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文檔簡介
2025屆河北省秦皇島市盧龍縣生物高三第一學期期末達標測試試題考生須知:1.全卷分選擇題和非選擇題兩部分,全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂;非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應位置上。2.請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.少量mRNA能在短時間內指導合成大量蛋白質的原因是()A.多個核糖體共同完成一條肽鏈的合成B.多個RNA聚合酶多起點催化蛋白質合成C.一種密碼子精確對應一種氨基酸D.一條mRNA上可相繼結合多個核糖體2.下列關于細胞的化學成分和基本結構的說法中,不正確的是()A.真核細胞中保持細胞內部結構有序性的細胞骨架是由蛋白質纖維組成的B.脂質中的磷脂和膽固醇是構成所有細胞膜的重要成分C.ATP和質粒的組成成分中都含有糖D.淀粉、肝糖原和纖維素徹底水解后得到的產物相同3.細胞是生物體結構與功能的基本單位。下列有關敘述錯誤的是()A.抗體的合成和分泌需要多種細胞結構參與 B.核膜與細胞膜可以通過高爾基體直接相連C.垂體細胞膜表面具有結合甲狀腺激素的受體 D.真核細胞具有由蛋白質纖維組成的網(wǎng)架結構4.無過氧化氫酶癥和半乳糖血癥是兩種人類單基因隱性遺傳病,不同個體酶活性范圍(酶活性單位相同)見下表。下列有關敘述錯誤的是()疾病名稱相關酶酶活性患者患者父母正常人無過氧化氫酶癥過氧化氫酶01.2~2.73.3~4.2半乳糖血癥磷酸乳糖尿苷轉移酶0~49~3025~30A.測定酶活性一定程度上可診斷胎兒是否患病B.表現(xiàn)型正常的人的酶活性也可能會較低C.僅通過化驗酶量無法判斷某個體是否為攜帶者D.據(jù)表格可推知兩病的遺傳均表現(xiàn)出交叉遺傳現(xiàn)象5.驅蚊香草為常用綠化及驅蚊的優(yōu)良植物,某科研小組研究不同濃度植物生長調節(jié)劑NAA對驅蚊香草種子發(fā)芽率的影響。實驗中各實驗組將健壯飽滿的驅蚊香草種子放在不同濃度NAA溶液中浸泡3h,而后取出各組種子并放于25℃恒溫箱中,培養(yǎng)至第3天和第7天的實驗結果如下圖所示。下列敘述錯誤的是()A.該實驗的實驗結果不僅受NAA濃度的影響,還受培養(yǎng)時間的影響B(tài).第3天時NAA促進驅蚊香草種子萌發(fā)的最適濃度是1.5mg/LC.第3天和第7天的實驗結果都能說明NAA的作用具有兩重性D.NAA的濃度是該實驗的自變量,培養(yǎng)溫度是該實驗的無關變量6.將相同的紫色洋蔥外表皮細胞分別放置在清水、1.3g/mL蔗糖溶液中進行滲透實驗,一段時間后得到圖所示的結果。下列敘述正確的是()A.乙細胞液泡中的色素含量不斷增大B.甲細胞在膨脹過程中細胞內外濃度差逐漸減小C.外界溶液與細胞液只要存在濃度差,細胞就會發(fā)生滲透作用D.甲細胞在膨脹過程中水分子從其分子數(shù)相對較多向相對較少處運動7.線粒體自噬時,內質網(wǎng)膜包裹損傷的線粒體形成自噬體,此時LC3-I蛋白被修飾形成LC3-II蛋白,LC3-II蛋白促使自噬體與溶酶體融合,完成損傷的線粒體降解。研究人員選取周齡一致的大鼠隨機分為對照組、中等強度運動組和大強度運動組。訓練一段時間后,測量大鼠腓腸肌細胞LC3-I蛋白和LC3-II蛋白的相對含量,結果如下圖。下列敘述不正確的是()A.自噬體與溶酶體融合依賴膜的流動性B.LC3-II/LC3-I的比值隨運動強度增大而增大C.運動可以抑制大鼠細胞的線粒體自噬D.溶酶體內的水解酶能分解衰老、損傷的線粒體8.(10分)下列有關生物多樣性和進化的敘述中,不正確的是()A.新物種的形成通常要經過突變和基因重組、自然選擇及隔離三個基本環(huán)節(jié)B.自然選擇能定向改變種群的基因頻率,決定了生物進化的方向C.