2025屆重慶江津長(zhǎng)壽綦江等七校聯(lián)盟高三下學(xué)期聯(lián)考生物試題含解析

2025屆重慶江津長(zhǎng)壽綦江等七校聯(lián)盟高三下學(xué)期聯(lián)考生物試題注意事項(xiàng):1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)碼填寫(xiě)清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時(shí)請(qǐng)按要求用筆。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書(shū)寫(xiě)的答案無(wú)效；在草稿紙、試卷上答題無(wú)效。4．作圖可先使用鉛筆畫(huà)出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列相關(guān)實(shí)驗(yàn)中涉及“分離”的敘述正確的是A．植物細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)中，滴加蔗糖溶液的目的是使細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞壁分離B．綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，色素分離是因其在層析液中溶解度不同C．植物根尖細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，可以觀察到姐妹染色單體彼此分離的過(guò)程D．T2噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中，離心的目的是使噬菌體的DNA與蛋白質(zhì)分離2．2019年底武漢出現(xiàn)由新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）感染引起的肺炎疫情，該病患者肺功能受損引起血氧飽和度下降，主要表現(xiàn)為發(fā)熱、咳嗽、乏力、渾身酸痛等癥狀。SARS-CoV-2主要由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的RNA組成。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．患者血氧飽和度下降導(dǎo)致呼吸急促，以補(bǔ)償機(jī)體缺氧B．患者治愈后，機(jī)體產(chǎn)生并在一段時(shí)間內(nèi)保持有對(duì)SARS-CoV-2免疫的能力C．體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精能使SARS-CoV-2的蛋白質(zhì)外殼變性，從而失去感染力D．患者發(fā)熱時(shí)機(jī)體產(chǎn)熱增多、散熱減少引起內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)失衡3．將同一紫色洋蔥鱗片葉外表皮制成兩組相同的臨時(shí)裝片，分別浸潤(rùn)在甲、乙兩種溶液中，測(cè)得液泡直徑的變化情況如圖所示。下列相關(guān)敘述，正確的是A．乙種溶液的濃度大于甲種溶液的濃度B．2-6min乙溶液中細(xì)胞的吸水能力逐漸增大C．甲溶液中的溶質(zhì)分子在2min后開(kāi)始進(jìn)入細(xì)胞D．甲溶液中細(xì)胞體積與液泡體積的變化量相等4．下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作的分析，正確的是（）A．撕取洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞，用臺(tái)盼藍(lán)和蔗糖溶液處理后無(wú)法觀察到質(zhì)壁分離現(xiàn)象B．觀察誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目變化時(shí)，低倍鏡找到染色體數(shù)目改變的細(xì)胞后換高倍鏡觀察C．將淀粉溶液和淀粉酶混勻后，滴加HCl或NaOH溶液用于研究pH對(duì)酶活性的影響D．檢測(cè)酵母菌數(shù)量時(shí)，靜置培養(yǎng)液再取樣，計(jì)數(shù)時(shí)不宜統(tǒng)計(jì)所有壓在方格界線上的菌體5．下列利用菜花進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A．粗提取DNA時(shí)觀察到絲狀物偏少，可能是向2mol·L-1NaCl溶液中加入蒸餾水過(guò)多B．在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，過(guò)濾后棄去濾液C．用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至1．14mol·L-1，用單層濾紙過(guò)濾獲取析出物D．將白色絲狀物溶解在NaCl溶液中，加入二苯胺試劑后振蕩，觀察顏色變化6．據(jù)報(bào)道，科研人員選取成人皮膚細(xì)胞，將其培育成神經(jīng)干細(xì)胞后，放入特制的環(huán)境中，誘導(dǎo)組織進(jìn)一步生長(zhǎng)發(fā)育，最終形成一個(gè)豌豆大小的“微型人腦”。這個(gè)組織已經(jīng)達(dá)到9周胎兒大腦的發(fā)育水平，但尚不能獨(dú)立思考。下列描述正確的是A．由成人皮膚細(xì)胞培育出微型人腦的過(guò)程中，處于分裂期的細(xì)胞不進(jìn)行DNA復(fù)制和蛋白質(zhì)合成B．若培育過(guò)程中因感染病毒出現(xiàn)癌變，則癌變細(xì)胞的基因組中整合有病毒癌基因以及與致癌有關(guān)的核酸序列C．若培育過(guò)程中出現(xiàn)細(xì)胞凋亡，則酶的活性都下降D．由成人皮膚細(xì)胞培育成微型人腦，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）科學(xué)家從某細(xì)菌中提取抗鹽基因，轉(zhuǎn)入煙草并培育成轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草。下圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過(guò)程，含目的基因的DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：（1）在該過(guò)程中，研究人員首先獲取了抗鹽基因（目的基因），并采用____________技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，該技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是_________________________，以便根據(jù)這一序列合成引物，同時(shí)該技術(shù)必須用_____________酶；然后構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是_________________________。（2）用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaI酶切割，原因是________________________。（3）圖中⑤、⑥依次表示植物組織培養(yǎng)過(guò)程中抗鹽煙草細(xì)胞的____________、____________過(guò)程。（4）為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功，既要進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要在個(gè)體水平上鑒定，后者具體過(guò)程是_____________________________________________________________。8．