mir145抑制人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)制分析

1/1mir145抑制人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)制分析華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文1MiR-145抑制人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)制研究華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院綜合醫(yī)療科碩士研究生：

范良指導(dǎo)老師：

殷鐵軍教授中文摘要[1]目的研究microRNA-145（miR-145）對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移的影響；探尋miR-145可能通過(guò)調(diào)控ADAM17進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤血管生成的作用機(jī)制。

方法通過(guò)轉(zhuǎn)染miR-145模擬物和無(wú)意義的陰性對(duì)照小RNA序列進(jìn)入人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞，使用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8(CellCountingKit-8，CCK-8)檢測(cè)轉(zhuǎn)染miR-145模擬物的實(shí)驗(yàn)組和轉(zhuǎn)染無(wú)意義的陰性對(duì)照小RNA序列的對(duì)照組的HUVECs的增殖能力，Transwell小室檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組HUVECs的遷移能力。

應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)預(yù)測(cè)的miR-145候選靶基因ADAM17的mRNA表達(dá)水平，并通過(guò)免疫印跡(Westernblot)從蛋白水平檢測(cè)ADAM17的表達(dá)。

結(jié)果轉(zhuǎn)染48h后，轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照小RNA序列組的吸光度（A值）（0.440.01）明顯高于轉(zhuǎn)染miR-145模擬物組的A值（0.340.01）（Plt;0.01）；轉(zhuǎn)染72h后，轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照小RNA序列組A值（0.860.05）也明顯高于轉(zhuǎn)染miR-145模擬物組的A值（0.600.09）（Plt;0.01）。

轉(zhuǎn)染無(wú)意義的陰性對(duì)照小RNA序列組的HUVECs遷移穿過(guò)transwell小室膜的細(xì)胞數(shù)（20530個(gè)）明顯多于轉(zhuǎn)染miR-145模擬物組穿過(guò)小室膜的細(xì)胞數(shù)（1356個(gè)）（P＜0.05）。

轉(zhuǎn)染miR-145模擬物組較轉(zhuǎn)染無(wú)意義的陰性對(duì)照小RNA序列組的ADAM17基因的蛋白水平和mRNA均呈現(xiàn)下調(diào)，Westernblot灰度值為0.650.21，（P＜0.05）；RT-PCR的相對(duì)值0.340.15，（P＜0.01）。

結(jié)論miR-145能夠顯著抑制人血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖能力，且miR-145可通過(guò)調(diào)節(jié)ADAM17基因的表達(dá)從而實(shí)現(xiàn)調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移和增殖功能。

關(guān)鍵詞ADAM17；microRNA-145；遷移；增殖；腫瘤血管生成華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文2MechanismsofmiR-145regulatingproliferationandmigrationofHUVECsPostgraduate：

FanLiangSupervisor：

Prof.TiejunYinDepartmentofComprehensiveMedicine，TongjiHospital，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnologyAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofmicroRNA-145(miR-145)ontheproliferationandmigrationofHUVECs．MethodsMiR-145mimicandnegativecontrolfragmentweretransfectedintoHUVE