種群是生物進化的基本單位,物種是群落的基本單位D.禁止濫殺捕獵野生動物是保護生物多樣性的有效措施二、非選擇題9.(10分)某多年生高等植物為XY型性別決定,其花的顏色受兩對等位基因控制,且兩對基因均不位于Y染色體上。A或a基因控制合成藍色色素,B或b基因控制合成紅色色素,不含色素表現(xiàn)為白花,含有兩種色素表現(xiàn)為紫花。為研究其遺傳機制,某同學選取一藍花雌株和一紅花雄株作為親本進行雜交,F(xiàn)1表現(xiàn)為紫花雌株:藍花雄株=1:1。回答下列問題:(1)控制藍色色素合成的基因是_____________,藍花雌株體內,只有花瓣細胞才呈現(xiàn)藍色,根本原因是___________________________。與B基因相比,b基因堿基數(shù)較少而控制合成的蛋白質中氨基酸數(shù)目較多,原因可能是b基因中缺失部分堿基對,引起__________________。(2)為解釋上述雜交結果,該同學提出了兩種假設。假設一:B基因控制紅色色素的合成且該對基因位于X染色體上,A、a基因位于常染色體上。假設二:_______________________________________________________________。為驗證哪一種假設正確,以上述親本或F1為實驗材料,設計雜交試驗方案實驗方案:________________________________________________________________。若假設二正確,則預測實驗結果為______________________________(不考慮交叉互換)。(3)現(xiàn)已確定假設一正確,欲以上述親本或F1為實驗材料,簡單快速的培育出白花植株,應選擇基因型為____________的植株作為親本進行雜交,后代中白花植株所占比例為___________。10.(14分)鼠尾藻是一種著生在礁石上的大型海洋褐藻,可作為海參的優(yōu)質飼料。鼠尾藻枝條中上部的葉片較窄,稱之狹葉;而枝條下部的葉片較寬,稱之闊葉。新生出闊葉顏色呈淺黃色,而進入繁殖期時闊葉呈深褐色。研究人員在溫度18℃(鼠尾藻光合作用最適溫度)等適宜條件下測定葉片的各項數(shù)據(jù)如下表。葉片光補償點(μmo1.m2-.s-1)光飽和點(μmo1.m-2.s-1)葉綠素a(mg.g-1)最大凈光合速率(nmolO2.g-1min-1)新生闊葉16.6164.10.371017.3繁殖期闊葉15.1266.00.731913.5狹葉25.6344.00.541058.2(1)據(jù)表分析,鼠尾藻從生長期進入繁殖期時,闊葉的光合作用強度_____,其內在原因之一是葉片的___________________。(2)依據(jù)表中_____的變化,可推知鼠尾藻狹葉比闊葉更適應_________(弱光強光)條件,這與狹葉著生在枝條中上部,海水退潮時會暴露于空氣中的特點相適應。(3)新生闊葉顏色呈淺黃色,欲確定其所含色素的種類,可用_________提取葉片的色素,然后用層析液分離,并觀察濾紙條上色素帶的_____。(4)將新生闊葉由溫度18℃移至26℃(為呼吸的最適溫度)下,其光補償點將_____(增大/不變/減?。?。故在南方高溫環(huán)境下,需考慮控制適宜的溫度及光照強度等條件以利于鼠尾藻的養(yǎng)殖。11.(14分)轉染是指利用一定手段使外源基因進入細胞中并穩(wěn)定表達的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉染,這在基因治療、疫苗研發(fā)和動物細胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應用前景?;卮鹣铝袉栴}。(l)腺病毒營____活,用作轉染的腺病毒載體上具有____識別和結合的部位,是外源基因在受體細胞中啟動表達的關鍵。