混合淋巴細胞培養(yǎng)中的免疫耐受機制

19/22混合淋巴細胞培養(yǎng)中的免疫耐受機制第一部分免疫耐受的定義 2第二部分混合淋巴細胞培養(yǎng)的原理 4第三部分供體-受體細胞相互作用 7第四部分細胞因子和調(diào)節(jié)性分子 9第五部分調(diào)節(jié)性淋巴細胞的生成 11第六部分細胞死亡機制 14第七部分共刺激分子的參與 17第八部分耐受誘導的實驗技術 19

第一部分免疫耐受的定義關鍵詞關鍵要點免疫耐受的定義

1.免疫耐受是免疫系統(tǒng)識別并對自我抗原或非有害外來抗原產(chǎn)生反應減弱或喪失的過程。

2.免疫耐受通過免疫系統(tǒng)細胞和分子機制維持，防止針對自身或無害物質(zhì)的自身免疫反應。

3.免疫耐受對于維持免疫平衡和防止組織損傷至關重要，因為它有助于區(qū)分自我和非自我抗原。

中樞耐受

1.中樞耐受發(fā)生在胸腺中，是清除或功能抑制自身反應性T細胞的過程。

2.它包括陽性選擇，允許識別MHC分子限制性肽抗原的T細胞成熟，和負性選擇，清除與自身抗原高親和力結合的T細胞。

3.中樞耐受缺陷會導致自身免疫疾病的發(fā)展，突顯其在自身免疫調(diào)節(jié)中的重要性。

外周耐受

1.外周耐受發(fā)生在胸腺外組織中，是抑制或消除自反應免疫細胞的過程。

2.機制包括抗原特異性T細胞的無反應性、耐受、細胞耗竭和調(diào)節(jié)性T細胞的活性。

3.外周耐受缺陷可以導致自身免疫疾病或移植排斥，表明其對免疫調(diào)節(jié)的至關重要性。

調(diào)節(jié)性T細胞

1.調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）是一類專門抑制免疫反應的T淋巴細胞。

2.它們通過釋放細胞因子、參與細胞間接觸和調(diào)節(jié)樹突狀細胞功能來介導免疫抑制。

3.Treg缺陷與自身免疫疾病的發(fā)展有關，突顯了它們在免疫耐受中的關鍵作用。

免疫檢查點分子

1.免疫檢查點分子是在免疫細胞表面表達的受體，它們在調(diào)節(jié)免疫反應中起著至關重要的作用。

2.它們可以抑制免疫細胞的激活和功能，幫助維持免疫穩(wěn)態(tài)。

3.免疫檢查點阻斷作為癌癥免疫治療的靶點，通過釋放免疫系統(tǒng)針對腫瘤細胞的作用。

免疫耐受的突破

1.免疫耐受可以通過各種因素被打破，包括組織損傷、炎癥和調(diào)節(jié)性途徑的缺陷。

2.耐受突破會導致自身免疫疾病或移植排斥，突出其在維持免疫平衡中的脆弱性。

3.了解耐受突破機制可以為預防和治療這些疾病提供見解。免疫耐受的定義

免疫耐受是一種生理過程，通過該過程，免疫系統(tǒng)被調(diào)控以識別并對自身抗原耐受，從而防止對自身組織的致病性免疫反應。這種容忍度至關重要，因為它有助于維持組織完整性和整體健康。

免疫耐受機制

免疫耐受可通過多種機制建立，包括：

*克隆刪除：在胸腺內(nèi)，對自身抗原有親和力的T細胞經(jīng)過負選擇過程，被清除或功能失調(diào)。

*克隆無能：T細胞對自身抗原有親和力，但缺乏激活所需的共刺激信號。

*調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)：Treg是專門的免疫細胞，可抑制其他免疫細胞的活性，從而調(diào)節(jié)免疫反應。

*抗原遞呈細胞耐受：抗原遞呈細胞(APC)不表達自身抗原，或表達低水平的抗原，從而限制針對這些抗原的免疫反應。

*免疫球蛋白耐受：免疫球蛋白，尤其是IgG，可與自身抗原結合并阻斷其與免疫細胞的相互作用。

*旁觀者抑制：當一種免疫反應對目標抗原同時激活多個T細胞克隆時，一些克隆會被抑制，防止過度的免疫反應。

免疫耐受的重要性

免疫耐受對于防止自身免疫疾病至關重要。當耐受機制失敗時，可能會發(fā)生對自身組織的攻擊，導致多種自身免疫疾病，例如：

*系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)