（10分）利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中，然后通過(guò)核移植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。下圖為基因編輯豬培育流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）對(duì)1號(hào)豬使用_________處理，使其超數(shù)排卵，收集并選取處在__________時(shí)期的卵母細(xì)胞用于核移植。（2）采集2號(hào)豬的組織塊，用__________處理獲得分散的成纖維細(xì)胞，放置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中CO2的作用是________。（3）為獲得更多基因編輯豬，可在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行__________。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來(lái)自于_________號(hào)豬。（4）為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號(hào)豬并正常表達(dá)，可采用的方法有__________（填序號(hào)）。①DNA測(cè)序②染色體倍性分析③體細(xì)胞結(jié)構(gòu)分析④抗原—抗體雜交9．（10分）回答有關(guān)微生物的問(wèn)題．Ⅰ、凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶．培育產(chǎn)高酶活力凝乳酶微生物菌種是目前最有前途的發(fā)展方向．圖1為產(chǎn)高酶活力凝乳酶的枯草芽孢桿菌培育過(guò)程．（1）枯草芽孢桿菌的芽孢是__________．A．休眠體B．營(yíng)養(yǎng)繁殖體C．孢子D．營(yíng)養(yǎng)體（2）圖1所示的b過(guò)程的目的是為_(kāi)_________，接種用的平板培養(yǎng)基在制備時(shí)需注意的是__________．A．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板B．倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行高壓滅菌處理C．等到平板培養(yǎng)基冷卻凝固后才可以蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋D．待平板冷卻凝固約5﹣10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置Ⅱ、在35℃、40分鐘內(nèi)能凝固1mL10%奶粉所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）．圖2表示圖1中提取得到的各種凝乳酶活力檢測(cè)結(jié)果．（3）據(jù)圖2所示，酶催化能力最強(qiáng)的是__________組，而各組酶催化能力存在差異的原因是__________．（4）A2、A5組酶活力與A0組芽孢桿菌相同，兩位同學(xué)對(duì)此做出了推測(cè)：①同學(xué)甲：A2、A5組芽孢桿菌可能未發(fā)生基因突變，用__________技術(shù)檢測(cè)即可證實(shí)．②同學(xué)乙：A2、A5組與A0組酶活力雖然相同，但也可能存在不同的基因突變，理論上的解釋是__________．10．（10分）基因定點(diǎn)整合可替換特定基因，該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的，將正常PKU基因定點(diǎn)整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上，替換突變基因，可用來(lái)研究該病的基因治療過(guò)程。定點(diǎn)整合的過(guò)程是：從染色體DNA上突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2，根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2，再將兩者分別與基因、連接，中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因，構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換，導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換，如圖所示。（1）構(gòu)建重組載體時(shí)，常用的工具酶有________。該實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞以培育出轉(zhuǎn)基因小鼠，除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外，還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞_________。（2）為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞，可將小鼠囊胚中的_________取出，并用_________處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長(zhǎng)，這種現(xiàn)象稱為_(kāi)__________。（3）用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細(xì)胞時(shí)，會(huì)出現(xiàn)PKU基因錯(cuò)誤整合。錯(cuò)誤整合時(shí)，載體的兩個(gè)中至少會(huì)有一個(gè)與一起整合到染色體DNA上。已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性，、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，在雙重選擇下存活下來(lái)的是__________的胚胎干細(xì)胞，理由是_________。（4）將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠，從個(gè)體生物學(xué)水平檢測(cè)，若小鼠__________，說(shuō)明PKU基因成功表達(dá)。11．（15分）某植物的花色受兩對(duì)等位基因M和m、T和t控制。這兩對(duì)基因?qū)ㄉ目刂茩C(jī)理如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）現(xiàn)有純合的紅花、粉花與白花植株若干，為驗(yàn)證兩對(duì)基因的遺傳是否符合自由組合定律，有同學(xué)進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：①將紅花植物與若干_____________植株雜交：②將得到的F1單獨(dú)隔離種植，分別進(jìn)行___________，統(tǒng)計(jì)___________________。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：若__________________________說(shuō)明這兩對(duì)基因的遺傳符合自由組合定律。（2）該種植物的花上有的出現(xiàn)紫斑，有的無(wú)花斑。將雜合紅花無(wú)斑植株作為親本自交，子代中出現(xiàn)紅花紫斑、紅花無(wú)斑、粉花紫斑、粉花無(wú)斑、白花紫斑、白花無(wú)斑6種表現(xiàn)型，對(duì)應(yīng)的比例為27：117：9：39：12：52。分析以上數(shù)據(jù)可知：花斑的遺傳受______對(duì)等位基因控制，親本雜合紅花無(wú)斑植株產(chǎn)生的配子種類是_______種，子代粉花無(wú)斑植株的基因型共有______種。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】

