體、重組DNA蛋白制品2016USUSP1050(40-35NF):ViralSafetyEvaluationofBiotechnologyProductsDerivedfromCellLinesofHumanorAnimal

人體或動(dòng)物細(xì)胞來(lái)源的生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全評(píng)價(jià)病毒安全性評(píng)價(jià)單克隆抗體、重組DNA蛋白制品2016USUSP1050(40-35NF):Design,SafetyEvaluation,andCharacterizationofViralClearanceProcedure病毒清除程序的設(shè)計(jì)，評(píng)價(jià)和表征病毒安全性評(píng)價(jià)單克隆抗體、重組DNA蛋白制品國(guó)外病毒安全法規(guī)單克隆抗體、重組DNA蛋白制品、血液制品、基因治療產(chǎn)品發(fā)布時(shí)間國(guó)家/區(qū)域文件名稱闡述重點(diǎn)適用范圍2008EUEMA/CHMP/BWP/532517/2008:GuidelineonDevelopment,Production,CharacterisationandSpecificationforMonoclonalAntibodiesandRelatedProducts

單克隆抗體及其相關(guān)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)、特性鑒定和規(guī)范指南單克隆抗體制品的綜合要求單克隆抗體制品2012EUEMA/CHMP/BWP/706271/2010Guidelineonplasma-derivedmedicinalproductsRevision4

血液制品指南第4版血液制品的綜合要求血液制品2011EUEudraLex-Volume4Goodmanufacturingpractice(GMP)Guidelines,Annex14:ManufactureofMedicinalProductsDerivedfromHumanBloodorPlasma

GMP指南第4卷，附錄14：人體血液或血漿來(lái)源醫(yī)藥產(chǎn)品生產(chǎn)血液制品的綜合要求血液制品2003EUDIRECTIVE2002/98/EC:Settingstandardsofqualityandsafetyforthecollection,testing,processing,storageanddistributionofhumanbioodandbioodcomponentsandamendingDirective2001/83/EC

人血及成分血的搜集、檢測(cè)、處理、儲(chǔ)存和分配中質(zhì)量和安全的標(biāo)準(zhǔn)制定血液制品的綜合要求血液制品N/AUS21CFRPart606:Currentgoodmanufacturingpracticeforbloodandbloodcomponents

血液及成分血的現(xiàn)行良好操作規(guī)范血液制品的綜合要求血液制品N/AUS21CFRPart630:RequirementsforBloodandBloodComponentsIntendedforTransfusionorforFurtherManufacturinguse

用于輸血或生產(chǎn)使用的血液及成分血的要求血液制品的綜合要求血液制品N/AUS21CFRPart640：AdditionalStandardsforHumanBloodandBloodProducts

人血及其制品的其他標(biāo)準(zhǔn)血液制品的綜合要求血液制品2016USUSP1180(40-NF35)HumanPlasma

人血漿血液制品的綜合要求血液制品1997USFDAPointstoConsiderintheManufactureandTestingofMonoclonalAntibodyProductsForHumanUse

人用單克隆抗體制品制備和檢測(cè)中的考慮要點(diǎn)單克隆抗體制品的綜合要求單克隆抗體制品1985USFDAPointstoConsiderintheProductionandTestingofNewDrugandBiologicalsProducedbyRecombinantDNATechnology采用重組DNA技術(shù)的新藥和生物制品的生產(chǎn)和檢測(cè)的考慮要點(diǎn)重組DNA制品的綜合要求重組DNA蛋白制品1998GAO-HEHS-98-205BloodPlasmaSafety:Plasmaproductrisksarelowifgoodmanufacturingpracticesarefollowed

血漿安全：遵循良好生產(chǎn)規(guī)范可降低血制品風(fēng)險(xiǎn)血液制品的綜合要求血液制品國(guó)外病毒安全法規(guī)污染源控制及病毒檢測(cè)方法發(fā)布時(shí)間國(guó)家/區(qū)域文件名稱闡述重點(diǎn)適用范圍1997ICHQ5DDerivationandCharacterizationofCellSubstratesUsedforProductionofBiotechnological/BiologicalProducts