*類風濕關節(jié)炎(RA)

*多發(fā)性硬化癥(MS)

治療中的免疫耐受

理解免疫耐受機制對于開發(fā)治療自身免疫疾病的新療法至關重要。免疫耐受療法的目標是恢復對自身抗原的耐受性，從而減輕炎癥和組織損傷。免疫耐受療法可以使用多種方法，包括：

*免疫抑制劑：免疫抑制劑可抑制免疫細胞活性，從而減少對自身抗原的反應。

*抗體療法：抗體可阻斷自身抗原與免疫細胞的相互作用，或抑制免疫細胞活性。

*細胞療法：細胞療法涉及使用調(diào)節(jié)性T細胞或其他耐受誘導細胞來抑制免疫反應。

研究免疫耐受機制和開發(fā)新的免疫耐受療法是治療自身免疫疾病和維持整體健康的關鍵一步。第二部分混合淋巴細胞培養(yǎng)的原理關鍵詞關鍵要點【混合淋巴細胞培養(yǎng)的原理】

1.混合淋巴細胞培養(yǎng)的概念：

-將供體淋巴細胞（刺激細胞）和受體淋巴細胞（應答細胞）混合培養(yǎng)，觀察應答細胞對刺激細胞的免疫反應。

-反應強度反映供體和受體淋巴細胞之間的組織相容性差異程度。

2.混合淋巴細胞培養(yǎng)的機制：

-刺激細胞上的主要組織相容性復合物（MHC）分子與應答細胞上的T細胞受體（TCR）相互結合。

-如果MHC分子與TCR匹配，則激活應答細胞。

-活化的應答細胞增殖分化，產(chǎn)生淋巴因子，引發(fā)細胞毒效應或抗體產(chǎn)生。

3.混合淋巴細胞培養(yǎng)的應用：

-評估組織移植的相容性：相容性越差，混合淋巴細胞反應越強。

-研究免疫耐受機制：通過添加抑制劑或共刺激信號，可以調(diào)節(jié)混合淋巴細胞反應。

-鑒定免疫細胞表面的分子標記：混合淋巴細胞培養(yǎng)可以幫助識別參與免疫識別的受體和分子。

混合淋巴細胞培養(yǎng)的原理

混合淋巴細胞培養(yǎng)（MLC）是一種體外免疫學技術，用于研究T細胞介導的免疫反應。其原理基于同種異體兩個不同個體的免疫細胞之間的相互作用。

步驟

MLC過程涉及以下步驟：

1.隔離淋巴細胞：從兩個不同個體（供體和刺激者）中采集靜脈血或脾臟，并分離出淋巴細胞。

2.刺激：供體淋巴細胞與刺激者淋巴細胞混合，通常以1:1的比例混合。

3.培養(yǎng)：混合的淋巴細胞在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)5-7天，在此期間它們會相互識別和相互作用。

原理

MLC的基本原理在于，來自供體個體的T細胞能夠識別刺激者個體的主要組織相容性復合物(MHC)分子。MHC分子在細胞表面表達，呈現(xiàn)屬于該個體的獨特肽段。

供體T細胞具有針對刺激者個體MHC分子特異性的T細胞受體(TCR)。當TCR與MHC-肽復合物結合時，會觸發(fā)T細胞激活：

*釋放細胞因子（例如白細胞介素-2），刺激T細胞增殖和分化。

*誘導細胞毒性T淋巴細胞（CTL）的生成，可殺傷表達刺激者MHC分子的細胞。

反應的種類

MLC反應可以分類為：

*單向MLC：僅使用一種個體的供體淋巴細胞和另一種個體的刺激者淋巴細胞。

*雙向MLC：使用來自兩個個體的供體和刺激者淋巴細胞。

應用

MLC廣泛用于研究免疫學中的各種方面，包括：

*器官移植：評估移植后免疫排斥的風險。

*自體免疫?。捍_定針對自身抗原的T細胞反應。

*免疫耐受：研究抗原特異性T細胞耐受的誘導和維持。

*免疫療法：開發(fā)針對癌癥和其他疾病的細胞療法。

了解MLC的原理對于理解T細胞介導的免疫反應至關重要，并且在免疫學研究和臨床應用中具有重大意義。第三部分供體-受體細胞相互作用關鍵詞關鍵要點【供體-受體細胞相互作用】