(2)構建腺病毒載體時,先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進行切割,可獲得相同的____,再用DNA連接酶恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的___。(3)通過腺病毒載體將藍色熒光基因轉染山羊耳緣成纖維細胞,利用藍色熒光直觀監(jiān)控細胞的體外培養(yǎng)過程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個成纖維細胞,培養(yǎng)至貼滿瓶壁時,細胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為________。這時,重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)進行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時使用的合成培養(yǎng)基,通常需加入___等一些天然成分,以滿足細胞對營養(yǎng)物質的全面需求。12.最新研究發(fā)現(xiàn),尼古?。ㄋ追Q煙堿)通過與神經細胞膜或腎上腺髓質細胞膜上的煙堿接受器結合,引起人體血液中腎上腺素含量增加。此外,尼古丁還能增加人體細胞對胰島素的敏感性,增強胰島素對血糖的調節(jié)作用。請分析回答:(1)當尼古丁與神經細胞膜上的煙堿接受器結合后,引起鈣離子由通道流入細胞,可見,尼古丁的作用相當于一種_______,此時的神經細胞膜所發(fā)生的信號轉化是_____________________。(2)尼古?。ㄋ追Q煙堿)通過與神經細胞膜或腎上腺髓質細胞膜上的煙堿接受器結合,引起人體血液中腎上腺素含量增加,此過程體現(xiàn)了細胞膜____________的功能。此外,尼古丁還能增加人體細胞對胰島素的敏感性,增強胰島素對血糖的調節(jié)作用,胰島素降低血糖的途徑有________________和抑制肝糖原分解、抑制非糖物質轉化為葡萄糖。(3)為驗證尼古丁對胰島素作用的影響,研究人員將實驗鼠隨機均分為兩組,每天分別注射一定量的尼古丁溶液和生理鹽水,相同且適宜條件下飼養(yǎng)3周。然后給各鼠注射等量的葡萄糖溶液,并立即開始計時,測定1小時內兩組鼠的胰島素濃度,實驗結果如下圖所示。分析給小鼠注射葡萄糖的目的是_________________________,圖中兩條曲線注射尼古丁的是_______________(填“甲組”或“乙組”)。(4)如果將實驗中的“測定胰島素濃度”改為“測定血糖濃度”,上述實驗過程需將“給各鼠注射等量的葡萄糖溶液”修改為___________________________。請在空白圖中嘗試畫出甲乙兩組血糖含量的變化圖________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】
翻譯是指以mRNA為模板,利用游離的氨基酸,在核糖體上合成蛋白質的過程。翻譯的條件有模板(mRNA)、原料(氨基酸)、能量、酶、運輸工具tRNA。【詳解】A、每個核糖體合成一條肽鏈,A錯誤;B、多個RNA聚合酶多起點催化的是轉錄過程,即RNA合成,B錯誤;C、翻譯時,一種氨基酸對應多種密碼子,除終止密碼子外,一種密碼子精確對應一種氨基酸,但這與蛋白質的合成效率無關,C錯誤;D、少量mRNA能在短時間內指導合成大量蛋白質的原因是一條mRNA上可相繼結合多個核糖體,同時進行多條相同肽鏈的合成,D正確。故選D。2、B【解析】
脂質的種類及其功能:功能分類化學本質功能儲藏脂類脂肪儲藏能量,緩沖壓力,減少摩擦,保溫作用結構脂類磷脂是細胞膜、細胞器膜和細胞核膜等生物膜的重要成分調節(jié)脂類固醇膽固醇動物細胞膜的重要成分,在人體中還參與血液中脂質的運輸性激素促進人和動物生殖器官的發(fā)育以及生殖細胞的形成維生素D促進人和動物腸道對鈣磷的吸收,調節(jié)鈣磷的平衡【詳解】A、真核細胞內部的蛋白纖維構成細胞骨架,具有維持細胞形態(tài)、保持內部結構的有序性的功能,A正確;B、膽固醇是構成動物細胞膜的重要成分,B錯誤;C、ATP中含有核糖,質粒中含有脫氧核糖,C正確;D、淀粉、肝糖原和纖維素徹底水解后得到的產物都是葡萄糖,D正確。故選B。3、B【解析】
