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文檔簡介
2025屆重慶康德卷高三生物第一學期期末統(tǒng)考試題注意事項1.考試結(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回.2.答題前,請務必將自己的姓名、準考證號用0.5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置.3.請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符.4.作答選擇題,必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑;如需改動,請用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案.作答非選擇題,必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律無效.5.如需作圖,須用2B鉛筆繪、寫清楚,線條、符號等須加黑、加粗.一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.下列相關實驗中涉及“分離”的敘述正確的是()A.植物細胞質(zhì)壁分離實驗中,滴加0.3g/mL蔗糖溶液的目的是使原生質(zhì)層與細胞壁分離B.T2噬菌體侵染大腸桿菌實驗中,離心的目的是將T2噬菌體中DNA與蛋白質(zhì)分離C.觀察根尖分生組織細胞有絲分裂實驗中,可以觀察到同源染色體彼此分離現(xiàn)象D.綠葉中色素提取和分離實驗中,分離色素的原理是不同色素在無水乙醇中溶解度不同2.種群的很多特征是種群內(nèi)個體的統(tǒng)計值,以下特征是種群特有的是()A.年齡結(jié)構(gòu) B.性比率 C.分布型 D.出生率3.自國家開展“退耕還林,退耕還草”工程20年來,河北省每年因退耕還林工程涵養(yǎng)水源1.16億立方米,防風固沙總物質(zhì)量為2.59萬噸,固碳851萬噸,釋放氧氣3.87萬噸,吸收污染物4.3萬噸,生態(tài)效益總價值達5.8億元。下列說法錯誤的是()A.“退耕還林”過程耕地中的雜草數(shù)量增加,呈“S”型曲線增長B.“退耕還林”過程中生態(tài)系統(tǒng)的物種組成增加,營養(yǎng)結(jié)構(gòu)變得復雜,抵抗力穩(wěn)定性提高C.“退耕還林”體現(xiàn)了人類活動往往使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向進行D.“退耕還林”能夠有效地固定碳,緩解溫室效應的進程,降低環(huán)境污染4.我國西部沙漠地區(qū)生長著一種葉退化的藥用植物鎖陽,該植物依附在另一種植物小果白刺的根部生長,從其根部獲取營養(yǎng)物質(zhì),下列相關敘述正確的是()A.該生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力強,恢復力穩(wěn)定性高B.藥用植物鎖陽與小果白刺的種間關系是捕食關系C.種植小果白刺以固沙體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值D.長期高溫干旱的生存環(huán)境使得鎖陽產(chǎn)生了定向突變5.研究發(fā)現(xiàn),癌細胞表面的PD-L1蛋白可與T細胞表面的PD-1蛋白結(jié)合,導致T細胞不能全面啟動對癌細胞的免疫攻擊,使用抗PD-1抗體可使癌癥患者的腫瘤快速萎縮。敘述正確的是()A.癌細胞的清除體現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除功能B.PD-L1蛋白和PD-1蛋白結(jié)合,這體現(xiàn)了細胞膜的選擇透過功能C.PD-L1蛋白和PD-1蛋白均可與抗PD-1抗體結(jié)合D.癌癥患者體內(nèi)的PD-1蛋白表達不足會降低機體細胞免疫的能力6.下列關于人體激素的敘述,正確的是()A.胰島β細胞和腺垂體都可分泌促進蛋白質(zhì)合成的激素B.卵巢通過輸卵管將孕激素分泌到血液中從而抑制妊娠時子宮的運動C.在甲狀腺激素分泌調(diào)節(jié)中,腺垂體細胞只能接受下丘腦釋放的信號物質(zhì)D.腺體通過垂體門脈運輸促甲狀腺激素到甲狀腺,促進甲狀腺激素的合成和分泌7.一個家庭中,父親正常,母親患血友病,婚后生了一個性染色體為XXY的正常兒子,產(chǎn)生這種變異最可能的親本和時間分別是A.父親、減數(shù)第二次分裂后期 B.母親、減數(shù)第二次分裂后期C.父親、減數(shù)第一次分裂后期 D.母親、減數(shù)第一次分裂后期8.(10分)用熒光標記的特定DNA片段作為探針,與染色體上對應的DNA片段結(jié)合,能在染色體上定位特定的基因,其定位原理如圖。下列敘述錯誤的是()A.合成熒光探針所需原料是帶標記的脫氧核苷酸B.熒光探針與染色體共同煮沸,DNA雙鏈中氫鍵斷裂而形成單鏈C.降溫復性時,探針與基因分子雜交遵循堿基互補配對原則D.