化妝品中烏洛托品的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 編制說(shuō)明

本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)國(guó)標(biāo)委發(fā)[2023]58號(hào)《國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)關(guān)于下達(dá)2023年第三批推薦性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)外文版計(jì)劃的通知》立項(xiàng)，項(xiàng)單位：蘇州世譜檢測(cè)技術(shù)有限公司、蘇州質(zhì)量檢測(cè)科學(xué)研究限公司、廣州質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)研究院等。項(xiàng)目周期18個(gè)月，計(jì)劃應(yīng)完成時(shí)間2025年6烏洛托品，學(xué)名為六亞甲基四胺，一般作為防腐效果。烏洛托品在弱酸性條件下可分解產(chǎn)生甲醛和氨，甲醛受體發(fā)生反應(yīng)，如與氨基化合物縮合與巰基化合物加成，使內(nèi)還可以還原成醇，表現(xiàn)出甲醇的毒理作用，對(duì)人體的腎、能、消化系統(tǒng)等均有損害?！痘瘖y品衛(wèi)生規(guī)范》未指明其為禁用物質(zhì)，以烏洛托品為原料的化妝品仍允許備施行。但迄今為止，化妝品中烏洛托品的檢測(cè)尚處于空白階段。中烏洛托品的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)，有助于填補(bǔ)國(guó)內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域檢測(cè)品中禁限用原料檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)體系，為政府部門(mén)對(duì)國(guó)內(nèi)化妝品生供技術(shù)支撐，有效打擊不法企業(yè)，規(guī)范市場(chǎng)良性競(jìng)爭(zhēng)，提高我國(guó)報(bào)道較少。因此研究相關(guān)的檢測(cè)技術(shù)是十分有必要的。本標(biāo)準(zhǔn)2劃任務(wù)的通知，項(xiàng)目承擔(dān)單位組建了標(biāo)準(zhǔn)編制工作小組，查內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)資料，并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室的條件、化妝品基質(zhì)特步設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究工作，優(yōu)化確定儀器檢測(cè)條取條件，考察和論證方法的靈敏度、準(zhǔn)確性、線性范圍和適本標(biāo)準(zhǔn)由蘇州世譜檢測(cè)技術(shù)有限公司、蘇州質(zhì)量檢本標(biāo)準(zhǔn)的編制原則是既參考國(guó)外的最新方法技術(shù)，檢測(cè)能力和實(shí)際情況，確保方法標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性、先進(jìn)性、可GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》和考了原國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的《化妝品中禁用物1C6H12N42烏洛托品-D12Methenamine-D12C6D12N43），正己烷，渦旋混勻，于4000r/min離心5min，取1mL下層清液用20%乙腈稀釋至準(zhǔn)溶液濃度為1.0mg/L，進(jìn)樣泵流速10μL/min。首先得到烏洛托品及其內(nèi)標(biāo)的二級(jí)質(zhì)譜分析，以響應(yīng)值最大的碎片離子定為定量離子，次j)化合物母離子、子離子及碰撞能量參見(jiàn)表2。烏洛托品-D124托品在保留很弱（圖1），選擇其它品牌的常規(guī)C18色譜柱同樣保留很弱，這是由于烏洛托品極性大，在高密度鍵合的C18色譜柱上保留不佳。嘗試使用低密度C18鍵合），流動(dòng)相是影響分離效果的一個(gè)重要因素。在實(shí)驗(yàn)中本標(biāo)準(zhǔn)中的烏洛托品在常規(guī)反向色譜柱上存在保留譜中經(jīng)常使用的乙腈/水和甲醇/水體系進(jìn)行分離。