1.供體細胞與受體細胞的直接相互作用：

-抗原呈遞細胞（APC）將供體細胞來源的抗原呈遞給受體細胞，激活受體細胞并誘導免疫反應。

-供體細胞與受體細胞之間的直接細胞-細胞接觸，促進細胞因子和共刺激分子的交換，調(diào)控免疫反應。

2.間接介導的相互作用：

-供體細胞釋放可溶性介質(zhì)，如細胞因子和趨化因子，影響受體細胞的激活、分化和功能。

-受體細胞釋放的調(diào)節(jié)因子，如抑制性細胞因子和共抑制劑，抑制供體細胞的免疫應答。

【受體細胞的激活與耐受】

供體-受體細胞相互作用

概論

在混合淋巴細胞培養(yǎng)（MLC）中，供體和受體淋巴細胞相互作用是免疫耐受發(fā)展的重要機制。該相互作用涉及多種細胞類型和分子信號，協(xié)調(diào)地調(diào)節(jié)免疫應答，防止移植排斥反應和自身免疫。

參與的細胞類型

*供體淋巴細胞：來自供體組織或器官的淋巴細胞，包含對受體組織的抗原反應的T細胞。

*受體淋巴細胞：來自受體組織或器官的淋巴細胞，包含針對供體抗原的T細胞。

*抗原呈遞細胞（APC）：來自受體組織的細胞，如巨噬細胞或樹突狀細胞，它們可以攝取、加工和呈遞供體抗原給T細胞。

分子信號

供體-受體細胞相互作用受多種分子信號的調(diào)節(jié)，包括：

*主要組織相容性復合物（MHC）分子：MHC分子呈遞抗原，供T細胞識別。供體和受體的MHC分子不同導致免疫應答。

*共刺激分子：如CD28和B7，它們在T細胞活化中起作用。

*凋亡配體：如FasL和TNFα，它們誘導T細胞凋亡。

*細胞因子：如IL-2、IFN-γ和IL-10，它們調(diào)節(jié)T細胞的增殖、分化和凋亡。

供體-受體細胞相互作用的階段

MLC中的供體-受體細胞相互作用可分為以下階段：

1.活化階段：供體T細胞識別受體APC呈遞的供體抗原，并被共刺激分子激活。

2.增殖階段：活化的T細胞增殖，形成效應T細胞。

3.分化階段：效應T細胞分化為輔助性T細胞（Th）或細胞毒性T細胞（Tc），并分泌細胞因子。

免疫耐受機制

供體-受體細胞相互作用可以通過多種機制促進免疫耐受：

*凋亡：供體抗原識別導致效應T細胞凋亡，從而限制其增殖和活性。

*抑制性細胞因子：免疫耐受性細胞，如調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）和M2型巨噬細胞，分泌IL-10等抑制性細胞因子，抑制T細胞應答。

*反調(diào)節(jié)：持續(xù)的抗原暴露會誘導耐受性T細胞的生成，它們抑制其他效應T細胞的活化。

*克隆耗竭：供體抗原識別會耗盡對特定抗原反應的效應T細胞，導致耐受。

意義

供體-受體細胞相互作用在器官移植和自身免疫等免疫耐受過程中至關重要。這些相互作用的調(diào)節(jié)失衡會導致免疫排斥或自身免疫疾病。因此，理解供體-受體細胞相互作用對于開發(fā)預防移植排斥反應和治療自身免疫性疾病的策略至關重要。第四部分細胞因子和調(diào)節(jié)性分子關鍵詞關鍵要點細胞因子