二倍體生物細胞減數(shù)分裂和有絲分裂過程中,最多可有8個熒光點二、非選擇題9.(10分)番茄植株有無茸毛(A、a)和果實的顏色(B、b)由位于兩對常染色體上的等位基因控制。已知在茸毛遺傳中,某種純合基因型的受精卵具有致死效應,不能完成胚的發(fā)育。有人做了如下三個番茄雜交實驗:實驗1:有茸毛紅果×有茸毛紅果→有茸毛紅果∶無茸毛紅果=2∶1實驗2:有茸毛紅果×無茸毛紅果→有茸毛紅果∶有茸毛黃果∶無茸毛紅果∶無茸毛黃果=3∶1∶3∶1實驗3:有茸毛紅果×有茸毛紅果→有茸毛紅果∶有茸毛黃果∶無茸毛紅果∶無茸毛黃果(1)番茄的果實顏色性狀中,______果是隱性性狀。致死受精卵的基因型是____________。(2)實驗1子代中的有茸毛紅果番茄的基因型為___,欲進一步確認,最簡便的方法是__________。(3)實驗2中甲、乙兩親本植株的基因型依次是_______________________。(4)實驗3產(chǎn)生的子代有4種表現(xiàn)型,理論上其比例應為______,共有______種基因型。(5)在生長環(huán)境適宜的情況下,讓實驗2子代中的有茸紅果番茄植株全部自交,所得后代個體中出現(xiàn)有茸毛黃果的概率是________。10.(14分)基因打靶技術是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術的基礎上而發(fā)展起來的一種分子生物學技術。請結(jié)合圖示回答下列有關問題:注:neor是新霉素抗性基因;tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì),導致細胞死亡。(1)將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上,構(gòu)建打靶載體(基因表達載體)。(2)打靶載體測序驗證正確后,利用__________酶,將之線性化,以提高重組率。通過__________技術將打靶載體導入胚胎干細胞,這樣打靶載體和與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。(3)為了篩選發(fā)生同源重組的細胞,可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術鑒定同源重組的細胞(去除靶基因),將這樣的細胞通過動物細胞培養(yǎng)后,獲得大量打靶成功的細胞。其中,暫時不用的細胞進行__________保存。(4)將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚,移植到同種、__________的母鼠體內(nèi),一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查,確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后,體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________(填“體細胞”或“生殖細胞”)恰巧被“修飾”過了,則它們的雜交后代中,就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。11.(14分)2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由SARS-CoV-2病毒引起的,能否快速、準確地檢測出病原體成為疾病防控的關鍵。請回答:(1)下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測的部分流程??茖W家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術稱為RT-PCR。(2)進行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應體系。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產(chǎn)物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與_____________互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結(jié)構(gòu)完整時,R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。熒光信號達到設定的閾值時,經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說明含有病毒的概率越____________。(4)一次核酸檢測歷時需16小時,為快速檢測可采用抗原-抗體雜交技術,這一技術的關鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體.請寫出生產(chǎn)這種抗體的思路:__________________。12.