動物學(xué)病理檢材的提取、固定、取材及保存規(guī)范_第1頁
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文檔簡介

1涉案動物病理學(xué)檢材的提取、固定、取材及保存規(guī)范鑒定標(biāo)準(zhǔn)從動物機(jī)體獲取的,用于病理學(xué)檢查、分析和診斷的組織、運(yùn)用適當(dāng)?shù)募夹g(shù)和方法,從動物體采集病理采用化學(xué)試劑或物理方法使病理檢材中的生物大分子保持原有狀態(tài)和從已固定的病理檢材中選取適宜部分用于后續(xù)運(yùn)用適當(dāng)?shù)臈l件和方法對病理檢材進(jìn)行儲存,以維持其質(zhì)準(zhǔn)備解剖刀、手術(shù)剪、鑷子、止血鉗、注射器、采樣管、無菌棉簽、載玻片、離器械和工具使用前應(yīng)進(jìn)行清潔、消毒和滅菌處操作人員應(yīng)穿戴一次性無菌手術(shù)衣、手套、口罩、護(hù)目鏡、帽子等防護(hù)裝備,防止自準(zhǔn)備好記錄表格、標(biāo)簽、記號筆等,用于記錄檢材的來源、種類、采集時間對于自然死亡的動物,應(yīng)在死亡后盡快(一般不超過6-24小時,變類型等因素確定)進(jìn)行檢材提取。在高溫、潮濕等環(huán)境條件下,應(yīng)盡快縮短提取時對于實(shí)驗(yàn)動物,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和研究目的,在預(yù)定的時間點(diǎn)進(jìn)行檢材提取。如果實(shí)驗(yàn)對于臨床病例,應(yīng)在動物接受治療前或治療過程中,根據(jù)疾病的發(fā)展和診斷需要,適時根據(jù)動物的種類、體型、病變部位和研究目的,選擇合適的解剖部位和切口位置。在在切取組織檢材時,應(yīng)避免過度牽拉、擠壓和損傷組織,保持組織的原有形態(tài)和結(jié)構(gòu)。或不同類型的病變,應(yīng)分別提取檢材,并做好標(biāo)記和記錄,注明檢材的來源、病變類型完整地摘取病變器官或目標(biāo)器官,在摘取過程中應(yīng)注意保護(hù)器官的血管、神經(jīng)和去除器官表面的結(jié)締組織、脂肪、筋膜和其他附著物,用生理鹽水輕輕沖洗將摘取的器官檢材放入無菌容器或保鮮袋中,做好標(biāo)記和記錄,盡),22G針頭),在無菌操作條件下進(jìn)行穿刺采集。穿刺部位應(yīng)選擇在積液較多選擇在肋間隙、腹腔穿刺可選擇在臍與恥骨聯(lián)合在穿刺過程中,應(yīng)緩慢進(jìn)針,避免損傷內(nèi)臟器官和血管。當(dāng)針頭進(jìn)入體腔后,緩慢抽?。?,采集完成后,立即將離心管密封,做好標(biāo)記和記錄,盡快進(jìn)行離心處理使用無菌刮片、毛刷或吸管等工具,采集病變部位的細(xì)胞,將細(xì)胞均勻涂抹在載玻對于液體樣本(如血液、腦脊液、尿液等),可采用離心涂),采集血液時,可通過靜脈穿刺、心臟穿刺、動脈穿刺等方法進(jìn)行。對于小型動物(),),前肢靜脈、后肢靜脈或頸靜脈穿刺的方法采集血液;對于大),前腔靜脈或尾靜脈穿刺的方法采集血液;對于實(shí)驗(yàn)動物的心臟穿刺采血,應(yīng)在麻醉狀態(tài)血液采集完成后,根據(jù)檢測目的和后續(xù)處理方法,將血液收集到抗凝管(如肝素二鉀抗凝管等)或促凝管中??鼓苤械难簯?yīng)輕輕顛倒混勻,防止血液凝固;促對于麻醉狀態(tài)下的動物,可采用輸尿管插管法或膀胱造瘺法采集尿液。輸尿管插管法是尿管,將尿液引流到收集容器中;膀胱造瘺法是在動物的膀胱上進(jìn)行手術(shù)造瘺,將尿?qū)τ谛⌒蛣游?,可使用唾液收集管或吸附棉棒等工具,刺激動物口腔分泌唾液,收集唾動物,可使用口腔引流裝置或唾液收集器等10%中性福爾馬林溶液是一種常用的固定劑,性保存較好,適用于免疫組織化學(xué)、原位雜交等需要檢測抗原和核根據(jù)特殊的研究目的和檢測要求,還可選擇戊二醛、醋將提取的組織或器官檢材放入裝有固定劑的在固定過程中,應(yīng)定期輕輕攪動固定劑,使檢材與固定劑充分接觸,確保固定均勻。固),準(zhǔn)備好取材所需的工具,如鋒利的切片刀、剪刀、鑷子、直尺、載玻片、包取材應(yīng)在清潔、通風(fēng)良好的實(shí)驗(yàn)室或?qū)S萌〔氖疫M(jìn)行,避免環(huán)境污染和交叉污取材部位應(yīng)根據(jù)病變的特點(diǎn)和研究目的進(jìn)行選擇,包括病變中心、病變與正常正常組織等。對于多灶性病變或彌漫性病變,應(yīng)在多個部取材組織塊的大小應(yīng)根據(jù)后續(xù)制片和檢測方法確定。一般來說,用于常0.2cm×0.2cm×0.2cm-0.3cm×0.3cm×0.3cm;用于冰凍切片的組織塊大小為0.5cm×0.5cm根據(jù)研究需要和病變的復(fù)雜性,確定取材的數(shù)量。一般來說,對于單個病變部位,應(yīng)至織;對于多個病變部位或不同類型的病變,應(yīng)分別取材,使用切片刀或剪刀,從固定后的組織或器官中切取所需的組織塊。取材時應(yīng)注意保向,避免過度牽拉和擠壓組織。對于質(zhì)地較硬的組織,可先將組織進(jìn)行軟化處),將切取的組織塊放入包埋盒中,做好標(biāo)記和記錄,注明組織的來源、病變類型、取材部對于細(xì)胞涂片,使用鑷子或吸管將涂片從載玻片上取下,放入包埋盒中。對于離心后的),保存環(huán)境應(yīng)避免陽光直射和強(qiáng)光照射,防止檢材中的生物大分子發(fā)組織和器官檢材可保存在裝有固定劑的密封

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