使用甲醇為有機(jī)相時(shí)，烏洛托品半峰寬較寬，使用乙腈為有機(jī)相流動(dòng)相時(shí)，保留時(shí)間與甲醇綜上，最終確定的高效液相色譜參數(shù)如下，在555555 I... I... 4.0e42.0e43.380.00.51.01.52.02.53.0 I... I...2.0e50.0b,------—------0.00.51.01.52.02.53.03.54.0 XICof+MRM(4pairs):153.100/94.200DaID:wuluotuoping-D12fromSample19(STD6)of20240828-Wuluotuoping-jinghua.wiff(TurboSpra...In...In... ------------------0.00.51.01.52.02.53.0步驟和獲得盡可能高的提取效率，實(shí)驗(yàn)首先選取水劑、乳液性基質(zhì)采用混合有機(jī)溶劑直接超聲提取。由于烏洛托品在乙腈良好，在水中溶解度也很好，實(shí)驗(yàn)對(duì)比了水和不同比例的混足方法提取回收率要求；但從樣品提取時(shí)的分散性上來(lái)看，但水相過(guò)高時(shí)易產(chǎn)生大量泡沫，且對(duì)峰形產(chǎn)生表4不同比例混合溶劑對(duì)水劑、乳液、水烏洛托品分子量小，由于化妝品基質(zhì)復(fù)雜，若提取9物的檢測(cè)產(chǎn)生嚴(yán)重干擾，因此需要對(duì)提取液凈化后再上機(jī)化方法有正己烷去除脂溶性雜質(zhì)及固相萃取小柱凈化等式，結(jié)果表明，選取固相萃取小柱凈化（烏洛托品含有N，選擇使用陰離子固相萃），面活性劑，導(dǎo)致固相萃取柱經(jīng)常堵塞，操作十分不便；正以去除大量脂類(lèi)和表面活性劑雜質(zhì)，由于烏洛托品在正己溶于乙腈水溶液，在正己烷除脂過(guò)程中，對(duì)烏洛托品的提取入0.400mL內(nèi)標(biāo)中間工作溶液（5.0腈，具塞后渦旋混合均勻，超聲10min，冷卻至室溫后定容至刻度。加入5mL正己烷，渦旋混勻，于4000r/min離心5min，取1mL下層清液用20%乙腈稀釋至10（%）（%）基質(zhì)效應(yīng)是指樣品中除分析物以外的組分會(huì)對(duì)分析物的影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性?；瘖y品的基質(zhì)復(fù)雜，儀器中共流出基質(zhì)效應(yīng)可以用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線與純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)曲線的斜Matrixfactor（MF）=Kb/Ka（1）的基質(zhì)效應(yīng)整體在0.19~0.51之間，子較小，極性強(qiáng)，且在色譜柱上保留不強(qiáng)，其電離過(guò)程易受為了保證定性定量分析的準(zhǔn)確性，本方法不能采取溶劑標(biāo)準(zhǔn)用同位素內(nèi)標(biāo)法對(duì)基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行校正后進(jìn)行定量添加混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按照試樣前處理方法和儀器條件進(jìn)行測(cè)定，以S/N=3確定方法檢出限，以信噪比S2y=0.9561x-0.0172烏洛托品-D12123456），本標(biāo)準(zhǔn)回收率范圍依據(jù)原國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局和實(shí)驗(yàn)室間回收率85.2%~92.8%的檢測(cè)數(shù)據(jù)，綜合確定標(biāo)準(zhǔn)回收率范圍為80%~本標(biāo)準(zhǔn)被測(cè)物質(zhì)為限用物質(zhì)，根據(jù)原國(guó)家食品藥品監(jiān)用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范》和被測(cè)物質(zhì)的含量法都未涉及該內(nèi)容，另一方面檢測(cè)機(jī)構(gòu)會(huì)根據(jù)客戶(hù)需求訂立本研究通過(guò)優(yōu)化目標(biāo)化合物的色譜分析參數(shù)，以及選取陰性的水劑、乳液、膏霜樣本邀請(qǐng)南京市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院、深圳市計(jì)量質(zhì)量檢測(cè)研究院、河北省綜述報(bào)告：5家驗(yàn)證結(jié)果表明，烏洛托品在0.001~0.050μg/mL范圍