在懷化市城鎮(zhèn)化快速發(fā)展的過程中,隨著經(jīng)濟發(fā)展和人口增長,污水排放量增加,污水處理越來越困難。如何科學有效地處理污水,成為懷化市城鎮(zhèn)化過程中亟待解決的問題。建立人工濕地公園是首選方案,可以獲得生態(tài)、社會和經(jīng)濟三重效益。如圖甲是某人工濕地公園污水處理示意圖。請回答下列問題:(1)圖甲濕地中蘆葦、綠藻和黑藻等植物的分層配置,體現(xiàn)了群落的____________結(jié)構(gòu)。人工濕地中植物的根系不僅能吸收____________等營養(yǎng)物質(zhì),還能為____________吸附和代謝提供良好的環(huán)境條件,利于它們通過分解作用降解污水中的有機物。但人們對污水排放量還要加以控制,原因是人工濕地以____________為基礎的____________是有限的。(2)圖乙表示該人工濕地公園草魚的種群數(shù)量增長速率隨時間的變化情況,如果在t1時用標志重捕法調(diào)查草魚的種群密度,第一次捕獲40條全部標志釋放,一段時間后進行了第二次捕捉,其中未標志的30條、標志的10條,估算草魚種群在t2時是____________條。(3)在此基礎上,某地進一步建立了一個集污水凈化、休閑、養(yǎng)魚為一體的新型人工生態(tài)系統(tǒng)??蒲行〗M對該新型人工生態(tài)系統(tǒng)的能量流動進行定量分析,得出相關數(shù)據(jù),如下表所示(部分數(shù)據(jù)未給出,能量單位為,肉食性動物作為只占據(jù)一個營養(yǎng)級研究)。生物類型X傳遞給分解者的能量未利用的能量傳給下一營養(yǎng)級的能量外來有機物輸入的能量生產(chǎn)者44.05.095.020.00植食性動物9.51.511.0Y5.0肉食性動物6.30.56.50.711.0據(jù)表分析,流入該生態(tài)系統(tǒng)的總能量為____________,X是指____________的能量,數(shù)據(jù)Y為____________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
1.葉綠體色素的提取和分離實驗:
①提取色素原理:色素能溶解在酒精或丙酮等有機溶劑中,所以可用無水酒精等提取色素。
②分離色素原理:各色素隨層析液在濾紙上擴散速度不同,從而分離色素。溶解度大,擴散速度快;溶解度小,擴散速度慢。
2.把成熟的植物細胞放置在某些對細胞無毒害的物質(zhì)溶液中,當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細胞液中的水分子就透過原生質(zhì)層進入到外界溶液中,使原生質(zhì)層和細胞壁都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大,當細胞不斷失水時,原生質(zhì)層就會與細胞壁逐漸分離開來,也就是逐漸發(fā)生了質(zhì)壁分離。當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,外界溶液中的水分子就通過原生質(zhì)層進入到細胞液中,發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞的整個原生質(zhì)層會慢慢地恢復成原來的狀態(tài),使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復原。
3.T2噬菌體侵染細菌的實驗步驟:分別用35S或32P標記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標記的細菌→在攪拌器中攪拌,然后離心,檢測上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)。【詳解】A、植物細胞質(zhì)壁分離實驗中,滴加蔗糖溶液的作用是使原生質(zhì)層與細胞壁分離,A正確;
B、T2噬菌體侵染細菌實驗,離心的目的讓上清液中析出重量較輕的T2噬菌體顆粒,而離心管的沉淀物中留下被感染的大腸桿菌,B錯誤;
C、根尖分生組織細胞有絲分裂過程中,沒有同源染色體的分離,同源染色體的分離發(fā)生在減數(shù)分裂過程中,C錯誤;
D、分離色素原理是:各色素隨層析液在濾紙上擴散速度不同,溶解度大,擴散速度快;溶解度小,擴散速度慢,從而分離色素,D錯誤。
故選A?!军c睛】本題考查了生物學中的相關實驗,觀察葉綠體中色素的提取和分離、觀察植物細胞質(zhì)壁分離和復原、觀察植物細胞的有絲分裂、噬菌體侵染細菌實驗,對于此類試題,需要考生注意的細節(jié)較多,如實驗的原理、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗現(xiàn)象等,需要考生在平時的學習過程中注意積累。2、C【解析】