1.促炎細胞因子（如IL-2、IFN-γ）：激活T細胞，促進細胞增殖和分化，引發(fā)免疫反應。

2.抗炎細胞因子（如IL-10、TGF-β）：抑制T細胞活化，促進免疫耐受。

調(diào)節(jié)性分子

1.免疫檢查點分子（如PD-1、CTLA-4）：在T細胞表面表達，與抗原呈遞細胞上的配體結合，抑制T細胞激活。

2.抑制性受體（如LAG-3、TIM-3）：在T細胞或自然殺傷細胞表面表達，與配體結合，抑制細胞活性。

3.調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）：一類抑制性T細胞，通過釋放抑制性細胞因子和直接細胞接觸抑制免疫反應。細胞因子和調(diào)節(jié)性分子

細胞因子和調(diào)節(jié)性分子在混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)中的免疫耐受中發(fā)揮至關重要的作用。這些分子負責調(diào)節(jié)免疫細胞的反應，并有助于建立和維持免疫耐受。

細胞因子

細胞因子是免疫系統(tǒng)釋放的小分子蛋白質(zhì)，在細胞間傳遞信號。在MLC中，幾種細胞因子參與調(diào)節(jié)免疫耐受，包括：

*IL-2：IL-2是T細胞生長因子，對T細胞的活化和增殖至關重要。在MLC中，IL-2的缺乏或阻斷可導致免疫耐受。

*IL-10：IL-10是抗炎細胞因子，抑制T細胞活化和增殖。在MLC中，IL-10的產(chǎn)生有助于建立免疫耐受。

*轉化生長因子-β(TGF-β)：TGF-β是免疫調(diào)節(jié)細胞因子，抑制T細胞活化和分化。在MLC中，TGF-β的產(chǎn)生有助于促進免疫耐受。

*干擾素-γ(IFN-γ)：IFN-γ是促炎細胞因子，激活T細胞和巨噬細胞。在MLC中，IFN-γ過量會導致免疫耐受受損。

調(diào)節(jié)性分子

調(diào)節(jié)性分子是一組異質(zhì)細胞和分子，負責抑制免疫反應。在MLC中，幾種調(diào)節(jié)性分子參與免疫耐受，包括：

*調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)：Treg是專門抑制免疫反應的T細胞亞群。在MLC中，Treg的存在有助于建立免疫耐受。

*髓系來源抑制細胞(MDSC)：MDSC是骨髓衍生的細胞，具有抑制免疫反應的能力。在MLC中，MDSC的積累有助于促進免疫耐受。

*NK細胞：NK細胞是一種天然殺傷細胞，能夠殺死靶細胞。在MLC中，NK細胞的調(diào)節(jié)性功能有助于抑制免疫反應。

*PD-1：PD-1是免疫檢查點受體，負責抑制T細胞活化。在MLC中，PD-1的表達有助于建立免疫耐受。

*CTLA-4：CTLA-4是免疫檢查點受體，抑制T細胞活化。在MLC中，CTLA-4的表達有助于促進免疫耐受。

細胞因子和調(diào)節(jié)性分子的作用機制

細胞因子和調(diào)節(jié)性分子通過各種機制發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，包括：

*抑制免疫細胞活化：細胞因子如IL-10和TGF-β可抑制T細胞和巨噬細胞的活化。

*促進細胞凋亡：細胞因子如FasL和TNF-α可誘導免疫細胞凋亡。

*調(diào)節(jié)細胞分化：細胞因子如IFN-γ可促進Th1分化，而IL-4可促進Th2分化。

*抑制免疫效應功能：調(diào)節(jié)性分子如Treg和MDSC可抑制免疫細胞釋放細胞因子和執(zhí)行細胞毒性功能。

*誘導免疫抑制環(huán)境：調(diào)節(jié)性分子如PD-1和CTLA-4可誘導免疫抑制環(huán)境，抑制免疫反應。

總之，細胞因子和調(diào)節(jié)性分子在MLC中的免疫耐受中發(fā)揮至關重要的作用。它們通過各種機制協(xié)調(diào)作用，抑制免疫反應并建立和維持免疫耐受。第五部分調(diào)節(jié)性淋巴細胞的生成關鍵詞關鍵要點【調(diào)節(jié)性T細胞的表型和功能】

1.調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）是一類具有抑制免疫反應功能的特殊T細胞亞群，在維持免疫穩(wěn)態(tài)和預防自身免疫疾病中發(fā)揮重要作用。