用于生物技術(shù)/生物制品的細(xì)胞基質(zhì)的來(lái)源的表征污染源控制，細(xì)胞基質(zhì)的控制單克隆抗體/重組DNA蛋白制品1993USFDAPointstoConsiderintheCharacterizationofCellLinesUsedtoProduceBiologicals用于生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞系鑒定的考慮要點(diǎn)污染源控制，細(xì)胞基質(zhì)的控制單克隆抗體/重組DNA蛋白制品2018EUEP9.3Cellsubstratesfortheproductionofvaccinesforhumanuse人用疫苗生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)污染源控制/病毒檢測(cè)疫苗2015USFAD.GuidanceforIndustry:Revisedrecommendationsforthepreventionofhumanimmunodeficiencyvirus(HIV)transmissionbybloodandbloodproducts

行業(yè)指南：關(guān)于預(yù)防血液和血制品傳播人免疫缺陷病毒的修訂建議污染源控制血液制品1987USFAD.RecommendationsforthemanagementofdonorsandunitsthatareinitiallyreactiveforhepatitisBsurfaceantigen(HBsAg)[letter]

關(guān)于對(duì)捐贈(zèng)者和單位對(duì)乙型肝炎表面抗原初始反應(yīng)的管理建議污染源控制血液制品/細(xì)胞治療產(chǎn)品2017USFAD.GuidanceforIndustry:nucleicacidtesting(NAT)forhumanimmunodeficiencyvirustype1(HIV-1)andhepatitisCvirus(HCV):testing,productdisposition,anddonordeferralandreentry

行業(yè)指南：人免疫缺陷病毒1型（HIV-1)和丙型肝炎病毒（HCV)的核酸檢測(cè)：檢測(cè)，產(chǎn)品配置，供體屏蔽與歸隊(duì)污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品/細(xì)胞治療產(chǎn)品2007USFAD.GuidanceforIndustry:adequateandappropriatedonorscreeningtestsforhepatitisB;hepatitisBsurfaceantigen(HBsAg)assaysusedtotestdonorsofwholebloodandbloodcomponenents,includingsourceplasmaandsourceleuko-cytes

行業(yè)指南：對(duì)乙肝病毒進(jìn)行充分及合適的獻(xiàn)血者篩查；用于獻(xiàn)血者全血及成分血，包括原料血漿和白細(xì)胞的乙肝表面抗原試驗(yàn)污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品/細(xì)胞治療產(chǎn)品2004USFAD.GuidanceforIndustry:useofnucleicacidtestsonpooledandindividualsamplesfromdonorsofwholebloodandbloodcomponents(includingsourceplasmaandsourceleukocytes)toadequatelyandappropriatelyreducetheriskoftransmissionofHIV-1andHCV

行業(yè)指南：應(yīng)用核酸檢測(cè)技術(shù)對(duì)獻(xiàn)血者全血和成分血（包括原料血漿和白細(xì)胞）進(jìn)行充分且適當(dāng)?shù)臋z測(cè)以降低HIV-1和HCV的傳播風(fēng)險(xiǎn)污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品/細(xì)胞治療產(chǎn)品1999USFAD.GuidanceforIndustryinthemanufactureandclinicalevaluationofinvitroteststodetectantibodiestothehumanimmunodeficiencyvirustype1andtype2

在生產(chǎn)和臨床評(píng)價(jià)中應(yīng)用體外試驗(yàn)檢測(cè)抗體中人免疫缺陷病毒1型和2型的行業(yè)指南污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品/細(xì)胞治療產(chǎn)品國(guó)外病毒安全法規(guī)污染源控制及病毒檢測(cè)方法發(fā)布時(shí)間國(guó)家/區(qū)域文件名稱闡述重點(diǎn)適用范圍1993USFAD.Revisedrecommendationsfortestingwholeblood,bloodcomponents,sourceplasma,andsourceleukocytesforantibodytohepatitisCvirusencodedantigen(anti-HCV)

對(duì)全血，成分血，原料血漿和白細(xì)胞進(jìn)行丙型肝炎病毒編碼抗原抗體檢測(cè)的修訂建議污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品/細(xì)胞治療產(chǎn)品1991USFAD.RecommendationsconcerningtestingforantibodytohepatitisBcoreantigen(Anti-HBc)