種群是指占有一定空間和時間的同一物種的集合體,它有很多特征,如出生率和死亡率、年齡結(jié)構(gòu)、種群密度、性比率、分布型等,其中出生率和死亡率、年齡結(jié)構(gòu)、性比率等是種群內(nèi)特征的統(tǒng)計值,而種群密度、分布型則是種群特有的。種群密度是指某個種群在單位空間或面積內(nèi)的個體數(shù)量,是種群最基本的特征;出生率和死亡率是決定種群興衰的晴雨表,出生率大于死亡率,種群密度增大,出生率小于死亡率,種群密度減??;種群的年齡結(jié)構(gòu)是指各個年齡組個體數(shù)量在種群中所占的比例關系,可以分為增長型、穩(wěn)定型、衰退型,可以預測種群未來數(shù)量的變化?!驹斀狻糠植夹褪欠N群的空間特征,是種群特有的,不是種群內(nèi)個體特征的統(tǒng)計值,而ABD三項均是統(tǒng)計值。故選C。3、C【解析】
隨著退耕還林的推進,群落的結(jié)構(gòu)越來越復雜,生物種類和數(shù)目增多,生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性增強,自我調(diào)節(jié)能力增加?!驹斀狻緼、“退耕還林”過程耕地中的雜草數(shù)量增加,但是受環(huán)境阻力的影響,會呈“S”型曲線增長,A正確;B、“退耕還林”過程中生態(tài)系統(tǒng)的物種組成增加,營養(yǎng)結(jié)構(gòu)變得復雜,自我調(diào)節(jié)能力增強,抵抗力穩(wěn)定性提高,B正確;C、“退耕還林”體現(xiàn)了人類活動改變了演替的速度,但是沒有改變方向,C錯誤;D、由題干的信息可以看出“退耕還林”能夠有效地固碳,緩解溫室效應的進程降低環(huán)境污染,D正確?!军c睛】本題以退耕還林為背景,考查了生態(tài)學的知識,識記種群增長曲線的條件,生態(tài)系統(tǒng)、群落的知識進行解答。4、C【解析】
一般情況下,生態(tài)系統(tǒng)的動植物種類越多,營養(yǎng)結(jié)構(gòu)越復雜,抵抗力穩(wěn)定性越高,而恢復力穩(wěn)定性越低;種間關系包括:捕食、競爭、寄生、互利共生等;生物多樣性的價值包括直接價值、間接價值、潛在價值?!驹斀狻緼、我國西部沙漠地區(qū)的動植物種類較少,營養(yǎng)結(jié)構(gòu)較簡單,因此其自我調(diào)節(jié)能力較弱,由于環(huán)境惡劣,恢復力穩(wěn)定性也較低,A錯誤;B、鎖陽葉退化,不能進行光合作用合成有機物,而是從小果白刺的根部獲取營養(yǎng)物質(zhì),故二者為寄生關系,B錯誤;C、小果白刺可以防風固沙,維持生態(tài)平衡,屬于生態(tài)功能,體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值,C正確;D、生物的變異是不定向的,D錯誤。故選C。5、A【解析】
特異性免疫包括體液免疫和細胞免疫,其具體過程如下:【詳解】A、對癌變細胞的清除體現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除功能,A正確;B、PD-L1蛋白和PD-1蛋白結(jié)合,抑制T細胞活性,體現(xiàn)了細胞膜“進行細胞間信息交流”功能,B錯誤;C、只有T細胞表面的PD-1蛋白可與抗PD-1抗體結(jié)合,C錯誤;D、癌癥患者體內(nèi)的PD-1蛋白表達不足,會使得癌細胞表面的PD-L1蛋白與T細胞表面的PD-1蛋白結(jié)合減少,使癌細胞對T細胞的抑制作用減弱,因此,機體細胞免疫的能力會增強,D錯誤。故選A。6、A【解析】
1、生長激素促進生長,促進蛋白質(zhì)合成和骨生長。2、孕激素主要生理功能為:(1)抑制排卵,促使子宮內(nèi)膜分泌,以利受精卵植入,并降低子宮肌肉興奮度,保證妊娠的安全進行。(2)促進乳腺腺泡的生長,為泌乳作準備。(3)提高體溫并使血管和消化道平滑肌松弛?!驹斀狻緼、胰島β細胞分泌的胰島素能促進蛋白質(zhì)的合成,也能促進葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白和合成,垂體分泌生長激素能促進蛋白質(zhì)的合成和骨骼的生長,A正確;B、卵巢屬于內(nèi)分泌腺,沒有導管,B錯誤;C、在甲狀腺激素分泌調(diào)節(jié)中,腺垂體細胞除了接受下丘腦釋放的信號物質(zhì),還接受甲狀腺釋放的信號物質(zhì),C錯誤;D、下丘腦分泌的多種調(diào)節(jié)激素通過垂體門脈到達腺垂體,D錯誤。故選A。7、C【解析】
XXY形成的原因有兩個,即XX+Y或XY+X,前者是由于母親在減數(shù)第二次分裂后期,姐妹染色單體分開后未移向兩極所致,后者是由于父親在減數(shù)第一次分裂后期,X和Y未分離所致,據(jù)此答題。【詳解】血友病是伴X染色體隱性遺傳?。ㄓ肂、b表示),父親正常,母親患血友病,生了一個性染色體為XXY的正常兒子,則這對夫婦的基因型為XBY×XbXb,兒子的基因型為XBX ̄Y。根據(jù)親代的基因型可判斷,XB和Y兩條染色體均來自于父方,則X ̄來自于母方,為Xb,因此可確定是父親產(chǎn)生了不正常的精子(XBY)所致,C正確。8、D【解析】