抗體為分泌蛋白,其合成和分泌需要多種細胞器的協(xié)調配合;內質網(wǎng)能有效地增加細胞內的膜面積,其外連細胞膜,內連核膜,將細胞中的各種結構連成一個整體,具有承擔細胞內物質運輸?shù)淖饔?;下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素能促進垂體分泌促甲狀腺激素,垂體分泌促甲狀腺激素能促進甲狀腺分泌甲狀腺激素.而甲狀腺激素對下丘腦和垂體有負反饋作用,當甲狀腺激素分泌過多時,會抑制促甲狀腺激素釋放激素和促甲狀腺激素的分泌,進而減少甲狀腺激素的分泌。【詳解】A、抗體屬于分泌蛋白,需要核糖體、內質網(wǎng)、高爾基體、線粒體等細胞器分工合作,這些是在細胞核的控制下完成的,故其合成和分泌需要多種細胞結構參與,A正確;B、核膜與細胞膜通過內質網(wǎng)膜相連,B錯誤;C、甲狀腺激素可通過負反饋作用對垂體進行調節(jié),故垂體細胞膜表面有結合甲狀腺激素的受體,C正確;D、真核細胞的細胞骨架是由蛋白質纖維組成的網(wǎng)架結構,能保持細胞形態(tài),D正確。故選B?!军c睛】本題較為綜合,熟記細胞的結構及相關物質的功能是解答本題的關鍵。4、D【解析】
從表中數(shù)據(jù)可知,無過氧化氫酶癥和半乳糖血癥患者不能產生該酶,酶活性為0或極低,攜帶者由于一個基因表達酶活性降低,而正常人為顯性純合體,兩個基因均表達,酶的活性最高。交叉遺傳:男性患者的X連鎖致病基因必然來自母親,以后又必定傳給女兒,這種遺傳方式稱交叉遺傳。【詳解】A、磷酸乳糖尿苷轉移酶活性為0~4時是半乳糖血癥患者,過氧化氫酶活性為0時是無過氧化氫酶癥患者,所以通過測定相關酶活性能準確診斷胎兒是否患無過氧化氫酶癥或半乳糖血癥,A正確;B、表現(xiàn)型正常的人的酶活性也可能會較低,如半乳糖血癥的正常人酶活性在25~30,B正確;C、由于攜帶者的磷酸乳糖尿苷轉移酶活性為9~30,純合子的磷酸乳糖尿苷轉移酶活性為25~30,所以通過測定相關酶活性不能準確判斷胎兒是否為半乳糖血癥攜帶者,C正確;D、據(jù)表格無法推知兩病的遺傳為伴性遺傳,因此無法推出表現(xiàn)出交叉遺傳現(xiàn)象,D錯誤。故選D。5、B【解析】
生長素的兩重性是指低濃度促進生長,高濃度抑制生長,由圖可知,無論是3天的檢測結果還是7天的檢測結果,隨NAA溶液濃度的增加,均是先表現(xiàn)了促進發(fā)芽,然后表現(xiàn)了抑制發(fā)芽,所以均能體現(xiàn)兩重性?!驹斀狻緼、從第3天或第7天的實驗結果均可看出,NAA的濃度不同導致種子的發(fā)芽率不同,所以NAA的濃度可以影響實驗結果,第3天和第7天的實驗結果相比,說明培養(yǎng)時間也可以影響實驗結果,A正確;B、第3天時雖然1.5mg/L的NAA在圖中的實驗結果中促進種子萌發(fā)效果最強,但不能判斷該濃度就是促進種子萌發(fā)的最適濃度,B錯誤;C、無論是第3天還是第7天的實驗結果,與對照組相比,既有發(fā)芽率高于對照組的也有發(fā)芽率低于對照組的,所以能說明NAA的作用具有兩重性,C正確;D、不同組別間的NAA濃度不同,所以NAA的濃度屬于該實驗的自變量,不同組別的培養(yǎng)溫度都是25℃,所以培養(yǎng)溫度屬于該實驗的無關變量,D正確。故選B?!军c睛】理解兩重性以及最適濃度時促進效果最好是解題的關鍵。6、B【解析】
根據(jù)題干信息分析,將紫色洋蔥外表皮細胞放置在清水中會吸水,由于細胞壁的保護作用,細胞的體積略有增大,如細胞甲所示;將紫色洋蔥外表皮細胞放置在1.3g/mL蔗糖溶液中,由于細胞液濃度小于蔗糖溶液濃度,細胞失水而發(fā)生質壁分離,如乙細胞所示?!驹斀狻緼、乙細胞液泡中的色素含量不變,濃度增加,A錯誤;B、甲細胞在膨脹過程中不斷吸水,因此細胞內外濃度差逐漸減小,B正確;C、甲細胞的細胞液與外界溶液存在濃度差,但是其并不能繼續(xù)通過滲透作用吸水,C錯誤;D、甲細胞在膨脹過程中,水分子從其分子數(shù)相對較多處向相對較少處擴散,該過程中水分子進入細胞的數(shù)量多于出細胞的數(shù)量,D錯誤。故選B。7、C【解析】
