DB54T 0408-2024 羊肚菌菌種生產(chǎn)技術規(guī)程

ICS65.020.2054CCSB0554西 藏 自 治 區(qū) 地 方 標 準DB54/T0408—2024羊肚菌菌種生產(chǎn)技術規(guī)程2024-09-15發(fā)布 2024-10-15實施西藏自治區(qū)市場監(jiān)督管理局??發(fā)布DB54/T0408DB54/T0408—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前 言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術語和定義 1菌種生產(chǎn)要求 1母種生產(chǎn) 2原種生產(chǎn) 3栽培種生產(chǎn) 3生產(chǎn)檔案 4附錄 A （規(guī)范性）檢驗要求 5前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則 第1部標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學院提出。本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村標準化技術委員會歸口。本文件起草單位：西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學院蔬菜研究所、西藏自治區(qū)高原生物研究所。本文件主要起草人：謝榮、徐愛國、張君麗、白瑪?shù)┰觥O慧娟、高磊、朱雪峰、王文海。DB54/T0408DB54/T0408—2024PAGEPAGE1羊肚菌菌種生產(chǎn)技術規(guī)程范圍本文件規(guī)定了羊肚菌菌種母種、原種、栽培種生產(chǎn)技術要求及生產(chǎn)檔案。本文件適用于羊肚菌母種、原種和栽培種生產(chǎn)技術。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5749 生活飲用水衛(wèi)生標準GB50073 潔凈廠房設計規(guī)范GB/T12728 食用菌術語NY/T528 食用菌菌種生產(chǎn)技術規(guī)程NY/T1731 食用菌菌種良好作業(yè)規(guī)范NY/T1742 食用菌菌種通用技術要求NY/T1935 食用菌栽培基質質量安全要求術語和定義GB/T12728界定的以及下列術語和定義適用于本文件。3.1羊肚菌子囊菌亞門、盤菌綱、盤菌目、羊肚菌科、羊肚菌屬統(tǒng)稱。菌種生產(chǎn)要求場地、廠房要求選擇地勢高，通風供電良好，給排水通暢，交通便利場地。易清洗。場地、廠房符合GB50073和NY/T528相關規(guī)定。水質符合GB5749相關規(guī)定。生產(chǎn)設備溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)架等常規(guī)接種器具齊全。母種生產(chǎn)菌種來源從有相應資質的供種單位引進，選擇種性穩(wěn)定、抗逆性強且適宜本地栽培的菌株，菌種質量應符合NY/T1742的規(guī)定。培養(yǎng)基配方馬鈴薯20%，葡萄糖2%，瓊脂2%，蛋白胨0.05%，水1000ml。容器試管選用15mm×150mm或者18mm×180mm；培養(yǎng)皿選用直徑9cm玻璃培養(yǎng)皿或一次性無菌塑料培養(yǎng)皿。培養(yǎng)基配制馬鈴薯去皮、去芽眼、切塊后，煮至酥而不爛，8層紗布過濾，加入葡萄糖、蛋白胨、瓊脂，用玻璃棒攪拌均勻，定容至1000ml。