TSATA 069-2024 甘蔗中3-硝基丙酸含量的測定液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法

ICS67.050CCSX04甘蔗中3-硝基丙酸含量的測定液相色譜-Determinationof3-nitropropionicacidinsugarcanebyliquidchromatography—tandemmassspeIT/SATA069—2024前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4原理 5試劑和材料 試劑 試劑配制 標準品 標準溶液配制 材料 26儀器和設(shè)備 27分析步驟 2試樣制備 2試樣的提取和凈化 2基質(zhì)加標標準工作曲線溶液的制備 2儀器參考條件 28結(jié)果計算與表述 3定性測定 3定量測定 3空白試驗 3結(jié)果計算 39精密度 410檢出限、定量限 4附錄A（資料性）標準工作曲線溶液中3-NPA的提取離子色譜圖 5T/SATA069—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由深圳市分析測試協(xié)會提出并歸口。本文件起草單位：深圳市羅湖區(qū)疾病預(yù)防控制中心，深圳市龍華區(qū)疾病預(yù)防控制中心，深圳市鹽田區(qū)疾病預(yù)防控制中心。本文件主要起草人：朱波、倪一平、葉小莉、賴少陽、葉敏、陳傳德、羅蘭、秦威振、曾楚瑩、王露、謝雨彤。1T/SATA069—2024甘蔗中3-硝基丙酸含量的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法本文件規(guī)定了甘蔗中的3-硝基丙酸的液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜測定方法。本文件適用于甘蔗中3-硝基丙酸含量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T27404實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理利用乙腈振蕩提取甘蔗樣品中3-硝基丙酸（3-NPA提取液離心過濾，上清液經(jīng)乙二胺-N-丙基（PSA）固相萃取柱凈化濃縮后，用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定目標物，結(jié)果通過外標法進行定量。5試劑和材料除非另有說明，本文件所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。試劑5.1.1乙腈（C2H3N）：色譜純。5.1.2甲醇（CH3OH）：色譜純。5.1.3甲酸（CH2O2）：色譜純。5.1.4氨水（NH4OH）。試劑配制5.2.11%氨水-甲醇溶液：吸取1.0mL氨水，用甲醇稀釋至100mL，混勻。5.2.20.5%甲酸水溶液：吸取5.0mL甲酸，用水稀釋至1000mL，混勻。標準品3-硝基丙酸（3-NPA，C8H5NO6，CAS：603-11-2）：純度≥97.0%。標準溶液配制5.4.1標準儲備液（100μg/mL）：稱取3-硝基丙酸標準品0.01g（精確到0.0001g），用乙腈溶解后轉(zhuǎn)移至100mL棕色容量瓶中，用乙腈定容，配制成質(zhì)量濃度為100μg/mL的標準儲備液，于-20℃條件下保存，有效期三個月。5.4.2標準使用液（1.00μg/mL）：準確量取標準儲備液1.0mL至100mL容量瓶，用乙腈定容，配制成1.00μg/mL的標準使用液，臨用時配制。2脫液于40℃水溫中氮吹至近干，用0.5%甲酸水溶液定容至1.0mL得到待測樣品(下文簡稱樣品),時間/min53T/SATA069—2024557.4.1.5柱溫：40℃。7.4.1.6進樣量：5.0μL。7.4.2質(zhì)譜參考條件7.4.2.1離子源：電噴霧離子源ESI，離子源溫度550℃。7.4.2.2掃描模式：負離子掃描模式。7.4.2.3檢測方式：多離子反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。7.4.2.4噴霧電壓：-4500V。7.4.2.5源內(nèi)氣：55psi。7.4.2.6輔助氣：55psi。7.4.2.7其他質(zhì)譜采集參數(shù)見表2：表23-NPA監(jiān)測離子對參數(shù)注2：對于不同質(zhì)譜儀，儀器參數(shù)可能存在差異，應(yīng)對質(zhì)譜參數(shù)進行優(yōu)化以8結(jié)果計算與表述定性測定在相同實驗條件下，樣品中待測物質(zhì)的保留時間與標準工作曲線溶液中對應(yīng)的保留時間偏差在±2.5%之間，且樣品圖譜中定性離子的相對豐度與濃度接近的標準工作曲線溶液圖譜中對應(yīng)的定性離子的相對豐度的偏差不超過表3中規(guī)定的范圍，則可判定為樣品中檢出目標物。表33-NPA定性測定的相對離子豐度及最大允許偏差要求>20-50>10-20定量測定以系列標準工作溶液的3-NPA信號峰面積為縱坐標，其溶液濃度為橫坐標，進行線性回歸擬合，得到濃度與信號峰面積的線性回歸方程。利用該方程對樣品中3-NPA的含量進行計算。標準工作曲線溶液中3-NPA的提取離子色譜圖參見附錄A?？瞻自囼灴瞻自囼灥臉颖境患痈收針颖就猓凑?.2的步驟進行操作。結(jié)果計算試樣中3-NPA的含量按公式（1）計算：式中：X——試樣中3-NPA的含量，單位為微克每千克(μg/kgc——樣品中3-NPA的含量，單位為納克每毫升（ng/mL4T/SATA069—2024v——樣品定容體積，單位為毫升（mLm——試樣的稱樣量，單位為克（gf——稀釋倍數(shù)；1000——換算系數(shù)。計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。