該題圖示中介紹了DNA探針的制作過程,需要先由限制酶將待標記的DNA切割開,后續(xù)使用DNA聚合酶將被熒光標記的脫氧核苷酸聚合上去,從而制作了DNA探針。使用DNA探針定位特定的基因時依靠了堿基的互補配對原則,將DNA探針與配對的部位結(jié)合在一起從而帶上標記。【詳解】A、圖中顯示制作熒光標記的DNA探針時,使用了DNA聚合酶聚合DNA片段,因此可推測需要帶標記的脫氧核苷酸,A正確;B、DNA分子雙鏈之間的氫鍵在加熱的情況下,會斷裂形成單鏈結(jié)構(gòu),B正確;C、由圖中信息可知,降溫以后DNA復性為雙鏈結(jié)構(gòu),此時DNA探針也與相關位置通過堿基互補配對結(jié)合在一起,C正確;D、一個DNA上某個特定的基因只能被標記一次,由于同源染色體上具有等位基因,因此正常情況下一個二倍體生物的體細胞中應該存在2個熒光點,當進行有絲分裂或者減數(shù)分裂的時候DNA會發(fā)生一次復制,細胞中最多會存在4個熒光點,D錯誤;故選D。二、非選擇題9、黃AAAaBB、AaBb讓子代中的有茸毛紅果自交,看果實顏色性狀是否發(fā)生性狀分離AaBb、aaBb6:2:3:161/9【解析】
根據(jù)實驗1后代有茸毛紅果:無茸毛紅果=2:1,推測有茸毛紅果的基因型是AaBB,同時番茄植株中,致死合子的基因型是AA。
根據(jù)實驗2后代有茸毛紅果:有茸毛黃果:無茸毛紅果:無茸毛黃果=3:1:3:1,推測有茸毛紅果的基因型是AaBb,無茸毛紅果的基因型是aaBb?!驹斀狻浚?)實驗2紅果后代出現(xiàn)黃果,說明黃果是隱性性狀;根據(jù)實驗1后代有茸毛紅果:無茸毛紅果=2:1,推測有茸毛紅果的基因型是AaBB,同時番茄植株中,致死合子的基因型是AA。(2)實驗1子代中的有茸毛紅果番茄的基因型有AaBB和AaBb;欲進一步確認,最簡便的方法是讓子代中的有茸毛紅果自交,看果實顏色性狀是否發(fā)生性狀分離。(3)根據(jù)實驗2后代有茸毛紅果:有茸毛黃果:無茸毛紅果:無茸毛黃果=3:1:3:1,推測有茸毛紅果的基因型是AaBb,無茸毛紅果的基因型是aaBb。(4)根據(jù)實驗3中親本的表現(xiàn)型可推測基因型為A_B_×A_B_,根據(jù)F1中兩種性狀均出現(xiàn)性狀分離可確定雙親基因型為AaBb×AaBb,由于AA純合致死,F(xiàn)1中每種性狀的分離比有茸毛:無茸毛=2:1、紅果:=3:1,基因型分離比為Aa:aa=2:1、BB:Bb:bb=1:2:1,有茸毛紅果:有茸毛黃果:無茸毛紅果:無茸毛黃果=6:2:3:1;基因型總共有2×3=6種。(4)因AA純合致死,實驗2的F1中有茸毛紅果的基因型及分離比為AaBB:AaBb=1:2,若全部自交,則F2中出現(xiàn)有茸毛黃果的概率為2/3(Aa有茸毛)×1/6(bb黃果)=1/9?!军c睛】本題考查基因自由組合定律的相關知識,意在考查學生的識記能力和判斷能力,運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力。10、載體(或質(zhì)粒)限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮(或冷凍)生理狀態(tài)相同(或經(jīng)同期發(fā)情處理)生殖細胞【解析】
基因工程技術的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術;個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)分析題圖可知,將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體(或質(zhì)粒)上,構(gòu)建打靶載體(基因表達載體)。(2)打靶載體測序驗證正確后,利用限制酶,將之線性化,以提高重組率。通過顯微注射技術導入胚胎干細胞,這樣打靶載體與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。(3)neor是新霉素抗性基因,tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì),導致細胞死亡,因此為了篩選發(fā)生同源重組的細胞,可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術鑒定同源重組的細胞(去除靶基因),將這樣的細胞通過動物細胞(或克?。┡囵B(yǎng)后,獲得大量打靶成功的細胞。其中,暫時不用的細胞進行液氮(或冷凍)保存。(4)將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚,移植到同種、生理狀態(tài)相同(或經(jīng)同期發(fā)情)的母鼠體內(nèi),一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查,確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后,體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細胞恰巧被“修飾”過了,則它們的雜交后代中,就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠?!