關(guān)于乙型肝炎核心抗原抗體檢測(cè)的建議污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品/細(xì)胞治療產(chǎn)品N/AUSFAD.CompletelistofdonorscreeningassaysforinfectiousagentsandHIVdiagnosticassays.致病原及HIV診斷方法的獻(xiàn)血者篩查方法完整清單特定病毒污染控制血液制品/細(xì)胞治療產(chǎn)品2012EUCHMP/BWP/360642/2010：Waringontransmissibleagentsinsummaryofproductcharacteristicsandpackageleafletsforplasma-derivedmedicinalproductsRevision1血漿來(lái)源制品產(chǎn)品特性和包裝說(shuō)明書(shū)中關(guān)于傳染因子的警示，第一版特定病毒污染控制血液制品2002EUCHMP/BWP/1818/02：Non-remuneratedandremunerateddonors:safetyandsupplyofplasma-derivedmedicinalproducts無(wú)償及有償獻(xiàn)血者：血漿來(lái)源制品的安全和供應(yīng)污染源控制（供體）血液制品2016USUSP1240(40-35NF):Virustestingofhumanplasmaforfurthermanufacturing用于后續(xù)生產(chǎn)的人血漿病毒檢測(cè)污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品2009USFDA.Guidanceforindustry:useofnucleicacidteststoreducetheriskoftransmissionofWestNileVirusfromdonorsofwholebloodandbloodcomponentsintendedfortransfusion行業(yè)指南：對(duì)用于輸血的全血和成分血進(jìn)行核酸檢測(cè)以降低西尼羅病毒的傳播風(fēng)險(xiǎn)污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品N/AUS21CFRPart610:GeneralBiologicalProductsStandards(610.40-610.48)生物制品通用標(biāo)準(zhǔn)污染源控制/病毒檢測(cè)血液制品N/AUSUSP1047GeneTherapyProducts基因治療產(chǎn)品污染源控制/病毒檢測(cè)基因治療產(chǎn)品2020USFDAChemistry,Manufacturing,andControl(CMC)InformationforHumanGeneTherapyInvestigationalNewDrugApplications(INDs)人用基因治療新藥臨床研究申請(qǐng)（INDs)的化學(xué)，生產(chǎn)和控制（CMC）信息污染源控制/病毒檢測(cè)基因治療產(chǎn)品SinoBiologicalInc.國(guó)外病毒安全法規(guī)生物制品生產(chǎn)用原輔料及其他發(fā)布時(shí)間國(guó)家/區(qū)域文件名稱闡述重點(diǎn)適用范圍2010USCharacterizationandQualificationofCellSubstratesandOtherBiologicalMaterialsUsedintheProductionofViralVaccinesforInfectiousDiseaseIndications

用于有傳染性疾病的病毒疫苗生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)和其他生物材料的鑒定和確認(rèn)生物制品的綜合要求生物制品生產(chǎn)用原輔料2016ESEP5.12Rawmaterialsofbiologicalorginfortheproductionofcellbasedandgenetherapymedicalproducts用于細(xì)胞和基因治療產(chǎn)品生產(chǎn)的生物來(lái)源的原材料生物制品的綜合要求生物制品生產(chǎn)用原輔料2016USUSP<1043>AncillarymaterialsforCell,GeneandTissue-engineeredproducts用于細(xì)胞，基因和組織工程產(chǎn)品的輔料生物制品的綜合要求生物制品生產(chǎn)用原輔料2003EUDIRECTIVE2003/94/EC:Layingdowntheprinciplesandguidelinesofgoodmanufacturingpracticeinrespectofmedicinalproductsforhumanuseandinvestigationalmedicinalproductsforhumanuse制定關(guān)于人用藥品及其臨床研究用藥品的良好生產(chǎn)規(guī)范的原則和指南人用藥品的綜合要求人用藥品SinoBiologicalInc.病毒安全相關(guān)法規(guī)總體要求01.對(duì)細(xì)胞系和其他原料（包括各種培養(yǎng)基）進(jìn)行選擇和檢測(cè)，確保其不含可能對(duì)人有感染或致病作用的病毒02.生產(chǎn)工藝中清除感染性病毒的能力進(jìn)行評(píng)估03.在生產(chǎn)的適當(dāng)步驟對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行病毒檢測(cè)，確保產(chǎn)品未受感染性病毒的污染國(guó)內(nèi)外在保證藥品病毒安全性的基本原則是一致的，可歸納為以下三條相互聯(lián)系的原則：SinoBiologicalInc.病毒污染篩查和檢測(cè)方法03生物制品病毒檢測(cè)要求概述病毒檢測(cè)方法歸類及介紹生物制品病毒檢測(cè)要求概述-庫(kù)細(xì)胞檢測(cè)項(xiàng)目MCBWCBEOPC內(nèi)外源病毒污染檢查細(xì)胞形態(tài)觀察及血吸附試驗(yàn)＋＋＋體外不同細(xì)胞接種培養(yǎng)法＋＋＋動(dòng)物和雞胚體內(nèi)接種法＋－＋逆轉(zhuǎn)錄病毒檢查＋－＋種屬特異性病毒檢查（＋）－－牛源性病毒檢查（＋）（＋）（＋）豬源性病毒檢查（＋）（＋）（＋）其他特定病毒檢查（＋）（＋）（＋）注：EOPC是指在或超過(guò)生產(chǎn)末期時(shí)收獲的細(xì)胞，盡可能取按生產(chǎn)規(guī)模制備的生產(chǎn)末期細(xì)胞?！?”為必檢項(xiàng)目；“-”為