A、觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)中，蔗糖溶液使原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離，A錯(cuò)誤；B、綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，因四種色素在層析液中溶解度不同，可以用紙層析法分離色素，B正確；C、植物根尖細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)解離使細(xì)胞死亡固定在某個(gè)時(shí)期，可以找到不同分裂時(shí)期的圖像，不能觀察到姐妹染色單體彼此分離的過(guò)程，C錯(cuò)誤；D、在T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，離心的目的是把噬菌體的蛋白質(zhì)外殼和被侵染的細(xì)菌分離開(kāi)來(lái)，D錯(cuò)誤。故選B。2、D【解析】

當(dāng)體溫升高時(shí)，機(jī)體產(chǎn)熱大于散熱；當(dāng)持續(xù)高溫時(shí)，機(jī)體產(chǎn)熱等于散熱；當(dāng)體溫下降時(shí)，機(jī)體產(chǎn)熱小于散熱?！驹斀狻緼、患者血氧飽和度下降,機(jī)體為補(bǔ)償缺氧就加快呼吸及血循環(huán)，可使人出現(xiàn)呼吸急促、心率加快的現(xiàn)象，A正確；B、治愈后的機(jī)體在一段時(shí)間內(nèi)含有可特異性識(shí)別SARS-CoV-2的抗體和記憶細(xì)胞，保持對(duì)SARS-CoV-2免疫的能力，B正確；C、體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精能使SARS-CoV-2的蛋白質(zhì)外殼變性，破壞病毒的結(jié)構(gòu)，從而失去感染力，C正確；D、患者發(fā)熱時(shí)，機(jī)體產(chǎn)熱、散熱均增加，D錯(cuò)誤。故選D?！军c(diǎn)睛】本題通過(guò)對(duì)SARS-CoV-2的分析，主要考查機(jī)體免疫調(diào)節(jié)和體溫調(diào)節(jié)，題干較新穎，考查內(nèi)容較基礎(chǔ)。3、B【解析】

分析題圖可知，在2分鐘之前，處于甲溶液中的洋蔥表皮細(xì)胞液泡的直徑減小的速度更快，因此甲溶液濃度大，A錯(cuò)誤；2-6min乙溶液中細(xì)胞的直徑不斷減小，則其吸水能力逐漸增大，B正確；甲溶液中2min后細(xì)胞已經(jīng)開(kāi)始吸收水分了，說(shuō)明在這之前溶質(zhì)分子已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)入細(xì)胞了，C錯(cuò)誤；由于細(xì)胞壁的伸縮性很小，所以甲溶液中細(xì)胞體積與液泡體積的變化量是不相等的，D錯(cuò)誤。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握植物細(xì)胞質(zhì)壁分離的原理，根據(jù)單位時(shí)間液泡直徑下降的速率判斷兩種溶液的濃度大小。4、B【解析】