军c睛】本題考查基因工程的原理及技術以及胚胎工程的有關知識,重點考查基因工程的操作步驟,要求考生識記基因表達載體的構(gòu)建過程,識記胚胎工程的操作過程,屬于考綱識記層次的考查。11、逆轉(zhuǎn)錄(或:反轉(zhuǎn)錄)逆轉(zhuǎn)錄酶Taq酶(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物目的基因大①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):②提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞;③將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【解析】
1.將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性、低溫復性、適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈式反應規(guī)律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得Ct值,同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。2.單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術來制備,單克隆抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的效應B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞,雜交瘤細胞既能產(chǎn)生抗體,又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群,可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。【詳解】(1)以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄或反轉(zhuǎn)錄,故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉(zhuǎn)錄,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術稱為RT-PCR。(2)RT-PCR是擴增DNA的過程,因為加入的模板是RNA,故需要加入的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關鍵在于要加入(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應體系,從而實現(xiàn)了相關基因的擴增。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產(chǎn)物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與目的基因互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結(jié)構(gòu)完整時,R發(fā)射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發(fā)射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監(jiān)測就可實現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。若熒光信號達到設定的閾值時,經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少,說明擴增次數(shù)少,說明更多的熒光探針與目的基因進行了堿基互補配對,可推測獲得的核酸產(chǎn)物中含有病毒的概率越大。(4)若采用抗原-抗體雜交技術進行病毒檢測,需要制備能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體,單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢,故設計的思路是設法獲得能產(chǎn)生該特異性抗體的雜交瘤細胞,步驟如下:①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒),目的是要獲得能能產(chǎn)生特異性抗體的效應B細胞;②提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特
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