非強(qiáng)制檢定項(xiàng)目；(+)表示要根據(jù)細(xì)胞特性、傳代歷史、培養(yǎng)過(guò)程等情況要求的檢定項(xiàng)目。《中國(guó)藥典》2020年版對(duì)不同級(jí)別細(xì)胞的病毒測(cè)試方法生物制品病毒檢測(cè)要求概述-庫(kù)細(xì)胞檢測(cè)MCBWCBEOPC逆轉(zhuǎn)錄病毒及其他內(nèi)源性病毒感染性實(shí)驗(yàn)+-+電鏡+-+逆轉(zhuǎn)錄酶活性檢測(cè)+1-+1其他特異性病毒如若適用2-如若適用2非內(nèi)源性或外源性病毒體外法檢測(cè)外源病毒+-3+體內(nèi)法檢測(cè)外源病毒+-3+抗體產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)+4--其他特異性病毒如若適用5--注：1.若感染性實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性，則此研究可不做2.若已知所用細(xì)胞系有特定病毒污染，需進(jìn)行特異性病毒檢測(cè)3.第一個(gè)WCB時(shí)，可直接在WCB上進(jìn)行單項(xiàng)體外和體內(nèi)測(cè)試，或在達(dá)到體外限傳代次的細(xì)胞上測(cè)試4.一般適用于嚙齒動(dòng)物細(xì)胞系，如倉(cāng)鼠、小鼠、大鼠抗體產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)5.對(duì)來(lái)源于人類、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物或其他動(dòng)物的細(xì)胞系進(jìn)行特異性檢測(cè)ICHQ5A中對(duì)細(xì)胞庫(kù)檢定要求生物制品病毒檢測(cè)要求概述-庫(kù)細(xì)胞差異點(diǎn)中國(guó)ICH細(xì)胞系或未加工品的病毒風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)分類無(wú)要求根據(jù)細(xì)胞或未加工品檢測(cè)結(jié)果的不同，將細(xì)胞系或未加工品的病毒風(fēng)險(xiǎn)分為了A、B、C、D、E五個(gè)風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)，因此在細(xì)胞系的檢測(cè)方面，指出在使用某些已知被特異性病毒感染的細(xì)胞系時(shí)，應(yīng)對(duì)此內(nèi)源性病毒進(jìn)行檢測(cè)細(xì)胞形態(tài)觀察和血吸附試驗(yàn)要求無(wú)要求WCB及EOPC的檢測(cè)通常要求每個(gè)批次的WCB均需要檢測(cè)在建立第一個(gè)工作代細(xì)胞庫(kù)后，由對(duì)WCB產(chǎn)生的達(dá)到體外限傳代次的細(xì)胞進(jìn)行體外檢測(cè)，以后的WCB，可直接對(duì)WCB進(jìn)行單項(xiàng)體外和體內(nèi)檢測(cè)，或?qū)_(dá)到體外限傳代次的細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)牛源性和豬源性胰蛋白酶的檢測(cè)若生產(chǎn)者在建庫(kù)之前，細(xì)胞基質(zhì)在建立或傳代歷史中使用了牛血清/豬源性胰蛋白酶，則所建立的MCB或WCB和（或）EOPC至少應(yīng)按要求檢測(cè)一次牛源性病毒或與來(lái)源動(dòng)物相關(guān)的外源病毒，包括豬細(xì)小病毒或牛細(xì)小病毒。如在后續(xù)生產(chǎn)中不再使用，且MCB或EOPC檢測(cè)顯示無(wú)牛源性/豬源性病毒污染，則后續(xù)工藝中可不再重復(fù)進(jìn)行檢測(cè)。如使用重組胰蛋白酶，應(yīng)根據(jù)胰蛋白酶生產(chǎn)工藝可能引入的外源性病毒評(píng)估需要檢測(cè)的病毒種類及方法并沒(méi)有明確指出上述要求，但若實(shí)際建立或傳代過(guò)程匯總使用了生物源性的材料，則需通過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的方式判斷對(duì)潛在病毒的檢測(cè)國(guó)內(nèi)外法規(guī)對(duì)細(xì)胞基質(zhì)的要求區(qū)別生物制品病毒檢測(cè)要求概述-收獲液檢測(cè)細(xì)胞收獲液純化后產(chǎn)物（原液）最終制品（制劑）外源病毒+1--種屬特異性病毒+2--逆轉(zhuǎn)錄病毒+3--種屬+--美國(guó)FDA生物制品批次安全性檢定病毒相關(guān)要求注：1.對(duì)于非腹水來(lái)源的生物制品，基于三種指示細(xì)胞系的體外檢測(cè)實(shí)驗(yàn)需常規(guī)檢測(cè)。動(dòng)物體內(nèi)檢測(cè)法一般只進(jìn)行一次，但當(dāng)生產(chǎn)工藝發(fā)生改變時(shí)需重測(cè)。2.僅對(duì)腹水來(lái)源生物制品要求進(jìn)行大鼠/倉(cāng)鼠/小鼠抗體產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)。3.在鼠系雜交瘤來(lái)源制品的發(fā)酵液中用電鏡方法定量?jī)?nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒樣顆粒。對(duì)于非鼠系雜交瘤，若MCB或者EOPC檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄病毒呈陽(yáng)性，則需結(jié)合電鏡和其他共培養(yǎng)的方法來(lái)確證發(fā)酵收獲液中逆轉(zhuǎn)錄病毒風(fēng)險(xiǎn)。依據(jù)美國(guó)FDA1997《單克隆抗體考慮要點(diǎn)》。生物制品病毒檢測(cè)要求概述-收獲液檢測(cè)項(xiàng)目細(xì)胞類型CHONS0和Sp2/0其他種類細(xì)胞體外（Invitro）需要，每批*需要，每批*需要，每批*檢測(cè)感染性逆轉(zhuǎn)錄病毒不需要需要，特定生產(chǎn)規(guī)?？蓛H一次需要，特定生產(chǎn)規(guī)?？蓛H一次體內(nèi)（Invivo）不需要不需要需要，特定生產(chǎn)規(guī)模可僅一次EMA細(xì)胞發(fā)酵收獲液病毒安全性檢定要求注：*對(duì)于特定開(kāi)發(fā)階段的批次，可只對(duì)前3批（若所制備批次少于3批，檢測(cè)批次或更少）細(xì)胞發(fā)酵收獲液進(jìn)行電鏡檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄病毒（樣）顆粒。生物制品病毒檢測(cè)要求概述-收獲液中國(guó)ICH歐盟（I期臨床前）樣本階段