1、當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí)，細(xì)胞液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到外界溶液中，由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的伸縮性大，當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí)，液泡逐漸縮小，原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開(kāi)來(lái)，即發(fā)生了質(zhì)壁分離；2、低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實(shí)驗(yàn)：低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實(shí)驗(yàn)的原理：低溫能抑制紡錘體的形成，使子染色體不能移向細(xì)胞兩極，從而引起細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍；該實(shí)驗(yàn)的步驟為選材→固定→解離→漂洗→染色→制片；該實(shí)驗(yàn)采用的試劑有卡諾氏液（固定）、改良苯酚品紅染液（染色），體積分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸溶液和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液（解離）。3、探究酵母菌種群數(shù)量的變化實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)流程為：（1）酵母菌培養(yǎng)（液體培養(yǎng)基，無(wú)菌條件）→（2）振蕩培養(yǎng)基（酵母菌均勻分布于培養(yǎng)基中），滴加培養(yǎng)液時(shí)，應(yīng)先加蓋玻片，再在蓋玻片的邊緣滴加培養(yǎng)液→（3）觀察并計(jì)數(shù)→重復(fù)（2）、（3）步驟（每天計(jì)數(shù)酵母菌數(shù)量的時(shí)間要固定）→繪圖分析?！驹斀狻緼、臺(tái)盼藍(lán)可以將死細(xì)胞染色，不能將活細(xì)胞染色，而細(xì)胞壁具有全透性；所以撕取洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞，用臺(tái)盼藍(lán)和蔗糖溶液處理后，細(xì)胞如果是獲得，并且蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞液濃度，可以觀察到藍(lán)色范圍變大，說(shuō)明細(xì)胞發(fā)生了質(zhì)壁分離，A錯(cuò)誤；B、觀察誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目變化時(shí)，低倍鏡找到染色體數(shù)目改變的細(xì)胞后換高倍鏡觀察，B正確；C、研究pH對(duì)酶活性的影響，需要先對(duì)酶和底物分別調(diào)節(jié)pH后再混合，C錯(cuò)誤；D、檢測(cè)酵母菌數(shù)量時(shí)，需要將培養(yǎng)液振蕩搖勻再取樣，計(jì)數(shù)時(shí)壓在線上的菌種，按照記上不記下，記左不計(jì)右的原則，D錯(cuò)誤。故選B?！军c(diǎn)睛】本題綜合考查教材實(shí)驗(yàn)，需要考生識(shí)記實(shí)驗(yàn)的原理、材料、操作步驟、結(jié)果及結(jié)論。5、A【解析】

DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理：①DNA在NaCl溶液中的溶解度，是隨著NaCl的濃度變化而改變的，當(dāng)NaCl的濃度為1.14mol·L-1時(shí)，DNA的溶解度最低，利用這一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液，利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA；③DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同：洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響，蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，在81℃條件下會(huì)變性，而DNA對(duì)溫度的耐受性較高；⑤DNA的鑒定：DNA遇二苯胺（沸水?。?huì)染成藍(lán)色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斀狻緼、2mol·L-1NaCl溶液溶解DNA，緩緩加入蒸餾水使得NaCl溶液濃度降低，則DNA不斷析出，DNA絲狀物不再增加時(shí)，此時(shí)NaCl溶液的濃度為1.14mol·L-1；如繼續(xù)加蒸餾水，DNA的溶解度增加，DNA絲狀物量減少，故粗提取DNA時(shí)觀察到絲狀物偏少，可能是蒸餾水加多了，A正確；B、在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，DNA溶解在濾液中，過(guò)濾后不能丟棄濾液，B錯(cuò)誤；C、用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至1.14mol·L-1的濃度，此時(shí)DNA溶解度最低，DNA大量析出，過(guò)濾時(shí)應(yīng)該用紗布，不能用濾紙，C錯(cuò)誤；D、將白色絲狀物溶解在NaCl溶液中，加人二苯胺試劑，需要水浴加熱觀察染色變化，D錯(cuò)誤。故選A。6、B【解析】