分裝和滅菌斜面培養(yǎng)基分裝和滅菌分裝培養(yǎng)基至試管長1/4處，用棉塞（棉花為梳棉，非脫脂棉）或硅膠塞封口，每7支試管為1把，0.11MPa～0.12MPa，溫度121℃～122℃，滅菌20min～30min。結束后冷卻至60℃，戴隔熱手套取出試管，在超凈工作臺上擺斜面，斜面長度不超過試管長度的2/3，自然降溫凝固后抽取5%的試管，于28℃下培養(yǎng)48h，無菌落長出為滅菌合格。平板培養(yǎng)基分裝和滅菌培養(yǎng)基裝入500ml三角瓶高1/3～1/2處，用棉塞（棉花為梳棉，非脫脂棉）或硅膠塞封口，牛皮紙122℃，滅菌20min～30min。結束后冷卻至皿面積的2/3。接種30min5mm菌塊到轉接試管斜面和培養(yǎng)皿中央，整個過程按照NY/T528規(guī)定嚴格無菌操作，培養(yǎng)皿需石蠟封口膜密封。貼好標簽并做好記錄。培養(yǎng)生化培養(yǎng)箱10℃～12℃恒溫培養(yǎng)NY/T17313d5d后分別進行檢查。貯存培養(yǎng)好的母種應置于2℃～4℃冰箱保存，時長不超過3個月。原種生產(chǎn)原料選擇主料小麥、輔料麩皮、谷殼、棉籽殼、生石灰、石膏、腐殖土應符合NY/T1935的相關要求，水質應符合GB5749的規(guī)定。培養(yǎng)基配方——青稞或小麥粒68%、棉籽殼20%、麩皮10%、生石灰1%、石膏1%。培養(yǎng)基制備青稞或小麥粒預先用3%生石灰水浸泡2～3均勻，含水量以手緊握培養(yǎng)基指縫有水溢出不下滴為宜，pH值8.0～8.5。裝袋和滅菌采用規(guī)格13cm×25cm×0.005cm聚丙烯折角單口開菌袋，培養(yǎng)基在4h內(nèi)裝完，袋料上緊下松、料面0.11MPa～0.12MPa3h。接種料袋冷卻至30℃NY/T528嚴格無菌操作將母種接到原種菌包中。培養(yǎng)室內(nèi)保持避光，每天通風2次，每次30min；溫度控制在10℃～20℃，空氣相對濕度控制在40%～50%，20d長滿料袋。貯存培養(yǎng)好的原種應置于2℃～4℃保存，時長不超過50d。栽培種生產(chǎn)原料選擇主料小麥、輔料麩皮、谷殼、棉籽殼、生石灰、石膏、腐殖土應符合NY/T1935的相關要求，水質應符合GB5749的規(guī)定。培養(yǎng)基配方——青稞或小麥粒90%、谷殼3%、腐殖土5%，生石灰1%、石膏1%。培養(yǎng)基制備原料攪拌均勻，含水量以手緊握培養(yǎng)基指縫有水溢出不下滴為宜，pH值7.5～8.5。裝袋和滅菌采用規(guī)格17cm×23cm×0.005cm聚丙烯折角單口開菌袋，采用雙沖壓立式機械裝袋，培養(yǎng)基在4h內(nèi)裝完，袋料松緊一致、中間打孔、料面平整，袋口用頸環(huán)、套蓋及無棉蓋體封口。溫度121℃～122℃，壓強0.11MPa～0.12MPa，高溫高壓滅菌3h。接種冷卻至30℃NY/T528嚴格無菌操作將原種接到栽培種菌包中。培養(yǎng)室內(nèi)保持避光，每天通風2次，每次30min；溫度控制在10℃～20℃，空氣相對濕度控制在40%～50%。貯存培養(yǎng)好的栽培種應置于2℃～4℃保存，時長不超過50d。生產(chǎn)檔案建立生產(chǎn)檔案，對每批次生產(chǎn)的母種、原種和栽培種長勢情況詳細記錄。檔案保存期不少于2年。附錄 A（規(guī)范性）檢驗要求表1 羊肚菌母種感官要求項目要求容器潔凈、完整、無損棉塞或硅膠塞干燥、整潔、松緊適度、能透氣濾菌培養(yǎng)基裝入量試管總容積1/4,培養(yǎng)皿高的1/3～1/2菌種外觀菌絲生長量長滿斜面或平板菌絲體特征潔白、絨毛狀、有少量淡黃色菌核菌絲體分泌物無菌落邊緣整齊雜菌菌落無蟲（螨）體無斜面或平板背面外觀培養(yǎng)基無干縮，顏色均勻，無暗斑氣味羊肚菌特有的清香味、無異味表2 羊肚菌原種和栽培種感官要求項目要求容器潔凈、完整、無損