2.Treg細胞表面表達獨特的分子標記，如CD4、CD25、Foxp3等，并分泌抑制性細胞因子如白介素-10（IL-10）和轉化生長因子-β（TGF-β）等。

3.Treg細胞通過細胞接觸和分泌細胞因子等機制抑制免疫反應，包括抑制T細胞活化、誘導T細胞凋亡、抑制抗體產(chǎn)生和調(diào)控樹突狀細胞功能等。

【調(diào)節(jié)性T細胞的生成】

調(diào)節(jié)性淋巴細胞的生成

混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)中的免疫耐受機制涉及調(diào)節(jié)性淋巴細胞的生成，這些細胞對維持體內(nèi)自穩(wěn)性和防止自身免疫至關重要。

調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）的誘導

MLC中Treg的誘導是一個多步驟過程，涉及以下關鍵信號：

抗原特異性刺激：MLC中的混合淋巴細胞暴露于異基因抗原，觸發(fā)抗原特異性T細胞的激活和增殖。

共刺激分子：共刺激分子，如CD80和CD86，與T細胞上的CD28受體結合，提供額外的信號，促進T細胞激活。

轉化生長因子-β（TGF-β）：TGF-β是MLC中一種重要的調(diào)節(jié)性細胞因子，可抑制T細胞增殖和促進Treg分化。

白細胞介素-2（IL-2）：IL-2是T細胞增殖和激活所必需的。在MLC中，低濃度的IL-2有利于Treg分化。

?？怂诡^轉錄因子（FOXP3）：FOXP3是Treg發(fā)育和功能的關鍵轉錄因子。TGF-β信號可誘導FOXP3表達，從而將幼稚T細胞分化為Treg。

適應性Treg的鑒別

MLC中誘導的Treg可分為以下亞群：

*自然Treg（nTreg）：nTreg在胸腺中產(chǎn)生，表達高水平的CD25和FOXP3。

*適應性Treg（iTreg）：iTreg在外周誘導產(chǎn)生，主要表達FOXP3，而CD25表達水平較低。

iTreg在MLC中的生成至關重要，因為它允許誘導特異性抗原反應的Treg，從而介導免疫耐受。

iTreg誘導機制

iTreg誘導的機制包括：

*轉化生長因子-β（TGF-β）介導的轉換：TGF-β信號可將幼稚T細胞分化為iTreg。

*白細胞介素-2（IL-2）介導的轉換：低濃度的IL-2促進幼稚T細胞向iTreg分化。

*樹突狀細胞（DC）介導的轉換：某些DC亞群可以產(chǎn)生TGF-β和IL-2，從而誘導iTreg分化。

iTreg的表征

iTreg的表型特征包括：

*FOXP3表達：iTreg表達高水平的FOXP3。

*CD25表達：iTreg表達CD25，但水平低于nTreg。

*抑制作用：iTreg具有抑制效應T細胞和B細胞的功能。

iTreg在免疫耐受中的作用

MLC中誘導的iTreg在維持免疫耐受中發(fā)揮至關重要的作用。它們通過以下機制抑制免疫反應：

*細胞接觸抑制：iTreg通過細胞接觸抑制效應T細胞和B細胞的活化和增殖。

*細胞因子分泌：iTreg分泌免疫抑制細胞因子，如IL-10和TGF-β，從而抑制免疫反應。

*代謝破壞：iTreg消耗必需的營養(yǎng)物質(zhì)，如色氨酸和谷氨酰胺，從而限制效應T細胞的增殖。

總之，MLC中調(diào)節(jié)性淋巴細胞的生成，特別是iTreg的誘導，對于維持免疫耐受和防止自身免疫至關重要。這些細胞通過多種機制抑制免疫反應，確保體內(nèi)自穩(wěn)性和免疫平衡。第六部分細胞死亡機制關鍵詞關鍵要點【Fas/FasL途徑】