1、細(xì)胞全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。細(xì)胞全能性以細(xì)胞形成個(gè)體為標(biāo)志。

2、細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞編程序死亡的過(guò)程。細(xì)胞凋亡是生物體正常的生命歷程，對(duì)生物體是有利的，而且細(xì)胞凋亡貫穿于整個(gè)生命歷程。

3、細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)：基因的選擇性表達(dá)。

4、癌細(xì)胞的主要特征：

（1）無(wú)限增殖；

（2）形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變；

（3）細(xì)胞表面發(fā)生變化，細(xì)胞膜上的糖蛋白等物質(zhì)減少，易轉(zhuǎn)移。【詳解】A、處于分裂期的細(xì)胞不進(jìn)行DNA復(fù)制，但是有少量蛋白質(zhì)合成，A錯(cuò)誤；B、若培育過(guò)程中因感染病毒出現(xiàn)癌變，則癌變細(xì)胞的基因組中整合有病毒癌基因以及與致癌有關(guān)的核酸序列，B正確；C、細(xì)胞的凋亡與基因的選擇性表達(dá)有關(guān)，此過(guò)程中與凋亡相關(guān)的基因的表達(dá)能力上升，與凋亡相關(guān)的酶的活性增強(qiáng)，C錯(cuò)誤；D、由成人皮膚細(xì)胞培育成微型人腦，但沒(méi)有形成完整個(gè)體，因此不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，D錯(cuò)誤。二、綜合題：本大題共4小題7、PCR要有一段已知目的基因的核苷酸序列Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因脫分化再分化將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽的土壤中，觀察該煙草植株的生長(zhǎng)狀態(tài)【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）基因工程的第一步是獲取目的基因，該基因工程中目的基因是抗鹽基因，然后采用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增目的基因的前提是要獲得一段已知目的基因核苷酸序列以便合成引物，同時(shí)還必須用Taq（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）酶；獲得目的基因后，進(jìn)行基因表達(dá)載體的構(gòu)建，以保證目的基因在受體細(xì)胞中能穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。（2）圖中的質(zhì)粒和目的基因中SmaⅠ的酶切位點(diǎn)包含在質(zhì)粒的抗性基因和目的基因中，因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不能使用SmaI酶切割，若選擇該酶會(huì)導(dǎo)致質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因被切割。（3）圖中⑤為脫分化形成愈傷組織的過(guò)程，⑥為再分化形成耐鹽幼苗的過(guò)程，這兩個(gè)過(guò)程是植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的關(guān)鍵步驟。（4）為確定轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草是否培育成功，既要進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要在個(gè)體水平上鑒定，個(gè)體水平上鑒定的具體做法是將培育的煙草幼苗栽培于含有一定鹽濃度的土壤中，觀察該煙草植株的生長(zhǎng)狀態(tài)，若生長(zhǎng)良好則意味著培育成功?！军c(diǎn)睛】熟知基因工程的原理和操作要點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵！PCR技術(shù)的原理和應(yīng)用也是本題的考查點(diǎn)之一，辨圖能力是解答本題的前提。8、促性腺激素減數(shù)第二次分裂中期胰蛋白酶（膠原蛋白酶）維持培養(yǎng)液的pH分割2①④【解析】

