1普通光學顯微鏡的使用及微生物的簡單染色

1、實驗題目；2、實驗目的；3、實驗材料；4、實驗原理；5、實驗內(nèi)容（實驗方法、簡單實驗步驟）；6、實驗結(jié)果與討論；7、思考題。★實驗報告要求字體工整、層次分明、獨立完成！實驗一、普通光學顯微鏡的使用

及微生物的簡單染色

實驗目的：

1.學習普通光學顯微鏡的構(gòu)造和功能；

2.學習微生物的簡單染色，觀察細菌的形態(tài)。實驗材料：顯微鏡載玻片香柏油擦鏡紙雙層瓶染色劑滴管菌液

普通光學顯微鏡的構(gòu)造及原理光學部分鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、推動器、調(diào)節(jié)器等

光源、物鏡、目鏡、聚光器及虹彩光圈等

機械部分普通光學顯微鏡為光學部分目鏡物鏡載物臺聚光圈燈源玻片夾調(diào)焦螺旋推進器電源關(guān)開物鏡轉(zhuǎn)換器調(diào)光螺旋物鏡放大倍數(shù)：4×:低倍10×:低倍40×:高倍100×:油鏡目鏡放大倍數(shù)：10×15×物鏡轉(zhuǎn)換器顯微鏡放大倍數(shù)目鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù)＝×顯微鏡使用總原則：先低倍后高倍先粗調(diào)后微調(diào)放大倍數(shù)：10×15×放大倍數(shù)：4×:低倍10×:低倍40×:高倍100×:油鏡油鏡的使用原理透鏡光線加油前玻片光線香柏油或液體石蠟加油后透鏡玻片四、油鏡的原理：

放大倍數(shù)可100倍之大，焦距很短，光強度最大。

油=1.52（香柏油）介質(zhì)折射率水=1.33空氣=1玻璃=1.55香柏油對光的折射率與玻璃相似，光線直接通過香柏油進入物鏡而不發(fā)生折射，不但增加了照明度，而且使油鏡的數(shù)值孔徑增加，用NA表示，一般在1.2—1.4。低高倍鏡頭等干鏡NA都低于1.0。若以可見光的平均波長為0.55μm來計算，數(shù)值孔徑通常在0.65的高倍鏡只能分辨出距離不小于0.4μm的物體而油鏡的分辨率卻可達到0.2μm左右?？梢婏@微鏡的放大效能是由數(shù)值孔徑?jīng)Q定的。最小可分辨距離=

/2NA顯微鏡使用的主要步驟：取鏡→檢查對光→夾片→低倍物鏡→調(diào)光、調(diào)焦→找目標→換高倍→找目標→清潔→還鏡。顯微鏡用畢后的處理1、平退片2、物鏡頭轉(zhuǎn)至低倍鏡3、調(diào)暗亮度，關(guān)閉電源4、蓋罩實驗步驟1、涂片左手持菌液試管,右手持接種環(huán)在火焰中灼燒,冷卻后從試管中取菌液一滴,在潔凈載玻片上做一涂膜;從固體斜面或平板上取菌時,用無菌接種環(huán)取少量菌體,涂抹均勻于預先滴有的一滴自來水地玻片上;2、干燥在空氣中自然干燥或在火焰快速通過干燥(與熱固定同步進行).

3、熱固定用鑷子夾住涂片一端,

在火焰上連續(xù)通過幾次;以載玻片在手背上試感覺不燙為宜.4、染色在固定好的菌膜上滴加美蘭染色劑，染色劑量以剛好蓋住菌膜為宜，染色1min.5、水洗

倒去染液，用自來水沿玻

片一端沖洗，直至流下的

水無色為止。6、干燥

用吸水紙吸干7、鏡檢七、實驗報告要求：1、根據(jù)觀察的球，桿菌的觀察實況畫示