分析題圖可知:LC3-II蛋白促使自噬體與溶酶體融合,完成損傷的線粒體降解,實驗數(shù)據(jù)顯示隨運動強度增大,LC3-II的含量增加,據(jù)此分析作答。【詳解】A、自噬體可以與溶酶體融合,這依賴于膜的流動性,A正確;BC、據(jù)圖可知,隨運動強度加大,LC3-II/LC3-I的比值變大,因“LC3-II蛋白促使自噬體與溶酶體融合,完成損傷的線粒體降解”,故運動可以促進細胞的線粒體自噬,B正確、C錯誤,D、溶酶體內含有水解酶,可以分解衰老、損傷的線粒體,也可消滅侵入機體的病菌,D正確。故選C?!军c睛】解答本題的關鍵是明確題目中兩種蛋白的功能,并能結合實驗結果分析作答。8、C【解析】
1、現(xiàn)代生物進化理論的主要內容:種群是生物進化的基本單位,生物進化的實質在于種群基因頻率的改變;突變和基因重組產生生物進化的原材料;自然選擇決定生物進化的方向;隔離是新物種形成的必要條件。2、生物與生物之間,生物與無機環(huán)境之間的共同進化導致生物多樣性的形成。【詳解】A、變異(突變和基因重組)、自然選擇和隔離是物種形成的三個基本環(huán)節(jié),A正確;B、自然選擇能定向改變種群的基因頻率,決定生物進化的方向,B正確;C、種群是生物進化的基本單位,種群也是生物群落的基本單位,C錯誤;D、禁止濫殺捕獵野生動物是保護生物多樣性的有效措施,D正確。故選C。二、非選擇題9、A基因的選擇性表達相應信使RNA中終止密碼子延遲出現(xiàn)B基因控制合成紅色色素且該對基因位于X染色體上,A、a基因也位于X染色體上取F1中紫花雌株與藍花雄株雜交,觀察子代表現(xiàn)型及比例(取F1紫花雌株與親本紅花雄株雜交,觀察子代表現(xiàn)型及比例)子代表現(xiàn)為藍花雌株:紫花雌株:藍花雄株:紅花雄株=1∶1∶1∶1(子代表現(xiàn)為紫花雌株:紅花雌株:藍花雄株:紅花雄株=1∶1∶1∶1)AaXBXb、AaXbY1/8【解析】
位于兩對同源染色體上的等位基因在遺傳的過程中遵循基因的自由組合定律。根據(jù)題干藍花雌株和一紅花雄株作為親本進行雜交,F(xiàn)1表現(xiàn)為紫花雌株:藍花雄株=1:1,可知控制顏色的基因有一對位于X染色體上?!驹斀狻浚?)藍花雌株和一紅花雄株作為親本進行雜交,后代雌株均為紫色,說明控制紅色這個基因位于X染色體上,且為顯性基因B,那么控制藍色的基因位于常染色體上,且為顯性A。藍花雌株體內,只有花瓣細胞才呈現(xiàn)藍色,根本原因是基因的選擇性表達。與B基因相比,其控制合成的蛋白質中氨基酸數(shù)目較多,而b基因堿基數(shù)較少,原因可能是b基因中缺失部分堿基對,引起相應信使RNA中終止密碼子延遲出現(xiàn)。(2)依據(jù)題干可知該植物為XY型性別決定,其花的顏色受兩對等位基因控制,且兩對基因均不位于Y染色體上,又根據(jù)其雜交情況可知,有一對為與X染色體上。則假設一B基因控制紅色色素的合成且該對基因位于X染色體上,A、a基因位于常染色體上;假設二B基因控制合成紅色色素且該對基因位于X染色體上,A、a基因也位于X染色體上。取F1中紫花雌株與藍花雄株雜交,觀察子代表現(xiàn)型及比例(取F1紫花雌株與親本紅花雄株雜交,觀察子代表現(xiàn)型及比例),若子代表現(xiàn)為藍花雌株:紫花雌株:藍花雄株:紅花雄株=1∶1∶1∶1(子代表現(xiàn)為紫花雌株:紅花雌株:藍花雄株:紅花雄株=1∶1∶1∶1),則假設二正確。(3)若確定假設一正確,欲以上述親本或F1為實驗材料,簡單快速的培育出白花植株,選擇基因型為AaXBXb、AaXbY的植株作為親本進行雜交,后代中白花植株所占比例為1/4X1/2=1/8?!军c睛】對于題干的正確理解是解答本題的第一步。當然,在求解的過程中要充分考慮各種情況,如這里就要注意當有兩對同源染色體,確定有一對位于X染色體上的時候,那么另一對,可能是X染色體上,也可能為與常染色體,若題干沒有強調沒有在Y染色體上,那么還要考慮在Y染色體上的可能。10、增大葉綠素a增多光補償點(或光飽和點)強光無水乙醇(或丙酮或有機溶劑)數(shù)目(或顏色或分布)增大【解析】