據(jù)圖分析，圖示基因編輯豬培育過(guò)程涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將病毒外殼蛋白基因（目的基因）導(dǎo)入2號(hào)豬的體細(xì)胞核中，然后將2號(hào)豬的體細(xì)胞核移植到1號(hào)豬的去核卵母細(xì)胞中，再將重組細(xì)胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號(hào)豬的子宮中去，最后分娩產(chǎn)生了4號(hào)轉(zhuǎn)基因克隆豬?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析可知，1號(hào)豬提供的是卵母細(xì)胞，對(duì)其注射促性腺激素可使其超數(shù)排卵，獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進(jìn)行核移植。（2）將2號(hào)豬的組織塊分散成單個(gè)的成纖維細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，該細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)在37℃含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，其中CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。（3）利用胚胎分割技術(shù)對(duì)圖示早期胚胎進(jìn)行分割，可以獲得更多的基因編輯豬；據(jù)圖分析可知，核移植的細(xì)胞核來(lái)自于2號(hào)豬，因此產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來(lái)自于2號(hào)豬。（4）檢測(cè)病毒外殼蛋白基因（目的基因）是否導(dǎo)入4號(hào)豬，可以采用DNA分子雜交法檢測(cè)目的基因的序列；目的基因表達(dá)的最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)（病毒外殼蛋白），可以利用抗原-抗體雜交法進(jìn)行檢測(cè)，故選①④?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等過(guò)程，能夠弄清楚題圖中不同的豬提供的結(jié)構(gòu)和作用，明確核移植時(shí)的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，并能夠選擇正確的方法檢測(cè)目的基因是否表達(dá)。9、（1）A（2）獲得單個(gè)菌落AD（3）A6基因突變具有多向性（4）①PCR（DNA測(cè)序）②一種氨基酸可能對(duì)應(yīng)多種密碼子（或基因突變發(fā)生在非編碼區(qū)）【解析】（1）芽孢是細(xì)菌在惡劣環(huán)境中的意在休眠體．A．（2）圖1所示的b過(guò)程為菌落的稀釋，目的是為獲得單個(gè)菌落．A、倒平板時(shí)需要待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行，A正確；B、培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要先進(jìn)行高壓滅菌處理，才能倒平板，B錯(cuò)誤；C、倒平板過(guò)程中不能打開(kāi)培養(yǎng)皿的皿蓋，C錯(cuò)誤；D、平板冷凝后要倒置放置，D正確．（3）據(jù)圖2所示，凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量最少的是A6組，故酶催化能力最強(qiáng)的是A6組．由于基因突變具有不定向性，故各組酶催化能力存在差異．（4）①檢測(cè)是否發(fā)生基因突變可以用PCR（DNA測(cè)序）技術(shù)檢測(cè)．②如果A2、A5組芽孢桿菌發(fā)生基因突變，但凝乳酶蛋白未改變，這可能是因?yàn)橐环N氨基酸可能對(duì)應(yīng)多種密碼子，隨基因發(fā)生突變，但不會(huì)改變翻譯出來(lái)的氨基酸．【考點(diǎn)定位】微生物的分離和培養(yǎng)；酶活力測(cè)定的一般原理和方法．10、限制酶和DNA連接酶具有全能性內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞胰蛋白酶或膠原蛋白酶貼壁生長(zhǎng)正確互換整合正確互換整合后的染色體上只有只有，無(wú)、，具有G418抗性，故能在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中生長(zhǎng)，錯(cuò)誤互換整合后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個(gè)，而、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)，故在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中錯(cuò)誤整合的細(xì)胞死亡尿液中霉臭味顯著降低【解析】

DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。構(gòu)建重組載體時(shí)，首先需用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和運(yùn)載體，再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組載體。胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)），因此獲取的胚胎干細(xì)胞應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。結(jié)合題圖可知，正?；Q后的染色體DNA上只有，而無(wú)、；錯(cuò)誤整合時(shí)，載體的兩個(gè)中至少會(huì)有一個(gè)與一起整合到染色體DNA上，故由于正確互換后的細(xì)胞染色體上有，無(wú)、，故對(duì)G418有抗性，可在含G418的培養(yǎng)液中正常生活，而錯(cuò)誤互換后的染色體DNA上由于含有至少1個(gè)，而、的產(chǎn)物都能使細(xì)胞死亡，故錯(cuò)誤互換的細(xì)胞不能生存，據(jù)此分析?！驹斀狻浚?）構(gòu)建重組載體時(shí)，常用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶。實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞，除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外，還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞具有全能性。（2）為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞，可將小鼠囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞取出，并用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長(zhǎng)，這種現(xiàn)象稱為貼壁生長(zhǎng)。（3）已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性，、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡，據(jù)分析可知，正確互換后的染色體上只有只有，無(wú)、，錯(cuò)誤互換后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個(gè)，因此，轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依