1.Fas（又稱CD95）是一種細胞表面死亡受體蛋白，在激活后可傳導凋亡信號。

2.FasL是一種Fas的配體，與Fas結合后可誘導細胞凋亡。

3.混合淋巴細胞培養(yǎng)中，供者淋巴細胞表達Fas，而受者淋巴細胞表達FasL，導致供者淋巴細胞的凋亡和免疫耐受。

【穿孔素/顆粒酶途徑】

混合淋巴細胞培養(yǎng)中的細胞死亡機制

在混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)中，供體和受體淋巴細胞之間的相互作用會導致多種細胞死亡機制，包括：

1.凋亡

*定義：一種受程序控制的細胞死亡形式，涉及激活細胞中的caspase家族蛋白水解酶級聯(lián)反應。

*MLC中的機制：供體淋巴細胞與受體抗原呈遞細胞(APC)相互作用后，可觸發(fā)激活誘導細胞死亡(AICD)通路。Fas配體(FasL)和TNF相關凋亡誘導配體(TRAIL)等促凋亡配體表達上調(diào)，與Fas和TRAIL受體結合，從而啟動caspases級聯(lián)反應，導致細胞凋亡。

*特征：細胞體積縮小、細胞質(zhì)濃縮、染色質(zhì)濃縮和核碎裂成稱為凋亡小體的特征性圓形碎片。

2.細胞毒性T淋巴細胞(CTL)介導的細胞毒性

*定義：由CTL執(zhí)行的一種免疫介導的細胞死亡形式，涉及通過穿孔素和顆粒酶的釋放來誘導細胞溶解。

*MLC中的機制：受體抗原呈遞細胞上MHC-I分子與供體T細胞受體的結合，導致CTL活化和穿孔素和顆粒酶的釋放。這些分子穿透受體細胞的細胞膜，導致細胞溶解和死亡。

*特征：細胞體積增加、膜完整性喪失、細胞質(zhì)基質(zhì)溶解和細胞核裂解。

3.抗體依賴性細胞介導的細胞毒性(ADCC)

*定義：一種由抗體介導的細胞死亡形式，涉及抗體結合靶細胞抗原，從而使細胞毒性效應細胞（通常為自然殺傷(NK)細胞）可以識別和殺傷靶細胞。

*MLC中的機制：受體淋巴細胞釋放的抗體與供體淋巴細胞上的抗原結合。NK細胞與具有結合抗體的Fc受體結合，從而觸發(fā)細胞溶解和死亡。

*特征：類似于CTL介導的細胞毒性，但細胞膜破裂更慢。

4.自然殺傷(NK)細胞介導的細胞毒性

*定義：一種由NK細胞執(zhí)行的細胞死亡形式，涉及非特異性識別和殺傷受損或感染的細胞。

*MLC中的機制：NK細胞通過識別供體淋巴細胞上的缺失自我MHC-I分子來激活。激活的NK細胞釋放穿孔素和顆粒酶，誘導細胞溶解和死亡。

*特征：類似于CTL介導的細胞毒性，但受體細胞可能不表達MHC-I分子。

5.NETosis

*定義：一種由中性粒細胞執(zhí)行的細胞死亡形式，涉及胞質(zhì)網(wǎng)(NET)的釋放，NET是DNA纖維和抗菌肽的復雜結構。

*MLC中的機制：尚不完全清楚，但可能涉及促炎細胞因子（如IL-1β和TNF-α）的釋放以及ROS的產(chǎn)生。

*特征：中性粒細胞死亡并釋放網(wǎng)狀結構，該結構富含DNA和抗菌肽。

凋亡的分子調(diào)控

凋亡的分子調(diào)控涉及多種信號通路和調(diào)節(jié)蛋白，包括：

*促凋亡蛋白：例如FasL、TRAIL、胱天蛋白酶3(caspase-3)和caspase-9。

*抗凋亡蛋白：例如Bcl-2家族成員（例如Bcl-2和Bcl-xL），它們通過阻斷caspases級聯(lián)反應來抑制凋亡。

*凋亡信號通路：例如本征通路（涉及線粒體損傷和細胞色素c釋放）和外在通路（涉及促凋亡配體和受體的相互作用）。

了解細胞死亡機制在MLC中的調(diào)節(jié)對于闡明器官移植、自身免疫性疾病和癌癥免疫等免疫相關疾病的免疫耐受機制至關重要。第七部分共刺激分子的參與關鍵詞關鍵要點【共刺激分子的參與】