根據(jù)表格分析,狹葉的光補償點和光飽和點最高,繁殖期闊葉的葉綠素含量和最大凈光合速率最高;新生出的闊葉顏色呈淺黃色,而進入繁殖期時闊葉呈深褐色,葉綠素a增多,吸收光能增多,光合作用強度增大;曲線圖表示在適宜溫度條件下鼠尾藻凈光合速率與環(huán)境因素之間的關系,A點的限制因素是光照強度,B點的限制因素是CO2的濃度?!驹斀狻浚?)表格中可以看出,繁殖期闊葉的葉綠素a含量比新生闊葉的多,色素具有吸收、傳遞、轉化光能的作用,因此繁殖期闊葉的光合作用強。(2)表格中數(shù)據(jù)顯示,狹葉的光補償點為25.6μmol.m-2?g-1,光飽和點為344.0μmol.m-2?g-1,這兩個值都比闊葉的高,說明狹葉比闊葉更能適應強光條件。(3)由于有機溶劑無水乙醇能夠溶解葉片的色素,所以用無水乙醇來提取葉片中的色素;然后用層析液分離,由于不同的色素在層析液中的溶解度不同,在濾紙上擴散的速度不同,觀察濾紙條上色素帶的數(shù)目或顏色或分布,可以確定闊葉中所含的色素種類。(4)將新生闊葉由溫度18℃移至26℃(為呼吸的最適溫度)下,其呼吸作用速率升高,其光補償點將增大,這將影響鼠尾藻對光能的利用效率。【點睛】本題著重考查了光合作用、呼吸作用過程中的物質變化和能量變化等方面的知識,透徹理解光合作用與呼吸作用物質與能量的關系是解題關鍵。11、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯鍵膠原蛋白酶細胞的接觸抑制傳代血清、血漿【解析】
1、基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。構建基因表達載體時需要用同種限制酶切割目的基因和載體,以產生相同的末端,然后用DNA連接酶連接,恢復被切開的核苷酸之間的磷酸二酯鍵,RNA聚合酶能夠與啟動子識別并結合催化轉錄的進行,這是是外源基因在受體細胞中啟動表達的關鍵。2、動物細胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)?!驹斀狻浚?)腺病毒屬于動物病毒,其無細胞結構,營寄生生活,必須寄生于宿主的活細胞中才能繁殖;用作轉染的腺病毒載體上應具有RNA聚合酶識別和結合的部位啟動子,這樣才能驅動目的基因轉錄形成mRNA,最終合成相應的蛋白質。(2)構建腺病毒載體時,先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進行切割,可以獲得相同的黏性末端或平末端,再用DNA連接酶恢復被限制酶切開的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)對山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理得到單個成纖維細胞,便于細胞與培養(yǎng)液充分接觸;培養(yǎng)至貼滿瓶壁時,細胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為接觸抑制;這時重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)進行傳代培養(yǎng);由于人們對動物細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)物質還沒有完全搞清楚,因此培養(yǎng)時使用的合成培養(yǎng)基,通常需加入血漿、血清等一些天然成分,以滿足細胞對營養(yǎng)物質的全
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