確定了細(xì)胞培養(yǎng)的基本生產(chǎn)條件和工藝后，應(yīng)將多批收獲物（特指細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束時(shí)的混懸液），在未經(jīng)任何處理前，對(duì)代表性樣本進(jìn)行適宜的病毒污染檢測(cè)

集中回收的一批或多批細(xì)胞和培養(yǎng)基。當(dāng)細(xì)胞不易獲?。ㄈ缡褂弥锌绽w維或類似裝置回收）時(shí)，未純化原液是發(fā)酵罐中收獲的液體

同ICH樣本要求

在模擬生產(chǎn)條件下，從至少三批培養(yǎng)細(xì)胞及其上清液制備的混懸液中抽取的樣本；

生產(chǎn)過(guò)程中不同階段或者不同時(shí)間點(diǎn)采取的樣本；

抽取的樣本量應(yīng)能夠反映培養(yǎng)物整體的情況

在進(jìn)行上市注冊(cè)申請(qǐng)時(shí)，至少應(yīng)上報(bào)三批試生產(chǎn)或規(guī)?；a(chǎn)的未加工品的研究資料每一批臨床批次均需按照ICHQ5A的要求對(duì)未純化的原液進(jìn)行檢測(cè)檢測(cè)項(xiàng)目要求

無(wú)針對(duì)性的指導(dǎo)原則

對(duì)于未加工品病毒測(cè)試的范圍、程度和頻度應(yīng)結(jié)合以下幾點(diǎn)綜合考慮后作出決定：用于生產(chǎn)產(chǎn)品的細(xì)胞系性質(zhì)、細(xì)胞系檢定過(guò)程中病毒檢測(cè)的結(jié)果和廣泛性、培養(yǎng)方法、原料來(lái)源和病毒清除研究結(jié)果等；

對(duì)未純化的原液，一般使用一種或幾種細(xì)胞系進(jìn)行體外篩查試驗(yàn)。如適用，可使用PCR試驗(yàn)或其他適當(dāng)?shù)姆椒?/p>

如可能，包含有細(xì)胞的收獲液應(yīng)進(jìn)行體外和PCR的方法檢測(cè)，必要時(shí)需進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄病毒的評(píng)估；

對(duì)于CHO而言，滿足上述要求即可，不需要進(jìn)行額外的測(cè)試；

對(duì)基于NS0或Sp2/0細(xì)胞系生產(chǎn)的生物制品，需要在細(xì)胞收獲后檢測(cè)感染性逆轉(zhuǎn)錄病毒；

對(duì)于其他細(xì)胞系生產(chǎn)的生物制品，需檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄病毒及體內(nèi)測(cè)試，通常只需要檢測(cè)一批，但如果發(fā)生重大工藝變更時(shí)可能需要重新檢測(cè)細(xì)胞發(fā)酵收獲液的病毒檢測(cè)要求對(duì)比病毒檢測(cè)方法歸類及介紹病毒檢測(cè)方法歸類檢測(cè)方法類別檢測(cè)方法主項(xiàng)檢測(cè)方法子項(xiàng)檢測(cè)對(duì)象直接檢測(cè)法形態(tài)觀察法電鏡法（TEM）病毒顆粒病毒計(jì)數(shù)儀法病毒顆粒生物學(xué)方法雞胚接種法5-6日齡雞胚存活率%感染性病毒顆粒9-10日齡雞胚尿囊液紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)病毒抗原動(dòng)物體內(nèi)接種法乳鼠存活率%感染性病毒顆粒成鼠存活率%感染性病毒顆粒豚鼠感染性病毒顆粒家兔感染性病毒顆