1.共刺激分子在混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)中發(fā)揮關鍵作用，它們提供額外信號，決定T細胞活化或耐受的命運。

2.B7分子和CD28分子家族是MLC中最重要的共刺激分子，它們之間的相互作用提供正向信號，促進T細胞活化。

3.CTLA-4和PD-1等抑制性共刺激分子向T細胞傳遞負向信號，抑制T細胞活化并促進耐受。

【免疫調(diào)節(jié)細胞的參與】

共刺激分子的參與

共刺激分子是免疫細胞表面表達的蛋白質(zhì)，在T細胞激活和耐受中發(fā)揮著至關重要的作用。在混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)中，共刺激分子的相互作用對于建立免疫耐受至關重要。

共刺激分子的類型和作用

參與MLC耐受的常見共刺激分子包括：

*CD28：T細胞上的共刺激受體，與抗原呈遞細胞(APC)上的B7-1(CD80)和B7-2(CD86)配體結合。CD28信號傳導可促進T細胞激活和增殖。

*CTLA-4：T細胞上的共刺激抑制受體，也與B7-1和B7-2結合。CTLA-4信號傳導可抑制T細胞活化并促進耐受。

*ICOS：T細胞上的共刺激受體，與B7-H2(ICOS-L)配體結合，參與T細胞輔助細胞(Th)分化和記憶T細胞形成。

*PD-1：T細胞上的共刺激抑制受體，與PD-L1和PD-L2配體結合，參與T細胞耗竭和耐受。

共刺激分子的相互作用在MLC耐受中的作用

在MLC中，共刺激分子的相互作用通過以下機制建立免疫耐受：

CD28/B7信號傳導的調(diào)節(jié)：CD28/B7信號傳導的平衡對于T細胞激活和耐受至關重要。在正常條件下，CD28信號傳導占主導地位，導致T細胞激活。然而，在耐受誘導條件下，CTLA-4通過與B7配體競爭結合來抑制CD28信號傳導，從而抑制T細胞活化。

誘導T細胞耗竭：PD-1與PD-L1/PD-L2的結合可誘導T細胞耗竭，這是一種功能性衰竭狀態(tài)。在MLC耐受中，PD-1信號傳導可抑制T細胞增殖、細胞因子產(chǎn)生和細胞毒性。

促進轉化生長因子(TGF-β)的產(chǎn)生：共刺激分子相互作用可促進TGF-β的產(chǎn)生，這是一種免疫抑制性細胞因子。TGF-β可通過抑制T細胞增殖和誘導調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)分化來促進免疫耐受。

影響T細胞分化：共刺激分子的相互作用可以影響T細胞分化。ICOS信號傳導可促進Th2和Tfh細胞的分化，而PD-1信號傳導可抑制Th1和Th17細胞的分化。這種分化影響可以調(diào)節(jié)MLC中的免疫應答并促進耐受。

結論

共刺激分子的相互作用在混合淋巴細胞培養(yǎng)中的免疫耐受中發(fā)揮著至關重要的作用。CD28和CTLA-4之間的平衡、PD-1信號傳導的誘導、TGF-β的產(chǎn)生和T細胞分化的影響共同建立了免疫耐受，防止移植排斥和自身免疫。第八部分耐受誘導的實驗技術耐受誘導的實驗技術

混合淋巴細胞培養(yǎng)（MLC）中誘導免疫耐受的實驗技術包括以下幾種：

1.抗體阻斷

*使用針對共刺激分子的抗體，例如抗-CD80/CD86或抗-CD28，阻斷共刺激信號傳導。

*阻斷共刺激信號可抑制T細胞活化，防止效應T細胞的分化。

2.單核細胞/樹突細胞耗盡

*用抗-CD14或抗-CD11c抗體聯(lián)合免疫磁珠技術耗盡單核細胞或樹突細胞。

*單核細胞和樹突細胞是抗原呈遞細胞，耗盡它們可減少抗原呈遞，從而降低T細胞活化。

3.Treg細胞添加

*添加外源性Treg細胞或促進Treg細胞分化的細胞因子，例如IL-10或TGF-β。

*Treg細胞具有