粒細(xì)胞培養(yǎng)直接觀察細(xì)胞培養(yǎng)直接觀察感染性病毒顆粒不同細(xì)胞傳代培養(yǎng)檢查猴源Vero細(xì)胞感染性病毒顆粒人源MRC-5細(xì)胞感染性病毒顆粒同種屬同組織類型細(xì)胞CHO-K1感染性病毒顆粒BT細(xì)胞感染性病毒顆粒MDBK(NBL-1)細(xì)胞感染性病毒顆粒NB324K細(xì)胞感染性病毒顆粒不同細(xì)胞傳代培養(yǎng)檢查紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)猴源Vero細(xì)胞病毒抗原人源MRC-5細(xì)胞病毒抗原同種屬同組織類型細(xì)胞CHO-K1病原抗原BT細(xì)胞病毒抗原MDBK(NBL-1)細(xì)胞病毒抗原病毒檢測(cè)方法歸類及介紹病毒檢測(cè)方法歸類檢測(cè)方法類別檢測(cè)方法主項(xiàng)檢測(cè)方法子項(xiàng)檢測(cè)對(duì)象免疫學(xué)方法不同細(xì)胞傳代培養(yǎng)檢查紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)猴源Vero細(xì)胞病毒抗原人源MRC-5細(xì)胞病毒抗原同種屬同組織類型細(xì)胞CHO-K1病毒抗原小鼠特異性抗體產(chǎn)生試驗(yàn)乳鼠病毒抗原3-4周齡小鼠病毒抗原6-8周齡小鼠病毒抗原其他病毒抗原酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA)雙抗原（體）夾心法病毒抗原間接法病毒抗原免疫熒光法（IFA）-病毒抗原酶標(biāo)斑點(diǎn)免疫法（E-DBA)-感染性病毒顆粒單向免疫擴(kuò)散法（SRID)-感染性病毒顆粒病毒檢測(cè)方法歸類及介紹病毒檢測(cè)方法歸類檢測(cè)方法類別檢測(cè)方法主項(xiàng)檢測(cè)方法子項(xiàng)檢測(cè)對(duì)象分子生物學(xué)方法核酸分子雜交技術(shù)-病毒核酸聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR)法轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴(kuò)增（TMA）法病毒核酸傳統(tǒng)PCR法病毒核酸實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR)法病毒核酸逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)法病毒核酸熒光實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄PCR(qRT-PCR)法病毒核酸產(chǎn)物增強(qiáng)逆轉(zhuǎn)錄酶檢測(cè)（PERT)病毒逆轉(zhuǎn)錄酶巢式PCR（nPCR)法病毒核酸其他方法流式細(xì)胞技術(shù)（FCM)法-感染性病毒顆?；蛐酒夹g(shù)法-病毒核酸蛋白質(zhì)芯片技術(shù)法-病毒蛋白高效液相色譜法（HPLC)-病毒抗原其他--SinoBiologicalInc.病毒污染風(fēng)險(xiǎn)控制策略04病毒污染風(fēng)險(xiǎn)控制總體策略單克隆抗體制品病毒安全保障血液制品病毒安全保障病毒污染風(fēng)險(xiǎn)控制總體策略檢防除建立健全的病毒檢測(cè)能力建立嚴(yán)密的預(yù)防病毒污染體系

建立健全的滅活/去除病毒能力病毒污染風(fēng)險(xiǎn)控制總體策略藥品生命周期不同階段病毒安全保障策略周期/安全策略策略病毒污染等級(jí)病毒危害等級(jí)藥物發(fā)現(xiàn)階段防＋檢(病毒安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及風(fēng)險(xiǎn)保障措施制定)高低臨床前階段防＋除＋檢（病毒檢測(cè)方法的建立及驗(yàn)證、原材料病毒篩選檢測(cè)、病毒滅活/去除工藝的建立及初步驗(yàn)證、中間品/產(chǎn)品檢測(cè))中低臨床至上市階段防＋除＋檢(生產(chǎn)工藝病毒去除/滅活工藝驗(yàn)證深入研究及綜合評(píng)價(jià))低高上市后階段防＋除(病毒清除工藝及并病毒篩查檢驗(yàn)方法的有效性研究及優(yōu)化提升低高單克隆抗體制品病毒安全保障細(xì)胞構(gòu)建過(guò)程中建議盡量使用成分明確的非生物來(lái)源材料，避免從源頭引入病毒規(guī)范操作流程，并加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的培訓(xùn)，避免人員帶來(lái)的外源病毒污染風(fēng)險(xiǎn)實(shí)驗(yàn)環(huán)境要保持整潔，儀器要及時(shí)清理消毒，做好校準(zhǔn)和驗(yàn)證，有條件的實(shí)驗(yàn)室盡量使用氣相液氮罐保存細(xì)胞細(xì)胞建庫(kù)通常采用主細(xì)胞庫(kù)和工作細(xì)胞庫(kù)兩級(jí)系統(tǒng)，細(xì)胞庫(kù)的病毒檢測(cè)應(yīng)在I期臨床前完成01020304細(xì)胞庫(kù)病毒安全保障單克隆抗體制品病毒安全保障生產(chǎn)用原輔料盡量避免使用動(dòng)物來(lái)源的原輔料原輔材料在生產(chǎn)入庫(kù)時(shí)進(jìn)行相關(guān)病毒檢測(cè)對(duì)生產(chǎn)車間采取防鼠等措施生產(chǎn)工藝